溶出度方法驗(yàn)證易忽視的幾個(gè)問題

1、化學(xué)藥品普通口服固體制劑溶出度方法驗(yàn)證易忽視的幾個(gè)問題字體：小中大|打印發(fā)表于：2007-11-0707:43作者：sjc_wy來源：藥物臨床試驗(yàn)網(wǎng)審評(píng)四部審評(píng)八室鄭國(guó)鋼溶出度系指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規(guī)定的溶出介質(zhì)中溶出的速度和程度，是一種模擬口服固體制劑在胃腸道中的崩解和溶出的體外試驗(yàn)方法。它是評(píng)價(jià)藥物制劑質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。一個(gè)完整的溶出度方法驗(yàn)證主要包括以下內(nèi)容：（1）溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇；（2）溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）及其轉(zhuǎn)速的選擇；（3）溶出量測(cè)定方法的驗(yàn)證，（4）溶出度均一性試驗(yàn)（批內(nèi)）、重現(xiàn)性試驗(yàn)（批間）等。審評(píng)中發(fā)現(xiàn)提供溶出度方法驗(yàn)證資料往往不全，應(yīng)引起申報(bào)單位注

2、意。（一）溶出度測(cè)定方法的選擇溶出度測(cè)定方法的選擇包括溶出介質(zhì)及介質(zhì)體積的選擇、溶出方法（轉(zhuǎn)籃法與槳法）及其轉(zhuǎn)速的選擇。根據(jù)化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則，溶出介質(zhì)通常采用水、0.1mol/L鹽酸溶液、緩沖液（pH值38為主）。對(duì)在上述溶出介質(zhì)中均不能完全溶解的難溶性藥物，可加入適量的表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉等。檢查方法轉(zhuǎn)籃法以100轉(zhuǎn)/分鐘為主；槳法以50轉(zhuǎn)/分鐘為主。應(yīng)該注意的是（1）溶出介質(zhì)的體積需使藥物符合漏槽條件，大杯法（第一、二法）常用體積為5001000ml,小杯法（第三法）常用體積為100250ml。部分品種為滿足在溶出量測(cè)定時(shí)藥物濃度的需要，可采用低于上述限

3、度范圍的溶劑。（2）介質(zhì)、方法、轉(zhuǎn)速的選擇一般根據(jù)溶出曲線測(cè)定結(jié)果確定。部分資料簡(jiǎn)單地通過比較主藥在各溶劑中的溶解度來選擇溶出介質(zhì)，我們認(rèn)為相同的溶劑可能會(huì)導(dǎo)致對(duì)不同制劑溶出行為的差異，且工藝的選擇、輔料的加入能改變主藥在不同溶劑中的溶解行為，故僅考慮溶解度是不適合的；部分資料根據(jù)單點(diǎn)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行方法和轉(zhuǎn)速選擇，如鹽酸左旋多巴甲酯片申報(bào)資料中采用籃法100rpm和槳法75rpm比較，結(jié)果45min溶出均大于95%,故選擇槳法75rpm測(cè)定溶出度，單點(diǎn)測(cè)定不能很好區(qū)分不同處方和生產(chǎn)工藝的溶出情況，也影響溶出拐點(diǎn)的確定，故不合適；考慮今后大生產(chǎn)工藝，申報(bào)單位確定溶出度檢查方法中常采用高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)取

4、樣時(shí)間，取樣時(shí)間與溶出曲線的拐點(diǎn)位置相距較遠(yuǎn)，導(dǎo)致溶出度測(cè)定區(qū)分能力不明顯，溶出度取樣時(shí)間常選擇溶出曲線的拐點(diǎn)處后推1020分鐘，如果時(shí)間較長(zhǎng)或太短，可通過適當(dāng)提高或減低轉(zhuǎn)速等手段重新測(cè)定溶出曲線。（3）如是仿制已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品，則應(yīng)與被仿制的制劑進(jìn)行溶出曲線比對(duì)，并對(duì)相似性進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)方法建議采用f2因子法。溶出曲線中溶出介質(zhì)除采用已確定溶出度檢查中的溶出介質(zhì)外，還應(yīng)選擇水、0.1mol/L鹽酸溶液、pH3.8醋酸鹽緩沖?夜、6.8磷酸鹽緩沖液及pH7.27.4磷酸鹽緩沖液進(jìn)行溶出曲線比對(duì)。（4）重現(xiàn)性試建議采用對(duì)驗(yàn)（批間均一性）是考察制劑工藝穩(wěn)定性及溶出度方法重復(fù)性的一項(xiàng)重要指標(biāo),三批

5、樣品進(jìn)行均一性考察。（二）溶出量測(cè)定方法的驗(yàn)證溶出量測(cè)定常同含量測(cè)定，采用HPLC、UV方法。如溶出量測(cè)定所用的溶劑（溶出介質(zhì)）與含量測(cè)定的溶劑不一致，溶出量測(cè)定濃度與含量測(cè)定濃度不一致，溶出度測(cè)定制劑為膠囊劑或需去除糖衣、薄膜衣后測(cè)定含量的片劑，則均需重新進(jìn)行溶出量測(cè)定方法驗(yàn)證。根據(jù)中國(guó)藥典附錄藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則（附錄XIXA）溶出度測(cè)定方法的驗(yàn)證與含量測(cè)定相同，包括準(zhǔn)確度（回收率）、精密度、專屬性（輔料、膠囊殼等的干擾試驗(yàn)）、線性和耐用性等。應(yīng)該注意的是（1）溶出量測(cè)定方法學(xué)驗(yàn)證中范圍與含量測(cè)定不同。含量測(cè)定范圍為測(cè)試濃度的80%120%（回收率高、中、低常設(shè)為80%、100

6、%、120%）,對(duì)于溶出度，范圍規(guī)定為限度的受0%（回收率高、中、低常設(shè)為50%、限度濃度、100%）。（2）測(cè)定干擾2%以下可忽略不計(jì)，25%可考慮在限度上適當(dāng)提高，超過5%以上測(cè)定方法不可取，如是空膠囊產(chǎn)生的應(yīng)進(jìn)行囊殼的消除試驗(yàn)?？漳z囊常僅對(duì)UV測(cè)定有干擾，藥典規(guī)定如空膠囊干擾大于標(biāo)示量的25%,實(shí)驗(yàn)無效，如干擾不大于標(biāo)示量的2%,可忽略不計(jì)?？紤]膠囊殼的批次、來源不同，紫外吸收強(qiáng)度也各不相同，故干擾也常常不同。嚴(yán)格按照樣品測(cè)定的步驟，取6?？瞻啄z囊殼進(jìn)行試驗(yàn)，工作量大，且由于干擾不一，會(huì)給測(cè)定結(jié)果帶來誤差。故空膠囊干擾較大時(shí)，建議采用HPLC法測(cè)定。如曾發(fā)現(xiàn)，氟康陛膠囊溶出度UV法測(cè)定，

7、部分企業(yè)空白膠囊干擾可達(dá)20%,嚴(yán)重影響數(shù)據(jù)的真實(shí)性，建議改為HPLC法測(cè)定。（三）濾膜吸附的驗(yàn)證取樣過濾時(shí)，可能存在損失，故需進(jìn)行濾膜吸附的驗(yàn)證，大部分資料未進(jìn)行該項(xiàng)試驗(yàn)。中國(guó)藥典溶出度測(cè)定法對(duì)微孔濾膜的規(guī)定為濾孔應(yīng)不大于0.8并使用惰性材料制成的濾器，以免吸附活性成分或干擾分析測(cè)定工作中常用濾膜有水系和有機(jī)系兩種，濾膜孔徑0.45m、0.80水系微孔濾膜通常為混合纖維素酯濾膜（WX）,不耐酸、堿、有機(jī)溶劑。使用前常需進(jìn)行漂洗（水浸）處理，防止濾膜使用時(shí)未壓緊有氣泡入內(nèi)，同時(shí)水浸也為了使膜充分溶脹，現(xiàn)有針式混合纖維素酯過濾器，可直接使用。有機(jī)系微孔過濾膜有尼龍（N6、N66）濾膜、聚偏氟乙烯

8、（PVDF）濾膜、聚四氟乙烯（PTFE）濾膜等，也有針式過濾器，上述濾膜具有顯親水性，使用前不需預(yù)先濕潤(rùn)，幾乎能與全部溶出介質(zhì)相容，無纖維脫落等優(yōu)點(diǎn)，但由于價(jià)格昂貴使用單位較少。判定吸附與否的方法可采用：（1）取溶出液過濾，舍去不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值的變化，了解被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。（2）取樣后，一部分不過濾，直接采用高速離心，取上清液測(cè)定。另一部分采用過濾法，取所得的續(xù)濾液測(cè)定，考察兩者間測(cè)定數(shù)據(jù)的差異。（3）取對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)的變化。發(fā)生吸附的品種往往是主藥均難溶于水（如他克莫司），制成制劑時(shí)一般需進(jìn)行微粉化等處理，使原料藥粒徑變小，比表面能變大，靜電吸附能力增強(qiáng)，故與濾膜的吸附作用明顯；一些小規(guī)格制劑（如非那雄胺片）溶出液中主藥濃度低，達(dá)到飽和所需的初濾液體積大大增加，干擾也較大。一般認(rèn)為吸附量在2%以下時(shí)可忽略不計(jì)，超過2%建議或在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明確注明濾膜規(guī)格或?yàn)V膜預(yù)處理方法（如煮沸1.5h）、增加初濾液量（常規(guī)為5ml）或規(guī)定樣品高速離心后取上清液測(cè)定。（四）其他溶出度方法驗(yàn)證除按規(guī)定的條件外，還應(yīng)注意介質(zhì)的脫氣、溫度控制，以及取樣位置等考察。介質(zhì)的脫氣中國(guó)藥典規(guī)定必須