第四章_藥物的雜質(zhì)檢查

1、第四章第四章 藥物藥物的雜質(zhì)檢查的雜質(zhì)檢查主要內(nèi)容主要內(nèi)容v概述（雜質(zhì)定義、來源、種類、限量檢查）質(zhì)定義、來源、種類、限量檢查）v一般雜質(zhì)檢查方法一般雜質(zhì)檢查方法v特殊雜質(zhì)檢查方法特殊雜質(zhì)檢查方法第一節(jié)概第一節(jié)概 述述 v雜質(zhì)的定義v雜質(zhì)的來源雜質(zhì)的來源v雜質(zhì)的種類雜質(zhì)的種類v雜質(zhì)檢查的意義雜質(zhì)檢查的意義v雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量一、雜質(zhì)的定義一、雜質(zhì)的定義v雜質(zhì)（雜質(zhì)（forinforin、impuritiesimpurities）是指）是指：v1. 藥物中存在的無治療作用藥物中存在的無治療作用v2. 或影響藥物的穩(wěn)定性和療效或影響藥物的穩(wěn)定性和療效v3. 甚至對人體健康有害的物質(zhì)。甚至對人體健康有

2、害的物質(zhì)。二、藥物中雜質(zhì)的來源二、藥物中雜質(zhì)的來源（2）試劑、溶劑、催化劑類 v1、生產(chǎn)過程中引入、生產(chǎn)過程中引入：（1）原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成）原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成 （2）合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成）合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成 （3）需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造）需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成成 （4）所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)）所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì)2 2 貯藏過程中引入貯藏過程中引入 (1) 保管不善或貯存時(shí)間過長保管不善或貯存時(shí)間過長(2) 包裝不當(dāng)包裝不當(dāng)產(chǎn)生雜質(zhì)發(fā)霉潮解、型轉(zhuǎn)化、聚合、

3、異構(gòu)化、晶水解、氧化、分解在外界條件藥品氣、微生物溫度、濕度、日光、空三、雜質(zhì)的分類三、雜質(zhì)的分類 v藥物中的雜質(zhì)按來源分為藥物中的雜質(zhì)按來源分為 ：v一般雜質(zhì)：如氯一般雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘?jiān)取Ｒ话汶s質(zhì)其檢查方法收載在中國藥典的附錄中。易炭化物、熾灼殘?jiān)?。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在中國藥典的附錄中。v特殊雜質(zhì)：指某特殊雜質(zhì)：指某一個(gè)或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)，如一個(gè)或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)，如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的其他甾體。阿司匹

4、林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的其他甾體。特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。三、雜質(zhì)的分類三、雜質(zhì)的分類v藥物中的雜質(zhì)按結(jié)構(gòu)分為藥物中的雜質(zhì)按結(jié)構(gòu)分為 ：v無機(jī)雜質(zhì)：如氯無機(jī)雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬等。屬等。v有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入的原料、中間體、有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物，異構(gòu)體和殘留溶劑副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物，異構(gòu)體和殘留溶劑。三、雜質(zhì)的分類三、雜質(zhì)的分類v藥物中的雜質(zhì)按性質(zhì)分為藥物中的雜質(zhì)按性質(zhì)分為 ：信號雜質(zhì)：本身一般無害，但其含量的多

5、少可信號雜質(zhì)：本身一般無害，但其含量的多少可 反映出藥物的純度水平，如含量過高，表明反映出藥物的純度水平，如含量過高，表明藥物的純度差。如氯化物、硫酸鹽等。藥物的純度差。如氯化物、硫酸鹽等。有害雜質(zhì)：如砷鹽、重金屬、氰化物對休體有有害雜質(zhì)：如砷鹽、重金屬、氰化物對休體有害，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要嚴(yán)格控制。害，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中要嚴(yán)格控制。試題舉例試題舉例v中國藥典（中國藥典（2010年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查年版）中規(guī)定的一般雜質(zhì)檢查中不包括的項(xiàng)目是中不包括的項(xiàng)目是v A. 硫酸鹽檢查硫酸鹽檢查v B. 氯化物檢查氯化物檢查 v C. 溶出度檢查溶出度檢查v D. 重金屬檢查重金屬檢查v E. 砷鹽檢查砷鹽

6、檢查 四、雜質(zhì)檢查的意義四、雜質(zhì)檢查的意義（一）雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，因此（一）雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素，因此藥品純度主要由藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的檢查相下藥品純度主要由藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的檢查相下的雜質(zhì)檢查來控制，包括雜質(zhì)名稱、檢查方的雜質(zhì)檢查來控制，包括雜質(zhì)名稱、檢查方法、允許限量。純度控制又稱雜質(zhì)限量控制。法、允許限量。純度控制又稱雜質(zhì)限量控制。（二）嚴(yán)格按照（二）嚴(yán)格按照中國藥典中國藥典規(guī)定的雜質(zhì)檢查規(guī)定的雜質(zhì)檢查項(xiàng)目進(jìn)行檢查，凡項(xiàng)目進(jìn)行檢查，凡中國藥典中國藥典未規(guī)定檢查未規(guī)定檢查的雜質(zhì)，一般不需要檢查。的雜質(zhì)，一般不需要檢查。（三）化學(xué)試劑不考慮生理毒副作用，不能用（三）化學(xué)試劑不考

7、慮生理毒副作用，不能用化學(xué)制劑規(guī)格代替藥用規(guī)格?；瘜W(xué)制劑規(guī)格代替藥用規(guī)格。藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較v1、等級劃分不同：藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理、等級劃分不同：藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個(gè)等級：作用，藥品只有兩個(gè)等級：合格或不合格。合格或不合格。v化學(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純化學(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純（GR）、分析純（）、分析純（AR）、化學(xué)純（）、化學(xué)純（CP）、色）、色譜純、光譜純。譜純、光譜純。藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較藥物純度與化學(xué)試劑純度的比較2、要求不同：藥物純度主要從用藥安全、有效及穩(wěn)定性角度考慮；化學(xué)試劑純度是

8、從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對使用產(chǎn)生的影響，以及根據(jù)使用范圍和使用目的來加以規(guī)定。 五、雜質(zhì)限量五、雜質(zhì)限量v指藥物中指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬，通常用百分之幾或百萬分之幾（分之幾（ppmppm）來表示）來表示v限量檢查法：不檢查藥物的絕對含量，而檢查其是否超過限量檢查法：不檢查藥物的絕對含量，而檢查其是否超過限量。限量。雜質(zhì)的限量檢查v在不影響療效和不發(fā)生毒副作用的原則下，既保證藥物質(zhì)量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對于藥物中可能存在的雜質(zhì)，允許有一定限度。五、雜質(zhì)限量五、雜質(zhì)限量v雜質(zhì)限量檢查方法：1、對照法：取限量的待檢雜質(zhì)對照品溶液與一定量供試

9、品溶液在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過規(guī)定。例：氯化物檢查；硫酸鹽；鐵鹽；重金屬；砷鹽檢查等。平行原則v使用對照法檢查藥物的雜質(zhì)，必須遵循平行原則：供試液和對照液應(yīng)在完全相同的條件下反應(yīng)，如加入的試劑、反應(yīng)的溫度、放置的時(shí)間等均應(yīng)相同。五、雜質(zhì)限量五、雜質(zhì)限量2、靈敏度法：在規(guī)定量的供試品溶液中加入試劑，在一定條件下反應(yīng)，觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)，以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格。即以該檢測條件下反應(yīng)的靈敏度來控制雜技限量（不需對照品）。例：純化水中的氯化物檢查：在50mL純化水中加入硝酸5滴及硝酸銀試液1mL，不發(fā)生渾濁為合格。五、雜質(zhì)限量五、雜質(zhì)限量3、比較法：取一定量供試品，在規(guī)定

10、條件下測定待檢雜質(zhì)結(jié)果（吸光度、旋光度）與規(guī)定數(shù)據(jù)（限量）比較，判斷供試品中雜質(zhì)限量。（不需對照品）。例：鹽酸去氧腎上腺素中酮體的檢查：取本品，加水制成1mL中含2.0mg的溶液，以水為空白，在310nm波長處測定吸光度，不得大于0.02。雜質(zhì)限量的計(jì)算雜質(zhì)限量的計(jì)算 允許雜質(zhì)存在的最大量允許雜質(zhì)存在的最大量v雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量 供試品量供試品量%100ScVL供試品量標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液體積雜質(zhì)限量6ppm10ScVL試題舉例檢查某藥物中的砷鹽，取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml（每1ml相當(dāng)于1g的As）制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，砷鹽限量為0.0001，應(yīng)取供試品的量為 A. 0.20g B. 2.0g C0.020g

11、 D. 1.0g E. 0.10gg0.2%100%0001.01012%1006LcVS已知：已知：c1 g/ml110 6 g/mlV2ml L0.0001%試題檢查維生素C中的重金屬時(shí)，若取樣量為1.0g，要求含重金屬不得過百萬分之十，問應(yīng)吸取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？A. 0.2ml B. 0.4ml C2mlD. 1ml E. 20mlml 110100.1101066cSLV第二節(jié)第二節(jié) 一般雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)檢查v一般雜質(zhì)：廣泛分布于藥物中的雜質(zhì)。如氯化物、一般雜質(zhì)：廣泛分布于藥物中的雜質(zhì)。如氯化物、 硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、硫酸鹽、鐵鹽、

12、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、 易炭化物、熾灼殘?jiān)?。易炭化物、熾灼殘?jiān)?。v重金屬、砷鹽重金屬、砷鹽 二、重金屬檢查法二、重金屬檢查法v重金屬重金屬：在實(shí)驗(yàn)條件下：在實(shí)驗(yàn)條件下能與顯色劑能與顯色劑如如S2-作用顯色的金屬。作用顯色的金屬。如銀、鉛、汞、銅等。如銀、鉛、汞、銅等。v鉛在多數(shù)藥物的生產(chǎn)中容易積累，在體內(nèi)會積蓄中毒，因鉛在多數(shù)藥物的生產(chǎn)中容易積累，在體內(nèi)會積蓄中毒，因此重金屬檢查時(shí)常以鉛為代表。此重金屬檢查時(shí)常以鉛為代表。v中國藥典（中國藥典（20002000年版）共收載四法：硫代乙酰氨法、熾灼年版）共收載四法：硫代乙酰氨法、熾灼殘?jiān)ā⒘蚧c法、微孔濾膜法。殘?jiān)?、硫化鈉法、微孔濾

13、膜法。1. 第一法 硫代乙酰胺法（1 1）、原理）、原理 ： 對照法對照法 SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黃色棕黑色藥物：PbSSHPbpH3.522 黃色棕黑色、對照：PbSSHPbNOpH3.523 Vc適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。 （2）. 測定條件測定條件v用用硝酸鉛硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止加硝酸防止Pb2+水解水解），標(biāo)準(zhǔn)），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10 g /ml，適宜比，適宜比色范圍為色范圍為2ml溶液中含溶液中含1020 g的的Pb2+。

14、 v本法用本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為值為33.5。v顯色劑：從顯色劑：從ChP（1990）開始改用）開始改用硫代乙酰硫代乙酰胺做胺做顯色劑顯色劑 。 （1）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。）供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 A. 外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾 的有色溶液。的有色溶液。 B. 內(nèi)消色法：內(nèi)消色法： C. 改用第四法，微孔濾膜過濾法改用第四法，微孔濾膜過濾法（3）. 干擾及排除干擾及排除（2）若供試品中有）若供試品中有微量微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，存在，

15、會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫， 干擾比色，加入干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺抗壞血酸或鹽酸羥胺（0.51.0g）還原）還原Fe3+為為Fe2+，可消除干擾。，可消除干擾。（3）若供試品為）若供試品為鐵鹽鐵鹽，F(xiàn)e3+在在鹽酸鹽酸中生成中生成FeCl2 ，用乙醚提取除，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中加去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中加KCN掩蔽，然后用第三法檢查掩蔽，然后用第三法檢查 。（4）若）若藥物本身能生成不溶性硫化物藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可時(shí)，可加入掩蔽劑加入掩蔽劑消干擾。消干擾。 如如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽掩蔽Zn2+后，

16、依第后，依第三法檢查。三法檢查。 2. 第三法 硫化鈉法 適用于適用于溶于堿而不溶于稀酸溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。或在稀酸中生成沉淀的藥物。 如磺胺類、巴比妥類。如磺胺類、巴比妥類。 （1 1）. . 原理原理 對照法對照法 黃色棕黑色藥物：PbSSNaPbNaOH22 黃色棕黑色、對照：PbSSNaPbNONaOH23 Vc（2 2）. . 測定條件及注意事項(xiàng)測定條件及注意事項(xiàng)（1 1）堿性條件：）堿性條件： NaOH（2 2）顯色劑：硫化鈉）顯色劑：硫化鈉 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：Na2S需新鮮配制需新鮮配制 3. 第二法 熾灼殘?jiān)?適用于適用于含芳環(huán)、雜環(huán)含芳環(huán)、雜環(huán)以及

17、以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿不溶于水、稀酸、乙醇及堿的的有機(jī)藥物。有機(jī)藥物。 500500600600熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。熾灼后的殘?jiān)?jīng)處理后，依一法檢查。 （1 1）. . 原理原理 對照法對照法依一法檢查氯化物殘?jiān)蜜釄逯袠悠罚壕彌_液左右調(diào)節(jié)至、熾灼殘?jiān)?mlS0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法檢查對照：空坩堝緩沖液溶液）（標(biāo)準(zhǔn)、 ml0 . 25 . 3pHNOPbOHOHNHHClHNOSOH23223342（2）. 操作方法（3）. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)v含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃含鈉鹽或氟的有機(jī)

18、藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。v熾熱溫度影響檢查結(jié)果：溫度越高，重金屬損失越多。熾熱溫度影響檢查結(jié)果：溫度越高，重金屬損失越多。v酸溶液使用后一定要采用適當(dāng)措施完全去掉，以免影響下酸溶液使用后一定要采用適當(dāng)措施完全去掉，以免影響下一步操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一步操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4. 第四法 微孔濾膜法 適用于適用于重金屬限量低重金屬限量低的藥物（含的藥物（含2 25 5 g g重金屬雜質(zhì)）及重金屬雜質(zhì)）及有色供試液的檢查。有色供試液的檢查。 原理：重金屬生成的硫化物富集于微孔濾膜，比較色斑原理：重金屬生成的硫化物富

19、集于微孔濾膜，比較色斑的深淺。的深淺。 裝置：過濾器（裝置：過濾器（p36 p36 圖圖3-13-1） USP（24）檢查重金屬時(shí)，使用硫代乙酰胺（特殊情）檢查重金屬時(shí)，使用硫代乙酰胺（特殊情況下也采用新制飽和硫化氫試液）顯色。檢查時(shí)，除用供況下也采用新制飽和硫化氫試液）顯色。檢查時(shí)，除用供試管、對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管，三管同法檢查。試管、對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管，三管同法檢查。 監(jiān)控管的設(shè)置是防止藥品中的重金屬以結(jié)合態(tài)存在而無法檢測。監(jiān)控管的設(shè)置是防止藥品中的重金屬以結(jié)合態(tài)存在而無法檢測。 我國我國藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬時(shí)，應(yīng)用該法。金

20、屬時(shí)，應(yīng)用該法。 例1：重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時(shí)溶液控制最佳的pH值是（） A. 1.5 B. 3.5 C7.5 D. 9.5 E. 11.5例2：微孔濾膜法是用來檢查（）A. 氯化物 B. 砷鹽C. 重金屬 D. 硫化物E. 氰化物例例3. 中國藥典(2000年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（） A. 硫化氫試液 B. 硫代乙酰胺試液 C. 硫化鈉試液 D. 氰化鉀試液 E. 硫氰酸銨試液例4. 葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時(shí)，適宜的條件是（）A. 用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液B. 用10ml稀硝酸酸化C. 在pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中D. 用硫化鈉為試液E. 結(jié)果需在黑色背景下觀察結(jié)果需

21、在黑色背景下觀察例5. 現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用中國藥典上收載的重金屬檢查的哪種方法（）A. 一法B. 二法C. 三法D. 四法E. 以上都不對例6. 下面哪些方法為中國藥典收載的重金屬檢查方法（） A. 500600熾灼殘?jiān)?按一法操作 B. pH33.5條件下，加入硫化氫試液 C. 堿性下，加入硫化鈉試液 D. 按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑 E. 以上都對三、砷鹽檢查法三、砷鹽檢查法 （一）、古蔡法（一）、古蔡法 ChP（2000）、）、BP（1998），），砷鹽的砷鹽的限量檢查限量檢查（二）、二）、Ag-DDC（二乙基二硫代氨基甲酸銀）法（二乙基二硫代

22、氨基甲酸銀）法 ChP(2000)、USP（24），），檢查、含量測定檢查、含量測定 遇遇HgBrHgBr2 2試紙?jiān)嚰埳牲S色棕色的生成黃色棕色的砷斑砷斑，與，與2ml2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較。在相同條件下生成的砷斑比較。1. 古蔡法3332AsHAsOHHClZn As（ HgBr）3 （黃色）AsH3 + HgBr2 AsH（ HgBr）2 （棕色） As2Hg3 （棕黑色）（2）. 操作方法操作方法（1 1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑）標(biāo)準(zhǔn)砷斑: :用用2ml2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備 1 g As/ml（2 2）如供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作。）如供試

23、品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作。導(dǎo)氣管導(dǎo)氣管C裝有裝有醋酸鉛醋酸鉛棉花棉花（約（約6080mm高）高）旋塞旋塞D的頂端放有的頂端放有溴化汞溴化汞試紙。試紙。3. 測定條件 （1 1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1 1 g As/mlg As/ml。 （2 2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸濃鹽酸5ml5ml。 （3 3）反應(yīng)中加入酸性氯化亞錫及碘化鉀反應(yīng)中加入酸性氯化亞錫及碘化鉀，其作用是：，其作用是：(4).(4).鋅粒應(yīng)無砷鋅粒應(yīng)無砷(5).(5).砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察A. A. 還原還原AsAs5+5+為

24、為AsAs3+3+，加快反應(yīng)速度；，加快反應(yīng)速度； B. B. 碘化鉀碘化鉀被氧化生成的被氧化生成的I I2 2又可被氯化亞錫還原為又可被氯化亞錫還原為I I- -，I I- -與與反應(yīng)中生成的反應(yīng)中生成的ZnZn2+2+能形成穩(wěn)定的能形成穩(wěn)定的配位離子配位離子，有利于生成砷，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行； C. C. 氯化亞錫與鋅氯化亞錫與鋅作用，作用，在鋅表面形成鋅錫齊在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；續(xù)地發(fā)生； D. D. 可可抑制微量抑制微量SbSb的干擾的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，在實(shí)驗(yàn)條件下，100 100 gSbgSb存在存在不干擾。不干

25、擾。 4. 干擾及排除干擾及排除（1 1）供試品若為）供試品若為硫化物、硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，加熱，加熱, ,使使氧化成硫酸鹽氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如，以除去干擾，如硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉中中砷鹽的檢查。砷鹽的檢查。 （2 2）供試品若為）供試品若為鐵鹽鐵鹽，需先，需先加酸性氯化亞錫加酸性氯化亞錫試液，將試液，將FeFe3+3+還原為還原為FeFe2+2+，如如枸櫞酸鐵銨枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。中砷鹽的檢查。（3 3）具）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。再進(jìn)行檢查。（4 4）本法適用于不含）

26、本法適用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于100100 g g的供試品。的供試品。 （二）Ag-DDC法3332AsHAsOHHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33紅色） 1. 原理：對照法原理：對照法 用用有機(jī)堿有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDCHDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。有利于反應(yīng)的進(jìn)行。 USP（2424）用吡啶，）用吡啶，ChPChP（20002000）用）用三乙胺三乙胺。 本法適用于本法適用于含含SbSb量小于量小于500500 g g的供試品。的供試品。 砷化氫與砷化氫與Ag-DDC溶液作用，溶液作用，還原還原AgDDC為紅色膠態(tài)為紅色膠態(tài)

27、銀銀，直接比色或于，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，進(jìn)行比較。波長處測定吸收度，進(jìn)行比較。（三）白田道夫法（三）白田道夫法v含銻藥物含銻藥物 v銻鹽被還原為銻鹽被還原為SbH3與與HgBr2試紙作用，產(chǎn)生試紙作用，產(chǎn)生灰色銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用灰色銻斑，干擾砷斑的檢查，可改用Betterdorff法。法。例1：在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過百萬分之十的是（） A. 氯化物 B. 硫酸鹽 C. 醋酸鹽 D. 砷鹽 E. 淀粉 例2： 在用古蔡法檢查砷鹽時(shí)，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（） A. 除去I2 B. 除去AsH3 C. 除去H2S D. 除去HBr E. 除去Sb

28、H3例3：古蔡氏法中，SnC12的作用有（）A. 使As5+As3+ B. 除去H2SC. 除去I2 D. 組成鋅錫齊E. 除去其它雜質(zhì) 例4：中國藥典（1995年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是（） A. 與鋅、酸作用生成H2S氣體 B. 與鋅、酸作用生成AsH3氣體 C. 產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑 D. 比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的面積大小 E. 比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強(qiáng)度 例5、砷鹽檢查法方法的比較1、在連接砷化氫發(fā)生瓶的導(dǎo)管中裝入醋酸鉛棉花（）2、使用的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液為2m1（）3、測定結(jié)果要與標(biāo)準(zhǔn)砷斑相比較（）4、要測定吸收度（）5、要用酸堿滴定法（） A. 古蔡氏（

29、Gutzeit）法 B. 二乙基二硫代氨基甲酸銀法 C. A和B均可 D. A和B均不可例6、用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時(shí)，排除干擾的方法： A. 先用硝酸或溴水氧化 B. 先加酸性氯化亞銻還原 C. 改用白田道夫法 D. 先加氰化鉀掩蔽 E. 先加草酸生成沉淀 1. 硫化物（） 2. 亞硫酸鹽（） 3. 硫代硫酸鹽（） 4. 高鐵鹽（） 5. 銻鹽（）例7. ChP（2000）檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時(shí)，應(yīng)選用（B） A. 古蔡氏法 B. 白田道夫法 C. 碘量法 D. AgDDC法 E. 契列法例8. 葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有（） APb2+標(biāo)準(zhǔn)液 BSnCl2試液 CKI試

30、液 DZn E醋酸鉛棉花例9. Ag-DDC法檢查砷鹽時(shí)，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為（） A將As5+還原為As3+ B有利于AsH3生成反應(yīng) C抑制SbH3的生成 D形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣 E催化加速生成AsH3例10. 古蔡氏法檢查所用的溶液是()A. 強(qiáng)堿性溶液B. 強(qiáng)酸性溶液C. 含稀鹽酸10ml溶液D. 含稀硝酸10ml溶液E. 含強(qiáng)氧化劑(硝酸或過硫酸銨)溶液例11、綜合練習(xí) 1、藥物中鐵鹽檢查（） 2、磺胺嘧啶中重金屬檢查（） 3、藥物中硫酸鹽檢查（） 4、葡萄糖中重金屬檢查（） 5、藥物中氯化物檢查（） A. 硝酸銀試液 B. 氯化鋇試液 C. 硫代乙酰胺

31、試液 D. 硫化鈉試液 E. 硫氰酸鹽試液例12、綜合練習(xí)：1-5可用于檢查的雜質(zhì)為 1、在酸性溶液中與氯化鋇生成渾濁液的方法（） 2、在酸性溶液中與硫氰酸鹽生成紅色的方法（） 3、在實(shí)驗(yàn)條件下與硫代乙酰胺形成均勻混懸溶液的方法（） 4、Ag-DDC法（） 5、古蔡法（） A. 氯化物 B. 砷鹽 C. 鐵鹽 D. 硫酸鹽 E. 重金屬例13、15 雜質(zhì)檢查中所用的酸是A. 稀硝酸 B. 稀鹽酸 C. 硝酸 D. 濃鹽酸 E. 醋酸鹽緩沖液1、 氯化物檢查法（）2、 硫酸鹽檢查法（）3、 鐵鹽檢查法（）4、重金屬檢查法（）5、砷鹽檢查法（）四、溶液顏色檢查法四、溶液顏色檢查法v控制藥物中控制藥

32、物中有色雜質(zhì)限量有色雜質(zhì)限量的方法。的方法。 vChP(2000)ChP(2000)采用三種方法檢查：采用三種方法檢查：v目視比色法目視比色法 v分光光度法分光光度法 v色差計(jì)法色差計(jì)法 觀察方法觀察方法 1. 目視比色法目視比色法v將樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法。將樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法。v標(biāo)準(zhǔn)比色液標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制的配制 ：v觀察方法觀察方法 ：個(gè)色號標(biāo)準(zhǔn)比色液種色調(diào)種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液溶液、不同量水稀釋不同比例5055CuSOCoClOCrK42722顏色較深時(shí)平視顏色較淺時(shí)從上向下 標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制 2. 2. 色差計(jì)法色差計(jì)法v本法是通過本法是通過色差計(jì)色差計(jì)直

33、接測定溶液的透視三刺激值，比較樣品直接測定溶液的透視三刺激值，比較樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)比色液之間的顏色差異進(jìn)行檢測的方法。溶液與標(biāo)準(zhǔn)比色液之間的顏色差異進(jìn)行檢測的方法。v三刺激值：在給定的三色系統(tǒng)中，與待測色達(dá)到色匹配所需要的三個(gè)原刺激量。三刺激值：在給定的三色系統(tǒng)中，與待測色達(dá)到色匹配所需要的三個(gè)原刺激量。v色差計(jì)的工作原理色差計(jì)的工作原理：利用儀器內(nèi)部的積分光學(xué)系統(tǒng)，把：利用儀器內(nèi)部的積分光學(xué)系統(tǒng)，把光譜光度數(shù)據(jù)光譜光度數(shù)據(jù)的的三刺激值進(jìn)行積分，得到顏色的數(shù)學(xué)表達(dá)式，計(jì)算出三刺激值進(jìn)行積分，得到顏色的數(shù)學(xué)表達(dá)式，計(jì)算出色差色差。v測色儀器一般為光電積分型色差計(jì)測色儀器一般為光電積分型色差計(jì) 。五

34、、澄清度檢查法五、澄清度檢查法 v檢查藥物中的檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)微量不溶性雜質(zhì)，用作，用作注射劑注射劑的的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。 v1. 檢查方法檢查方法 對照法對照法 v把把供試品供試品溶液與溶液與規(guī)定級號的濁度標(biāo)準(zhǔn)液規(guī)定級號的濁度標(biāo)準(zhǔn)液相比較相比較五、澄清度檢查法五、澄清度檢查法v2. 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制：濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制：v原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。v濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液： 1.0硫酸肼溶液硫酸肼

35、溶液 + 10烏洛托品溶液烏洛托品溶液 等量混合等量混合 （低溫避光保存）（低溫避光保存） v濁度標(biāo)準(zhǔn)原液濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 ：15.00ml 貯備液稀釋至貯備液稀釋至1000ml （A550 = 0.120.15） v濁度標(biāo)準(zhǔn)液（濁度標(biāo)準(zhǔn)液（5個(gè)級號）：個(gè)級號）：0.5；1；2；3；4。五、澄清度檢查法五、澄清度檢查法v3. 判斷判斷 藥典中規(guī)定的藥典中規(guī)定的“澄清澄清”，系指供試品溶液的，系指供試品溶液的澄清度澄清度相同于所用溶劑，或未超過相同于所用溶劑，或未超過0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。v0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液號濁度標(biāo)準(zhǔn)液：2.5ml標(biāo)準(zhǔn)原液稀釋至標(biāo)準(zhǔn)原液稀釋至100ml。v配制用水配制用

36、水：新煮沸的冷水。：新煮沸的冷水。六、有機(jī)溶劑殘留量測定法六、有機(jī)溶劑殘留量測定法 1. 有機(jī)溶劑殘留量測定法適用對象有機(jī)溶劑殘留量測定法適用對象 是用以檢查是用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機(jī)溶劑藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機(jī)溶劑，包括，包括苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。 2. 檢查方法檢查方法 中國藥典采用中國藥典采用氣相色譜法氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑。檢查殘留有機(jī)溶劑。3. 色譜條件v固定相：直徑為固定相：直徑為0.250.18mm的二乙烯苯乙基乙烯苯型的二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球。高分子多孔小球。v

37、載氣：氮?dú)廨d氣：氮?dú)鈜檢測器：氫火焰離子化檢測器檢測檢測器：氫火焰離子化檢測器檢測v柱溫：柱溫：80170v色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國藥典規(guī)定，在測定殘留溶劑前確色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：中國藥典規(guī)定，在測定殘留溶劑前確定色譜適用性條件。定色譜適用性條件。（1）用待測物的色譜峰計(jì)算的理論塔板數(shù)應(yīng)大于）用待測物的色譜峰計(jì)算的理論塔板數(shù)應(yīng)大于1000；（2）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測物色譜峰的分離度應(yīng)大于）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，內(nèi)標(biāo)物與待測物色譜峰的分離度應(yīng)大于 1.5；（3）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液（限量待測溶劑與內(nèi)標(biāo)液）用內(nèi)標(biāo)法測定時(shí)，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液（限量待測溶劑與內(nèi)標(biāo)液） 進(jìn)樣進(jìn)樣5次，待測物與內(nèi)標(biāo)物

38、峰面積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)次，待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng) 不大于不大于5；若用外標(biāo)法測定，待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)；若用外標(biāo)法測定，待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn) 偏差應(yīng)不大于偏差應(yīng)不大于10。第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查法特殊雜質(zhì)檢查法v特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì)：在：在特定藥物特定藥物的的生產(chǎn)和貯藏中生產(chǎn)和貯藏中引入的雜質(zhì)。引入的雜質(zhì)。v一般根據(jù)一般根據(jù)藥物和雜質(zhì)藥物和雜質(zhì)在物理、化學(xué)性質(zhì)上的在物理、化學(xué)性質(zhì)上的差異差異來進(jìn)來進(jìn)行區(qū)別，如顏色的差異、溶解行為的差異、旋光性的行區(qū)別，如顏色的差異、溶解行為的差異、旋光性的差異、吸收光譜的差異和化學(xué)反應(yīng)的差異等。差異、吸收光譜的差異和化學(xué)反應(yīng)的差異等。

39、v高壓液相色譜法高壓液相色譜法一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異v臭味及揮發(fā)性質(zhì)的差異臭味及揮發(fā)性質(zhì)的差異v 例如：黃例如：黃凡士林凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品中異性有機(jī)物檢查：本品2.0g, 直火加熱直火加熱無辛味無辛味。v顏色差異顏色差異v 例如：例如：磺胺嘧啶磺胺嘧啶中中有色偶氮苯化合物有色偶氮苯化合物的檢查：取本品的檢查：取本品2.0g，加，加NaOH試液試液10ml，加水，加水25ml，與黃色，與黃色3號比色液比，不得更深。號比色液比，不得更深。v溶解行為的差異溶解行為的差異v 例如：例如：吡哌酸吡哌酸中中不溶物吡哌酸甲酯不溶物吡哌酸甲酯（I）和

40、（）和（II）檢查）檢查一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異v旋光性質(zhì)的差異旋光性質(zhì)的差異v 例如：例如：硫酸阿托品硫酸阿托品中中莨菪堿莨菪堿的檢查：本品溶液的檢查：本品溶液(50mg/ml)- 0.4v對光吸收性質(zhì)的差異對光吸收性質(zhì)的差異v 例如：例如：苯丙醇苯丙醇中中苯丙酮苯丙酮的檢查的檢查: 純品苯丙醇純品苯丙醇A247nm/A258nm= 0.59; 99.5% 時(shí)時(shí)A247nm/A258nm= 0.79一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異一、利用藥物和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異v熒光分析法熒光分析法 v v 例如：例如：利血平利血平中中氧化產(chǎn)物氧化產(chǎn)物

41、檢查檢查：利血平：利血平(無熒光無熒光) v 3,4-二去氫利血平二去氫利血平(I) (黃綠色熒光黃綠色熒光)v 3,4,5,6-四去氫利血平四去氫利血平 (II) (藍(lán)色熒光藍(lán)色熒光) 二二. 高壓液相色譜法概述高壓液相色譜法概述v高效液相色譜法高效液相色譜法是是70年代初期、年代初期、在氣相色譜和經(jīng)典色譜在氣相色譜和經(jīng)典色譜的基的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種以液體做流動相以液體做流動相的新色譜技術(shù)。的新色譜技術(shù)。v氣相色譜氣相色譜僅能分析在操作溫度下僅能分析在操作溫度下能氣化能氣化而而不分解不分解的物質(zhì)。對的物質(zhì)。對高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化高沸點(diǎn)化合物

42、、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難。據(jù)統(tǒng)計(jì)合物及高聚物的分離、分析較為困難。據(jù)統(tǒng)計(jì)只有大約只有大約20%的有機(jī)物能用氣相色譜分析。的有機(jī)物能用氣相色譜分析。v液相色譜則不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，能用液相色液相色譜則不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，能用液相色譜分析的有機(jī)物大約占有機(jī)物的的譜分析的有機(jī)物大約占有機(jī)物的的70 80%。 2. 液相色譜的分離原理液相色譜的分離原理v液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相固定相和流動相組成固定相和流動相組成。液相。液相色譜的固定相可以是吸附劑、化學(xué)鍵合固定相（或在惰性載色譜的固定相可以是吸附劑、化學(xué)鍵

43、合固定相（或在惰性載體表面涂上一層液膜）、離子交換樹脂或多孔性凝膠；流動體表面涂上一層液膜）、離子交換樹脂或多孔性凝膠；流動相是各種溶劑。相是各種溶劑。v被分離混合物由流動相液體推動進(jìn)入色譜柱被分離混合物由流動相液體推動進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在。根據(jù)各組分在固定相及流動相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或固定相及流動相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。3. 高效液相色譜儀高效液相色譜儀v高效液相色譜儀由高效液相色譜儀由 高壓輸液系統(tǒng)高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)、檢檢測系統(tǒng)測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)記錄系統(tǒng) 等五大部分組成

44、。等五大部分組成。v高壓輸液系統(tǒng)：由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。高壓輸液系統(tǒng)：由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。v進(jìn)樣系統(tǒng)：包括進(jìn)樣口、注射器和進(jìn)樣閥等。進(jìn)樣系統(tǒng)：包括進(jìn)樣口、注射器和進(jìn)樣閥等。v分離系統(tǒng)包括色譜柱、恒溫器和連接管等部件。分離系統(tǒng)包括色譜柱、恒溫器和連接管等部件。v檢測器：溶質(zhì)性檢測器（包括紫外、熒光、電化學(xué)檢測器等）和總體檢測檢測器：溶質(zhì)性檢測器（包括紫外、熒光、電化學(xué)檢測器等）和總體檢測器（如示差折光檢測器）。器（如示差折光檢測器）。4. 藥物雜質(zhì)檢查中的高效液相色譜法藥物雜質(zhì)檢查中的高效液相色譜法v峰面積歸一化法峰面積歸一化法v內(nèi)標(biāo)法加校正因子法內(nèi)標(biāo)法加校正因子法v外標(biāo)法外標(biāo)法v不加校正因子的主成分自身對照法不加校正因子的主成分自身對照