實(shí)驗(yàn)六、細(xì)胞凝集反應(yīng)目的要求1、掌握細(xì)胞凝集反應(yīng)的

1、實(shí)驗(yàn)六、細(xì)胞凝集反應(yīng)實(shí)驗(yàn)六、細(xì)胞凝集反應(yīng)目的要求目的要求 1 1、掌握細(xì)胞凝集反應(yīng)的原理。、掌握細(xì)胞凝集反應(yīng)的原理。2 2、掌握細(xì)胞凝集的實(shí)驗(yàn)方法。、掌握細(xì)胞凝集的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)用品 光學(xué)顯微鏡、離心機(jī)、載玻片、生理鹽水、光學(xué)顯微鏡、離心機(jī)、載玻片、生理鹽水、PBSPBS液、液、土豆塊莖、兔血紅細(xì)胞土豆塊莖、兔血紅細(xì)胞( (無(wú)細(xì)胞核無(wú)細(xì)胞核) )實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 凝集素是一類含糖（少數(shù)例外）并能與糖專凝集素是一類含糖（少數(shù)例外）并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞一結(jié)合的蛋白質(zhì)，它具有凝集細(xì)胞和刺激細(xì)胞分裂的作用。在細(xì)胞膜的表面，組成細(xì)胞膜的分裂的作用。在細(xì)胞膜的表面，組

2、成細(xì)胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖鏈，形成細(xì)胞外被（又糖脂和糖蛋白伸出寡糖鏈，形成細(xì)胞外被（又稱為糖萼）。凝集素能與細(xì)胞外被中的糖分子稱為糖萼）。凝集素能與細(xì)胞外被中的糖分子鏈接，在細(xì)胞間形成鏈接，在細(xì)胞間形成“橋橋”，從而引起細(xì)胞凝，從而引起細(xì)胞凝集。集。 大多數(shù)凝集素存在于儲(chǔ)藏器官內(nèi)，作為一種大多數(shù)凝集素存在于儲(chǔ)藏器官內(nèi)，作為一種氮源。氮源。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法一、一、2%2%兔血紅細(xì)胞制備：兔血紅細(xì)胞制備： 1ml1ml兔血加入兔血加入5ml5ml生理鹽水，生理鹽水，2000r/min,52000r/min,5分鐘離心分鐘離心2 2次次 后，按照紅細(xì)胞體積比配制后，按照紅細(xì)胞體積比配

3、制2%2%兔血紅細(xì)胞懸液。兔血紅細(xì)胞懸液。二、土豆塊莖：二、土豆塊莖： 1 1、提取凝集素：稱取土豆去皮塊莖、提取凝集素：稱取土豆去皮塊莖4g4g，加少許磷酸緩沖，加少許磷酸緩沖 液研磨成勻漿，最終加到液研磨成勻漿，最終加到30ml30ml磷酸緩沖液，浸泡磷酸緩沖液，浸泡2h2h， 浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。 2 2、測(cè)定血凝活性：一滴、測(cè)定血凝活性：一滴 2%2%兔血紅細(xì)胞懸液和一滴凝集兔血紅細(xì)胞懸液和一滴凝集 素粗提液，靜置素粗提液，靜置1515分鐘于低倍鏡下觀察。分鐘于低倍鏡下觀察。 3 3、用磷酸緩沖液作為對(duì)照：一滴、用磷酸緩沖液作為對(duì)照：一滴 2%2%兔血紅細(xì)胞懸液和兔血紅細(xì)胞懸液和 一滴磷酸緩沖液，靜置一滴磷酸緩沖液，靜置1515分鐘于低倍鏡下觀察。分鐘于低倍鏡下觀察。 4 4、實(shí)驗(yàn)繪圖、實(shí)驗(yàn)繪圖顯