土壤中微生物的分離

1、實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 土壤中微生物的分離土壤中微生物的分離實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握從樣品中分離不同種類的微生物，掌握從樣品中分離不同種類的微生物，并進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)并進(jìn)行活菌計(jì)數(shù) 鞏固無菌操作的方法鞏固無菌操作的方法單位時間里微生物數(shù)量或生物量（單位時間里微生物數(shù)量或生物量（Biomass）的增加）的增加。微生物生長：微生物生長：微生物生長的測定：微生物生長的測定：個體計(jì)數(shù)個體計(jì)數(shù)群體重量測定群體重量測定群體生理指標(biāo)測定群體生理指標(biāo)測定評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響；評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響；評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制(或殺死或殺死)作

2、用的效果；作用的效果；客觀地反映微生物生長的規(guī)律；客觀地反映微生物生長的規(guī)律；第一節(jié)第一節(jié) 微生物生長的測定微生物生長的測定以數(shù)量變化對微生物生長情況進(jìn)行測定以數(shù)量變化對微生物生長情況進(jìn)行測定通常用來測定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長情況通常用來測定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長情況或樣品中所含微生物個體的數(shù)量（細(xì)菌、孢子、酵母菌）或樣品中所含微生物個體的數(shù)量（細(xì)菌、孢子、酵母菌）培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以得到正確的結(jié)果：、準(zhǔn)確，否則難以得到正確的結(jié)果：樣品充分混勻；樣品充分混勻；每支移液管及涂布棒只能接觸一個每

3、支移液管及涂布棒只能接觸一個稀釋度的菌液；稀釋度的菌液；同一稀釋度三個以上重復(fù)同一稀釋度三個以上重復(fù),取平均值；取平均值；每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)；準(zhǔn)確計(jì)數(shù)；一個菌落可能是多個細(xì)胞一起形成，所以在科研中一般用一個菌落可能是多個細(xì)胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成單位（菌落形成單位（colony forming units， CFU）來表示，而）來表示，而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟 將將10g土樣裝入含土樣裝入含100ml無菌水的錐形瓶中振無菌水的錐形瓶中振蕩蕩10min 取取1ml移入含移入含9ml無菌水的試管中，吹吸均勻，無菌水的試管中，吹吸均勻，為稀釋為稀釋10倍的樣品倍的樣品 依次進(jìn)行梯度稀釋依次進(jìn)行梯度稀釋 倒培養(yǎng)基倒培養(yǎng)基 取合適稀釋度的樣品取合適稀釋度的樣品1ml涂布涂布實(shí)驗(yàn)安排實(shí)驗(yàn)安排 10-510-610-7稀釋度為細(xì)菌培養(yǎng)稀釋度為細(xì)菌培養(yǎng) 牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基胨培養(yǎng)基 10-310-410-5 稀釋度為放線菌培養(yǎng)，注意培養(yǎng)稀釋度為放線菌培養(yǎng)，注意培養(yǎng)基在倒入平板前先加入數(shù)滴重鉻酸鉀溶液基在倒入平板前先加入數(shù)滴重鉻酸鉀溶