甜蜜素測定方法

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上甜蜜素測定方法1實(shí)驗(yàn)原理氣象色譜法測定甜蜜素是國標(biāo)中的第一法，測定原理，是用亞硝酸鈉分解食品中的甜蜜素，產(chǎn)生的環(huán)己醇在硫酸的介質(zhì)中與亞硝酸鈉作用，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，該物質(zhì)在氫火焰中有良好的響應(yīng)值，以保留時(shí)間定性，峰面積定量。2實(shí)驗(yàn)步驟取樣品2克左右，需要提取打碎成粉末或者最大程度的剪碎，加入蒸餾水25ml在30攝氏度水浴中超聲提取甜蜜素45mins，同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)、對照實(shí)驗(yàn)（加入甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品）和回收率實(shí)驗(yàn)（炒貨樣品最好每個(gè)都做回收，蜜餞樣品可使用一個(gè)回收率進(jìn)行計(jì)算），45mins結(jié)束后，加入5ml濃度為100g/L的硫酸在30°中穩(wěn)定10mins，取出置于

2、4攝氏度冰水浴中5mins，隨后加入5ml正己烷（4）封住液面，防止而后產(chǎn)生的衍生物環(huán)己基氨基磺酸酯揮發(fā)，再加入5ml濃度為50g/L的亞硝酸鈉，封管，緩慢搖動，放入冰水浴中，反應(yīng)開始前10mins內(nèi)不要劇烈搖動，后20mins內(nèi)，每5mins左右漩渦震蕩一次，冰水浴的時(shí)間總共30mins，從冰水浴中取出后，加入氯化鈉飽和溶液2.5ml，離心，取上清，上機(jī)分析。3工作曲線制作 分別加入取配置好的實(shí)驗(yàn)室級別標(biāo)準(zhǔn)溶液于50ml離心管中，加入量參考表1，定溶到同一刻度，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為5mg/ml，按上述方法進(jìn)行操作，得到工作曲線。由于平時(shí)日檢的產(chǎn)品的甜蜜素含量基本在1mg/g到5mg/g這個(gè)區(qū)間，尤

3、其在1mg/g到2mg/g的產(chǎn)品居多，所以，我們有針對性的將這兩個(gè)區(qū)間的點(diǎn)加入的相對密集，以便于準(zhǔn)確的得到產(chǎn)品的甜蜜素含量。如表1所示，標(biāo)準(zhǔn)溶液配制時(shí)間為，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為5.2340mg/ml。表1 2014年5月5日標(biāo)準(zhǔn)工作曲線No.標(biāo)準(zhǔn)溶液加入量（ml）甜蜜素（mg）Area(L)BLANK100.502.6170025220.84.187239631.05.234051141.26.280862051.57.851076661.89.42129257210.4680103582.513.085012949315.70201552103.518.31901842 此工作曲線定期校正，由于色

4、譜柱的柱效會一直下降，因此每次做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率會有所差異。4 結(jié)果和計(jì)算 上機(jī)分析后，得到色譜峰面積，帶入工作曲線，得到甜蜜素含量M，單位mg，帶入以下公式計(jì)算：X：為樣品中甜蜜素含量；單位：g/kgM：由工作曲線得出的甜蜜素含量；單位：mgm：樣品的質(zhì)量；單位：g；P：為加標(biāo)回收率；F：為計(jì)算換算系數(shù)0.8908； 注：加標(biāo)回收率主要使用生產(chǎn)級別的甜蜜素，濃度5mg/ml，向樣品中加入2ml，計(jì)算回收率；計(jì)算換算系數(shù)，主要是用于將環(huán)己基氨基磺酸鈉換算為環(huán)己基氨基磺酸。實(shí)驗(yàn)要素：1、 樣品盡量打碎，超聲提取時(shí)間不宜超過45mins；2、 硫酸、正己烷和亞硝酸鈉的添加順序有嚴(yán)格要求，不可混亂順序；3、 添加正己烷的移液槍要精確，至少系統(tǒng)誤差是一樣的；4、 冰浴時(shí)間不宜超過30mins，冰浴后應(yīng)盡快上機(jī)；5、 計(jì)算回收率時(shí)，參考標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積變化，前后兩