實(shí)驗(yàn)二 影響酶促反應(yīng)的因素

1、精選課件1實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二溫度、溫度、pHpH值、激活值、激活劑和抑制劑和抑制劑對(duì)酶活劑對(duì)酶活性的影響性的影響及特異性及特異性精選課件2一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康? 1通過實(shí)驗(yàn)，觀察溫度、通過實(shí)驗(yàn)，觀察溫度、pHpH值、激活劑與值、激活劑與抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。2 2能運(yùn)用所學(xué)的生化知識(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行能運(yùn)用所學(xué)的生化知識(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行正確的分析。正確的分析。精選課件3二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 利用淀粉及其水解產(chǎn)物的顏色反應(yīng)，來比較唾液淀粉酶在利用淀粉及其水解產(chǎn)物的顏色反應(yīng)，來比較唾液淀粉酶在不同條件下催化淀粉水解的程度，從而判斷溫度、不同條件下催化淀粉水解的程度，從

2、而判斷溫度、pHpH、激、激動(dòng)劑和抑制劑對(duì)酶的活性影響。動(dòng)劑和抑制劑對(duì)酶的活性影響。淀粉淀粉糊精糊精麥芽糖和葡萄糖麥芽糖和葡萄糖藍(lán)色藍(lán)色碘碘紫色紫色紅色紅色無色無色無色無色碘碘碘碘精選課件4二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 u在低溫時(shí)，酶活性降低，酶促反應(yīng)速度較慢，甚在低溫時(shí)，酶活性降低，酶促反應(yīng)速度較慢，甚至停止；隨著溫度升高，酶的活性恢復(fù)，反應(yīng)速至停止；隨著溫度升高，酶的活性恢復(fù)，反應(yīng)速度加快；當(dāng)達(dá)到最適溫度時(shí)，酶的活性最大，酶度加快；當(dāng)達(dá)到最適溫度時(shí)，酶的活性最大，酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大。人體內(nèi)大多數(shù)的酶的最適促反應(yīng)速度達(dá)到最大。人體內(nèi)大多數(shù)的酶的最適溫度在溫度在3737左右。溫度過高，酶變性失活

3、，酶促左右。溫度過高，酶變性失活，酶促反應(yīng)速度下降，甚至停止。反應(yīng)速度下降，甚至停止。u每種酶都有最適的每種酶都有最適的pHpH值，在最適值，在最適pHpH值時(shí)，酶的活值時(shí)，酶的活性最大，酶促反應(yīng)速度最快；偏離酶的最適性最大，酶促反應(yīng)速度最快；偏離酶的最適pHpH均均可引起酶蛋白變性而降低或失去活性。唾液淀粉可引起酶蛋白變性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最適酶的最適pHpH值為值為6.86.8。u氯離子對(duì)唾液淀粉酶有激活作用；銅離子對(duì)唾液氯離子對(duì)唾液淀粉酶有激活作用；銅離子對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用。淀粉酶有抑制作用。精選課件5三、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)材料u1.1%1.1%淀粉溶液淀粉溶液 取可溶性淀

4、粉取可溶性淀粉1g, 1g, 加加5ml5ml蒸餾水蒸餾水, , 調(diào)成糊狀調(diào)成糊狀, , 再加再加80ml80ml蒸餾水蒸餾水, , 加熱并不斷攪拌加熱并不斷攪拌, , 使其充分溶解使其充分溶解, , 放冷放冷, , 最后用蒸餾水稀釋至最后用蒸餾水稀釋至100ml100ml。u2.pH3.02.pH3.0緩沖液緩沖液 取取0.2mmol/LNa2HPO40.2mmol/LNa2HPO4溶液溶液205ml205ml，0.1mol/L0.1mol/L檸檬酸溶液檸檬酸溶液795ml, 795ml, 混合即成混合即成. .u3.pH6.83.pH6.8緩沖液緩沖液 取取0.2mmol/LNa2HPO4

5、0.2mmol/LNa2HPO4溶液溶液772ml772ml，0.1mol/L0.1mol/L檸檬酸溶液檸檬酸溶液228ml, 228ml, 混合即成混合即成. .u4.pH8.04.pH8.0緩沖液緩沖液 取取0.2mmol/LNa2HPO40.2mmol/LNa2HPO4溶液溶液972ml972ml，0.1mol/L0.1mol/L檸檬酸溶液檸檬酸溶液28ml28ml混合即成混合即成. .精選課件65.0.9%NaCl溶液溶液 6.1% CuSO4溶液溶液7.碘液碘液 9.試管架試管架 11.試管夾試管夾 12.滴管滴管 13.白瓷板白瓷板 14.恒溫水浴箱恒溫水浴箱 15.電爐電爐 16

6、.燒杯燒杯精選課件7【注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)】1.注意實(shí)驗(yàn)器材的干凈，避免雜質(zhì)影響反應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)器材的干凈，避免雜質(zhì)影響反應(yīng)結(jié)果結(jié)果2.各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制，保證一致。各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格控制，保證一致。精選課件8四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法 稀釋唾液制備稀釋唾液制備 用水漱口，含蒸餾水咀嚼用水漱口，含蒸餾水咀嚼2 2分鐘分鐘后，把唾液吐進(jìn)燒杯中備用。后，把唾液吐進(jìn)燒杯中備用。（注：唾液淀粉酶（注：唾液淀粉酶活性具有個(gè)體差異，按下述各實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，活性具有個(gè)體差異，按下述各實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，有部分同學(xué)可能失敗，可重新操作，但在重做過有部分同學(xué)可能失敗，可重新操作，但在重做過程中，要根據(jù)第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果改

7、變稀釋唾液的用程中，要根據(jù)第一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果改變稀釋唾液的用量，反應(yīng)太慢，則增加稀釋唾液用量，如果反應(yīng)量，反應(yīng)太慢，則增加稀釋唾液用量，如果反應(yīng)太快，則減少稀釋唾液的用量）太快，則減少稀釋唾液的用量） 煮沸唾液的制備煮沸唾液的制備 取上述唾液約取上述唾液約5ml5ml，放入沸水中，放入沸水中煮沸煮沸5 5分鐘，取出備用。分鐘，取出備用。精選課件9（一）溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響（一）溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管管 號(hào)號(hào) 123緩沖液（緩沖液（pH6.8）20滴滴20滴滴20滴滴1%淀粉溶液淀粉溶液10滴滴10滴滴10滴滴把三支管溶液搖勻，然后分別放至相應(yīng)的溫度中水浴預(yù)溫把三支管溶液搖勻，然后分別放至相

8、應(yīng)的溫度中水浴預(yù)溫預(yù)溫溫度預(yù)溫溫度 0 37 37預(yù)溫預(yù)溫5分鐘后取出，繼續(xù)向各管加入相應(yīng)唾液分鐘后取出，繼續(xù)向各管加入相應(yīng)唾液稀釋唾液稀釋唾液10滴滴10滴滴 煮沸唾液煮沸唾液10滴滴把三支管搖勻，然后分別放至相應(yīng)的溫度中水浴把三支管搖勻，然后分別放至相應(yīng)的溫度中水浴10分鐘，加碘分鐘，加碘2滴滴水浴溫度水浴溫度 03737結(jié)果與分析結(jié)果與分析精選課件10 取白瓷板一塊，向各凹分別加取白瓷板一塊，向各凹分別加1 1滴碘液，每滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從隔半分鐘用滴管或玻棒從2 2號(hào)管取溶液號(hào)管取溶液1 1滴，滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，

9、直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液向各管加碘液1 1滴，搖勻觀察顏色變化滴，搖勻觀察顏色變化( (切切記勿搖動(dòng)記勿搖動(dòng)) )。搖勻再觀察。搖勻再觀察。精選課件11（二）（二）pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管號(hào)管號(hào)1231%淀粉溶液淀粉溶液10滴滴10滴滴10滴滴pH5.0緩沖液緩沖液10滴滴pH6.8緩沖液緩沖液10滴滴pH8.0緩沖液緩沖液10滴滴稀釋唾液稀釋唾液5滴滴5滴滴5滴滴把三支管搖勻，然后放至把三支管搖勻，然后放至 37水浴水浴10分鐘，加碘分鐘，加碘2滴搖勻滴搖勻結(jié)果與分析結(jié)果與分析精選課件12 將各管混勻，放進(jìn)將各

10、管混勻，放進(jìn)3737水浴箱水浴箱中保溫。中保溫。 取白瓷板一塊，向各凹分別加取白瓷板一塊，向各凹分別加1 1滴碘液，每隔半分鐘用滴管滴碘液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從或玻棒從2 2號(hào)管取溶液號(hào)管取溶液1 1滴，加滴，加到已加有碘液的小凹中，觀察到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液加碘液1 1滴，搖勻觀察顏色變滴，搖勻觀察顏色變化?；?。精選課件13（三）激活劑與抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響（三）激活劑與抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響管號(hào)管號(hào)12341%淀粉溶液淀粉溶液10滴滴10滴滴10滴滴10滴滴pH6

11、.8緩沖液緩沖液10滴滴10滴滴10滴滴10滴滴蒸餾水蒸餾水2滴滴氯化鈉溶液氯化鈉溶液2滴滴CuSO4溶液溶液2滴滴Na2SO4溶液溶液2滴滴稀釋唾液稀釋唾液5滴滴5滴滴5滴滴5滴滴把三支管搖勻，然后放至把三支管搖勻，然后放至 37水浴水浴10分鐘，加碘分鐘，加碘2滴搖勻滴搖勻結(jié)果與分析結(jié)果與分析精選課件14 將各管搖勻，放進(jìn)將各管搖勻，放進(jìn)3737水水浴箱中保溫。取白瓷板一浴箱中保溫。取白瓷板一塊，向各凹分別加塊，向各凹分別加1 1滴碘滴碘液，每隔半分鐘用滴管或液，每隔半分鐘用滴管或玻棒從玻棒從2 2號(hào)管取溶液號(hào)管取溶液1 1滴，滴，加到已加有碘液的小凹中，加到已加有碘液的小凹中，觀察顏色變

12、化，直至與碘觀察顏色變化，直至與碘不呈色時(shí)（即只顯棕黃色不呈色時(shí)（即只顯棕黃色時(shí)），向各管加碘液時(shí)），向各管加碘液1 1滴，滴，搖勻，觀察各管顏色變化。搖勻，觀察各管顏色變化。 激活劑與抑制劑激活劑與抑制劑精選課件15激活劑與抑制劑激活劑與抑制劑五、思考題五、思考題1. 什么是酶的最適溫度？什么是酶的最適溫度？2. 什么是酶的最適什么是酶的最適pH?3. 激活劑與抑制劑對(duì)酶活性影激活劑與抑制劑對(duì)酶活性影 響實(shí)驗(yàn)中設(shè)置第四管的作用響實(shí)驗(yàn)中設(shè)置第四管的作用 是什么？是什么？4. 什么是酶的特異性？什么是酶的特異性？精選課件16（四）（四） 酶的專一性對(duì)酶促反應(yīng)的影響。酶的專一性對(duì)酶促反應(yīng)的影響。加入物加入物1號(hào)管號(hào)管2號(hào)管號(hào)管3號(hào)管號(hào)管PH值值6.8緩沖