化驗基礎知識[2]

1、目錄第五章 氧化還原滴定法第六章 配位滴定法（絡合滴定法）第七章 沉淀滴定法銀量法 第三部分 儀器分析法第一章 比色法第二章 氣相色譜法 第三章 高效液相色譜法第一部分 基本常識第一章 允許差一、準確度和誤差 1.準確度 系指測得結果與真實值接近的程度。 2.誤差 系指測得結果與真實值之差。第一章 允許差二、精密度和偏差 1.精密度 系指在同一實驗中，每次測得的結果與它們的平均值接近的程度。 2.偏差 系指測得的結果與平均值之差。第一章 允許差三、誤差和偏差 由于“真實值”無法準確知道，因此無法計算誤差。在實際工作中，通常是計算偏差（或用平均值代替真實值計算誤差，其結果仍然是偏差）。第一章 允

2、許差四、絕對偏差和相對偏差 絕對偏差 = 測得值平均值 絕對偏差 相對偏差 = 100% 平均值第二章 有效數(shù)字的處理一、有效數(shù)字1.在分析工作中實際能測量到的數(shù)字就稱為有效數(shù)字。2.在記錄有效數(shù)字時，規(guī)定只允許數(shù)的末位欠準，而且只能上下差1。第二章 有效數(shù)字的處理二、有效數(shù)字修約規(guī)則用“四舍六入五成雙”規(guī)則舍去過多的數(shù)字。即當尾數(shù)4時，則舍；尾數(shù)6時，則入；尾數(shù)等于5時，若5前面為偶數(shù)則舍，為奇數(shù)時則入。當5后面還有不是零的任何數(shù)時，無論5前面是偶或奇皆入。 例如：將下面左邊的數(shù)字修約為三位有效數(shù)字第二章 有效數(shù)字的處理三、有效數(shù)字運算法則 1.在加減法運算中，每數(shù)及它們的和或差的有效數(shù)字的

3、保留，以小數(shù)點后面有效數(shù)字位數(shù)最少的為標準。在加減法中，因是各數(shù)值絕對誤差的傳遞，所以結果的絕對誤差必須與各數(shù)中絕對誤差最大的那個相當。 例如：2.03750.074539.54 = ？39.54是小數(shù)點后位數(shù)最少的，在這三個數(shù)據(jù)中，它的絕對誤差最大，為0.01，所以應以39.54為準，其它兩個數(shù)字亦要保留小數(shù)點后第二位，因此三數(shù)計算應為：第二章 有效數(shù)字的處理2.在乘除法運算中，每數(shù)及它們的積或商的有效數(shù)字的保留，以每數(shù)中有效數(shù)字位數(shù)最少的為標準。在乘除法中，因是各數(shù)值相對誤差的傳遞，所以結果的相對誤差必須與各數(shù)中相對誤差最大的那個相當。 例如：13.920.01121.9723 = ？ 0

4、.0112是三位有效數(shù)字，位數(shù)最少，它的相對誤差最大，所以應以0.0112的位數(shù)為準，即： 3.分析結果小數(shù)點后的位數(shù)，應與分析方法精密度小數(shù)點后的位數(shù)一致。第二部分 化學分析法第一章 化驗室常用玻璃儀器一、常用玻璃儀器的主要用途、使用注意事項名 稱 主要用途 使用注意事項 量筒、量杯 粗略地量取一定體積的液體用 不能加熱，不能在其中配制溶液，不能在烘箱中烘烤，操作時要沿壁加入或倒出溶液 滴定管（25 50 100ml） 容量分析滴定操作；分酸式、堿式 活塞要原配；漏水的不能使用；不能加熱；不能長期存放堿液；堿式管不能放與橡皮作用的滴定液 燒杯 配制溶液、溶解樣品等加熱時應置于石棉網上，使其受

5、熱均勻，一般不可燒干 錐形瓶 加熱處理試樣和容量分析滴定 除有與上相同的要求外，磨口錐形瓶加熱時要打開塞，非標準磨口要保持原配塞 試劑瓶：細口瓶、廣口瓶、下口瓶 細口瓶用于存放液體試劑；廣口瓶用于裝固體試劑；棕色瓶用于存放見光易分解的試劑 不能加熱；不能在瓶內配制在操作過程放出大量熱量的溶液；磨口塞要保持原配；放堿液的瓶子應使用橡皮塞，以免日久打不開 第二章 重量法一、定義 根據(jù)單質或化合物的重量，計算出在供試品中的含量的定量方法稱為重量法二、原理 采用不同方法分離出供試品中的被測成分，稱取重量，以計算其含量。按分離方法不同，重量分析分為沉淀重量法、揮發(fā)重量法和提取重量法。【？】本實驗室那些實

6、驗用到重量法？三、注意事項1.沉淀法測定，取供試品應適量。取樣量多，生成沉淀量亦較多，致使過濾洗滌困難，帶來誤差；取樣量教少，稱量及各操作步驟產生的誤差較大，使分析的準確度較低。 2.不具揮發(fā)性的沉淀劑，用量不宜過量太多，以過量2030%為宜。過量太多，生成絡合物，產生鹽效應，增大沉淀的溶解度。 3.加入沉淀劑時要緩慢，使生成較大顆粒。 4.沉淀的過濾和洗滌，采用傾注法。傾注時應沿玻璃棒進行。沉淀物可采用洗滌液少量多次洗滌。三、注意事項5.沉淀的干燥與灼燒，洗滌后的沉淀，除吸附大量水分外，還可能有其他揮發(fā)性雜質存在，必須用烘干或灼燒的方法除去，使之具有固定組成，才可進行稱量。干燥溫度與沉淀組成

7、中含有的結晶水直接相關，結晶水是否恒定又與換算因數(shù)緊密聯(lián)系，因此，必須按規(guī)定要求的溫度進行干燥。 灼燒這一操作是將帶有沉淀的濾紙卷好。置于已灼燒至恒重的坩堝中，先在低溫使濾紙?zhí)炕?，再高溫灼燒。灼燒后冷卻至適當溫度，再放入干燥器繼續(xù)冷至室溫，然后稱量。第三章 滴定分析法（容量分析法）一、滴定分析法的原理與種類 滴定分析法是將一種已知準確濃度的試劑溶液，滴加到被測物質的溶液中，直到所加的試劑與被測物質按化學計量定量反應為止，根據(jù)試劑溶液的濃度和消耗的體積，計算被測物質的含量。 這種已知準確濃度的試劑溶液稱為滴定液。 將滴定液從滴定管中加到被測物質溶液中的過程叫做滴定。 一、滴定分析法的原理與種類當

8、加入滴定液中物質的量與被測物質的量按化學計量定量反應完成時，反應達到了計量點。 在滴定過程中，指示劑發(fā)生顏色變化的轉變點稱為滴定終點。 滴定終點與計量點不一定恰恰符合，由此所造成分析的誤差叫做滴定誤差。一、滴定分析法的原理與種類 （1）直接滴定法 用滴定液直接滴定待測物質，以達終點。 （2）間接滴定法 直接滴定有困難時常采用以下兩種間接滴定法來測定：a 置換法 利用適當?shù)脑噭┡c被測物反應產生被測物的置換物，然后用滴定液滴定這個置換物。 銅鹽測定：Cu2+2KICu2K+I2用Na2S2O3滴定液滴定、以淀粉指示液指示終點 b 回滴定法（剩余滴定法） 用定量過量的滴定液和被測物反應完全后，再用另

9、一種滴定液來滴定剩余的前一種滴定液。第四章 水溶液酸堿中和法（中和法）一、定義 以酸堿中和反應為基礎的容量分析法稱為酸堿中和法（亦稱酸堿滴定法）。二、原理 以酸（堿）滴定液，滴定被測物質，以指示劑或儀器指示終點，根據(jù)消耗滴定液的濃度和毫升數(shù)，可計算出被測藥物的含量。 反應式： H+ OH- H2O三、酸堿指示劑指示劑的變色原理 常用的酸堿指示劑是一些有機弱酸或弱堿，它們在溶液中能或多或少地電離成離子，而且在電離的同時，本身的結構也發(fā)生改變，并且呈現(xiàn)不同的顏色。 弱酸指示劑 HIn In- H+ 酸式色 堿式色 弱堿指示劑 InOH In+ OH- 堿式色 酸式色常用指示劑及變色范圍酚酞 無色8

10、.0-10.0紅溴酚藍 黃3.0-4.6紫 溴甲酚綠 黃3.8-5.4藍 第五章 氧化還原滴定法一、定義 氧化還原法 以氧化還原反應為基礎的容量分析法。二、原理 氧化還原反應是反應物間發(fā)生電子轉移。 示意式： 還原劑1 ne 氧化劑1 氧化劑2 ne 還原劑2 還原劑1 氧化劑2 氧化劑1 還原劑2 氧化還原反應按照所用氧化劑和還原劑的不同，常用的方法有碘量法、高錳酸鉀法、鈰量法和溴量法等。第六章 配位滴定法（絡合滴定法）一、定義 以絡合反應為基礎的容量分析法，稱為絡合滴定法二、原理 乙二胺四乙酸二鈉液（EDTA）能與許多金屬離子定量反應，形成穩(wěn)定的可溶性絡合物，依此，可用已知濃度的EDTA滴

11、定液直接或間接滴定某些藥物，用適宜的金屬指示劑指示終點。根據(jù)消耗的EDTA滴定液的濃度和毫升數(shù)，可計算出被測藥物的含量。第七章 沉淀滴定法銀量法一、定義 以硝酸銀液為滴定液，測定能與Ag+反應生成難溶性沉淀的一種容量分析法。二、原理 以硝酸銀液為滴定液，測定能與Ag+生成沉淀的物質，根據(jù)消耗滴定液的濃度和毫升數(shù)，可計算出被測物質的含量。 反應式： Ag+ X- AgX X-表示Cl-、Br-、I-、CN-、SCN-等離子。第三部分 儀器分析法第一章 比色法一、原理及適用范圍 在可見光區(qū)，除某些物質有吸收外，很多物質本身并沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后，根據(jù)顏色深淺與

12、濃度成正比關系，則可用比色法測定含量。第一章 比色法二、儀器 可見分光光度計（或比色計）其應用波長范圍為400850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源（光源）、色散系統(tǒng)（或濾光片）、檢測器系統(tǒng)、顯示系統(tǒng)、記錄器及吸收池等部件組成。使用前應校正測定波長并按儀器說明書進行操作。第二章 氣相色譜法一、原理 氣相色譜法的流動相為氣體，稱為載氣；色譜柱分為填充柱和毛細管柱兩種。填充柱內裝吸附劑、高分子多孔小球或涂漬固定液的載體；毛細管柱內壁涂漬或交聯(lián)固定液。注入進樣口的供試品被加熱氣化，并被載氣帶入色譜柱，在柱內各成分被分離后先后進入檢測器，色譜信號用記錄儀或數(shù)據(jù)處理器記錄。第二章 氣相色譜法二、適用范圍 氣

13、相色譜法是一種分離分析方法，適用于含揮發(fā)性或經裂解、衍生化等能氣化的藥品及多組分混合物的定性、定量分析。三、儀器 氣相色譜儀主要由氣路系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、記錄器、顯示器及數(shù)據(jù)處理機（或兼有組分收集系統(tǒng)）等組成。 第三章 高效液相色譜法一、原理 高效液相色譜法是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相，壓入裝有固定相的色譜柱，經進樣閥注入供試品，由流動相帶入柱內，在柱內各成分被分離后，依次進入檢測器，色譜信號由記錄儀或積分儀記錄。第三章 高效液相色譜法二、適用范圍 高效液相色譜法是一種分離分析方法，適用于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物以及

14、離子型化合物等的定性、定量分析。中國藥典主要用于藥品的含量測定、有關物質檢查、雜質限度檢查和鑒別等。三、儀器 高效液相色譜儀主要由輸液泵系統(tǒng)、進樣器系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、記錄器、顯示器及數(shù)據(jù)處理機（或兼有組分收集系統(tǒng)）等組成。使用時應按儀器的說明書進行操作。 第三章 高效液相色譜法注意事項 1.雖然泵能耐壓6000PSI的壓力，但不要使泵處于4000PSI以上的壓力為宜。 2.安裝及拆卸色譜柱時應注意柱的連接方向，千萬不能接反。否則可能導致柱效降低，甚至損壞色譜柱。 3.嚴禁開空泵。在無流動相通過時不要扳動進樣閥的操作桿，使用時要注意盡可能少扳動，以免磨損內部的密封墊圈。 4.為了延長檢測器燈

15、源的使用壽命，在色譜泵穩(wěn)定后再打開檢測器電源開關，分析結束后立即關閉檢測器。 5.應使用高純度、高質量的溶劑和試劑。 第三章 高效液相色譜法6.避免pH值超限，pH值應控制在2.27.5之間。pH值偏低或偏高都會腐蝕液相系統(tǒng)的不銹鋼材料；破壞色譜柱填料的結構，使填料失活。7.色譜柱溫不能超過規(guī)定要求，柱溫過高會加速色譜柱填料老化，破壞其結構。 8.使用所有溶劑必須是互溶的。這對于緩沖流動相來說是非常重要的，鹽類的析出會很快損壞要維護的部件。9.流動相首選甲醇-水系統(tǒng)，如經試用不適合時，再選用其他溶劑。為保護儀器，應盡可能少用含有緩沖液的流動相。如果流動相中含有緩沖劑，每日使用后應用不含緩沖劑的流動相或新鮮純化水將儀器管路、泵、進樣閥、色譜柱及檢測池等充分沖洗干凈。 第三章 高效液相色譜法10.如果液相系統(tǒng)使用未過濾的洗脫液、注入未過濾的樣品、系統(tǒng)中滯留緩沖洗脫液都能堵塞系統(tǒng)或劃傷泵柱塞。所以流動相、樣品使用前必須用0.45m微孔濾膜過濾；流動相并先經脫氣處理后使用。停泵后決不允許緩沖洗脫液滯留在系統(tǒng)中，須用經過濾后的新鮮純化水進行清洗，并保