臨床實驗室生物

1、臨床實驗室生物安全導(dǎo)則衛(wèi)生部臨床檢驗中心申子瑜病原微生物實驗室安全管理條例病原微生物實驗室安全管理條例（征求意見稿）（征求意見稿）第一章第一章 總總 則則 為了加強病原微生物實驗室(以下稱實驗室)安全管理，保護實驗室工作人員和公眾的健康，制定本條例。 本條例所稱病原微生物：是指能夠使人或者動物致病的微生物。 條例目標(biāo)及適用范圍 保護實驗室工作人員、社會公眾和環(huán)境 適應(yīng)于從事病原微生物研究、教學(xué)、生產(chǎn)、診斷檢測等所有實驗室 國家對病原微生物按照其對人類和動物以及環(huán)境的危害程度實行分類管理，對實驗室根據(jù)其對病原微生物的防護水平實行分級管理。 國家實行統(tǒng)一的實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。 病原微生物的分類和管

2、理l l、 國家將病原微生物分為四類國家將病原微生物分為四類2 2、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物、第三類、第四類稱為高致病性病原微生物3 3、衛(wèi)生部負責(zé)制定并調(diào)整四類病原微生物、衛(wèi)生部負責(zé)制定并調(diào)整四類病原微生物 的種類的種類 第一類病原微生物，是指在通常情況下不會引起人或者動物疾病的微生物。 第二類病原微生物，是指能夠引起人或者動物疾病，發(fā)生實驗室暴露可能引起感染，但不會引起嚴(yán)重危害，且能夠有效實施預(yù)防和治療的微生物。 第三類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴(yán)重疾病，但不易在人或者動物間傳播，且能夠有效實施預(yù)防和治療的微生物。 第四類病原微生物，是指能夠引起人或者動物的嚴(yán)重疾病，

3、容易在人或者動物間傳播，或者沒有有效的預(yù)防和治療措施的微生物。 第三類、第四類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。 國家根據(jù)實驗室防護水平，將實驗室分為一級、二級、三級、四級。 臨床診斷、檢測檢驗工作可以在二級實驗室中進行。但是，發(fā)現(xiàn)高致病性病原微生物的其病原學(xué)的分離鑒定工作應(yīng)當(dāng)轉(zhuǎn)移到三級以上的實驗室中進行。中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) GB 19489-2004實驗室 生物安全通用要求一、實驗室生物安全防護分級 一級生物安全防護實驗室，簡稱一級生物安全防護實驗室，簡稱BSL1BSL1或或P1P1 二級生物安全防護實驗室，簡稱二級生物安全防護實驗室，簡稱BSL2BSL2或或P2P2 三級生物安全防護

4、實驗室，簡稱三級生物安全防護實驗室，簡稱BSL3BSL3或或P3P3 四級生物安全防護實驗室，簡稱四級生物安全防護實驗室，簡稱BSL4BSL4或或P4P4一級生物安全防護實驗室 實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對健康成年人已知無致病對健康成年人已知無致病作用作用的微生物，如用于教學(xué)的普通微生物實驗室等。二級生物安全防護實驗室 實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人或環(huán)境具有中等潛在對人或環(huán)境具有中等潛在危害危害的微生物。三級生物安全防護實驗室 實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防

5、傳染的疫苗。 艾滋病毒的研究（血清學(xué)實驗室除外）應(yīng)在三級生物安全防護實驗室中進行。 四級生物安全防護實驗室 實驗室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對人體具有高度的危險性，對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素微生物及其毒素。二、二級生物安全防護實驗室二、二級生物安全防護實驗室安全設(shè)備和個體防護安全設(shè)備和個體防護可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安全可能產(chǎn)生致病微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作均應(yīng)在生物安全柜柜(級級生物安全柜生物安全柜為宜為

6、宜)或其他物理抑制設(shè)備中進行，并使用或其他物理抑制設(shè)備中進行，并使用個體防護設(shè)備。個體防護設(shè)備。處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜處理高濃度或大容量感染性材料均必須在生物安全柜(級生級生物安全柜為宜物安全柜為宜)或其他物理抑制設(shè)備中進行，并使用個體防護或其他物理抑制設(shè)備中進行，并使用個體防護設(shè)備。設(shè)備。上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉(zhuǎn)子或安全離心杯，上述材料的離心操作如果使用密封的離心機轉(zhuǎn)子或安全離心杯，且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗且它們只在生物安全柜中開閉和裝載感染性材料，則可在實驗室中進行。室中進行。1. 當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進行

7、而必須采取外部操當(dāng)微生物的操作不可能在生物安全柜內(nèi)進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置裝置(護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設(shè)護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設(shè)備備)。4 . 在實驗室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護服。離開實在實驗室中應(yīng)穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內(nèi)。不得穿著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應(yīng)先在實著外出，更不能攜帶回家。用過的工作服應(yīng)先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。驗室

8、中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。5. 當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴當(dāng)手可能接觸感染材料、污染的表面或設(shè)備時應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結(jié)束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。用。三、實驗室設(shè)計和建造的特殊要求每個實驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。每個實驗室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。實驗室圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔。地面應(yīng)防滑、無縫隙。實驗室圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔。地面應(yīng)防

9、滑、無縫隙。實驗臺表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗臺表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱。實驗室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之實驗室中的家具應(yīng)牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺間應(yīng)保持一定間隙。應(yīng)有專門放置生物廢棄物容器的臺(架架)。實驗室應(yīng)有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。實驗室應(yīng)有可開啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。在實驗室所在的建筑內(nèi)應(yīng)高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和在實驗室所在的建筑內(nèi)應(yīng)高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗證，以保證符合要求。驗證，以保證符合要求。應(yīng)設(shè)置洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。應(yīng)設(shè)置洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置。實驗室門宜帶鎖、可

10、自動關(guān)閉，門有可視窗。實驗室門宜帶鎖、可自動關(guān)閉，門有可視窗。實驗室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨識的標(biāo)識。實驗室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辨識的標(biāo)識。1. 應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗。二級生物安全防護實驗室操作要點實驗室人口須貼上生物危險標(biāo)志，注明危險因子、生物安全級別、負責(zé)人姓名和電話、進人實驗室的特殊要求及離開實驗室的程序；禁止非工作人員進人實驗室。參觀實驗室等特殊情況須經(jīng)實驗室負責(zé)人批準(zhǔn)后方可進入；禁止在工作區(qū)飲食、吸煙、處理隱形眼鏡、化妝及儲存食物；接觸微生物或含有微生物的物品后，脫掉手套后和離開實驗室前要洗手；以移液器吸取液體，禁止口吸

11、；制定尖銳器具的安全操作規(guī)程； 按照實驗室安全規(guī)程操作，降低濺出和氣溶膠的產(chǎn)生；1每天至少消毒一次工作臺面，活性物質(zhì)濺出后要隨時消毒；9. 所有培養(yǎng)物、廢棄物在運出實驗室之前必須進行滅活，如高壓滅活。需運出實驗室滅活的物品必須放在專用密閉防漏的容器內(nèi)儲存、運輸及消毒滅菌；10.如有條件工作人員應(yīng)接受必要的免疫接種 (如卡介苗等)；11.必要時收集從事危險性工作人員的基本血清留底，并根據(jù)需要定期收集血清樣本，應(yīng)有檢測報告，如有問題及時處理；12.將生物安全程序納入標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范或生物安全手冊，由實驗室負責(zé)人專門保管，工作人員在進入實驗室之前要閱讀規(guī)范并按照規(guī)范要求操作；13.工作人員要接受有關(guān)的潛

12、在危險知識的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露以及暴露后的處理程序。每年要接受一次最新的培訓(xùn)；14.實驗設(shè)備在運出修理或維護前必須進行消毒；15.人員暴露于病毒時，及時向?qū)嶒炇邑撠?zé)人匯報并記錄。安全管理制度 實驗室內(nèi)務(wù)管理制度 尖銳器具安全使用制度 實驗室消毒防護制度 標(biāo)本采集運輸制度 廢棄物處理制度 工作人員防護制度 差錯事故處理制度尖銳器具安全使用制度除特殊情況外，禁止在實驗室使用針、注射器及其他利器。盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。盡可能應(yīng)用一次性注射器，用過的針頭禁止折彎、剪斷、折斷、重新蓋帽、從注射器取下，禁止用手直接操作。用過的針頭必須直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必須放入厚壁容器中并運送到

13、特定區(qū)域消毒，最好進行高壓消毒。盡可能使用無針注射器和其他安全裝置。禁止用手處理破碎的玻璃器具。裝有污染針、利器及破碎玻璃的容器在丟棄之前必須消毒。四、為何需使用生物安全柜?考慮對操作人員，操作樣品，操作環(huán)境的保護。美國國家衛(wèi)生研究院NIH標(biāo)準(zhǔn)與美國國家疾病控制中心CDC實驗室生物安全級別標(biāo)準(zhǔn)中要求：應(yīng)用于臨床、診斷、教學(xué)、研究、或者生產(chǎn)設(shè)施，開展有關(guān)內(nèi)源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入該病源, 會引發(fā)嚴(yán)重的、可能致死的疾病。需使用ClassII級生物安全柜實驗人員受過專業(yè)訓(xùn)練應(yīng)有管道化的排氣系統(tǒng)，排出的空氣不再循環(huán)至建筑物內(nèi)的任何其他區(qū)域。 1. 建議生物安全柜每年經(jīng)過測試和確證 生物安

14、全設(shè)備分類 1.超凈臺 2.抽風(fēng)櫥 3. CLASS I 一級生物安全柜 4.CLASS II 二級生物安全柜 5. CALSS III三級生物安全柜（又稱手套柜）1、超凈臺 正壓柜 氣流從頂部或底部經(jīng)過過濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒有循環(huán)氣流。 超凈臺保護樣品不受污染，適用于普通實驗室適用于普通實驗室或或1 1級生物安全水平中級生物安全水平中對對人員和環(huán)境無保護要求人員和環(huán)境無保護要求的實驗的實驗。 2、CLASS I一級生物安全柜負壓柜氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進入工作臺面，被污染的氣流通過HEPA過濾器外排出柜外，沒有循環(huán)氣流。CLASS I級BSC保護操作人員和

15、環(huán)境不受污染，適用于適用于生物安全水平中生物安全水平中對實驗樣品對實驗樣品無保護要求的實驗。無保護要求的實驗。 3、CLASS II 二級生物安全柜 層流負壓柜 它們可以安全的保護樣品、人員和環(huán)境它們可以安全的保護樣品、人員和環(huán)境。 II 級生物安全柜分為A型（30%排在室內(nèi) ）和 B型； B型中又分為B1 （70%接管道外排） 、 B2 （100%接管道外排） 、 B3 （30% 接管道外排） 。 CLASS II A生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.38米/秒)；（2）30%30%氣流氣流經(jīng)經(jīng)HEPAHEPA過濾后外過濾后外排在室內(nèi)排在室內(nèi)；（3）被污染的管道和氣流通道為正壓狀態(tài)生

16、物安全柜空氣流向 CLASS II B1生物安全柜（1）進入的氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）70%70%氣流通過專用的管道氣流通過專用的管道經(jīng)經(jīng)HEPAHEPA過濾后接管道外排至室過濾后接管道外排至室外外；（3）所有受生物污染的管道和氣流通道均在負壓狀態(tài)下或被負壓的管道或氣流通道包圍。CLASS II B2生物安全柜（1）進入氣流最低流速平均為0.5米/秒；（2）所有向內(nèi)進入的氣流和向下的氣流均通過HEPA過濾后排到室外而不在柜內(nèi)循環(huán)，也不能排入實驗室；100%100%接管道外排接管道外排。（3）所有的被污染的管道和氣流通道都在負壓狀態(tài)下或被直接外排的負 壓管道或氣流管道所包圍。CLA

17、SS II B3生物安全柜（1）進入的氣流最低流速為0.5米/秒；（2）外排到室外的氣流（外排到室外的氣流（30%30%）經(jīng)過經(jīng)過HEPAHEPA高效過濾；高效過濾；（3）所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均為負壓狀態(tài)；（4）與CLASS II A型氣流方向相同，但與CLASS A型不同的是，它30%30%外排氣是接管道外排氣是接管道排到室外的排到室外的。 II級生物安全柜Airflow 4. CLASS III生物安全柜（手套柜）全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜；通過橡膠手套進行操作；柜內(nèi)保持至少120Pa的負壓；供氣通過HEPA抽入內(nèi)；外排的氣流經(jīng)過雙層雙層HEPA過濾或經(jīng) HEPA后再經(jīng)燃燒處理。

18、 CLASS III 型BSC適用于BSL3、BSL4的生物實驗。 高效空氣高效空氣過濾過濾工作人員工作人員安全安全無渦流單無渦流單向流空氣向流空氣實驗對象實驗對象不受污染不受污染手套箱式手套箱式操作口操作口抽風(fēng)櫥抽風(fēng)櫥無無是是是是否否否否I級級有有是是否否否否否否II級級有有是是是是是是否否III級級有有是是是是是是是是生物安全裝置異同級、級、級和級和級生物安全柜的區(qū)別級生物安全柜的區(qū)別BSC表面風(fēng)速表面風(fēng)速（m/s）%氣流氣流在循環(huán)在循環(huán) 排除排除排風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)系統(tǒng)級級0.36 0 100硬管道硬管道級級A1型型0.38-0.51 70 30派到室內(nèi)或套派到室內(nèi)或套管式的連接管式的連接向室外

19、排風(fēng)的向室外排風(fēng)的級級A2型型0.51 70 30派到室外或套派到室外或套管式的連接管式的連接級級B1型型0.51 30 70硬管道硬管道級級B2型型0.51 0 100硬管道硬管道級型級型NA 0 100硬管道硬管道根據(jù)保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜根據(jù)保護類型的需要選擇適宜的生物安全柜保護類型保護類型BSCBSC的選擇的選擇針對危險組針對危險組1-31-3微生物的人員保護微生物的人員保護級、級、級、級、級級針對危險組針對危險組4 4微生物的人員保護，手套箱實驗室微生物的人員保護，手套箱實驗室級級針對危險組針對危險組1-31-3微生物的人員保護微生物的人員保護, ,防護服實驗室防護服實驗

20、室級、級、級級產(chǎn)品保護產(chǎn)品保護級級, ,僅當(dāng)涉及層流時用僅當(dāng)涉及層流時用級級針對微量的不穩(wěn)定的放射性核針對微量的不穩(wěn)定的放射性核/ /化學(xué)藥品的保護化學(xué)藥品的保護級級B1,B1,向室外排風(fēng)的向室外排風(fēng)的級級A2A2針對不穩(wěn)定的放射性核針對不穩(wěn)定的放射性核/ /化學(xué)藥品的保護化學(xué)藥品的保護級、級、級級B2B2，級級對各級生物安全水平實驗室的要求對各級生物安全水平實驗室的要求生物安全柜生物安全柜生物安全級別生物安全級別一級一級二級二級三級三級四級四級級級不需要不需要隨意隨意需要需要不需要不需要級級不需要不需要最好有最好有需要需要需要，在防護服實驗室中需要，在防護服實驗室中使用使用級級不需要不需要不需要不需要最好有最好有需要，在安全柜室使用需要，在安全柜室使用五、廢棄物處理 國務(wù)院醫(yī)療廢