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1、1 2實實 驗驗 目目 的的l掌握鄰甲苯胺法測定血糖的原理和方法。l掌握在定量分析中的應用3實實 驗驗 原原 理理l本實驗采用臨床上常用的鄰甲苯胺法,利用葡萄糖在熱的醋酸溶液中脫水后與鄰甲苯胺縮合,生成青色的Schiff堿,對波長630nm的光有特征吸收,可比色定量測定。l由于鄰甲苯胺只與醛糖作用而顯色,故此種測定法不受血液中其他還原物質的干擾,測定時也無需去除血漿或血清中的蛋白質。4 原理反應式原理反應式5實實 驗驗 操操 作作一、標準曲線的制備一、標準曲線的制備(標準品梯度稀釋)(標準品梯度稀釋) l取l0ml容量瓶5只,分別編號1,2,3,4,5,依次加入葡萄糖貯存標準液0.5,1.0,

2、2.0,3.0,4.0(ml),再以飽和苯甲酸溶液稀釋至l0ml刻度,混勻。上述溶液l00ml葡萄糖含量分別為50,100,200,300,400(mg)。6二、顯二、顯 色色l取7只試管,編號,按下表操作?;靹蚝螅梅兴≈兄蠓?5min,取出,在冰水浴中冷卻。鄰甲苯胺法測定血糖操作表鄰甲苯胺法測定血糖操作表7比色及結果比色及結果l以“0”號管為對照,用分光光度計在630nm處比色測定,以各管的吸光度為縱坐標,相應管中葡萄糖含量為橫坐標,繪制標準曲線。l根據測定管吸光度,通過標準曲線即查得含量。8附:標準樣品法定量測定附:標準樣品法定量測定 試劑 空白管空白管 標準管標準管 檢測管檢測管 蒸餾水 0.1ml _ _ 鄰甲苯胺 5ml 5ml 5ml 葡萄糖標準品 _ 0.1ml _ 待檢血清 _ _ 0.1mll取3只試管,編號,按下表操作?;靹蚝螅梅兴≈兄蠓?5min,取出,在冰水浴中冷卻。以空白號管為對照,用分光光度計在

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