冠心丹參滴丸抗垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的實驗研究

1、冠心丹參滴丸抗垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的實驗研究王怡 高秀梅 張伯禮（天津中醫(yī)學(xué)院中醫(yī)藥研究中心 天津300193）【摘要】 目的： 觀察冠心丹參滴丸抗垂體后葉素（pituitrin，Pit）致大鼠急性心肌缺血的作用。方法： 采用大鼠舌下靜脈注射Pit造成急性心肌缺血模型，觀察各給藥組對注射Pit后不同時間點導(dǎo)聯(lián)心電圖T波變化百分率（%）以及血清LDH、CPK、SOD、MDA的含量變化的影響。結(jié)果： 冠心丹參滴丸能明顯對抗Pit引起的急性心肌缺血的心電圖變化、提高血清SOD活性、降低MDA含量。結(jié)論： 冠心丹參滴丸具有顯著對抗Pit致大鼠急性心肌缺血的作用?！娟P(guān)鍵詞】 冠心丹參滴丸 垂體后

2、葉素 心肌缺血 實驗研究Objective: To study the effect of GuanXin Salvia Drop Pill(GXSDP) on pituitary(Pit) induced acute myocardium ischemia. Methods: Pit(0.35u/kg) was given to form model of acute myocardium ischemia. The changes of the second road ECG(T wave) and contents of LDH/CK/SOD/MDA in serum was obser

3、ved after injection Pit via sublingual vein. Results: GXSDP group can significantly lower the height of T wave. In GXSDP group the SOD activity was significantly enhanced and MDA contents was significantly induced. Conclusions: GXSDP have the functions of anti-acute myocardium ischemia. 冠心丹參滴丸的主要成分為

4、丹參、三七、降香揮發(fā)油等，功能活血化瘀，理氣止痛，主要用于治療冠心病心絞痛、胸悶、憋氣等。本實驗用垂體后葉素造成大鼠急性心肌缺血模型來觀察冠心丹參滴丸抗心肌缺血的作用。材料和方法1 實驗主要儀器 多道生理記錄儀（MP-100，美國BIOPAC公司）、半自動生化分析儀（荷蘭威圖Dpu-411Type）2 實驗藥物及試劑 冠心丹參滴丸0.04 g/粒，中發(fā)實業(yè)集團(tuán)業(yè)銳藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：200105031；消心痛，5mg/片，批號：000901（天津市海光制藥廠）；垂體后葉素（pituitrin，Pit），每支10u/mL，批號：20000501（天津市生物化學(xué)制藥廠）；乳酸脫氫酶（LDH）、

5、 磷酸肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）試劑盒購于南京建成生物工程公司。3 動物、動物分組及給藥Sprage-Dawley大鼠共50只，雌雄各半，體重247.314.5g，由北京維通利華動物中心提供。隨機分組：（1）正常對照組；（2）模型組；（3）吐溫組；（4）消心痛組；（5）冠心丹參滴丸組。上述受試藥物使用前均用生理鹽水配制，濃度為1mL/kg，吐溫劑量與溶解冠心丹參滴丸所用吐溫劑量等同。4具體方法于實驗前一天首先進(jìn)行動物對垂體后葉素（Pit）敏感性篩選實驗，方法是：大鼠舌下靜脈注射Pit 0.35 u/kg（濃度為1u/2mL），觀察導(dǎo)聯(lián)心電圖變化情況，選取對Pi

6、t敏感大鼠用于實驗（T波明顯抬高，ST段抬高超過0.1Mv）,對Pit不敏感大鼠淘汰。將篩選獲得的敏感大鼠40只，24小時后用于實驗。實驗前按隨機分組原則提前1小時分別灌胃給藥，用3%戊巴比妥鈉（30mg/kg）腹腔注射麻醉，將動物仰位固定在鼠臺上，并與多道生理記錄儀相接，描記導(dǎo)聯(lián)心電圖，將心電圖正常大鼠舌下靜脈注射Pit 0.35 u /kg，并于5秒內(nèi)注完，描記導(dǎo)聯(lián)心電圖5分鐘，觀察3小時后心臟取血。（模型組和正常對照組灌服生理鹽水，正常對照組舌下注射生理鹽水）。5統(tǒng)計方法：采用Stata4.0軟件進(jìn)行t檢驗。 結(jié) 果1.各組對大鼠注射垂體后葉素后導(dǎo)聯(lián)心電圖T波變化百分率的影響模型組和吐溫

7、組大鼠注射Pit后即刻導(dǎo)聯(lián)心電圖T波顯著抬高，30秒時達(dá)到最高，即出現(xiàn)第一期心電圖的變化，于注射Pit 30秒后心電圖出現(xiàn)T波低平、雙相、倒置，心率減慢，P-R及Q-T間期延長等第二期心電圖變化，吐溫組與模型組比較二者之間無顯著差異（P0.05）。消心痛組及冠心丹參滴丸組均能夠顯著對抗Pit引起的大鼠第一期和第二期的心電圖變化，與模型組比較差異非常顯著（P0.05，P0.01）；冠心丹參滴丸組與吐溫組比較差異非常顯著（P0.01）(見表-1及圖-1)。表-1 各組導(dǎo)聯(lián)心電圖T波變化百分率（%）的比較組別動物數(shù)即刻15秒30秒1分鐘2分鐘3分鐘4分鐘5分鐘模型組1031.1314.9136.49

8、25.5044.5820.6041.8824.6241.3521.1538.6115.4631.9515.8238.729.13吐溫組1028.4319.5540.9525.8653.3323.9851.0327.7440.8828.6441.6424.2930.4216.6032.5112.77消心痛組107.446.47*6.465.42*10.557.30*8.615.88*5.124.92*5.363.30*4.913.53*4.483.35*冠心丹參滴丸組1011.9911.59*#17.1113.74*#13.546.23*#13.587.64*#11.568.73*#11.708

9、.31*#13.047.69*#14.566.22*#注：與模型組比較：*p0.05，*p0.01；與吐溫組比較#p0.05，#p0.01圖-1 各組導(dǎo)聯(lián)心電圖T波變化百分率（%）的比較2各組對大鼠血清LDH、CK的影響模型組和吐溫組大鼠注射Pit后血清LDH有所升高，消心痛組及冠心丹參滴丸組有降低血清LDH的趨勢；模型組和吐溫組大鼠注射Pit后血清CK明顯升高，與正常對照組比較差異顯著（P0.01），消心痛組及冠心丹參滴丸組對血清CK有不同程度的減少趨勢（見表-2）。表-2 各組血清LDH、CK的比較組別動物數(shù)CK(u/l)LDH(u/l)模型組101008.7318.6*1068.0329

10、.9吐溫組101149.0686.9*1087.0240.9正常對照組10571.6243.5860.0185.7消心痛組10842.5350.4768.3418.6冠心丹參滴丸組10825.1254.6813.5280.0注：與正常對照組比較*p0.013 各組對大鼠血清SOD、MDA的影響 模型組及吐溫組注射Pit后血清SOD活性明顯降低、MDA含量顯著升高，與正常對照組比較差異顯著（P0.01）；消心痛、冠心丹參滴丸組均能顯著提高SOD活性、降低MDA含量，與模型組比較差異非常顯著（P0.01）；冠心丹參滴丸組與吐溫組比較差異顯著（P0.01）；消心痛組及冠心丹參滴丸組之間無顯著差異。（

11、見表-3）。表-3 各組血清SOD、MDA的比較組別動物數(shù)SOD(NU/ml)MDA(nmol/ml)模型組10167.9614.06#13.751.82#吐溫組10166.2213.30# 14.252.56#正常對照組10202.537.2210.331.53消心痛組10191.0618.03*11.171.93*冠心丹參滴丸組10 186.2310.42*11.071.37*注：與模型組比較*p0.01；與正常對照組比較#p0.01 與吐溫組比較p0.01討 論垂體后葉素（Pit）是從動物腦垂體中提取的，內(nèi)含有加壓素（抗利尿素）和催產(chǎn)素，加壓素能直接使血管，特別是毛細(xì)血管和小動脈收縮，包

12、括冠狀動脈收縮，從而使血壓升高，心肌缺血缺氧；收縮全身小血管，導(dǎo)致心臟負(fù)荷加重12。冠心丹參滴丸的主要成分為丹參、三七、降香揮發(fā)油等，其中丹參、三七具有活血化瘀止痛，降香辛溫，活血散瘀止痛，三味藥物均是治療冠心病心絞痛的主要藥物，實驗結(jié)果顯示：冠心丹參滴丸組能夠顯著改善由垂體后葉素誘發(fā)的急性心肌缺血。由垂體后葉素誘發(fā)急性心肌缺血模型復(fù)制方法十分簡便，該模型廣泛用于篩選抗心肌缺血藥物的研究。本實驗應(yīng)用垂體后葉素舌下靜脈注射造成大鼠急性心肌缺血模型34，觀察心電圖、心肌酶、過氧化物的變化。近年來隨著心肌缺血損傷機制研究的深入，發(fā)現(xiàn)大量氧自由基生成及脂質(zhì)過氧化物反應(yīng)增強是心肌缺血損傷的主要機制之一5

13、。超氧化物歧化酶（SOD）常作為反應(yīng)氧自由基清除能力的指標(biāo)，它是機體清除氧自由基的重要酶類，對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用。SOD能清除超氧陰離子，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，其活力的高低常間接地反映了機體清除自由基的能力，當(dāng)心肌受損時，可導(dǎo)致SOD活性的降低，而脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的中間產(chǎn)物MDA常被作為觀察氧自由基生成和造成細(xì)胞膜損傷的指標(biāo)6，間接反映機體內(nèi)細(xì)胞損傷的輕重和脂質(zhì)過氧化的程度。本實驗結(jié)果顯示：消心痛組和冠心丹參滴丸組均能夠明顯增強SOD的活性，降低MDA的含量，從而對心肌發(fā)揮保護(hù)作用；磷酸肌酸激酶（CK）以及乳酸脫氫酶（LDH）在心肌損傷時因缺血后膜損傷而釋放入血內(nèi)，故可作為觀察心肌缺血的指標(biāo)；冠心丹參滴丸對心肌酶的溢出也有一定的保護(hù)作用，提示冠心丹參滴丸能夠?qū)褂纱贵w后葉素引起的大鼠急性心肌缺血，對缺血的心肌具有保護(hù)作用，其確切機制有待于進(jìn)一步實驗研究。參考文獻(xiàn)1張頁，楊學(xué)娟，沈紹功.冠心病心絞痛氣虛痰濁癥動物模型研究.中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2000，6（12）：820-8212李紹芝，朱文鋒，黃獻(xiàn)平，等.心氣虛證動物模型的研制. 中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2000，6（7）：466-4713陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)M.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996，5644吳偉康，侯燦，羅漢川，等.垂體后葉素性心肌缺血模型再探.中國病理生理雜志，1993，9（2）：124-