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1、專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)* * * CO1HGG IITISHENG XIUKOfiGJIA基礎(chǔ)鞏固11在微生物培養(yǎng)過程中,需要對(duì)培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌,其標(biāo)準(zhǔn)是()A.殺死所有的病原微生物B.殺死所有的微生物的細(xì)胞C.殺死所有微生物的細(xì)胞、芽抱和抱子D.使病原菌不生長(zhǎng)解析:滅菌是指利用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子。答案:CI 2下列有關(guān)倒平板的敘述,錯(cuò)誤的是()A.在酒精燈的火焰旁進(jìn)行操作B.將打開的錐形瓶瓶口迅速通過酒精燈的火焰C.將培養(yǎng)皿打開,培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D.待平板冷卻凝固后需要倒過來放置解析:整個(gè)倒平板過程要防止外來雜菌的入侵,因此,

2、應(yīng)在酒精燈的火焰旁進(jìn)行操作 ,打開的錐形瓶瓶口應(yīng)迅速通過酒精燈的火焰。培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙進(jìn)行操作,不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開。平板冷卻凝固后需要倒過來放置。答案:CI 3下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)基一一般都含水、碳源、氮源和無機(jī)鹽B.涂布接種時(shí),涂布器應(yīng)在干熱滅菌箱中滅菌冷卻后再使用C.純化培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)D.觀察菌落時(shí),應(yīng)將培養(yǎng)皿蓋拿掉后在顯微鏡下進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)解析:涂布接種時(shí),涂布器應(yīng)在酒精燈火焰引燃滅菌,冷卻后再使用;用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí),應(yīng)放在搖床上,培養(yǎng)皿中的是固體培養(yǎng)基,應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng);菌落肉眼可見,不需要借

3、助于顯微鏡。答案:A1 4下列操作與消毒或滅菌無關(guān)的是()A.接種前用酒精燈的火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種在酒精燈的火焰旁完成解析:接種用具、器皿上以及空氣中都有微生物,都有導(dǎo)致污染的可能,必須嚴(yán)格消毒、滅菌。A、B、D三項(xiàng)都屬于實(shí)驗(yàn)操作過程中的消毒或滅菌。將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)是為了 防止雜菌污染,不屬于消毒或滅菌。答案:CI 5微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.病毒和細(xì)菌的培養(yǎng)基成分相同B.平板劃線法中的劃線是連續(xù)進(jìn)行的C.微生物培養(yǎng)基中并不都必須添加碳源或氮源D.在培養(yǎng)的過程中,細(xì)胞種類、數(shù)目都不斷地增

4、加解析:病毒是寄生生物,在活細(xì)胞中才能進(jìn)行生命活動(dòng);平板劃線法是為了稀釋細(xì)菌,劃線間斷 進(jìn)彳T ;微生物培養(yǎng)基根據(jù)需要添加相應(yīng)的碳源和氮源;在培養(yǎng)的過程中,細(xì)胞的數(shù)目不斷地增加,種類不增加。答案:CI 6防止雜菌入侵,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒B.接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C.在實(shí)驗(yàn)室中,切不可吃東西、喝水,離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境解析:接種環(huán)等金屬用具應(yīng)放在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰處灼燒滅菌。 答案舊匚

5、7下列關(guān)于菌種彳藏的敘述,錯(cuò)誤的是()A.菌種保藏的目的之一是保持菌種的純凈B.固體斜面培養(yǎng)基可用于菌種的臨時(shí)保藏C.菌種的長(zhǎng)期保存一般采用甘油管藏法D.甘油管藏菌種在-20 C條件下進(jìn)行,因此對(duì)甘油可不必滅菌解析:采用甘油管藏法保存菌種時(shí),需對(duì)甘油滅菌,以避免雜菌污染。答案:DI 8下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題,請(qǐng)回答下列問題。某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH 2P。4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸儲(chǔ)水,其中凝固劑是 ,碳源是,氮源是。從同化作用類 型看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于 。(2)將少量細(xì)菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定菌體數(shù)目,以時(shí)

6、間為橫坐標(biāo),以菌體數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可以得到細(xì)菌的 曲線。該曲線中以菌體數(shù) 目 的 對(duì) 數(shù) 作 為 縱 坐 標(biāo) 的 原 因 是O解析:(1)在該細(xì)菌固體培養(yǎng)基組成成分中,凝固劑是瓊脂,碳源是葡萄糖,氮源是尿素。由于該 細(xì)菌以有機(jī)物(葡萄糖)作碳源,故從同化作用類型看,該細(xì)菌屬于異養(yǎng)型。(2)細(xì)菌的增長(zhǎng)曲線反映了細(xì)菌群體從開始生長(zhǎng)到死亡的動(dòng)態(tài)變化過程。答案:(1)瓊脂葡萄糖尿素異養(yǎng)型(2)增長(zhǎng)培養(yǎng)中的細(xì)菌數(shù)量以指數(shù)形式增長(zhǎng),取對(duì)數(shù)便于反映細(xì)菌群體的生長(zhǎng)規(guī)律V- 9為了獲得純度高的大腸桿菌,需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛 肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),配制固體培養(yǎng)基

7、的基本步驟是計(jì)算一稱量一 一一倒平板。(2)稱量時(shí),牛肉膏由于比較黏稠,可以用 挑取,放在 上稱量。由于牛肉膏和蛋白臍,稱量時(shí)動(dòng)作要迅速,稱后要及時(shí)蓋上瓶蓋。在牛肉膏蛋白月東固體培養(yǎng)基上大腸桿菌能生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基含有 等大腸桿菌生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法,如 和 等,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè) ,從而獲得純菌株。答案:(1)溶化滅菌(2)玻璃棒 稱量紙 容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落能力提升匚1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.單菌落的分離是消除雜菌污染的一種方法C.培

8、養(yǎng)基都必須使用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落解析:防止雜菌污染是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵,A項(xiàng)正確;單菌落由一個(gè)微生物繁殖而來,因此分離單菌落可以消除雜菌,B項(xiàng)正確;培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法,但是對(duì)于含有高溫易分解的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,就不能采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,C項(xiàng)錯(cuò)誤;倒置平板可以防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落到培養(yǎng)基表面污染培養(yǎng)基,D項(xiàng)正確。答案:C匚2下列有關(guān)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化大腸桿菌的敘述,正確的是()都需要用固體培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種都可以用菌落數(shù)來計(jì)數(shù)活菌A.B.C.D.解析:平板劃線法和稀釋涂布平

9、板法都是為了在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落,所以都需要用固體培養(yǎng)基,正確;稀釋涂布平板法不需要使用接種針進(jìn)行接種,錯(cuò)誤;為防止雜菌污染,操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種,正確;平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)活菌,只能用于分離菌種, 稀釋涂布平板法可以用來計(jì)數(shù)活菌,錯(cuò)誤。答案:B匚3金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力,常引起骨髓炎等,還可能引起食物中毒。 下列篩選金黃色葡萄球菌實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法,錯(cuò)誤的是()A.對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉C.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D.接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈 ,再用體積分?jǐn)?shù)為 75%的酒精棉球擦拭解析:帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒

10、掉,不能經(jīng)簡(jiǎn)單地加熱后就倒掉。答案:C匚4下圖是微生物平板劃線示意圖 ,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列敘述正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在酒精燈的火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌解析:操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的火焰上灼燒滅菌;劃線操作應(yīng)在酒精燈的火焰旁進(jìn)行,而不是火焰上;所有的劃線區(qū)都有可能得到菌落,只是5區(qū)域中菌落相對(duì)較純。答案:D匚5下列關(guān)于倒平板及對(duì)菌種純化的說法,正確的是()A.倒平板時(shí)左手將滅過菌的培養(yǎng)皿蓋完全打開,右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿(1020mL),左手立即蓋上

11、培養(yǎng)皿蓋B.接種時(shí),應(yīng)使用已滅菌的接種環(huán),培養(yǎng)基不需要滅菌C.平板冷凝后要將平板倒置,以防皿蓋上的冷卻水倒流入培養(yǎng)基D.涂布器直接在酒精燈的火焰上灼燒滅菌解析:倒平板時(shí)用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是直接將蓋完全打開;接種時(shí),應(yīng)使用已滅菌的接種環(huán),培養(yǎng)基仍需進(jìn)行滅菌處理;涂布器滅菌時(shí)需蘸少量酒 精并引燃。答案:C匚6下列關(guān)于微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)技術(shù)的表述,正確的是()A.溶化時(shí)將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B.常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學(xué)試劑等C.配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂,其目的是為微生物生長(zhǎng)提供碳源D.用移液管稀釋菌液時(shí),吹吸三次的目的是使菌液

12、與水充分混勻解析:稱好的牛肉膏要連同稱量紙一起放入燒杯,待牛肉膏與稱量紙分離后 ,用玻璃棒取出稱量紙;灼燒屬于滅菌方法,不屬于消毒方法;瓊脂可以作為固體培養(yǎng)基的凝固劑,而不能為微生 物提供碳源;吹吸三次可以使菌液混合均勻 ,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確。答案:D(7(2018全國(guó)n高考理綜)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的 污染。回答下列問題。(1)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具 (填 何以或 不可以”)放入干熱滅菌 箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外

13、線能 。在照射前,適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過 (填氯氣”乙醇”或高鎰酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可 能的原因是。解析:實(shí)驗(yàn)室中能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等,可用干熱滅菌的方法滅菌。對(duì)于一些不耐高溫的液體,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高溫瞬時(shí)消毒法消毒,這種消毒方法的優(yōu)點(diǎn)是可以殺死牛奶中的微生物,并且牛奶中的營(yíng)養(yǎng)成分基本不被破壞。自來水通常用氯氣消毒,氯氣與水反應(yīng)生成次氯酸和氯化氫,次氯酸具有強(qiáng)氧化性,能殺死自來水中的微生物。用高壓蒸汽滅菌法滅菌,必須把鍋內(nèi)的冷空氣徹底

14、排除后才能達(dá)到設(shè)定的壓力和 相應(yīng)的溫度。答案:(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu) 消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡I 8炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平,呈竹節(jié)狀排列菌落呈卷發(fā)狀。對(duì)炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實(shí)驗(yàn)確診。(1)細(xì)菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定:實(shí)驗(yàn)流程如下圖所示。時(shí)馳蛆對(duì)配制的液體培養(yǎng)基等需采用 法滅菌;實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為 (填無機(jī)碳”或有機(jī)碳”)。挑選可疑菌落制片后,用 觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。接種可疑菌后,在溫度為35 C的環(huán)境中培養(yǎng)24 h,液體培養(yǎng)基變渾濁,原因 是。對(duì)照組試管中應(yīng)加入 ,與實(shí)驗(yàn)組同 時(shí)培養(yǎng)6 h后,若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組 (填 高或 低),則可確定疑 似患者被炭疽桿菌感染;反之,則排除。對(duì)排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體 相關(guān)的細(xì)胞除 T細(xì)胞、B細(xì)胞外,還有。解析:(2)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型微生物,培養(yǎng)基中應(yīng)加有機(jī)碳作碳源。炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列,

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