微生物大腸菌群檢驗(yàn)原始記錄

1、檢 驗(yàn) 原 始 記 錄編號：報(bào)告類別：微生物共 頁 項(xiàng)目：大腸菌群coliforms檢驗(yàn)地點(diǎn)：樣品名稱： 樣品編號： 樣品狀態(tài)： 符合檢驗(yàn)要求； 其他 環(huán)境條件： 實(shí)驗(yàn)依據(jù)及步驟GB4789.3-2016樣品稀釋 固體和半固體樣品：稱取25g樣品置盛有225ml生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的無菌均質(zhì)容器內(nèi)均質(zhì)，或放入盛有225ml稀釋液的無菌均質(zhì)袋中拍擊式均質(zhì)器拍打，制成為1:10樣品勻液。依次進(jìn)行10倍遞增稀釋。 液體樣品：以無菌吸管吸取25ml樣品置盛有225ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠）中混勻，為1:10樣品勻液。樣品勻液的ph應(yīng)在6.5-7.5之間，必

2、要時(shí)分別用1mol/lNaOH或1mol/lHcL調(diào)節(jié)。 取1mL110稀釋勻液沿管壁緩緩注入9ml磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用一支無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成1:100樣品勻液。 按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸量管。從樣品勻液制備到樣品接種完畢，全過程不得超過15min。初發(fā)酵試驗(yàn)（9管法）每個(gè)樣品，選擇3個(gè)適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯（大腸菌群測定：如果超過1ml，則用雙料LST肉湯）361 培養(yǎng)24h2h，觀察

3、倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生。產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至482h，產(chǎn)期進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)（證實(shí)試驗(yàn)）用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠糖膽鹽肉湯（BGLB）管中，361培養(yǎng)48h2h，觀察產(chǎn)氣情況。 數(shù)據(jù)分析與結(jié)果一、 菌落計(jì)數(shù)根據(jù)證實(shí)為大腸菌群的陽性管數(shù)，查MPN檢索表，報(bào)告大腸菌群的最可能數(shù)。二、 緩沖液1.磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀 34.0g 蒸餾水500ml （稀釋液需要1000ml）貯存液：將34.0g磷酸二氫鉀溶于500ml蒸餾水中，用大約175ml的1mol/l氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph至7.2，用蒸餾水稀釋至1000ml后貯

4、存冰箱。稀釋液：取貯存液1.25ml用蒸餾水稀釋至1000ml分裝于適宜容器，121高壓滅菌15min。2.無菌生理鹽水氯化鈉 8.5g 蒸餾水1000ml 將稱取好的氯化鈉溶于1000ml蒸餾水中，121高壓滅菌15min。3.PH調(diào)節(jié)劑1mol/l氫氧化鈉溶液稱取40g氫氧化鈉溶于1000ml無菌蒸餾水中。1mol/l HcL溶液移取Hcl 90ml，用無菌蒸餾水稀釋至1000ml。 三、 微生物限量采樣方案（根據(jù)GB 4789.1-2016）1. 采樣方案分為二級和三級方案，二級采樣方案設(shè)有n、c、m值，三級采樣方案設(shè)有n、c、m和M值。 n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù) c：最大可允許

5、超出m值的樣品數(shù) m：微生物指標(biāo)可接受水平的限量值 M：微生物指標(biāo)的最高安全限量值 2. 例：n=5,c=2,m=1cfu/g,M=10cfu/g,即從一批產(chǎn)品中采集5個(gè)樣品，若5個(gè)樣品的檢測結(jié)果均小于或等于m值（1cfu/g），則這種情況是允許的；若2個(gè)樣品的結(jié)果（X）位于m值和M值之間（1cfu/gX10cfu/g），則這種情況也是允許的；若有3個(gè)及以上樣品的檢驗(yàn)結(jié)果位于m和M之間，則這種情況是不允許的；若有任一樣品的檢驗(yàn)結(jié)果大于M（10cfu/g），則這種情況也是不允許的。檢測記錄：校對：檢測日期：菌落總數(shù)檢樣原始記錄產(chǎn)品名稱檢測日期時(shí)間試樣編號初發(fā)酵試驗(yàn)未產(chǎn)氣培養(yǎng)482h復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)（接種BGLB管）結(jié)果各試樣菌落分析/個(gè)結(jié)論稀釋液及產(chǎn)氣管數(shù)稀釋液及產(chǎn)氣管數(shù)接種日