酪氨酸酶抑制劑對(duì)生育期雌性大鼠的抗生育效應(yīng)研究

1、酪氨酸酶抑制劑對(duì)生育期雌性大鼠的抗生育效應(yīng)研究    作者：鐘興明 鐘依平 齊詮 韋相才【關(guān)鍵詞】  酪氨酸激酶； 大豆異黃酮； 抗著床酪氨酸激酶（tyrosine protein kinase ,PTKs）是一組酶系，是在正常和異常增殖過(guò)程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成員。多種生長(zhǎng)因子包括表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、血小板源生長(zhǎng)因子（PDGF）和胰島素樣生長(zhǎng)因子（IGF）的受體都有PTKs活性。PTK途徑的激活屬于與細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和分化有關(guān)的信號(hào)途徑。目前，PTK抑制劑在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用主要是抗腫瘤。近來(lái)研究還發(fā)現(xiàn)PTKs的活性與非腫瘤細(xì)

2、胞的生理活動(dòng)有關(guān)，許多PTKs抑制劑能影響正常細(xì)胞的功能和機(jī)能，在這一方面研究較多的是一些發(fā)現(xiàn)較早的天然化合物如染料木黃酮（genistein，GST）、herbimycin  A和lavendustin A。大量的研究已證實(shí)，GST在防治癌癥、降低血脂、婦產(chǎn)科的激素替代治療、激素依賴性腫瘤的防治方面有著廣闊的應(yīng)用前景1，但對(duì)于抗生育方面的研究較少。本研究通過(guò)小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察大豆異黃酮對(duì)青年雌性大鼠生育功能的影響。1  材料與方法1.1  材料1.2  試驗(yàn)方法及內(nèi)容1.3  數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)所有數(shù)據(jù)以SPSS10.0軟件包建庫(kù)并計(jì)算各組各指標(biāo)的

3、平均值，進(jìn)行均數(shù)和方差分析。2  結(jié)果2.1  大豆異黃酮對(duì)胚泡在體內(nèi)發(fā)育的影響光鏡下，3組共獲取胚胎378個(gè)，其中正常對(duì)照組為125個(gè)，低劑量組為128個(gè)，高劑量組為125個(gè)。3組相比較，獲取胚胎總數(shù)無(wú)顯著差異（P0.05）。其中，正常對(duì)照組見(jiàn)106個(gè)胚胎發(fā)育成囊胚，囊胚發(fā)育率為84.8%（106/125）；低劑量組見(jiàn)84個(gè)胚胎發(fā)育成囊胚,囊胚發(fā)育率為65.63%(84/128)；高劑量組見(jiàn)73個(gè)胚胎發(fā)育成囊胚，囊胚發(fā)育率為62.4%（78/125）。3組相比較，正常對(duì)照組的囊胚發(fā)育率較低劑量組和高劑量組顯著增高（P0.05），而低劑量組的囊胚發(fā)育率和高劑量組相比較無(wú)顯著

4、差異（P0.05）。2.2  大豆異黃酮對(duì)胚胎著床的影響3組共獲得孕鼠18只。其中正常對(duì)照組8只，妊娠率為80%；低劑量組為7只，妊娠率為60%；高劑量組為3只，妊娠率為30%。3組相比較，高劑量組的妊娠率顯著低于正常對(duì)照組和低劑量組（P0.05）。正常對(duì)照組和低劑量組的妊娠率相比較無(wú)顯著差異（P0.05）。3組共獲得的著床胚胎總數(shù)為58個(gè)，其中正常對(duì)照組為42個(gè)，平均著床胚胎數(shù)為5.25個(gè)；低劑量組著床胚胎總數(shù)為12個(gè)，平均著床胚胎數(shù)為1.71個(gè)；高劑量組著床胚胎總數(shù)為4個(gè)，平均著床胚胎數(shù)為1.33個(gè)。3組相比較，正常對(duì)照組的著床胚胎總數(shù)和平均著床胚胎數(shù)顯著高于低劑量組和高劑量組（

5、P0.05）。2.3  大豆異黃酮對(duì)胎鼠的影響剖宮取胎后共獲得活胎62個(gè)，均未見(jiàn)死胎和畸胎。其中正常對(duì)照組為46個(gè)，平均活胎數(shù)為4.6個(gè)，低劑量組為9只，平均活胎數(shù)為0.9個(gè)，高劑量組為7只，平均活胎數(shù)為0.7只。3組相比較，正常對(duì)照組的活胎總數(shù)和平均活胎數(shù)顯著高于低劑量組和高劑量組（P0.01）。3  討論大豆異黃酮是一種黃酮類的PTKS抑制劑，其中包含大豆黃酮、大豆甙元、金雀異黃酮和金雀異黃素（genistein）等。國(guó)內(nèi)研究表明，大豆異黃酮提取物對(duì)酪氨酸酶活性有比較強(qiáng)的抑制作用，并且隨著大豆異黃酮提取物濃度的提高，其對(duì)酪氨酸酶活性的抑制率也提高4。Genistein是

6、ATP與PTK結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，能有效地抑制EGF酪氨酸激酶?，F(xiàn)有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在黃體細(xì)胞的體外培養(yǎng)中，應(yīng)用PTK抑制劑不僅可明顯拮抗EGF升高孕酮的作用，而且在小鼠的胚泡體外發(fā)育和胚胎移植的過(guò)程中可明顯抑制胚胎著床5。另外，從結(jié)構(gòu)上講，genistein屬于一種植物雌激素6，既能代替雌激素和ER結(jié)合，發(fā)揮雌激素樣作用，又能干擾雌激素和ER結(jié)合，表現(xiàn)抗雌激素作用，具有雙向性。Dechaud H研究發(fā)現(xiàn)，genistein可以與3H標(biāo)記的雌二醇競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合性激素型球蛋白，從而干擾雌激素與其受體結(jié)合，破壞體內(nèi)的激素平衡。通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物攝入過(guò)量的植物雌激素，能干擾促性腺激素釋放的反饋系統(tǒng)，導(dǎo)致

7、生育問(wèn)題7。近年來(lái)對(duì)靈長(zhǎng)類胚泡著床的研究表明，著床期子宮內(nèi)膜也需要基礎(chǔ)水平的雌激素，而且孕激素受體的表達(dá)有賴于雌激素的誘導(dǎo)，因此利用小劑量genistein的抗雌激素作為抗著床的可能性是存在的。趙更力8的研究表明，應(yīng)用大豆異黃酮后,內(nèi)膜表現(xiàn)出不同程度的增生、子宮重量明顯增加，而且子宮重量系數(shù)和內(nèi)膜增生程度與大豆異黃酮的劑量有關(guān)，表明大豆異黃酮具有雌激素樣作用并且作用強(qiáng)度與劑量有關(guān)，大劑量大豆異黃酮引起子宮內(nèi)膜的增生反應(yīng)明顯。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在喂養(yǎng)不同劑量的大豆異黃酮后，D4獲取的胚胎總數(shù)和囊胚的發(fā)育率較對(duì)照組顯著降低（P0.05）；D6獲得的胚胎著床數(shù)和平均著床胚胎數(shù)較對(duì)照組顯著降低（P0.0

8、5）；D20獲得的活胎總數(shù)和平均活胎數(shù)也較對(duì)照組顯著降低（P0.01）。說(shuō)明大豆異黃酮對(duì)生育期雌性小鼠存在著明顯的抗生育效應(yīng)。遲曉星等9認(rèn)為大豆異黃酮對(duì)青年雌性大鼠體質(zhì)量的影響不顯著，但高劑量組大鼠的卵巢發(fā)生了病理變化，主要表現(xiàn)為卵泡增多，體積增大，卵泡內(nèi)顆粒層細(xì)胞增多，厚度增加，卵泡液豐富。推測(cè)在300 mg/kg·bw的劑量下，大豆異黃酮可能會(huì)對(duì)青年雌性大鼠卵巢產(chǎn)生影響。Genistein與E2一樣，在低濃度時(shí)促進(jìn)黃體酮的合成，高濃度時(shí)則抑制其合成10。Genistein對(duì)于年輕動(dòng)物、雌激素化的動(dòng)物及年輕婦女等高雌激素水平者，表現(xiàn)為抗雌激素活性，而在E2較低的自然絕經(jīng)和手術(shù)絕經(jīng)的

9、婦女則顯示雌激素樣作用11。有研究發(fā)現(xiàn)，青年婦女每天服用異黃酮45mg，月經(jīng)周期推遲1.5天，卵泡相延長(zhǎng)2.5天，黃體相縮短1天。因而，從理論上推測(cè)genistein作為PTKS抑制劑一方面可干擾著床時(shí)細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，破壞蛻膜組織的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡；另一方面對(duì)體內(nèi)高雌激素水平的生育期雌性小鼠還具有抗雌激素作用，故其具有抗著床作用。本研究結(jié)果還顯示，大豆異黃酮雖可抑制胚泡發(fā)育和胚胎著床，但對(duì)于著床后的胚胎發(fā)育卻無(wú)明顯影響，剖宮取胎未發(fā)現(xiàn)死胎或畸胎。綜上所述，大豆異黃酮作為黃酮類的PTKS抑制劑，對(duì)生育期雌性小鼠具有一定的抗生育作用。但具體的抗著床劑量及機(jī)制，還需進(jìn)行更深入的研究，為新型避孕藥

10、物的研究及開(kāi)發(fā)提供理論及實(shí)驗(yàn)支持?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 Arena S , Rappa C, Del Frate E，et al . Anatural alternative to menopausal hormone replacement therapy . Phytoestrogens. Minerva Ginecol , 2002 , 54(2):5358.5 Lachgar S,Moukadiri H,Jonca F , etal . Vascular endothelial growth factor is an autocrine growth factor for hair derm

11、al papilla cells . J Invest Dermatol ,1996，106(1):1723.6 Arcuri F, Ricci C, Ietta F, etal . Macrophage migration inhibitory factor in the human endometrium:expression and localization during the menstrual cycle and early pregnancy. Biol Repord , 2001,64(4):12001205.7 楊志華，綜述；沈倍奮，審閱.gp130的結(jié)構(gòu)、功能及信號(hào)傳導(dǎo).國(guó)

12、外醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)分冊(cè)，2000，22（4）：217222.10 Tanaka T, Sakamoto T, Miyama M,etal. Interleukin-11 enhance cell survival of decidualized normal human endometrial stromal cells. Gynecol Endocrinol ,2001,15(4):272278.11 Loke YW, Burrows TD , King A. Adhesion molecules and trophoblastic invasion. Contracept Fertil Sex , 1995,23(9):573575.    你可能感興趣的論文