一腎一夾腎血管性高血壓動(dòng)物模型的制作

1、一腎一夾腎血管性高血壓動(dòng)物模型的制作         08-09-04 14:18:00     編輯：studa20             作者：孫琪黃榮桂鄭興中梁萌 【摘要】  目的 研究一腎一夾（1K1C）腎血管性高血壓動(dòng)物模型的制作。方法 選用200220 g 體重的SD大鼠，制作1K1C高血壓大鼠模型。隨機(jī)分為正常對(duì)照組、單腎對(duì)照組(1

2、K)、1K1C組、1K1C+BEA組。使用藥物2溴乙胺氫溴酸鹽(BEA)破壞腎髓質(zhì)。采用尾動(dòng)脈袖套法測(cè)量各組大鼠血壓的變化。結(jié)果 1K組大鼠血壓4周后有明顯升高，與正常對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但是1K組大鼠與正常對(duì)照組大鼠4周后血壓遠(yuǎn)未達(dá)到腎血管性高血壓入選標(biāo)準(zhǔn)；1K1C組大鼠血壓在1周后開始升高，2周時(shí)已達(dá)到本實(shí)驗(yàn)高血壓入選標(biāo)準(zhǔn)；1K1C+BEA組血壓升高更明顯，4周時(shí)血壓與1K1C組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 本方法制作腎血管性高血壓模型簡(jiǎn)單易行，成功率約80%。 【關(guān)鍵詞】  一腎一夾；高血壓；動(dòng)物模型Abstract： Ob

3、jective  To study the preparation of onekidney and oneclip (1K1C) renovascular hypertension animal model. Methods  The animal models of 1K1C renovascular hypertension were established with SpragueDawley rats (200-220g per rat). The rats were randomly divided into four groups, i.e. normal g

4、roup, onekidney (1K) group, 1K1C group and 1K1C+BEA group (BEA=2bromoethylamine hydrobromide). The renal medulla was destroyed by BEA. Blood pressure was measured with tailcuff method by rat blood pressure meter of type RBP1. Results  Compared with normal control group, the blood pressure in 1K

5、 group obviously increased (P<0.05), but four weeks later the blood pressure in both the groups did not achieved the standard of renovascular hypertension. The blood pressure in 1K1C group began to increase one week later and achieved the threshold standard of renovascular hypertension two weeks

6、later. Compared with 1K1C group the blood pressure in 1K1C+BEA group increased more obviously after four weeks (P<0.05). Conclusion  Our making method to rat model of renovascular hypertension is simple and easy to operate. The success rate is about 80%, similar with those in the previous re

7、ports.Key  words： onekidney one clip; hypertension; animal model    腎血管性高血壓(renovascular hypertension)是指單側(cè)或雙側(cè)腎動(dòng)脈的主干或其分支狹窄，使腎血流量減少，導(dǎo)致腎缺血引起的高血壓，為繼發(fā)性高血壓最常見的病因。我國(guó)腎血管性高血壓占高血壓人群的5%7%1，腎血管的損害尚可引起受累腎尿的生成及內(nèi)分泌功能異常。研究方法常以大鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其動(dòng)物模型制作有兩種類型：二腎一夾(2K1C)型(一側(cè)腎動(dòng)脈狹窄，保留對(duì)側(cè)腎臟)，其高血壓早期系“腎素依賴型”；一腎一夾(1

8、K1C)型(一側(cè)腎動(dòng)脈狹窄，對(duì)側(cè)腎切除)，其高血壓系“容量依賴型”。鉗夾腎動(dòng)脈的方法有絲線結(jié)扎、U型銀夾。但絲線結(jié)扎對(duì)于以后去夾不利，而銀夾不易制得，其大小不易控制。本研究參考傅繼華等2的方法加以改進(jìn)制作“”形小夾，小夾內(nèi)徑0.4 mm，制作簡(jiǎn)單，直徑易控制，術(shù)后成功率較高，且高血壓穩(wěn)定。1  材料和方法1.1  實(shí)驗(yàn)材料成年雄性SD大鼠，體重200220 g，福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(閩)20040002。將鋁制易拉罐刮掉外表油漆，剪成長(zhǎng)2.0 cm，寬1.0 mm 的長(zhǎng)條，將一個(gè)4號(hào)針頭(直徑0.4 mm)放入長(zhǎng)條中央，用鑷子小心壓制成小環(huán)，小環(huán)

9、內(nèi)徑與4號(hào)針頭相同。(見圖1)1.2  實(shí)驗(yàn)分組A：正常對(duì)照組(9只)，B：1K對(duì)照組(9只)，C：1K1C組(9只)，D：1K1C+BEA組(5只)。SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組與模型組，造模后再隨機(jī)分為C、D組。B組只游離左腎動(dòng)脈而不套鉗夾，同時(shí)切除右腎，C組鉗夾左腎動(dòng)脈，同時(shí)切除右腎造模，1周后一次性腹腔注射（ip）生理鹽水，D組同C組方法造模，1周后一次性ip藥物BEA(100mg/kg)。1.3  實(shí)驗(yàn)方法 大鼠分籠飼養(yǎng)于室溫、12 h 日光照、45%55%相對(duì)濕度的環(huán)境中，進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)普通顆粒飼料，自由飲水。預(yù)飼養(yǎng)1周后，禁食12 h，不禁水，戊巴比妥鈉30 m

10、g/kg ip麻醉，仰臥固定于操作臺(tái)上，腹部備皮，分別用1%碘酒和75%乙醇消毒皮膚，鋪上無(wú)菌中間開孔的紗布，于劍突下1.5 cm 沿腹正中線依次切開皮膚、正中白色肌腱，剪開腹膜進(jìn)入腹腔。用溫?zé)猁}水無(wú)菌紗布包裹左側(cè)內(nèi)臟并翻向體外，暴露左腎后沿腹主動(dòng)脈用無(wú)齒小彎鑷與消毒棉簽鈍性向下分離，在左腎靜脈下方游離出左腎動(dòng)脈，將一內(nèi)徑0.4 mm 的鋁質(zhì)小夾呈水平方向套入左腎動(dòng)脈起始處，左腎動(dòng)脈落入鋁質(zhì)小夾頂部的小孔內(nèi)，鉗閉夾子兩端造成狹窄，離小夾0.5 cm 處用絲線結(jié)扎，剪去小夾多余部分并將尾端朝上避免壓迫左腎靜脈。將左側(cè)內(nèi)臟仔細(xì)放回腹腔，再用同樣方法暴露右腎，分離右腎周圍脂肪組織，避免損傷右側(cè)腎上腺，近腎臟側(cè)結(jié)扎右腎蒂后將右腎切除，內(nèi)臟仔細(xì)復(fù)位后逐層縫合切口，待動(dòng)物清醒后放入單籠飼養(yǎng)。正常對(duì)照組僅游離左腎動(dòng)脈