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文檔簡介
1、常見真菌的別離與鑒定病原真菌的一般特性真菌Fungi是微生物中的一個大類,是一群數(shù)目龐大的細胞生物,估計全世界已有記載的真菌有10萬種以上。它們的子實體小者用顯微鏡才能見到,大者可達數(shù)十厘米,它們共同特征是具有真正的細胞核,產(chǎn)生抱子和不含葉綠素,以寄生或腐生等方式吸取養(yǎng)料,僅少數(shù)類群為單細胞,其他都有分支或不分支的絲狀體,能進展有性或無性繁殖,具有纖維素或其他葡聚糖或幾丁質(zhì)的微纖維或兩者兼有的細胞壁的有機體。對人類和動物致病的真菌大約100余種,屬于病原真菌。一、根本性狀一形態(tài)構(gòu)造真菌分單細胞真菌與多細胞真菌兩大類,前者屬于酵母菌yeast一般呈球形或卵圓形,后者稱為霉菌mold或絲狀真菌,呈
2、絲狀分枝,菌絲交織象絨球狀,另有一些真菌可因寄生環(huán)境及培養(yǎng)條件養(yǎng)料、溫度、氧氣等的不同可交替出現(xiàn)兩種形態(tài),即在室溫中呈霉菌型,在37C或體內(nèi)呈單細胞的酵母型,這類真菌有雙相性,所以稱之為雙態(tài)真菌或二相真菌。真菌的細胞構(gòu)造與一般植物細胞相似,有定型的細胞核及完善的細胞器,但胞壁與細菌胞壁不同,不含粘肽而是由角質(zhì)及葡聚糖組成,也含有脂多糖蛋白質(zhì),其中酵母菌及類酵母菌皆以出芽增殖,不生長真菌絲,革蘭氏染色呈陽性,絲狀真菌分菌絲及抱子兩局部,形態(tài)多種多樣,分述如下。菌絲Hypha真菌在適宜的環(huán)境中,由抱子生出嫩芽,稱為芽管。芽管逐漸延長呈絲狀,稱菌絲。菌絲繼續(xù)生長并生長分枝,增殖的菌絲交織組成菌絲體。
3、其中一局部菌絲深入被寄生的物體或培養(yǎng)基中吸取養(yǎng)料,稱為營養(yǎng)菌絲體。另一局部菌絲向空間生長,稱為氣生菌絲體。氣生菌絲體能產(chǎn)生抱子者稱為生殖菌絲體。菌絲中各個細胞間有明顯分隔者,稱為有隔菌絲。主要見于病原性真菌。很多非病原真菌的菌絲無明顯分隔,稱為無隔菌絲。有些菌絲可呈各種特殊形式,如球拍狀、破梳狀、螺旋狀、結(jié)節(jié)狀、關(guān)節(jié)狀、鹿角狀、假菌絲。1. 抱子生成抱子是真菌擴大繁殖的一種方式。真菌抱子的抵抗力、形態(tài)及作用等均與細菌芽胞不同,分為無性抱子及有性抱子兩大類。不經(jīng)過兩性細胞的結(jié)合而形成的抱子叫無性抱子,這一繁殖過程稱為無性繁殖。常見的無性抱子有5種:關(guān)節(jié)抱子、厚壁抱子、抱子囊抱子、芽抱和分生抱子。
4、病原真菌屬于不完全菌綱,很少產(chǎn)生有性抱子,大多數(shù)是無性抱子。1厚壁抱子:當真菌在不利環(huán)境中,由菌絲內(nèi)胞漿縮濃和胞壁增厚而成,呈圓形。當環(huán)境好轉(zhuǎn)時可生成芽管成長為菌絲。2關(guān)節(jié)抱子:菌絲斷裂形成長方形兩端略鈍圓的抱子叫關(guān)節(jié)抱子。如白地霉和粗球抱子菌。3抱子囊抱子:為鞭毛菌和接合菌的無性生殖形式。抱子囊中所含的抱子來源于分枝菌絲或胞囊梗頂端膨大形成抱子囊,囊內(nèi)原生質(zhì)濃縮集聚,割裂而成,一般數(shù)目較多,抱子囊形態(tài)多樣,因種而異。4芽生抱子:由菌細胞出芽生成,見于念珠菌及隱球菌,前者類酵母菌出芽后抱子伸長呈絲狀,但不見與母細胞別離,稱為假菌絲,在假菌絲上的收縮點也可出芽成芽生抱子。5分生抱子:是子囊菌和半
5、知菌的無性抱子,也是半知菌分類的主要依據(jù),單細胞的分生抱子稱小分生抱子,有蒂或無蒂,側(cè)生或游離,分散或成群,圓形、梨形、卵圓形或其它形狀,外表粗糙或光滑,或有或無各種紋飾。多細胞的分生抱子稱大分生抱子,有紡錘形、棒形、球棍形、鐮刀形及其它形狀,兩端尖或圓或一端圓,厚壁或薄壁,壁光滑或粗糙,有色或無色,分隔有多有少。二培養(yǎng)特性及繁殖方式1.培養(yǎng)特性大多數(shù)真菌對營養(yǎng)要求不高,只需要水、鹽,簡單的氮源及碳水化合物就可生長,一般常用沙堡氏瓊脂基主要成分葡萄糖4%蛋白腺1%瓊脂2%培養(yǎng)都能生長。但需要弱酸性pH46、較低孵育溫度2228C,充分溫度和氧氣供給才能生長良好。侵害內(nèi)臟的某些真菌在37C含血的
6、培養(yǎng)基中生長良好。真菌生長都比擬緩慢,大多需孵育數(shù)天后才成明顯菌落,菌落有以下三種類型:1酵母型菌落:外觀濕潤稠軟致密,類似一般細菌菌落,鏡檢只見有圓形或橢圓形生芽細胞例如隱球菌的菌落。2類酵母型菌落:外觀性狀似酵母型菌落,鏡檢除見有出芽的細胞外,尚可見到假菌絲例如念珠菌的菌落。3絲狀型菌落:由多數(shù)分枝的菌絲體向上生長組成疏松的絨球狀,外表有很多抱子,顯示各種色澤,菌落可呈棉絮狀絨球狀粉末狀或石膏樣,其正面和反面可顯示各種不同色素,常作為鑒定菌種的參考。鏡檢可見有縱橫交織的菌絲及各種抱子例如各種癬菌的菌落。2.繁殖方式有多樣性,包括出芽增殖,菌絲增長,菌絲分枝和斷裂,產(chǎn)生無性抱子及有性抱子進展
7、繁殖,因此它繁殖力很強,但生長速度較慢。三變異性和抵抗力真困很容易發(fā)生變異,在人工培養(yǎng)基中屢次移種或孵育過久,就可出現(xiàn)形態(tài)構(gòu)造、菌落性狀、色素以及各種生理性狀包括毒力的改變,用不同的培養(yǎng)基和溫度培養(yǎng)真菌,其性狀也有改變,真菌對枯燥陽光紫外線及一般化學(xué)消毒劑耐受性卻較強。但對熱的抵抗力卻不強。60C以上1小時即可殺死抱子及其菌絲,在1吮3%炭酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10御醛中可被滅活。用甲醛氣體熏蒸被真菌污染的衣物用具,可殺滅真菌菌絲及其抱子。但真菌對一般抗菌素及磺胺藥均不敏感。只對二性霉素、酮康哇、制霉菌素等非常敏感,治療真菌感染常用此藥。四致病性與免疫性1.致病性病原真菌的致病機制還
8、是一個未完全解決的問題;根據(jù)其侵害部位,主要分為以下兩類:1淺部真菌?。褐饕砂_菌引起,大多為外源感染,常易侵害皮膚、指趾甲及須發(fā)等含角質(zhì)的組織,引起癬癥。2深部真菌?。嚎捎筛鞣N真菌引起,包括類酵母菌、二相真菌及絲狀菌。侵害粘膜、皮下組織、內(nèi)臟及腦膜等處,有時擴散全身,主要是內(nèi)源性感染,也可由外源傳染;前者是因機體抵抗力降低,如患重病,長期使用免疫抑制劑,廣譜抗菌素或放射治療,患惡性病,嚴重?zé)齻葧r,造成體內(nèi)菌群失調(diào),以致常居在體內(nèi)的某些真菌如白念珠菌,甚至平時不致病的環(huán)境中的真菌如曲霉、毛霉等也會乘機侵害,一些傳染性較強的內(nèi)臟真菌病是內(nèi)外源感染。2.免疫性淺部真菌病一般在血中不產(chǎn)生特異性抗體
9、,病后無免疫保護力,只是兒童頭癬等青春期后頭皮皮脂增多時可以白愈,以后不再感染,其他部位癬癥治愈后仍可再感染。深部真菌病雖可產(chǎn)生抗體,但無明顯免疫保護作用。臨床常見的病原性真菌一、淺部真菌一皮膚癬菌皮膚癬菌又稱皮膚絲狀真菌,有以下三屬見表1,都只侵犯體表角化組織皮膚,毛發(fā)及指甲和趾甲。不侵害深部組織,或內(nèi)臟,皆屬外源性傳染,由接觸患癬病人、動物狗、貓、鼠、牛、馬等或染菌物體而感染。毛癬菌屬大紅色毛癬菌1直接鏡檢:皮屑及甲屑,分枝分隔的菌絲有時可斷裂或關(guān)節(jié)抱子狀,毛發(fā):發(fā)外型感染表現(xiàn)為發(fā)外抱子排列成串。少數(shù)為發(fā)內(nèi)型感染抱子在發(fā)內(nèi)排列成鏈狀;毛發(fā)穿孔試驗陰性。2培養(yǎng)特征:在葡萄糖蛋白腺瓊脂,25C
10、,生長比擬快,菌落形態(tài)有多種表現(xiàn),鏡檢也不完全一樣,常見有以下四種:I型:羊毛狀:白色羊毛狀菌絲充滿斜面,典型的卷成筒狀,邊緣貼牢管壁,呈鮮紅色,反面開場在中心有一紅色小點,以后形成深紅色環(huán),最后成片為葡萄酒色,色素邊緣劃界非常明顯。少數(shù)I型菌株表現(xiàn)無紅色色素,正面白色,反面呈淡黃色類似石膏I型,亦有正面白色而反面呈灰黑色。II型:絨毛狀:粉紅色絨毛狀菌絲生長,占斜面3/5,菌絲稀疏,透過菌絲可見粉紅色的基底,反面顏色同I型一樣。山型:粉未狀:菌落外表稍有凸起,呈粉末狀,粉紅色,約占斜面的1/22/3,反面同I型。IV型:溝紋狀:菌落生長相對較慢,比以上三種類型為小,占斜面的1/31/2,菌落
11、中央凸起,從中央向四周有排列比擬整齊的放射狀溝紋,邊緣整齊,外表菌絲甚少。開場微帶黃色,以后變粉紅,反面同I型。3菌種鑒定:菌落特征及色素;大小分生抱子的形態(tài);玉米粉吐溫瓊脂上產(chǎn)生紅色色素;毛發(fā)穿孔試驗陰性;尿素酶試驗陰性。大須癬毛癬菌1直接鏡檢:皮屑內(nèi)見分枝分隔的菌絲,甲屑內(nèi)為關(guān)節(jié)狀菌絲。毛發(fā)感染為發(fā)外型,發(fā)內(nèi)有時有菌絲。2培養(yǎng)特性:在沙氏上生長較快,菌落形態(tài)可分為兩大類:毛型和粉型;以下I、II型為毛型,III、IV、V型屬粉型。白炎癥明顯的皮損中所別離出的菌株多屬粉型。毛型菌落外觀均似紅毛,應(yīng)注意鑒別。具體分型羊毛狀I(lǐng)型,又稱趾間毛癬菌,菌落生長快,白色羊毛狀。氣生菌絲較多且長,排列嚴密
12、,充滿斜面,好象紅毛,正面雪白,反面淡黃色。鏡檢見較細分枝,分隔的菌絲,胞漿濃。有少量球形或長形小分生抱子,無螺旋菌絲和大分生抱子。間或可見球拍菌絲及結(jié)節(jié)菌絲。絨毛型II型,生長快,菌落雪白。外表有嚴密的細短氣生菌絲,中央可有乳頭狀突起,邊緣如刀切,反面棕黃色或棕紅色。鏡檢見較細的分枝、分隔的菌絲,小分生抱子多,有時成葡萄串狀,無螺旋菌絲或大分生抱子;乳皮狀I(lǐng)II型,開場為乳白色菌絲,不久一局部菌落變?yōu)榉勰樱ⅫS,光滑,似牛乳外表的一層薄膜,可一塊塊地挑取,中央有少許褶疊,邊緣不整齊,反面淡黃或棕黃色。鏡檢見粗細不一,分枝分隔的菌絲和大量螺旋菌絲,間或可見破梳狀菌絲,結(jié)節(jié)菌絲及球拍菌絲,大
13、分生抱子少,棒狀,兩端圓,與分生抱子梗的連接處較窄,薄壁光滑,小分生抱子多,球形或長形,有時成葡萄串狀排列。粉末狀I(lǐng)V型,菌落粉末狀,外表平坦、光滑。間或有少數(shù)白色氣生菌絲,中央有乳頭狀凸起,邊緣鋸齒狀。菌落生長快,充滿斜面,色黃或奶油色,外觀像石小、反面棕黃或棕紅色。顆粒狀V型:生長快,菌落粉樣,外表不平,呈顆粒狀。有不規(guī)那么的褶疊或溝紋,邊緣不整齊。下面色黃帶紅或棕黃。反面棕紅色。IV、V鏡檢均見大量棒狀大分生抱子及無數(shù)圓形的小分生抱子,少數(shù)長型。游離或葡萄狀成串,有螺旋菌絲和球拍菌絲。3菌種鑒定:菌落形態(tài);菌絲較細,是皮膚癬菌中最細的一種;螺旋菌絲多見;大分生抱子的形態(tài)和球形小分生抱子;
14、尿素酶陽性;毛發(fā)穿孔陽性。太紫色毛癬菌1直接鏡檢:皮屑、甲屑內(nèi)可見分枝分隔的菌絲或成串的抱子,病發(fā)取黑點部位的斷發(fā),毛發(fā)損害為發(fā)內(nèi)型大抱子,呈關(guān)節(jié)型排列,充滿整個發(fā)內(nèi),故毛發(fā)出皮即斷。2培養(yǎng)特性:在沙氏瓊脂培養(yǎng)基室溫培養(yǎng)菌落生長慢,開場為圓形、白色、潮濕發(fā)亮的菌落,類似酵母;以后中央褶疊或突起,產(chǎn)生紫色色素,并逐漸擴大,或中央紫色,邊緣淡紅色,最外圍有一圈白色的環(huán)。培養(yǎng)基顏色不變,邊緣無放射狀菌絲,整齊如刀切,下沉不明顯,反面無色至深紫色,少數(shù)菌株無顏色,呈無色紫色毛癬菌,鏡檢見粗細不一的菌絲,分隔較密,胞漿淡,有很多不規(guī)那么的突起和腫脹,但無鹿角菌絲。厚壁抱子多,多為間生,偶見小分生抱子25
15、個大生分生抱子。3菌種鑒定:菌落形態(tài),紫色色素;VitB能促進菌落生長,形成大分生抱子;發(fā)內(nèi)型感染。1. 小抱子菌屬大羊毛狀小抱子菌1直接鏡檢:皮屑內(nèi)見分枝、分隔的菌絲,病發(fā)為發(fā)外型感染。2培養(yǎng)特性:在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上室溫生長快。開場為黃色絨毛樣生長,2周后菌絲較多,呈羊毛狀,可充滿大局部斜面。中央趨向粉未化。正面桔黃,反面紅棕色,平皿中培養(yǎng)的菌落外表中央可有少數(shù)同心園,無放射狀溝紋。生長約4-5周后開場變異,菌絲增多,大分生抱子減少或消失。鏡檢見大量紡錘形,厚壁的大分生抱子。一端稍彎曲,末端有帽樣肥大,有6-15個分隔。小分生抱子較少,長形,無柄側(cè)生。可有球拍狀菌絲,破梳狀菌絲,結(jié)節(jié)菌絲及大
16、量厚壁抱子等。3菌種鑒定:菌落形態(tài)及色素,在PDA養(yǎng)基上能產(chǎn)生黃色色素;特征性的厚壁、頂端膨大微彎曲,如戴帽的大分生抱子;發(fā)外抱子型感染。大石膏樣小抱子菌1直接鏡檢:皮屑內(nèi)見菌絲或成串的抱子,病發(fā)為發(fā)外型感染,抱子較大,排列成串。2培養(yǎng)特性:在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上室溫生長快,開場為白色菌絲,后成棕黃色粉未狀菌落,凝結(jié)成片,菌落中心有隆起,外圍有少數(shù)極短的溝紋,邊緣不整齊,反面紅棕色。鏡檢:見多數(shù)較小,紡錘形,46個的大分生抱子,壁厚13m兩端園,壁有刺,菌絲較少,小分生抱子棒狀無柄,有時可見球拍狀菌絲,螺旋,破梳狀菌絲及結(jié)節(jié)菌絲。3菌種鑒定:菌落形態(tài);大分生抱子的形態(tài);毛發(fā)穿孔試驗陽性。2. 表皮
17、癬菌屬大絮狀表皮癬菌1直接鏡檢:皮屑及甲屑內(nèi)見分枝分隔的菌絲。2培養(yǎng)特性:在沙氏培養(yǎng)基室溫生長快。菌落開場蠟狀,Wj出斜面,外表有不規(guī)那么的褶疊,上覆粉未樣菌絲,黃綠色。較大的菌落中央有褶疊,外圍可見放射狀溝紋,最外圍有不整齊的平滑圈。菌落下沉明顯,培養(yǎng)基常為之開裂。反面黃至棕色。鏡檢:見典型的杵狀大分生抱子,24個分隔。游離端圓形,薄壁光滑,基部平截。常24個成群,無小分生抱子,老齡菌落厚壁抱子多,菌絲較細,分枝,分隔,間或可見球拍,結(jié)節(jié)和螺旋菌絲。3菌種鑒定:菌落特征;典型杵狀大分生抱子;無小分生抱子。二、深部真菌一白念珠菌:Candidaalbicans1. 標本來源痰、大便、口腔或陰道
18、分泌物、尿、腦脊液、胸水、膿液、皮屑及痂皮等。2. 直接鏡檢氫氧化鉀涂片,可見卵圓形、圓形芽抱,薄壁,直徑約24芽抱,橢圓形芽抱的芽管延長形成假菌絲,有時在菌絲旁附著芽抱,PASfe色為紅色。3. 培養(yǎng)及鏡檢1葡萄糖蛋白月東瓊脂:30C劃線培養(yǎng)一天即有光滑小菌落生長,菌落為奶油色,閃光或呈蠟狀,柔軟光滑,老的菌落漸變硬,外表有皺褶或有毛發(fā)狀突起。鏡檢,在菌絲交接處有群集的卵圓形抱子或在菌絲旁側(cè)有少許芽抱,。2玉米培養(yǎng)基:菌落外觀同上,鏡檢:菌絲很少分枝,有少量芽生抱子,在菌絲的頂端或側(cè)緣有厚壁抱子,直徑717叫m3快速鑒定與鑒定程序:將標本直接接種在科瑪嘉上,24小時出現(xiàn)翠綠色菌落,將初代別離
19、的酵母樣菌接種在含1礎(chǔ)溫80米粉中,25C室溫中2448小時,鏡檢可見頂端產(chǎn)生圓形厚壁抱子或接種于,正常人血清或羊血清中,置37C溫箱中,經(jīng)12小時鏡檢有芽生抱子及芽管形成,可初步鑒定為白念珠菌。API酵母快速鑒定:同化試驗結(jié)果:葡萄糖+,麥芽糖+,乳糖一,半乳糖+。二熱帶念珠菌CandidaTropicalis1. 標本來源:同白念珠菌。2. 直接鏡檢:同白念珠菌。3. 培養(yǎng)及鏡檢:1葡萄糖蛋白月東瓊脂,在25C中培養(yǎng),菌落平滑有光澤,白色,時間較久外表有皺紋,粘稠,甚至有毛樣外觀,鏡檢可見卵圓形細胞或球形細胞約59m612mi。2玉米瓊脂:產(chǎn)生豐富的假菌絲及發(fā)育良好芽生抱子,但無厚壁抱子生
20、長。3快速鑒定:科瑪嘉培養(yǎng)基上,24小時出現(xiàn)藍灰色。同化試驗。三克柔氏念珠菌CandidaKrusei1. 標本來源:同白念珠菌。2. 直接鏡檢:同白念珠菌。3. 培養(yǎng)及鏡檢:葡萄糖蛋白腺瓊脂:菌落扁平,平滑、枯燥,有時外表有皺折,通常是乳白色到淡黃,鏡檢所見:大多數(shù)抱子是較大的柱狀,亦有少數(shù)短卵圓形抱子。假菌絲豐富,芽生抱子在菌絲上輪生。玉米瓊脂:對稱分枝的菌絲,芽生抱子較少,無厚壁抱子。葡萄糖蛋白月東液培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基外表生長,與試管壁粘連??焖勹b定:科瑪嘉培養(yǎng)基上24小時出現(xiàn)淡粉紅色菌落。同化試驗。四近平滑念珠菌Candidaparapsilosis1. 標本來源:同白念珠菌。2. 直接
21、鏡檢:同白念珠菌。3. 培養(yǎng)及鏡檢:葡萄糖蛋白月東瓊脂:乳酪樣菌落,通常外表光滑,亦有菌落外表粗糙及皺折。鏡檢所見:卵圓形芽生抱子5.0X48m假菌絲形成豐富。玉米瓊脂:穿插分枝菌絲,側(cè)生芽生抱子較多,無厚壁抱子。葡萄糖蛋白月東液基:無外表生長,在管底生長。快速鑒定:科瑪嘉培養(yǎng)上24小時出現(xiàn)粉色光滑菌落。同化試驗:API。五光滑念珠菌Candidaglabrata1. 標本來源:痰、尿、血、皮膚、陰道、傷口、腹水、胸水、膽汁等。2. 直接鏡檢:卵圓形芽生抱子,直徑27或更大,單芽,位于抱子的細端,無莢膜,無子囊或菌絲。3. 培養(yǎng)及鏡檢:葡萄糖蛋白月東瓊:白色或奶油色乳酪樣菌落,日久變棕灰色,外
22、表平滑,稍有光澤,本菌只在酸性條件下生長,即不生長,鏡檢:同直接涂片??焖勹b定:科瑪嘉培養(yǎng)基上24小時出現(xiàn)紫色菌落。同化:API試驗。六膠紅酵母RhodotorulamucilaginosaL標本來源:痰、尿、血、大便、皮膚、CSF咽喉、體液等。2. 直接鏡檢:圓形或卵圓形,35山直徑,有莢膜的芽生抱子,單芽生,抱子內(nèi)有少數(shù)顆粒,無菌絲,不著色。3. 培養(yǎng)及鏡檢:葡萄糖蛋白月東瓊脂:25C或37C時,生長迅速,菌落10天內(nèi)可達2直徑,為乳酪樣生長,邊緣整齊,外表光滑,但無光澤,桔紅,日久顏色逐漸消退,呈淡黃色或桔黃色,培養(yǎng)基不變色,鏡檢同涂片所見,有時可見假菌絲,無子囊??焖勹b定:菌落產(chǎn)生紅色
23、色素;使尿素瓊脂由黃變紅。七新生隱球菌Cryptococcusneoformans1. 標本來源:腦脊液、痰、膿、尿、糞、血、活體組織及尸體解剖材料等。2. 直接鏡檢:墨汁染色,可見圓形厚壁抱子,菌體直徑約4201m外圍有一透光的厚莢膜,厚度約57少m莢膜內(nèi)的菌體可出芽或不出芽,抱內(nèi)有一較大的反光顆粒脂質(zhì)顆粒,不是抱核和許多小顆粒,可與白細胞或淋巴細胞相鑒別。3. 培養(yǎng)及鏡檢:在葡萄蛋白月東瓊脂,25C或37C培養(yǎng)時,25天即生長出乳白色細菌粘液性菌落,呈不規(guī)那么圓形,外表有蠟樣光澤,以后菌落增厚,顏色由乳白、奶油轉(zhuǎn)桔黃色。非致病性隱球菌37C不生長。鏡檢類似直接鏡檢,可見圓形抱子,直徑8m多
24、數(shù)有芽,抱子外圍有莢膜,但莢膜開場甚狹,日久漸增厚,無真菌絲及子囊抱子,但可有芽管??焖勹b定:37C生長;尿素酶變紅;咖啡酸變棕色;同化試驗,不發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖等。三、其它實驗室常見的絲狀真菌一曲霉屬:1. 標本來源:皮屑,甲屑,耳丁盼,痰,糞,尿,膿液,活檢與尸檢組織標本。2. 直接鏡檢:涂片見分枝,分隔的菌絲及足細胞,與外界相通腔道內(nèi)標本中有時可見分生抱子頭,為曲霉的特征構(gòu)造。3. 培養(yǎng):初代用沙氏培養(yǎng)基,次代用察氏PDA養(yǎng)基,接種后室溫培養(yǎng)2周。少數(shù)能產(chǎn)生閉囊殼的曲霉需培養(yǎng)3周或更長時間。4. 菌種鑒定:1菌落,菌落生長速度,外表質(zhì)地,顏色,形態(tài)和氣味等,其中顏色的特征較穩(wěn)定,是曲霉分類的主要依據(jù)之一2分生
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