甘肅省武威市高中生物第5章DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)5.1DNA的粗提取與鑒定課件1新人教版選修1

1、 DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定v通過本節(jié)課的學(xué)習(xí)我們要通過本節(jié)課的學(xué)習(xí)我們要v知道知道DNA提取原理提取原理v據(jù)據(jù)原理設(shè)計(jì)原理設(shè)計(jì)DNA提取方法提取方法v能對能對DNA進(jìn)行進(jìn)行鑒定鑒定v掌握本實(shí)驗(yàn)的基本操作方法掌握本實(shí)驗(yàn)的基本操作方法DNA粗提取與鑒定粗提取與鑒定DNA提取原理提取原理資料一：資料一：1 . DNA在不在不同濃度同濃度NaCl溶液中溶溶液中溶解度不同解度不同 蛋白質(zhì)在蛋白質(zhì)在0.14mol/L中的中的溶解度大，在高鹽濃度溶解度大，在高鹽濃度下溶解度小下溶解度小v2.DNA不溶于酒精，細(xì)胞中某些蛋不溶于酒精，細(xì)胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。白質(zhì)則溶于酒精。v資料二資料二:v洗滌

2、劑瓦解細(xì)胞膜。洗滌劑瓦解細(xì)胞膜。v動物細(xì)胞吸水會脹破。動物細(xì)胞吸水會脹破。v資料三資料三v1.酶的專一性酶的專一性蛋白酶水解蛋白蛋白酶水解蛋白質(zhì)而不會對質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響產(chǎn)生影響 。v2.蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA熱穩(wěn)定性不同。溫?zé)岱€(wěn)定性不同。溫度值為度值為6080，因?yàn)樵摐囟戎档?，因?yàn)樵摐囟戎档鞍踪|(zhì)變性沉淀，而白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會變性。不會變性。 資料四資料四:DNA的鑒定原理的鑒定原理v當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時，時，需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定？需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定？在沸水浴條件下，在沸水浴條件下，DNA遇二苯遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。胺呈現(xiàn)藍(lán)色。注意注

3、意:二苯胺要現(xiàn)配現(xiàn)用二苯胺要現(xiàn)配現(xiàn)用,使用時取使用時取4ml二苯胺加一滴已乙醛搖勻再倒入待測二苯胺加一滴已乙醛搖勻再倒入待測樣液樣液實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)v據(jù)資料二思考據(jù)資料二思考:如何使如何使DNA從細(xì)胞里釋放出來從細(xì)胞里釋放出來得到含有得到含有DNA的濾液的濾液?v利用什么原理可以使動物細(xì)胞或植物細(xì)胞破利用什么原理可以使動物細(xì)胞或植物細(xì)胞破裂裂?植物細(xì)胞可以加入一定量的食鹽和洗滌植物細(xì)胞可以加入一定量的食鹽和洗滌劑。劑。動物細(xì)胞吸水會脹破。這樣能得到含動物細(xì)胞吸水會脹破。這樣能得到含有有DNA的濾液的濾液食鹽和洗滌劑的用途分別是什么食鹽和洗滌劑的用途分別是什么?食鹽溶解食鹽溶解DNA,洗滌劑溶解細(xì)胞膜洗

4、滌劑溶解細(xì)胞膜實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)v根據(jù)資料提供的DNA理化性質(zhì)，你能思考提取DNA的基本方法嗎？例：根據(jù)蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)、DNA熱穩(wěn)定性不同。熱穩(wěn)定性不同。溫度值為溫度值為6080，因?yàn)樵摐囟戎档埃驗(yàn)樵摐囟戎档鞍踪|(zhì)變性沉淀，而白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會變性不會變性v方案一：將濾液放在 的恒溫水浴箱中保溫1015min，注意嚴(yán)格控制溫度范圍，使 沉淀而 分子還未變性，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離。6067蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)DNA根據(jù)資料一思考v1.DNA在不同濃度在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點(diǎn)？要溶液中溶解度有何特點(diǎn)？要使使DNA溶解溶解，需要使用什么濃度？要使，需要使用什么濃度？要使DNA析出析出，又需要

5、使用什么濃度？又需要使用什么濃度？ 在在0.14mol/L時溶解度最??；較高濃度時溶解度最??；較高濃度可使可使DNA溶解；溶解；0.14mol/L可使可使DNA析析出。出。 在溶解細(xì)胞中的在溶解細(xì)胞中的DNA時，通常可時，通?？蛇x用選用2mol/LNaCl溶液；將溶液；將DNA分子析分子析出的方法是向溶有出的方法是向溶有DNA的的NaCl溶液中溶液中緩慢注入蒸餾水，以稀釋緩慢注入蒸餾水，以稀釋NaCl溶液。溶液。 如何利用這一性質(zhì)設(shè)計(jì)提取方案v方案二：通過控制 NaCl 的濃度去除蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)30mL濾液2mol/NaCl40mL同方向攪拌，DNA溶解加入蒸餾水0.14mol/NaClDNA析

6、出過濾得到過濾物放到2mol/LNaCl溶液中溶解DNA-NaCl溶解液2采用DNA不溶于酒精的原理，可以達(dá)到什么目的？將將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。v方案三：v直接向?yàn)V液中加入 ，反應(yīng)1015min， 中的 能夠分解蛋白質(zhì)。v？此方案利用了酶的什么特性？嫩肉粉（木瓜蛋白酶）嫩肉粉蛋白酶專一性v實(shí)驗(yàn)拓展v你還能作些什么探究？交流v1.動物組織和植物在提取方法上有什么不同?v為什么?v2、用同樣的方法提取時,哪種材料較好?v3、用同種材料同樣方法時洗滌劑與NaCl比例不同，有沒有影響？v4用玻璃燒杯和塑料燒杯哪種效果好？v5、你有什么疑惑嗎？或者有更好的建議？結(jié)果分析與評價結(jié)果分析與評價1、你提取出了白色絲狀物嗎？用二苯胺鑒定的結(jié)果、你提取出了白色絲狀物嗎？用二苯胺鑒定的結(jié)果如何？如何？2如果鑒定結(jié)果不出現(xiàn)藍(lán)色如果鑒定結(jié)果不出現(xiàn)藍(lán)色,討論可能是什么原因討論可能是什么原因.3、你能分析出粗提取的、你能分析出粗提取的DNA可能含有哪些雜質(zhì)嗎？可能含有哪些雜