水生生態(tài)系統(tǒng)藻類(lèi)毒性實(shí)驗(yàn)

1、編輯ppt1水生生態(tài)系統(tǒng)藻類(lèi)毒性試驗(yàn)編輯ppt2不常用詞解釋 半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙:橫坐標(biāo)或縱坐標(biāo)軸是按照相等的指數(shù)變化來(lái)增加的，（距離來(lái)說(shuō)：如果每1cm代表10的1次方增加，則坐標(biāo)軸刻度依次為0，10，100，1000，10000。） 內(nèi)插法:一般是指數(shù)學(xué)上的直線內(nèi)插，利用等比關(guān)系，是用一組已知的未知函數(shù)的自變量的值和與它對(duì)應(yīng)的函數(shù)值來(lái)求一種求未知函數(shù)其它值的近似計(jì)算方法，是一種未知函數(shù)，數(shù)值逼近求法 。 編輯ppt3實(shí)驗(yàn)原理 生物測(cè)試能夠彌補(bǔ)化學(xué)和物理的檢驗(yàn)的不足，目前水生生態(tài)系統(tǒng)藻類(lèi)毒理試驗(yàn)已經(jīng)成為許多國(guó)家對(duì)環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一而得到廣泛應(yīng)用，影響藻類(lèi)生長(zhǎng)的主要因子包括陽(yáng)光、二氧化碳、溫度

2、、PH及氮、磷、微量元素等營(yíng)養(yǎng)成分。水環(huán)境中的這些生態(tài)因子的變化會(huì)刺激或抑制藻類(lèi)的生長(zhǎng)，而導(dǎo)致水體初級(jí)生產(chǎn)力的變化。如果外來(lái)有毒有害化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入水體，藻類(lèi)的生命活動(dòng)就會(huì)受到影響，生物量也隨之發(fā)生變化。編輯ppt4試驗(yàn)方法1 水樣的加工制備 利用濾膜在減壓條件下過(guò)濾，以除去水樣中原有的藻類(lèi)生物，在108kPa和121oC之下持續(xù)30min，高壓處理水樣，殺滅水樣中所有生物，以便測(cè)定水樣中的全部營(yíng)養(yǎng)。2 藻類(lèi)培養(yǎng)基的配制 分別取常量營(yíng)養(yǎng)鹽的每一種化合物儲(chǔ)備液1mL和微量元素-EDTA的混合液1mL加入去離子水中，定容至1000mL得標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基，高壓滅菌后分裝三角瓶中備用。3 藻類(lèi)預(yù)培養(yǎng) 將事先準(zhǔn)備

3、的藻種移種至盛有培養(yǎng)基的三角瓶中，在試驗(yàn)確定的溫度和光強(qiáng)條件以及無(wú)菌條件下，培養(yǎng)2-3周，使藻類(lèi)達(dá)到同步生長(zhǎng)階段。用離心機(jī)離心收集培養(yǎng)物中的藻細(xì)胞，去除上清液，在沉積的藻細(xì)胞中加入10mLNaHCO3溶液（15g/L）使藻細(xì)胞懸浮于此溶液中，再次離心，懸浮，再離心，懸浮，經(jīng)此處理的藻懸浮物作為試驗(yàn)藻接中原。編輯ppt54 預(yù)備試驗(yàn) 目的在于探明毒物對(duì)藻類(lèi)影響的半數(shù)有效濃度（EC50）的范圍，為正式試驗(yàn)打基礎(chǔ)。5 正式試驗(yàn) (1) 試驗(yàn)濃度的選擇 按等對(duì)數(shù)間距取5-7個(gè)毒物濃度，其中必須包括EC50并在此濃度上下至少各設(shè)2個(gè)濃度，另設(shè)一個(gè)不含毒物的空白對(duì)照。各濃度組均設(shè)3個(gè)平行樣。（2）種的制備

4、和接種量 取上述達(dá)到同步生長(zhǎng)的藻類(lèi)培養(yǎng)液充分搖勻，取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞密度后，用吸管轉(zhuǎn)移相應(yīng)體積的細(xì)胞懸浮液到受試水樣中。（3）生物量的測(cè)定測(cè)定藻類(lèi)生長(zhǎng)的指標(biāo)有多種，要考慮所有相關(guān)的環(huán)境因素以及自己試驗(yàn)的目的和條件來(lái)選擇指標(biāo) 編輯ppt6 常用的測(cè)試指標(biāo)有：干重、光密度、細(xì)胞計(jì)數(shù)、葉綠素a含量的測(cè)定（減壓過(guò)濾一定體積的藻類(lèi)培養(yǎng)液到玻璃纖維濾片上，加入1mL的MgCO3懸浮液后將水抽濾干凈，把濾片放到一個(gè)組織研磨管內(nèi)的底部，加入2mL的90%的丙酮，弱光下淹沒(méi)1-2min，再用5mL的90%的丙酮把殘留的樣品洗入15mL的有螺旋蓋的離心管中，離心（2000g）1-5min，靜置于暗處1-2h，是色素充分被抽提，離心，將上清液在分光光度計(jì)上，用1cm的比色皿分別讀取750、663、645和630波長(zhǎng)處的吸收率，并以90%的丙酮作對(duì)照校正吸光度，依據(jù)P298的公式計(jì)算得葉綠素的濃度。） 編輯ppt7實(shí)驗(yàn)結(jié)果與報(bào)告 計(jì)算EC50設(shè)各組平行樣品生物量的平均值分別為V空白,，V1，V2，V3，V4,，Vn，在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上以受試毒物濃度為縱坐標(biāo)y，以（ V空白- Vn ）/ V空白為橫坐標(biāo)x，用內(nèi)插法計(jì)算生物量下降50%的毒物