高中生物選修一專(zhuān)題二微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)填空+答案

1、、課題背景選修一生物技術(shù)實(shí)踐專(zhuān)題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1 .研究和應(yīng)用微生物的前提是2 .在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物,一方面需要,另一方面而Q1 .概念：人們根據(jù)微生物對(duì)的不同需求,配制出供其的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)稱(chēng)為培養(yǎng)基.2 .種類(lèi)：根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為、和半固體培養(yǎng)基.3 .瓊脂：是一種從紅藻中提取的,在C以上熔化,在C以下凝固,在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn).瓊脂是制備培養(yǎng)基時(shí)最常用的劑.4 .營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、和無(wú)機(jī)鹽,另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)、以及的要求.例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加,培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至或,培

2、養(yǎng)厭氧微生物時(shí)那么需要提供的條件.5 .牛肉膏,蛋白月東來(lái)源于,含有、和等營(yíng)養(yǎng).三、無(wú)菌技術(shù)1 .獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是預(yù)防的入侵.2 .無(wú)菌技術(shù)圍繞著展開(kāi),主要包括以下幾個(gè)方面：(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的、操作者的衣著和進(jìn)行清潔和.(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、和等進(jìn)行.(3)為預(yù)防周?chē)h(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在附近進(jìn)行.(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)預(yù)防已經(jīng)滅菌處理的材料用具與相接觸.3 .無(wú)菌技術(shù)的目的：(1)預(yù)防,(2)預(yù)防.4.消毒和滅菌火菌概念使用較為_(kāi)物體的物理或化學(xué)方法殺死或的局部微生物使用微生物(包括_的理化因素殺死物體和)的(不包括_和)_常用方法(1)_消毒法(在C煮(1).火菌：直接

3、在酒精燈火焰的min);灼燒,如、接種針或其他用(2)min或在_消毒法在C煮min;_c煮_具；2火菌在C加熱h).消毒法如用適用于、的物品.擦拭雙手、用消毒水源；紫外線如吸管、培養(yǎng)皿和用具；照射前,適量噴灑或溶(3)火菌：壓力為kpa,溫液等消毒液.)度為C條件下,維持minO4紫外線消毒法：可以殺死或中的微生物.一制備牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基的步驟：1 .計(jì)算：依據(jù)是培養(yǎng)基的比例,計(jì)算配制某一體積如100ml的培養(yǎng)基時(shí),各種成分的用量.2 .稱(chēng)量：牛肉膏比擬,可用玻棒挑取到上,同其一塊稱(chēng)量.牛肉膏和蛋白月東易吸潮,稱(chēng)取時(shí)動(dòng)作要,稱(chēng)后及時(shí).3 .溶化：和稱(chēng)量紙+少量的水'取出一加和

4、一加注意：不斷用玻璃棒攪拌,預(yù)防而導(dǎo)致.當(dāng)完全熔化后一補(bǔ)加蒸儲(chǔ)水至100mLo調(diào)節(jié)后再進(jìn)行滅菌.培養(yǎng)基：滅菌4 .滅菌i培養(yǎng)皿：火國(guó)、5 .倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至左右時(shí),在附近倒平板.二純化大腸桿菌1 .微生物的接種技術(shù)最常用的是和,除此之外還包括和等方法.雖然這些技術(shù)方法各不相同,但是,其核心都是要預(yù)防,保證.平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在培養(yǎng)基外表的操作,將聚集的菌種逐步到培養(yǎng)基的外表.稀釋涂布平板法：將進(jìn)行一系列的,然后將不同的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表,進(jìn)行培養(yǎng).兩種接種方法都是為了將聚集在一起的微生物,在劃線培養(yǎng)后或者在的菌液涂布后,可以別離得到由繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的單個(gè).2 .菌

5、落：概念：.菌落特征包括.3 .系列稀釋操作：(P19)1、2、3注意：移液管需要經(jīng)過(guò).操作時(shí),和應(yīng)在離火焰處.4 .涂布平板操作：將涂布器末端浸在體積分?jǐn)?shù)為的酒精；取少量滴加到培養(yǎng)基外表；將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,冷卻S;涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng),使菌液分布均勻.5 .培養(yǎng)基滅菌合格與否的方法：將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)的培養(yǎng)基都放入中,培養(yǎng)12h和24h后,分別記錄觀察.P20培養(yǎng)12h和24h后,觀察到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相同嗎？如果不同,請(qǐng)分析產(chǎn)生差異的原因.如果你在培養(yǎng)基上觀察到了不同形態(tài)的菌落,你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎?6 .如何記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果？(三)菌種的保藏：(1)臨時(shí)保藏：將菌種接種

6、到試管的,在溫度下培養(yǎng),當(dāng)長(zhǎng)成后,將試管放入冰箱中保藏,以后每個(gè)月,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上.適用范圍：對(duì)于的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法.缺點(diǎn)是：保存時(shí)間,菌種容易被或產(chǎn)生變異.(2)長(zhǎng)期保存菌種的方法：法,在mL的甘油瓶中,裝入mL甘油后將mL轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油后,放在冷凍箱中保存.P15旁欄思考題：無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)預(yù)防實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的？P16旁欄思考題：請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌.如果需要,請(qǐng)選擇適宜的方法.(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手(1)、(2)需要;(3)需要.P17倒平板操作的討論1

7、.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50c左右時(shí),才能用來(lái)倒平板.你用什么方法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?2 .為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?3 .平板冷凝后,為什么要將平板倒置?4 .在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么？P18平板劃線操作的討論1 .為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2 .在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？O3 .在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線？P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行.結(jié)合

8、平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？OP20課后練習(xí)題1、2、3專(zhuān)題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用答案課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、1、預(yù)防雜菌入侵,獲得純潔的培養(yǎng)物.2、為培養(yǎng)的微生物提供適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件,保證無(wú)處不在的其他微生物無(wú)法混入.1 .營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)生長(zhǎng)繁殖2 .液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基水3、多糖9844固態(tài)固體凝固4、碳源氮源PH特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧氣維生素酸性中性微堿性無(wú)氧5、動(dòng)物原料糖維生素有機(jī)氮三、1 .外來(lái)雜菌2 、如何預(yù)防雜菌空間手消毒接種用具培養(yǎng)基滅菌酒精燈火焰周?chē)奈锲? 、實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)的微生物污染操作者自身被微生物感染4 .溫和外表或內(nèi)部芽抱和

9、抱子強(qiáng)烈內(nèi)外所有芽抱和抱子5 .煮沸消毒1005-6巴氏70-75308015化學(xué)藥劑酒精氯氣石碳酸煤酚皂物體外表空氣灼燒滅菌接種環(huán)金屬干熱滅菌160-1701-2耐高溫需保持枯燥玻璃器皿金屬高壓蒸汽滅菌10012115-30四、一1 .配方2 .粘稠稱(chēng)量紙迅速蓋上瓶蓋3 .牛肉膏加熱稱(chēng)量紙蛋白陳氯化鈉瓊脂瓊脂糊底燒杯破裂瓊脂PH4、高壓蒸汽滅菌干熱滅菌5、50酒精燈火焰二1 .平板劃線法稀釋涂布法斜面接種穿刺接種雜菌的污染培養(yǎng)物的純度瓊脂固體連續(xù)劃線稀釋菌液梯度稀釋稀釋度別離數(shù)次稀釋度足夠高一個(gè)細(xì)胞菌落2 .在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以別離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體菌落的形狀,大小

10、,隆起程度和顏色等3、滅菌試管口移液管1-2cm4、70%菌液8-10S培養(yǎng)皿5、未接種37C恒溫箱不同三1固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)適宜的2甘油管藏法31滅菌1菌落4C3-6新鮮充分混勻-20C頻繁使用不長(zhǎng)污染P15無(wú)菌技術(shù)還能有效預(yù)防操作者自身被微生物感染.P16滅菌消毒P171、可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行2、通過(guò)灼燒滅菌,預(yù)防瓶口的微生物污染培養(yǎng)基.3、平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,將平板倒置,既可以預(yù)防皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,又可以預(yù)防使培養(yǎng)基中的水分過(guò)快地地?fù)]發(fā).4、空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物.P181、操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了預(yù)防接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落.劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,預(yù)防細(xì)菌污染環(huán)