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1、.乙肝五項(xiàng)乙肝五項(xiàng)膠體金定性實(shí)驗(yàn)?zāi)z體金定性實(shí)驗(yàn)濱醫(yī)附院檢驗(yàn)科濱醫(yī)附院檢驗(yàn)科.認(rèn)識(shí)乙肝病毒認(rèn)識(shí)乙肝病毒.乙肝五項(xiàng)檢測(cè)v HBsAgv HBsAbv HBeAgv HBeAbv HBcAb.認(rèn)識(shí)乙肝五項(xiàng)認(rèn)識(shí)乙肝五項(xiàng).在認(rèn)識(shí)乙肝五項(xiàng)前,在認(rèn)識(shí)乙肝五項(xiàng)前,先了解乙肝病毒感染的相關(guān)臨床先了解乙肝病毒感染的相關(guān)臨床.急性肝炎急性肝炎 慢性肝炎慢性肝炎 來(lái)源來(lái)源 之前從來(lái)未感染過(guò) l 急性乙肝轉(zhuǎn)變而來(lái)。l 乙肝攜帶者發(fā)病后轉(zhuǎn)變而來(lái)l 原發(fā)性慢性乙肝新近感染病毒后表現(xiàn)為慢性乙肝的過(guò)程 ALT ALT升高幅度升高幅度 較大500-1000U或更高 不大多在正常值5倍左右感染時(shí)間感染時(shí)間一般不超過(guò)半年 半年以上病
2、程特點(diǎn)病程特點(diǎn) 病程順利,無(wú)需特殊治療,一般不用抗病毒藥 反復(fù),復(fù)雜,遷延不愈預(yù)后預(yù)后預(yù)后良好若有不良因素,5-10%成慢性抗病毒為主的綜合治療完全可控制病情發(fā)展、推遲和預(yù)防肝硬化,肝癌的發(fā)生結(jié)果結(jié)果 6個(gè)月內(nèi)sAg、eAg、DNA可轉(zhuǎn)陰并出現(xiàn)抗HBs,獲得對(duì)乙肝的免疫 病毒不會(huì)被徹底清除不存在大 、小三陽(yáng)全轉(zhuǎn)陰.急性肝炎?慢性肝炎?攜帶者?急性肝炎?慢性肝炎?攜帶者?T T細(xì)胞免疫功能細(xì)胞免疫功能能否清除病毒、引起損傷能否清除病毒、引起損傷疾病疾病完全完全、并產(chǎn)生抗體急性肝炎低下不足以、持續(xù)引起病理反應(yīng)慢性肝炎完全缺乏不清除、不引起病理反應(yīng)無(wú)癥狀攜帶者.乙肝五項(xiàng)及血清學(xué)診斷乙肝五項(xiàng)及血清學(xué)診
3、斷.vHBsAgHBsAg 已感染已感染標(biāo)志標(biāo)志 不反映病毒有無(wú)復(fù)制、復(fù)制程度、傳染性強(qiáng)弱不反映病毒有無(wú)復(fù)制、復(fù)制程度、傳染性強(qiáng)弱vHBsAbHBsAb 中和性抗體標(biāo)志,中和性抗體標(biāo)志,是否康復(fù)是否康復(fù)或或是否有抵抗力是否有抵抗力的主要標(biāo)志。的主要標(biāo)志。 乙肝疫苗接種者,若僅此項(xiàng)陽(yáng)性,應(yīng)視接種成功 若感染病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人體內(nèi)也會(huì)產(chǎn)生vHBeAgHBeAg 病毒病毒復(fù)制復(fù)制標(biāo)志。持續(xù)陽(yáng)性標(biāo)志。持續(xù)陽(yáng)性3 3個(gè)月以上則有慢性化傾向個(gè)月以上則有慢性化傾向 vHBeAbHBeAb 病毒病毒復(fù)制停止復(fù)制停止標(biāo)志。病毒復(fù)制減少,標(biāo)志。病毒復(fù)制減少,傳染性較弱傳染性較弱vHBcAbHBc
4、Ab 曾感染或正感染曾感染或正感染者都會(huì)出現(xiàn)的標(biāo)志者都會(huì)出現(xiàn)的標(biāo)志 HBcAb-IGM是新近感染或病毒復(fù)制標(biāo)志 HBcAb-IgG是感染后就會(huì)產(chǎn)生的.兩對(duì)半檢查兩對(duì)半檢查 判斷是否感染乙肝或粗略估計(jì)病毒復(fù)制水平的初步檢查 兩對(duì)半兩對(duì)半 評(píng)估病情嚴(yán)重程度價(jià)值不大評(píng)估病情嚴(yán)重程度價(jià)值不大 肝功能肝功能 衡量肝臟是否有肝細(xì)胞壞死或炎癥存在衡量肝臟是否有肝細(xì)胞壞死或炎癥存在的重要檢查(的重要檢查(轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)氨酶價(jià)值最高氨酶價(jià)值最高),治療的重要參考指標(biāo)。),治療的重要參考指標(biāo)。 HBV DNA HBV DNA 判斷如何治療的參考依據(jù),也可評(píng)估傳染性。判斷如何治療的參考依據(jù),也可評(píng)估傳染性。 一般一般DNAD
5、NA越高,傳染性越強(qiáng)越高,傳染性越強(qiáng)(應(yīng)同肝功能一起檢查)(應(yīng)同肝功能一起檢查). 膠體金(colloidal gold)也稱金溶膠(goldsol),是金鹽被還原成原子金后形成的金顆粒懸液。膠體金.vHBsAg, HBeAg檢測(cè)試紙條采用雙抗體夾心法,試紙條含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的多克隆抗體和控制區(qū)(C)的相應(yīng)抗體。HBsAb檢測(cè)試紙條采用雙抗原夾心法,試紙條含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的乙肝表面抗原和控制區(qū)(C)的相應(yīng)抗體。.14雙抗體夾心法G區(qū):金標(biāo)特異性抗體(兔型)C區(qū):羊抗兔IgT區(qū):特異性抗體 吸水紙標(biāo)本標(biāo)本陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果.v測(cè)試時(shí),血清/血漿標(biāo)本滴入試劑板加樣處,
6、隨之標(biāo)本在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如標(biāo)本中含有相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì),在測(cè)試區(qū)內(nèi)(T)出現(xiàn)一條紅色條帶,則是陽(yáng)性結(jié)果。如標(biāo)本中不含有相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì),則測(cè)試區(qū)內(nèi)(T)將沒(méi)有紅色條帶,則是陰性結(jié)果。無(wú)論相應(yīng)的待測(cè)物質(zhì)是否存在于標(biāo)本中,一條紅色條帶都會(huì)出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定是否有足夠標(biāo)本,層析過(guò)程是否正常的標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。.vHBeAb, HBcAb檢測(cè)試紙條采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法,試紙條含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的單克隆抗體和控制區(qū)(C)的相應(yīng)抗體。測(cè)試時(shí),血清/血漿標(biāo)本滴入試劑板加樣處,隨之標(biāo)本在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析。如標(biāo)本中含有相應(yīng)的抗體,則同膜上測(cè)試區(qū)(T
7、)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)與預(yù)包被在乳膠顆粒上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。如標(biāo)本中沒(méi)有相應(yīng)的抗體,預(yù)包被在乳膠顆粒上的相應(yīng)抗原則同膜上測(cè)試區(qū)(T)的單克隆抗體全部結(jié)合。強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本,測(cè)試區(qū)內(nèi)(T)將沒(méi)有紅色條帶,弱陽(yáng)性標(biāo)本,測(cè)試區(qū)內(nèi)(T)將有一條非常弱的紅色條帶,陰性標(biāo)本,測(cè)試區(qū)內(nèi)(T)將會(huì)出現(xiàn)明顯的紅色條帶。.17競(jìng)爭(zhēng)法標(biāo)本標(biāo)本G區(qū):金標(biāo)特異性抗體(兔型)C區(qū):羊抗兔IgT區(qū):標(biāo)準(zhǔn)抗原 吸水紙陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果.18標(biāo)本標(biāo)本G區(qū):金標(biāo)特異性抗體(兔型)C區(qū):羊抗兔IgT區(qū):標(biāo)準(zhǔn)抗原 吸水紙陰性結(jié)果陰性結(jié)果.v無(wú)論相應(yīng)的抗體是否存在于標(biāo)本中,一條紅色條帶都會(huì)出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定是
8、否有足夠標(biāo)本,層析過(guò)程是否正常的標(biāo)準(zhǔn),同時(shí)也作為試劑的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)。.v標(biāo)本收集標(biāo)本收集:標(biāo)本收集后應(yīng)盡快分離出血清或血漿以避免溶血。檢測(cè)時(shí)應(yīng)盡量使用新鮮的標(biāo)本。標(biāo)本若不能及時(shí)送檢,可在2-8冷藏3天。長(zhǎng)期保存需冷凍于-20,忌反復(fù)凍融。.v操作步驟操作步驟:在進(jìn)行測(cè)試前必須先完整閱讀使用說(shuō)明書(shū),使用前將試劑板和血樣標(biāo)本恢復(fù)至室溫(20-30)。v1.從原包裝鋁箔袋中取出試劑板,在小時(shí)內(nèi)應(yīng)盡快地使用。v2.用吸管吸取血清/血漿標(biāo)本,逐滴(每孔2-3滴)加入試劑板的五個(gè)加樣孔中。v3.等待紅色條帶的出現(xiàn),測(cè)試結(jié)果應(yīng)在15分鐘時(shí)讀取。20分鐘后判定無(wú)效。.v檢驗(yàn)結(jié)果判定:陽(yáng)性(+):兩條紅色條帶出現(xiàn),
9、一條位于測(cè)試區(qū)(T)內(nèi),另一條位于質(zhì)控區(qū)(C)。陽(yáng)性結(jié)果表明:標(biāo)本中含有待測(cè)物質(zhì)。v陰性(-):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)無(wú)紅色條帶出現(xiàn)。陰性結(jié)果表明:標(biāo)本中檢測(cè)不出待測(cè)物質(zhì)。v無(wú)效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紅色條帶,表明不正確的操作過(guò)程或試紙條已變質(zhì)損壞。在任何情況下,應(yīng)重新測(cè)試。如果問(wèn)題仍然存在,應(yīng)立即停止使用此批號(hào)產(chǎn)品,并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。v注意:測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)的紅色條帶可顯現(xiàn)出顏色深淺的現(xiàn)象。但是,在規(guī)定的觀察時(shí)間內(nèi),不論該色帶顏色深淺,即使只有非常弱的色帶也應(yīng)判為陽(yáng)性結(jié)果。.v強(qiáng)陽(yáng)性(+):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)無(wú)紅色條帶出現(xiàn)。陽(yáng)性結(jié)果表明:標(biāo)本中含有待測(cè)抗體。v弱陽(yáng)性(+):質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)有非常弱的紅色條帶出現(xiàn)。弱陽(yáng)性結(jié)果表明:標(biāo)本中含有少量待測(cè)抗體。v陰性 (-):兩條紅色條帶出現(xiàn),一條位于測(cè)試區(qū)(T)內(nèi),另一條位于質(zhì)控區(qū)(C
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