藥物的鑒別實(shí)驗(yàn)ppt課件

1、根據(jù)藥典進(jìn)展的藥物分析主要有三大項(xiàng)：根據(jù)藥典進(jìn)展的藥物分析主要有三大項(xiàng)： 鑒別、檢查和含量測(cè)定鑒別、檢查和含量測(cè)定藥典所收載的藥物項(xiàng)下的鑒別實(shí)驗(yàn)方法，藥典所收載的藥物項(xiàng)下的鑒別實(shí)驗(yàn)方法，僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用僅適用于貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物，用以證明能否為其所標(biāo)示的藥物。以證明能否為其所標(biāo)示的藥物。 這些實(shí)驗(yàn)方法不能賴以鑒別未知物這些實(shí)驗(yàn)方法不能賴以鑒別未知物 一性狀：反映了藥物特有的物理性質(zhì)，普通包一性狀：反映了藥物特有的物理性質(zhì)，普通包括外觀、嗅、味、溶解度以及物理常數(shù)括外觀、嗅、味、溶解度以及物理常數(shù)(mp.bp. (mp.bp. 等等) )。二普通鑒別實(shí)驗(yàn)二普通鑒別實(shí)驗(yàn)g

2、eneral identification general identification testtest：證明其是某一類藥物，而不能證明是哪一：證明其是某一類藥物，而不能證明是哪一種藥物。僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)種藥物。僅供確認(rèn)單一的化學(xué)藥物，如為數(shù)種化學(xué)藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，藥物的混合物或有干擾物質(zhì)存在時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)不適用。應(yīng)不適用。 無(wú)機(jī)藥物無(wú)機(jī)藥物 陰離子和陽(yáng)離子的特殊反響陰離子和陽(yáng)離子的特殊反響 有機(jī)藥物有機(jī)藥物 典型的官能團(tuán)反響典型的官能團(tuán)反響 三專屬鑒別實(shí)驗(yàn)三專屬鑒別實(shí)驗(yàn)specific identification specific i

3、dentification testtest：根據(jù)每一種藥物化學(xué)構(gòu)造的差別及其所引起：根據(jù)每一種藥物化學(xué)構(gòu)造的差別及其所引起的物理化學(xué)特性的不同的物理化學(xué)特性的不同, ,選用某些特有的靈敏定性反選用某些特有的靈敏定性反響，來(lái)鑒別藥物真?zhèn)蔚摹ＷC明其是某一種藥物響，來(lái)鑒別藥物真?zhèn)蔚?。證明其是某一種藥物 。例如，經(jīng)普通鑒別反響的鈉鹽實(shí)驗(yàn)，證明某一藥物例如，經(jīng)普通鑒別反響的鈉鹽實(shí)驗(yàn)，證明某一藥物為鈉鹽，但不能識(shí)別是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其為鈉鹽，但不能識(shí)別是氯化鈉、苯甲酸鈉或者是其它某一種鈉鹽藥物。要想最后證明被鑒別的物質(zhì)究它某一種鈉鹽藥物。要想最后證明被鑒別的物質(zhì)究竟是哪一種藥物，必需在普通鑒別實(shí)驗(yàn)

4、的根底上，竟是哪一種藥物，必需在普通鑒別實(shí)驗(yàn)的根底上，再進(jìn)展專屬鑒別實(shí)驗(yàn)，方可確認(rèn)。再進(jìn)展專屬鑒別實(shí)驗(yàn)，方可確認(rèn)。一反響靈敏度和空白實(shí)驗(yàn)一反響靈敏度和空白實(shí)驗(yàn)1.1.反響靈敏度反響靈敏度sensitivitysensitivity * *最低檢出量最低檢出量minimum detectable quantityminimum detectable quantity又稱檢出限量：以又稱檢出限量：以m m表示，就是運(yùn)用某一表示，就是運(yùn)用某一反響，在一定的條件下，可以觀測(cè)出的供試品反響，在一定的條件下，可以觀測(cè)出的供試品的最小量，其單位通常用微克的最小量，其單位通常用微克 g g表示。表示。 *最低

5、檢出濃度最低檢出濃度minimum detectable concentration：以：以1:G或或1:V表示，是運(yùn)用表示，是運(yùn)用于某一反響，在一定條件下，可以觀測(cè)出供于某一反響，在一定條件下，可以觀測(cè)出供試品的最低濃度。試品的最低濃度。 兩者間滿足以下關(guān)系：兩者間滿足以下關(guān)系： m=(vm=(v106)/V106)/V2. 空白實(shí)驗(yàn)空白實(shí)驗(yàn)blank test:就是在與供試就是在與供試品鑒別實(shí)驗(yàn)完全一樣的條件下，除不加供品鑒別實(shí)驗(yàn)完全一樣的條件下，除不加供試品外，其它試劑同樣參與進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)。試品外，其它試劑同樣參與進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)。 二提高靈敏度的方法二提高靈敏度的方法1.參與與水不相溶的有機(jī)溶

6、劑參與與水不相溶的有機(jī)溶劑 2.改良觀測(cè)方法改良觀測(cè)方法 1.1.干法干法 焰色實(shí)驗(yàn)焰色實(shí)驗(yàn) 加熱分解加熱分解 取鉑絲，用鹽酸潮濕后，蘸取供試品，在取鉑絲，用鹽酸潮濕后，蘸取供試品，在無(wú)色火焰中熄滅，使火焰顯出特殊的顏色。無(wú)色火焰中熄滅，使火焰顯出特殊的顏色。在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，加熱使供試品分在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下，加熱使供試品分解，生成有特殊氣味的氣體。解，生成有特殊氣味的氣體。 二化學(xué)鑒別法二化學(xué)鑒別法2.2.濕法濕法 呈色或褪色反響呈色或褪色反響 沉淀生成反響沉淀生成反響 熒光反響熒光反響 氣體生成反響氣體生成反響 三氯化鐵呈色反響三氯化鐵呈色反響-酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基酚羥基或水解后產(chǎn)生

7、酚羥基異羥肟酸鐵反響異羥肟酸鐵反響-多為芳酸及其酯類、酰胺類多為芳酸及其酯類、酰胺類 茚三酮呈色反響茚三酮呈色反響-脂肪氨基脂肪氨基 重氮化重氮化- -巧合顯色反響巧合顯色反響-芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基氨基氧化復(fù)原顯色反響及其它顏色反響氧化復(fù)原顯色反響及其它顏色反響 常見(jiàn)的呈色反響常見(jiàn)的呈色反響與重金屬離子的沉淀反響與重金屬離子的沉淀反響-如巴比妥類藥物如巴比妥類藥物與銅鹽、鈷鹽、銀鹽生成沉淀的反響；與銅鹽、鈷鹽、銀鹽生成沉淀的反響； 與硫氰化鉻銨雷氏鹽的沉淀反響與硫氰化鉻銨雷氏鹽的沉淀反響- -多為生多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽；物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)

8、堿及其鹽； 其它沉淀反響。其它沉淀反響。 常見(jiàn)的呈色反響有：常見(jiàn)的呈色反響有：藥物本身可在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光；藥物本身可在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光；藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見(jiàn)光下發(fā)藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見(jiàn)光下發(fā)射熒光；射熒光；藥物和溴反響后，于可見(jiàn)光下發(fā)射出熒光；藥物和溴反響后，于可見(jiàn)光下發(fā)射出熒光；藥物和間苯二酚反響后，發(fā)射出熒光及藥物藥物和間苯二酚反響后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反響后，發(fā)射熒光。經(jīng)其它反響后，發(fā)射熒光。常見(jiàn)的熒光發(fā)射方式有以下類型常見(jiàn)的熒光發(fā)射方式有以下類型大多數(shù)的胺銨類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺大多數(shù)的胺銨類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處置后，加熱，

9、產(chǎn)生氨胺氣類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處置后，加熱，產(chǎn)生氨胺氣化學(xué)構(gòu)造中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處置后，加熱，發(fā)化學(xué)構(gòu)造中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處置后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體生硫化氫氣體 含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。 常有氣體生成的藥物常有氣體生成的藥物三光譜鑒別法三光譜鑒別法1 1紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法 核對(duì)核對(duì)max和和min； 規(guī)定一定濃度的供試液在規(guī)定一定濃度的供試液在max處的吸收度；處的吸收度； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收

10、系數(shù)法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)法； 規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收度比值法；規(guī)定吸收波長(zhǎng)和吸收度比值法； 經(jīng)化學(xué)處置后，測(cè)定其反響產(chǎn)物的吸收光譜特性。經(jīng)化學(xué)處置后，測(cè)定其反響產(chǎn)物的吸收光譜特性。 2.紅外光譜 鑒別法規(guī)范圖譜對(duì)照法：規(guī)范圖譜對(duì)照法：中國(guó)藥典中國(guó)藥典2019年版年版)BP (2019年版年版)對(duì)照品法：對(duì)照品法： USP (29)。 一種專屬性很強(qiáng)、一種專屬性很強(qiáng)、 運(yùn)用較廣運(yùn)用較廣四色譜鑒別法四色譜鑒別法 1.1.薄層色譜鑒別法薄層色譜鑒別法 采用對(duì)照品或規(guī)范品比較采用對(duì)照品或規(guī)范品比較法，要求二者的法，要求二者的RfRf值一致值一致 ；2.2.高效液相色譜鑒別法高效液相色譜鑒別法 要求供

11、試品和對(duì)照品色要求供試品和對(duì)照品色譜峰的保管時(shí)間應(yīng)一致含量測(cè)定方法為內(nèi)標(biāo)法譜峰的保管時(shí)間應(yīng)一致含量測(cè)定方法為內(nèi)標(biāo)法 ； 3.3.氣相色譜鑒別法氣相色譜鑒別法 4.4.紙色譜鑒別法紙色譜鑒別法 逐漸被薄層色譜法所取代逐漸被薄層色譜法所取代 5.5.高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳五生物學(xué)方法五生物學(xué)方法 對(duì)于某些有特殊生物效應(yīng)的藥物，可根據(jù)藥物的特殊生理活對(duì)于某些有特殊生物效應(yīng)的藥物，可根據(jù)藥物的特殊生理活性將藥物經(jīng)過(guò)各種途徑給予微生物、動(dòng)物或動(dòng)物的離體器官，性將藥物經(jīng)過(guò)各種途徑給予微生物、動(dòng)物或動(dòng)物的離體器官，察看藥理作用以鑒別藥物，多用抗生素及生化藥物的鑒別。察看藥理作用以鑒別藥物，多用抗生素及

12、生化藥物的鑒別。1.1.儀器方法的數(shù)量大大添加，尤其是儀器方法的數(shù)量大大添加，尤其是IRIR和和HPLCHPLC；2.2.制劑廣泛采用制劑廣泛采用IRIR法鑒別；法鑒別；六藥物鑒別方法的新動(dòng)向六藥物鑒別方法的新動(dòng)向二、鑒別實(shí)驗(yàn)與原理二、鑒別實(shí)驗(yàn)與原理一、有機(jī)氟化物一、有機(jī)氟化物取供試品約取供試品約7mg7mg，照氧瓶熄滅法附錄，照氧瓶熄滅法附錄VIIVIIC C進(jìn)展進(jìn)展有機(jī)破壞有機(jī)破壞, ,用水用水20ml20ml與與0.01mol/L0.01mol/L氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液6.5ml6.5ml為為吸收液，待熄滅完全后，充分振搖；取吸收液吸收液，待熄滅完全后，充分振搖；取吸收液2ml2ml，

13、加，加茜素氟藍(lán)試液茜素氟藍(lán)試液0.5ml0.5ml，再加，再加12%12%醋酸鈉的稀醋酸溶液醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2ml0.2ml，用水稀釋至，用水稀釋至4 ml4 ml，加硝酸亞鈰試液，加硝酸亞鈰試液0.5ml0.5ml，即，即顯藍(lán)紫色；同時(shí)做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。顯藍(lán)紫色；同時(shí)做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。 反響式見(jiàn)反響式見(jiàn)p16 p16 二、有機(jī)酸鹽二、有機(jī)酸鹽1 1、水楊酸鹽、水楊酸鹽 加三氯化鐵試液加三氯化鐵試液1 1滴，即顯紫色滴，即顯紫色; ;加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分別，沉淀在醋加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分別，沉淀在醋酸銨試液中溶解。酸銨試液中溶解。 2 2、醋酸鹽、醋酸鹽 加硫酸和乙

14、醇后，加熱，即分解發(fā)生醋酸乙酯的香氣；加硫酸和乙醇后，加熱，即分解發(fā)生醋酸乙酯的香氣；取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液1 1滴，溶液呈深滴，溶液呈深紅色紅色, ,加稀無(wú)機(jī)酸，紅色即退去。加稀無(wú)機(jī)酸，紅色即退去。3.3.苯甲酸鹽苯甲酸鹽 取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液，即生成赭取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液，即生成赭色沉淀；加稀鹽酸，變?yōu)榘咨恋?；色沉淀；加稀鹽酸，變?yōu)榘咨恋恚蝗」┰嚻?，置枯燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭取供試品，置枯燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭化，但析出苯甲酸，在試管?nèi)壁凝結(jié)成白色升華物?；龀霰郊姿?，在試管內(nèi)壁凝結(jié)成白色升華

15、物。 4.4.枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽 加稀硫酸數(shù)滴加稀硫酸數(shù)滴, , 加熱至沸，加高錳酸鉀試液數(shù)滴振加熱至沸，加高錳酸鉀試液數(shù)滴振搖，紫色即消逝；溶液分成兩份，搖，紫色即消逝；溶液分成兩份，1 1份中加硫酸汞試份中加硫酸汞試液液1 1滴滴, ,另另1 1份中逐滴參與溴試液，均生成白色沉淀；份中逐滴參與溴試液，均生成白色沉淀；取供試品的中性溶液，置干凈的試管中，加氨制取供試品的中性溶液，置干凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在管的內(nèi)壁成銀鏡。管的內(nèi)壁成銀鏡。取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亞鐵試取供試品溶液，加醋酸成酸性后，加硫

16、酸亞鐵試液液1 1滴和過(guò)氧化氫試液滴和過(guò)氧化氫試液1 1滴，待溶液退色后，用氫氧滴，待溶液退色后，用氫氧化鈉試液堿化，溶液即顯紫色?；c試液堿化，溶液即顯紫色。5.5.酒石酸鹽酒石酸鹽 四托烷生物堿類四托烷生物堿類 取供試品約取供試品約10mg10mg，加發(fā)煙硝酸，加發(fā)煙硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)爬洌右掖嫉命S色的殘?jiān)?，放冷，加乙? 23 3滴潮濕，加固體滴潮濕，加固體氫氧化鉀一小顆，即顯深紫色。氫氧化鉀一小顆，即顯深紫色。三芳香第一胺類三芳香第一胺類 取供試品約取供試品約50mg50mg，加稀鹽酸，加稀鹽酸1ml,1ml,必要時(shí)漸漸煮沸使必要時(shí)漸漸煮沸使

17、溶解，放冷，加溶解，放冷，加0.1mol/L0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性堿性萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。黃到猩紅色沉淀。五常見(jiàn)無(wú)機(jī)離子的鑒別五常見(jiàn)無(wú)機(jī)離子的鑒別1.1.鈉鹽鈉鹽焰色反響焰色反響 火焰顯黃色火焰顯黃色 取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。液，即生成黃色沉淀。 2.2.鉀鹽鉀鹽焰色反響：焰色反響顯紫色，但有少量鈉鹽混焰色反響：焰色反響顯紫色，但有少量鈉鹽混存時(shí)，須隔藍(lán)色玻璃透視存時(shí)，須隔藍(lán)色玻璃透視 ；取供試品，加熱熾灼，除去能夠含有的

18、銨鹽，取供試品，加熱熾灼，除去能夠含有的銨鹽，放冷后，加水溶解，再加放冷后，加水溶解，再加0.1%0.1%四苯硼鈉溶液與醋四苯硼鈉溶液與醋酸，即生成白色沉淀。酸，即生成白色沉淀。3.3.鈣鹽鈣鹽熄滅火焰顯磚紅色熄滅火焰顯磚紅色 取供試品溶液取供試品溶液120120，加甲基紅指示液，加甲基紅指示液2 2滴，滴，用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試用氨試液中和，再滴加鹽酸至呈酸性，加草酸銨試液，即生成白色沉淀；分別，沉淀不溶于醋酸，但液，即生成白色沉淀；分別，沉淀不溶于醋酸，但可溶于鹽酸?？扇苡邴}酸。焰色反響焰色反響焰色反響：鋇的火焰光譜在可見(jiàn)光區(qū)有焰色反響：鋇的火焰光譜在可見(jiàn)光區(qū)有533.56533.56、513513、488 nm488 nm幾條主要譜線，其中以幾條主要譜線，其中以533.56 nm533.56 nm波長(zhǎng)的譜線波長(zhǎng)的譜線最強(qiáng)最強(qiáng), , 故鋇鹽的熄滅火焰顯黃綠色，用綠色玻璃透視故鋇鹽的熄滅火焰顯黃綠色，用綠色玻璃透視火焰顯藍(lán)色?；鹧骘@藍(lán)色。取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分別，取供試品溶液，加稀硫酸，即生成白色沉淀；分別，沉