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1、WORD格式幾種常用的染色方法1美藍(lán)染色法在已枯燥、固定好的抹片上,滴加適量的美藍(lán)染色液,經(jīng)12min,水洗,瀝去多余的水分,吸干或烘干,鏡檢。2革蘭氏染色法( 1在已枯燥、固定好的抹片上,滴加草酸銨結(jié)晶紫染色液,經(jīng) 12min,水洗。( 2加革蘭氏碘溶液于抹片上媒染,作用1 3min,水洗。( 3加 95酒精于抹片上脫色,約 30s-1min ,水洗。( 4加堿性復(fù)紅液或沙黃或稀釋石炭酸復(fù)紅液復(fù)染10-30s ,水洗。( 5吸干或烘干,鏡檢。革蘭氏陽(yáng)性菌呈藍(lán)紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。3抗酸性染色法( 1在已枯燥、固定好的抹片上,滴加較多量的石炭酸復(fù)紅染色液,在玻片下以酒精燈火焰緩緩加熱,至發(fā)

2、生蒸汽即止,維持微微發(fā)生蒸汽,經(jīng) 3 5min,水洗。( 2用 3鹽酸酒精脫色,直至標(biāo)本無(wú)色脫出為止,充分水洗。( 3用美藍(lán)染色液復(fù)染約 1min,水洗。( 4吸干或烘干,鏡檢??顾嵝约?xì)菌呈紅色,非抗酸性細(xì)菌呈藍(lán)色。以下方法也可:即在枯燥、固定好的抹片上,滴加石炭酸復(fù)紅染色 1min,水洗,用 1美藍(lán)染色液復(fù)染約 20s,水洗。對(duì)光觀察,標(biāo)本務(wù)必全呈藍(lán)色,在火焰上烘干、鏡檢??顾嵝约?xì)菌呈紅色,非抗酸性細(xì)菌和背景呈藍(lán)色。4瑞氏染色法專業(yè)資料整理WORD格式 1抹片自然枯燥后,滴加瑞氏染色液于其上,為了防止很快變干,染色液可專業(yè)資料整理WORD格式稍多加些,或看情況補(bǔ)充滴加, 經(jīng) 1 3min,加

3、約與染液等量的中性蒸餾水或 PBS 液,輕輕晃動(dòng)玻片,使與染液混勻,約 3min 左右,直接用水沖洗不可先將染液傾去,吸干或烘干、鏡檢。細(xì)菌染成藍(lán)色,組織、細(xì)胞等物呈其它顏色。( 2另一方法 抹片自然枯燥后, 按涂抹點(diǎn)大小, 蓋上一塊略大的清潔濾紙片,在其上輕輕滴加染色液,至略浸過(guò)濾紙,并看情況進(jìn)展補(bǔ)滴,維持不使變干;染色 3-5min ,直接用水沖洗,吸干或烘干、鏡檢。此法使染色液經(jīng)濾紙過(guò)濾,可大大防止沉渣粘附于抹片上影響鏡檢觀察。5姬姆薩染色法 1于 5ml 新煮過(guò)的中性蒸餾水中滴加510 滴姬姆薩氏染色液原液,即稀釋成為常用的姬姆薩氏染色液。( 2抹片經(jīng)甲醇固定枯燥后,在其上滴加足量的染

4、色液或?qū)⒛ㄆ胧⒂腥旧旱娜旧字?,染?30min,或者染色數(shù)小時(shí)至 24h,取出水洗,吸干或烘干、鏡檢。細(xì)菌呈藍(lán)青色,組織、細(xì)胞等呈其它顏色。視野常呈淡紅色。6克利特氏莢膜染色法 1染色液配制美藍(lán)溶液美藍(lán) 1g, 95酒精 10ml,蒸餾水 100ml。將美藍(lán)溶于酒精內(nèi),再加蒸餾水混合。堿性復(fù)紅溶液堿性復(fù)紅 0.03g ,95酒精 1ml,蒸餾水 99ml。將堿性復(fù)紅溶于酒精內(nèi),再加蒸餾水混合。 2染色法涂片經(jīng)火焰固定后,滴加美藍(lán)溶液,將玻片至火焰上面加熱至發(fā)生蒸汽為止。水洗,以堿性復(fù)紅溶液復(fù)染15 30s。水洗后、吸干、鏡檢。染色后,菌體呈藍(lán)色,莢膜呈紅色。專業(yè)資料整理WORD格式7.

5、 結(jié)晶紫福爾馬林莢膜染色法專業(yè)資料整理WORD格式1染色配制結(jié)晶紫福爾馬林染色液結(jié)晶紫 10g,福爾馬林溶液 100ml?;旌鲜蛊渫耆芙猓粢惯^(guò)濾。堿性復(fù)紅溶液見前:克利特氏莢膜染色法 2染色法涂片用結(jié)晶紫福爾馬林染色液染色0.5 1min。水洗后,以堿性復(fù)紅染色液復(fù)染1530s。水洗、吸干、鏡檢。染色后,菌體呈深藍(lán)色,莢膜呈淡紅色。8. 番紅染色液莢膜染色法1染液配制番紅或沙黃0.7g,95酒精20ml,蒸餾水15ml。將番紅溶解于酒精內(nèi),再加蒸餾水混合而成。 2染色法涂片滴加番紅染色液,將玻片置火焰上加熱至發(fā)生蒸氣約5min。水洗、吸干、鏡檢。染色后,菌體呈暗紅色,莢膜呈淡黃色。9. 赫

6、斯氏莢膜染色法( 1染色液配制專業(yè)資料整理WORD格式龍膽紫酒精溶液龍膽紫酒精飽和液5ml,蒸餾水95ml。專業(yè)資料整理WORD格式硫酸銅水溶液硫酸銅20g,蒸餾水100ml。專業(yè)資料整理WORD格式2染色法專業(yè)資料整理WORD格式涂片加熱固定, 將龍膽紫酒精溶液滴加于玻片。 將玻片置火焰上微加熱至見蒸氣并保持蒸氣約 20min。專業(yè)資料整理WORD格式用硫酸銅液代替水沖洗染液,用吸水紙吸干、鏡檢。染色后,菌體呈深紫色,莢膜呈淺藍(lán)色。10 安沙尼氏莢膜染色法( 1染色液配制 1結(jié)晶紫水溶液。 20硫酸銅水溶液。( 2染色法將涂片在空氣中自然枯燥。以 1結(jié)晶紫水溶液染色 2min不必加熱 ,再以

7、 20硫酸銅代水沖洗染液。吸干、鏡檢。染色后,菌體呈紫色,莢膜呈淡紫色。11 苗列爾氏芽孢染色法( 1染色液配制媒染液5 鉻酸液鉻酸5ml,加蒸餾水 95ml染色液石炭酸復(fù)紅液脫色液2 硫酸液純硫酸2ml,加蒸餾水 98ml復(fù)染液堿性美藍(lán) 2染色法涂片,枯燥,火焰固定,用媒染液染色 10min,充分水洗,用炭酸酸復(fù)紅液加溫染色最好在標(biāo)本上覆蓋一X濾紙 2min,水洗,用脫色劑脫色 10s,水洗,用美藍(lán)液復(fù)染 1min,水洗,枯燥、鏡檢。結(jié)果:芽孢呈紅色,菌體呈藍(lán)色。專業(yè)資料整理WORD格式12孔雀綠沙黃芽孢染色法專業(yè)資料整理WORD格式( 1染色液 5 孔雀綠液, 0.5 沙黃液。( 2染色法

8、涂片火焰固定,加 5孔雀綠液微微加溫染色 30s 1min,至發(fā)生蒸氣為止,待冷后水洗,再加沙黃液復(fù)染 30s,水洗,枯燥后鏡檢。結(jié)果:芽孢呈綠色,菌體其它局部呈淡紅色。13李富遜氏鞭毛染色法( 1染色液配制 5 鉀明礬水溶液 10ml,20鞣酸水溶液 10ml,1堿性復(fù)紅酒杯精溶液 10ml。專業(yè)資料整理WORD格式將上述三種溶液按次混合配成,如發(fā)生沉淀,用其上清液,本染液保存染液可用以下染液:美藍(lán)0.1g ,硼砂 0.5g1 周,復(fù)專業(yè)資料整理WORD格式,蒸餾水100ml。專業(yè)資料整理WORD格式 2染色法專業(yè)資料整理WORD格式所用的載玻片必須十分清潔無(wú)油脂、無(wú)劃痕??蓪⒉F冉谥劂t

9、酸鉀清潔液數(shù)天,用鑷子取出后以清水沖洗干凈沖洗時(shí)切勿用手捏玻片,然后斜插于木架上,置 37 度溫箱中任其枯燥后備用。菌液最好用 10 16h 的幼年肉湯培養(yǎng)物。假設(shè)取自瓊脂培養(yǎng)基上的菌落,那么用接種環(huán)挑取少許,置蒸餾水中制成輕度混濁的細(xì)菌懸液,切忌用接種環(huán)多作攪動(dòng),以免損傷鞭毛。挑取肉湯培養(yǎng)物或細(xì)菌懸液一環(huán),輕置于玻片一滴,玻片作傾斜放置,使菌液沿玻片面順向下流,自成一薄菌膜,置37 度恒溫箱內(nèi)枯燥。將上述染液滴加于涂片上,染 1015min,染色時(shí)間的長(zhǎng)短隨室溫的上下而不同,如在冬季,可置于 37 度溫箱內(nèi)染色。輕輕地水洗12min。在室溫或 37 度溫箱內(nèi)任其枯燥后作鏡檢,細(xì)菌菌體及鞭毛呈

10、紅色。如需復(fù)染色,那么用上述美藍(lán)硼砂復(fù)染液在水洗后, 染色 10min,用水沖洗,枯燥后作鏡檢。菌體呈藍(lán)色,鞭毛呈紅色。專業(yè)資料整理WORD格式良好的鞭毛染色涂片, 應(yīng)在顯微鏡的視野中見到大局部細(xì)菌菌體均附有鞭毛。14 過(guò)碘酸錫夫氏真菌染色法 1染色液配制甲液: 1過(guò)碘酸液乙液:堿性復(fù)紅0.1g , 95乙醇 5ml,蒸餾水 95ml丙液:亞硫酸氫鋅1g,酒石酸 0.5g,蒸餾水 100ml丁液: 1.22 飽和苦味酸液2染色法將標(biāo)本在甲液中染 10min,水洗后再用乙液染 23min,置丙液中染 30 40min,至玻片呈淡紅色為適宜,水洗 1min,再置于丁液中染 3min。充分水洗至無(wú)黃色液體為止。脫水、透明,樹膠封固后鏡檢。結(jié)果:真菌組織染色鮮紅色。15 中國(guó)藍(lán)真菌染色法 1染色液純石炭酸 20ml,乳酸 20ml,甘油 40ml,蒸餾水 20ml。將上述成分混合,加溫溶解后參加中國(guó)藍(lán)0.05g ,混合振蕩即成。 2染色法先將染色液加在載玻片上,將培養(yǎng)物被檢樣放在玻片上的染色液中,涂勻后覆蓋蓋玻片,微加溫后鏡檢。16黑色素螺旋體染色法 1染色液配制黑色素 5g,蒸餾水 50ml?;旌霞訜崾蛊淙芙?, 在溶液中加1福爾馬林作防腐劑,臨用前過(guò)濾。 2

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