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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上微生物學(xué)復(fù)習資料緒論1、名詞解釋:微生物,微生物學(xué),種,菌株、品系、克隆,菌落,菌苔。 微生物: 微生物是形體微小、單細胞或個體結(jié)構(gòu)簡單的多細胞、甚或無細胞結(jié)構(gòu),用肉眼看不見或看不清的低等生物的總稱。 微生物學(xué): 微生物學(xué)是一門在細胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進化等生命活動基本規(guī)律,并將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護等實踐領(lǐng)域的科學(xué),其根本任務(wù)是發(fā)掘、利用、改善和保護有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物,為人類社會的進步服務(wù)。
2、 種:種是最基本的分類單位,它是一大群表型特征高度相似,親緣關(guān)系極其相近,與同屬內(nèi)其它種有著明顯差異的菌株的總稱。 菌株(品系):表示任何由一個獨立分離的單細胞繁殖而成的純種群體極其一切后代;實際上是一個微生物達到遺傳性純的標志。克?。喝艟涫怯梢粋€單細胞發(fā)展而來的,則它就是一個純種細胞群或克隆。菌落:在適宜的培養(yǎng)條件下,微生物在固體培養(yǎng)基表面(有時為內(nèi)部)生長繁殖,形成以母細胞為中心的一堆肉眼可見的、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細胞集團,這就是菌落。菌苔:如果將某一純種的大量細胞密集地接種到固體培養(yǎng)基表面,結(jié)果長成的各“菌落”互相連成一片,這就是菌苔。2、簡述微生物學(xué)發(fā)展史上5
3、個時期的特點和代表人物。 史前期朦朧階段(約8000年前-1676) 特點:人們雖然沒有看到微生物,但已經(jīng)不自覺的利用有益微生物、防止有害微生物。 中國古代: 初創(chuàng)期-形態(tài)學(xué)時期(1676-1861) 特點:這一時期微生物學(xué)的研究工作主要是對一些微生物進行形態(tài)描述。 代表人物列文虎克:微生物學(xué)的先驅(qū)者 奠基期-生理學(xué)時期(1861-1897) 特點:這一時期的主要工作是查找各種病原微生物,把微生物學(xué)的研究從形態(tài)描述推進到生理學(xué)研究的新水平,建立了系列微生物學(xué)的分支學(xué)科。代表人物:巴斯德和科赫。 發(fā)展期生化水
4、平研究階段 特點:微生物學(xué)的研究進入分子水平,微生物學(xué)家的研究工作從上一時期的查找病原微生物轉(zhuǎn)移到尋找各種有益微生物的代謝產(chǎn)物。代表人物E.Büchner生物化學(xué)奠基人 成熟期分子生物學(xué)水平研究階段特點:微生物學(xué)從一門應(yīng)用學(xué)科發(fā)展為前沿基礎(chǔ)學(xué)科,其研究工作進入分子水平,而微生物因其不同于高等動植物的生物學(xué)特性而成為分子生物學(xué)研究的主要對象。在應(yīng)用研究方面,向著更自覺、更有效和可認為控制的方向發(fā)展,與遺傳工程、細胞工程和酶工程緊密結(jié)合,成為新興生物工程的主角。代表人物J.Watson和F.Crick:分子生物學(xué)奠基人3、微生物共有哪五大共性?其中最基本的是哪一個?
5、為什么? 五大共性:體積小,面積大;吸收多,轉(zhuǎn)化快;生長旺,繁殖快;適應(yīng)強,易變異;分布廣,種類多。其中最基本的是體積小,面積大;原因:由于微生物是一個如此突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們具有不同于一切大生物的五大共性,因為一個小體積大面積系統(tǒng),必然有一個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,并由此而產(chǎn)生其余4個共性。4、微生物分類學(xué)有哪3項具體任務(wù)?試加以簡述。 3項具體任務(wù):分類、鑒定和命名 分類的任務(wù)是解決從個別到一般或從具體到抽象的問題,亦即通過收集大量描述有關(guān)個體的文獻資料,經(jīng)過科學(xué)的歸納和理性的思考,整理成一個科學(xué)的分類系統(tǒng)鑒定的任務(wù)與分類恰恰相反
6、,它是一個從一般到特殊或從抽象到具體的過程,亦即通過詳細觀察和描述一個未知純種微生物的各種性狀特征,然后查找現(xiàn)成的分類系統(tǒng),以達到對其知類、辨名的目的。命名的任務(wù)是為一個新發(fā)現(xiàn)的微生物確定一個新學(xué)名,亦即當你詳細觀察和描述某一具體菌種后,經(jīng)過認真查找現(xiàn)有的權(quán)威性分類鑒定手冊,發(fā)現(xiàn)這是一個以往從未記載過的新種,這時,就得按微生物的國際命名法規(guī)給予一個新學(xué)名。5、種以上的分類單元分幾級? 界,門,綱,目,科,屬,種七級6、何謂三域?qū)W說? 20世紀70年代末由美國伊利諾斯大學(xué)的C.R.Woese等人對大量微生物和其他生物進行16S和18S r
7、RNA的寡聚核苷酸測序,并比較其同源性水平后,提出了一個與以往各種界級分類不同的新系統(tǒng),稱為三域?qū)W說。三域指細菌域、古生菌域和真核生物域。7、何謂(G+C)mol% 值?它在微生物分類鑒定中有何應(yīng)用? 表示DNA分子中鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)所占的摩爾百分比值。 應(yīng)用: 判別種與種之間親緣關(guān)系相近程度;是建立新分類單元時的重要指標。第一章 原核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:原核生物,細菌,缺壁細菌,原生質(zhì)體,芽孢,伴孢晶體,放線菌。原核生物:即廣義的細菌,指一大類細胞核無核膜包裹,只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細胞生物,包括真細菌和古生菌兩大類
8、群。細菌:是一類細胞細短、結(jié)構(gòu)簡單、胞壁堅韌、多以二分裂方式繁殖和水生性較強的原核生物。缺壁細菌:指細胞壁缺乏或缺損的細菌。包括原生質(zhì)體、球狀體、 L型細菌和支原體。原生質(zhì)體:人工條件下用溶菌酶除去細胞壁或用青霉素抑制細胞壁合成后,所留下的僅由一層細胞膜包裹的圓球狀細胞。一般由G+形成。芽孢:某些細菌在生長發(fā)育后期,可在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形的抗逆性休眠體,稱為芽孢(又稱內(nèi)生孢子)。伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢的同時,會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體,稱為伴孢晶體(即ð內(nèi)毒素)。放線菌:是一類呈絲狀生長、菌落呈放射狀、以孢子繁殖的陸生性較強的革蘭氏陽性
9、菌。2、細菌的基本有哪些?細胞壁,細胞膜 ,間體 ,核區(qū) ,核糖體 ,細胞質(zhì)及其內(nèi)含物3、圖示細菌細胞構(gòu)造。見書11頁4、試比較G+和G-細菌細胞壁的異同。 成 分革蘭氏陽性細菌革蘭氏陰性細胞肽聚糖磷壁酸類脂質(zhì)蛋白質(zhì)含量很高(30-95)含量較高(<50)一般無(<2)0 含量很低(520)0含量較高(約20)含量較高 5、簡述革蘭氏染色法的機制并說明此法的重要性。 革蘭氏染色機制:結(jié)晶紫液初染和碘液媒染:在細菌的細胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。乙醇脫色:G細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和
10、交聯(lián)致密且不含類脂,把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色;G-細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,細胞退成無色。復(fù)染: G-細菌呈現(xiàn)紅色,而G+細菌則仍保留最初的紫色。重要性: 革蘭氏染色有著十分重要的理論與實踐意義。通過這一染色,幾乎可把所有的細菌分成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個大類,因此它是分類鑒定菌種時的重要指標。又由于這兩大類細菌在細胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異,因此任何細菌只要通過簡單的革蘭氏染色,就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。6、滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說是如何解釋芽孢
11、的耐熱機制的?芽孢的耐熱在于芽孢衣對多價陽離子和水分的滲透很差以及皮層的離子強度很高,這就使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽孢核欣中的水分,其結(jié)果造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水,正是這種失水的核心才賦予了芽孢極強的耐熱性。7、簡述鏈霉菌形態(tài)構(gòu)造特點。(1)基內(nèi)菌絲:又稱營養(yǎng)菌絲,是緊貼固體培養(yǎng)基表面并向培養(yǎng)基里面生長的菌絲。色淺、較細,其主要功能是吸收營養(yǎng)物和排泄代謝產(chǎn)物,一般沒有隔膜。有的產(chǎn)生色素。(2)氣生菌絲:營養(yǎng)菌絲發(fā)育到一定階段,伸向空間形成氣生菌絲,色較深、直徑較粗,直形或彎曲狀而分枝,有的產(chǎn)生色素。第二章 真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1、名詞解釋:真核微生物,酵母菌,生活史,霉
12、菌,無性孢子,有性孢子,子實體。真核微生物:是指一大類有完整細胞核、結(jié)構(gòu)精巧的染色體和多種細胞器的微生物。酵母菌:非分類名詞,一群能發(fā)酵糖類的單細胞微生物,屬真菌類。生活史 :個體經(jīng)一系列生長、發(fā)育階段后而產(chǎn)生下一代個體的全部過程,就稱為該生物的生活史或生命周期。霉菌:(非分類名詞)絲狀真菌統(tǒng)稱,通常指菌絲體發(fā)達而又不產(chǎn)生大型子實體的真菌。無性孢子:不經(jīng)過兩性細胞結(jié)合而直接由菌絲分化形成的繁殖性小體。有性孢子:指經(jīng)過兩性細胞結(jié)合,經(jīng)質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂形成的繁殖小體。子實體:是由真菌的營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲纏結(jié)而成的具有一定形狀的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。2、簡述真菌的特點。 不能進行光合作用; 以產(chǎn)生大量孢子進
13、行繁殖; 一般具有發(fā)達的菌絲體; 細胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì); 營養(yǎng)方式為異養(yǎng)吸收型; 陸生性較強。3、簡述酵母菌的特點。(1)生活史中,個體主要以單細胞狀態(tài)存在;(2)多數(shù)營出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能發(fā)酵糖類產(chǎn)能;(4)細胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量較高、酸度較大的水生環(huán)境中生長。4、圖示酵母菌細胞構(gòu)造,并指出其細胞壁的結(jié)構(gòu)特點。細胞結(jié)構(gòu): 見書48頁細胞壁的結(jié)構(gòu)特點:(1)化學(xué)組成:三明治狀的“酵母纖維素”:分三層,外層為甘露糖,內(nèi)層為葡聚糖,其間夾有一層蛋白質(zhì)分子。芽痕周圍有少許幾丁質(zhì)。(2)原生質(zhì)體的制備:用蝸牛消化酶水解細胞壁。(注:其結(jié)構(gòu)特點可能不完善)5、簡述酵母菌的繁殖方式,
14、圖示釀酒酵母的生活史 并說明各階段的特點。生活史:見書51頁5、簡述酵母菌的繁殖方式繁殖方式:無性繁殖:芽殖 裂殖 產(chǎn)生擲孢子等無性孢子 有性繁殖產(chǎn)生子囊及子囊孢子各階段的特點:子囊孢子發(fā)芽產(chǎn)生單倍體營養(yǎng)細胞單倍體營養(yǎng)細胞出芽繁殖異性營養(yǎng)細胞接合,質(zhì)配核配,形成二倍體細胞二倍體營養(yǎng)細胞不進行核分裂,出芽繁殖二倍體細胞變成子囊,減數(shù)分裂,形成4子囊孢子子囊破壁后釋放出單倍體子囊孢子6、霉菌的有性和無性孢子主要有哪些?無性孢子有:厚垣孢子、節(jié)孢子、分生孢子、孢囊孢子、游動孢子、芽孢子、擲孢子。有
15、性孢子有:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔孢子。7、試比較細菌、放線菌、酵母菌和霉菌細胞壁成分的 異同,并討論它們原生質(zhì)體制備方法。細胞壁成分的異同細菌分為G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量較高,而G-不含磷壁酸;G+類脂質(zhì)一般無,而G-含量較高;G+不含蛋白質(zhì),G-含量較高。放線菌為G-,其細胞壁具有G-所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌,酵母菌的細胞壁外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖;而霉菌的細胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。原生質(zhì)體制備方法:G+菌原生質(zhì)體獲得:青霉素、溶菌酶G-菌原生質(zhì)體獲得:EDTA鰲合劑處理,溶菌酶放線菌 原生質(zhì)體獲得:青霉素、溶菌酶霉菌原
16、生質(zhì)體獲得:纖維素酶酵母菌原生質(zhì)體獲得:蝸牛消化酶13、什么叫鎖狀聯(lián)合?其生理意義如何?鎖狀聯(lián)合: 擔子菌亞門中多數(shù)擔子菌的雙核菌絲,在進行細胞分裂時,于菌絲的分隔處形成的一個側(cè)生的喙狀結(jié)構(gòu)稱鎖狀聯(lián)合。生理意義:保證了雙核菌絲在進行細胞分裂時,每節(jié)(每個細胞)都能含有兩個異質(zhì)(遺傳型不同)的核,為進行有性生殖,通過核配形成擔子打下基礎(chǔ)。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標準,凡是產(chǎn)生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。鎖狀聯(lián)合也是擔子菌亞門的明顯特征之一。14、霉菌的營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲各有何特點?它們分別可分化出哪些特化結(jié)構(gòu)?1) 營養(yǎng)菌絲體:伸入培養(yǎng)基吸收營養(yǎng); 2) 氣生菌絲體:向空中生成,形成繁殖器官。
17、營養(yǎng)菌絲的特化結(jié)構(gòu):假根吸器附著枝附著胞菌核菌索匍匐菌絲菌環(huán)和菌網(wǎng)氣生菌絲的特化結(jié)構(gòu):子實體第三章 病毒和亞病毒1、名詞解釋:病毒,真病毒,亞病毒,噬菌斑,烈性噬菌體,溫和噬菌體,溶原菌,溶原性。 病毒:是超顯微的,無細胞結(jié)構(gòu),專性活細胞內(nèi)寄生,在活細胞外具一般化學(xué)大分子特征,一旦進入宿主細胞又具有生命特征。 真病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)兩種組分的病毒亞病毒:凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中,只含其中之一的分子病原體稱為亞病毒 噬菌斑:當一個噬菌體感染一個敏感細胞后,隔不久即釋放出一群子代噬菌體,在固體培養(yǎng)基中,它們通過瓊脂層的
18、擴散又侵染周圍的宿主細胞,并引起它們的裂解,如此經(jīng)過多次重復(fù),就出現(xiàn)了一個由無數(shù)噬菌體粒子構(gòu)成的群體噬菌斑,它是透亮不長菌的小圓斑,每一個噬菌斑是由一個噬菌體粒子形成的。 烈性噬菌體:凡在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體。 溫和性噬菌體:噬菌體侵染宿主后,并不增殖,裂解,而與宿主DNA結(jié)合,隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制,此時細胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體,這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。 溶原菌:含有溫和性噬菌體的細菌稱為溶源性細菌。
19、溶源性噬菌體附著或整合在宿主染色體上,一道復(fù)制。 2、病毒粒有哪幾種對稱體制?每種對稱又有幾類特殊外形?螺旋對稱型TMV 呈直桿狀,中空 二十面體對稱腺病毒 外形呈典型的二十面體 復(fù)合對稱T偶數(shù)噬菌體 呈蝌蚪狀3、什么叫烈性噬菌體?簡述其裂解性生活史。 烈性噬菌體:凡在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體。 吸附 噬菌體尾絲散開,固著于特異性受點上。 侵入 尾鞘收縮,尾管推出并插入到細胞壁和膜中,
20、頭部的核酸注入到宿主細胞中,而蛋白質(zhì)衣殼留在細胞壁外。 增殖 增殖過程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細胞的核酸操縱宿主細胞代謝機構(gòu),以寄主個體及細胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料,大量復(fù)制噬菌體核酸,并合成蛋白質(zhì)外殼。 成熟(裝配)寄主細胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。 裂解(釋放)子代噬菌體成熟后,脂肪酶和溶菌酶促進宿主細胞裂解,從而釋放出大量子代噬菌體。什么是效價?試簡述噬菌體效價的雙層平板法。效價表示每毫升試樣中所含有的具有侵染性的噬菌體粒子數(shù)。雙層平板法主要步驟:預(yù)先分別配
21、制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿上澆一層平板,待凝固后,再把預(yù)先融化并冷卻到45以下,加有較濃的敏感宿主和一定體積待測噬菌體樣品上層培養(yǎng)基,在試管中搖勻后,立即倒在底層培養(yǎng)基上鋪平待凝,然后在37下保溫。一般經(jīng)10余h 后即可對噬菌斑計數(shù)。4、 什么是一步生長曲線?它可分幾期?各期有何特點? 一步生長曲線 : 定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實驗曲線稱作一步生長曲線或一級生長曲線。潛伏期 從噬菌體吸附細菌細胞至細菌細胞釋放出新的噬菌體的最短時間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。裂解期 從被感染的第一個
22、細胞裂解至最后一個細胞裂解完畢所經(jīng)歷的時間。平穩(wěn)期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達到最高點后的時期。 裂解量 每個被感染的細菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基1、名詞解釋:自養(yǎng)微生物,異養(yǎng)微生物,營養(yǎng),營養(yǎng)物,C/N,氨基酸自養(yǎng)型生物,氨基酸異養(yǎng)型生物,生長因子,大量元素,微量元素,培養(yǎng)基。 自養(yǎng)微生物:以二氧化碳作為主要或唯一的碳源,以無機氮化物作為氮源,通過細菌光合作用或化能合成作用獲得的能量的微生物。 異養(yǎng)微生物:以有機物為碳源,光或有機物分解為能源的微生物。
23、0; 營養(yǎng):指生物體從外部環(huán)境攝取其生命活動所必須的能量和物質(zhì),以滿足其生長和繁殖需要的一種生理功能 。 營養(yǎng)物:能為機體生命活動提供結(jié)構(gòu)物質(zhì)、能量、代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)和良好的生理環(huán)境的物質(zhì)稱為營養(yǎng)物。 C/N比:所謂C/N是指在微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中碳原子的摩爾數(shù)與氮源中氮原子的摩爾數(shù)之比。 氨基酸自養(yǎng)型生物:不需要氨基酸作為氮源的,它們能把非氨基酸類的簡單氮源自行合成所需要的一切氨基酸。 氨基酸異養(yǎng)型生物:需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源。 生長因子:一類對微
24、生物正常代謝必不可少且又不能從簡單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機物。 大量元素:凡是生長所需濃度在10-310-4mol/L范圍內(nèi)的元素,可稱為大量元素,包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。 微量元素:凡是生長所需濃度在10-610-8mol/L范圍內(nèi)的元素,則稱為微量元素,包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。 培養(yǎng)基:是一種人工配制的適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合養(yǎng)料,它具備微生物所需的六大營養(yǎng)元素,且其間比例合適。 2、指出四大類微生物的最適生長pH范圍及常用的培養(yǎng)基名稱。細菌(PH 7476)
25、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基;真菌(自然PH)馬鈴薯培養(yǎng)基;霉菌(PH 7072)察氏培養(yǎng)基;放線菌(PH 7476)高氏一號培養(yǎng)基。3、指出微生物的六大營養(yǎng)要素。 (一)碳源(二)氮源(三)能源(四)生長因子(五)無機鹽(六)水 4、試比較細胞膜運輸營養(yǎng)物質(zhì)的四種方式。比較項目 單純擴散 促進擴散 主動運輸 基因移位
26、 特異載體蛋白無慢由濃至稀內(nèi)外相等無特異性不需要不變 無無競爭性無H2O、CO2、O2甘油、乙醇、少數(shù)氨基酸、鹽類、代謝抑制劑有快由濃至稀內(nèi)外相等特異性不需要不變有有競爭性有SO42+、PO43+、糖(真核生物)有快由稀至濃內(nèi)部濃度高得多特異性需要不變有有競爭性有無快由稀至濃內(nèi)部濃度高得多特異性需要改變有有競爭性有運送速度溶質(zhì)運送方向平衡時內(nèi)外濃度運送分子能量消耗運送前后溶質(zhì)分子載體飽和效應(yīng)與溶質(zhì)類似物運送抑制劑運送對象舉例氨基酸、乳糖等糖類、Na+、Ca2+等無機離子葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等5、什么是鑒別性培
27、養(yǎng)基?試以EMB培養(yǎng)基為例,分析其鑒別作用的原理。 鑒別性培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。 EMB作用原理 其中的伊紅和美藍兩種苯胺染料可抑制革蘭氏陽性細菌和一些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細菌。在低酸度時,這兩種染料結(jié)合形成沉淀,起著產(chǎn)酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細菌會在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生相互易區(qū)分的特征菌落,因而易于辨認。尤其是大腸桿菌,因其強烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸,菌體帶H+故可
28、染上酸性染料伊紅,又因伊紅與美藍結(jié)合,所以菌落染上深紫色,從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光: 6、什么是單功能營養(yǎng)物、雙功能營養(yǎng)物、多功能營養(yǎng)物? 單功能營養(yǎng)物:一種營養(yǎng)物有一種營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為單功能營養(yǎng)物。 雙功能營養(yǎng)物:一種營養(yǎng)物有兩種營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為雙功能營養(yǎng)物。 多功能營養(yǎng)物:一種營養(yǎng)物常有兩種以上營養(yǎng)要素功能,該營養(yǎng)物稱為多功能營養(yǎng)物。7、試述培養(yǎng)基的種類。 按對培養(yǎng)基成分的了解來分: (1)天然培養(yǎng)基 (2)組合培養(yǎng)基
29、;按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)來分 (1)固體培養(yǎng)基 (2)半固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 (4)脫水培養(yǎng)基 按培養(yǎng)基的功能來分 (1)種子培養(yǎng)基 (2)發(fā)酵培養(yǎng)基 (3)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (4)選擇性培養(yǎng)基第六章 微生物的生長及其控制1、名詞解釋:生長產(chǎn)量常數(shù)(Y),最適生長溫度,巴氏消毒法,抗生素,抗代謝藥物,選擇毒力,生長限制因子,MIC。 生長產(chǎn)量常數(shù)(Y):指菌體產(chǎn)量與限制性營養(yǎng)物消耗的比例關(guān)系。 最適生長溫度:某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度。
30、160; 巴氏消毒法:用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)與風味的消毒方法。 抗生素:抗生素是生物在其生命活動中產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,能對他種生物的生命活動產(chǎn)生抑制作用或致死作用。 抗代謝藥物:又稱代謝拮抗物、代謝類似物,是指在結(jié)構(gòu)上與生物體所必需的代謝物相似,可以與正常代謝途徑中特定的酶發(fā)生競爭性反應(yīng),從而阻礙酶的功能、干擾代謝的正常進行的物質(zhì)。 選擇毒力:抗生素對人體及動、植物組織的毒力,一般遠小于它對致病毒的毒力,這稱為抗生素的選擇毒力。
31、0; 生長限制因子:凡是處于較低濃度范圍內(nèi),可影響生長速率和菌體產(chǎn)量的營養(yǎng)物,就稱生長限制因子。 MIC:最小抑菌濃度,表示某藥物對某菌的最小抑菌濃度,常以g/ml或/ml來表示。2、什么是典型生長曲線?它可分幾期?劃分的依據(jù)是什么?各期特點如何? 典型生長曲線 :將少量純種單細胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下,其群體就會有規(guī)律地生長,定時取樣測定細胞含量,以細胞數(shù)目的對數(shù)值作縱坐標,以培養(yǎng)時間作橫坐標,就可以畫出一條有規(guī)律的曲線,這就是微生物的典型生長曲線。 劃分的
32、依據(jù):單細胞微生物。 (1)延滯期(停滯期、調(diào)整期) 特點:a.生長速率常數(shù)為零;b.細胞形態(tài)變大或增大;c.細胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。 (2) 對數(shù)期 特點:此時菌體細胞生長的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時短,細胞進行平衡生長,菌體內(nèi)酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加,群體的形態(tài)與生理特征最一致,抗不良環(huán)境的能力強。穩(wěn)定期 特點:a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個時期形成;f.有些微生物在此時形成次
33、生代謝產(chǎn)物。 衰亡期 特點:a.細胞形態(tài)多樣;b.出現(xiàn)細胞自溶現(xiàn)象;c.有次生代謝產(chǎn)物的形成;d.芽孢在此時釋放。 3、延滯期有何特點?如何縮短延滯期? 特點:a.生長速率常數(shù)為零;b.細胞形態(tài)變大或增大;c.細胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。 消除:a. 以對數(shù)期的菌體作種子菌 ;b. 適當增大接種量 :一般采用3%8%的接種量,根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定,最高不超過1/10。c. 培養(yǎng)基的成分:種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。 4、指
34、數(shù)期有何特點?處于該期的微生物有何應(yīng)用? 特點:此時菌體細胞生長的速率常數(shù)R最大,分裂快,代時短,細胞進行平衡生長,菌體內(nèi)酶系活躍,代謝旺盛,菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加,群體的形態(tài)與生理特征最一致,抗不良環(huán)境的能力強。 應(yīng)用:指數(shù)期的微生物是研究生理、代謝等的良好材料;是增殖噬菌體的最適菌齡;是發(fā)酵生產(chǎn)中用做種子的最佳種齡,通過補加營養(yǎng)物質(zhì)延長指數(shù)期。5、穩(wěn)定期為何會到來?有何特點? 形成原因:a.營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;b.營養(yǎng)物的比例失調(diào);c.有害代謝產(chǎn)物的積累;d.物化條件的變化。 特點:
35、a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細胞開始貯存貯藏物;e.芽孢在這個時期形成;f.有些微生物在此時形成次生代謝產(chǎn)物。 6、什么叫連續(xù)培養(yǎng)?有何優(yōu)點?為何連續(xù)時間是有限的? 連續(xù)培養(yǎng):指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個生長期間,微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長速率常數(shù)進行生長,從而導(dǎo)致微生物的生長過程能“不斷”地進行下去的一種培養(yǎng)方法。 優(yōu)點:高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。 菌種易于退化;容易污染;營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。 因此連續(xù)時間是有限的。7、微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何?
36、如何調(diào)整? 微生物的生命活動過程中會自動地改變外界環(huán)境的pH,其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿兩種過程,在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢,因此,隨著培養(yǎng)時間延長,培養(yǎng)基的pH會逐漸下降。的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系,碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH會明顯下降;相反,碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后,其pH常會明顯上升。 措施:分為“治標”和“治本”兩大類,前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進行直接、及時、快速但不持久的表面化調(diào)節(jié),后者指根據(jù)內(nèi)在機制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。8、比較滅菌、消毒、防腐和化療的異同,并舉例。比較項目滅菌
37、;消毒防腐化療處理因素強理、化因素理、化因素生物體表,理、化因素化學(xué)治療劑處理對象任何物體內(nèi)外酒、乳等有機質(zhì)物體內(nèi)外宿主體內(nèi)微生物類型一切微生物有關(guān)病原菌一切微生物有關(guān)病原菌對微生物作用徹底殺滅殺死或抑制抑制或殺死抑制或殺死實 例加壓蒸氣滅菌,輻射滅菌,化學(xué)殺菌劑70酒精消毒,巴氏消毒法 冷藏,干燥,糖漬,鹽腌,缺氧,化學(xué)防腐劑 抗生素,磺胺藥,生物藥物素 9、試述微生物生長繁殖的測定方法。 一、測生長量(一)直接法1、測體積2、測干重(二)間接法1、比濁法2、生理指標法 二、
38、計繁殖數(shù)1、直接計數(shù)法(全數(shù))血球計數(shù)板法 2、間接計數(shù)法(活菌數(shù))稀釋平板菌落計數(shù)法10、試述高溫滅菌的方法。1、干熱滅菌法(1)原理:干熱可使破壞細胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥,并可使各種細胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。(2)應(yīng)用范圍:1)烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法(150170,12hr):金屬器械、洗凈的玻璃器皿。2)火焰灼燒法:接種環(huán)、接種針等。2、濕熱滅菌: 即以100以上的加壓蒸氣進行滅菌。(1)相同溫度及相同作用時間下,濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效:濕熱空氣穿透力強,能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫鍵,能加速其變性。(2)種類: 1)常壓法a.巴氏消毒法: 用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)
39、食品,殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)與風味的消毒方法。a)低溫維持法(LTH):要求62.8保持30min;b)高溫瞬時法(HTST):要求71.7維持至少15s; b.煮沸消毒法:a)適用范圍:一般用于飲用水的消毒。b)條件:100下數(shù)分鐘。c.間隙滅菌法:又稱丁達爾滅菌法或分段滅菌法。a) 適用范圍:適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。b) 條件:80一100下蒸煮1560分鐘,三天。2)加壓法:a.常規(guī)加壓法a) 適用范圍:適合于一切微生物學(xué)實驗室、醫(yī)療保健機構(gòu)或發(fā)酵工廠中對培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。b) 條件:121(壓力為lkgcm2),時間維持1520分鐘,也可采用在較低的溫度(115,即0.7kgcm2下維持35分鐘的方法。b.連續(xù)加壓滅菌法:在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。a) 適用范圍:在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作。培養(yǎng)基滅菌用。主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進行加熱、維持和冷卻,然后才進入發(fā)酵罐。b) 條件:在135140下處理5一l 5秒鐘11、請說明營養(yǎng)物質(zhì)濃度變化對微生物生長速度和最終菌體產(chǎn)量的影響。 微生物生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì),只有在濃度適當?shù)臈l件下才能表現(xiàn)出良好的作用。濃度太低,不能滿足微生物生長的需要;
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