中藥蓮子心中總生物堿的提取及特征圖譜研究

1、廣東工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文本科畢業(yè)設(shè)計（論文）中藥蓮子心中總生物堿的提取及特征圖譜研究 學(xué) 院 輕工化工學(xué)院 專 業(yè) 制藥工程 年級班級 2011級（3）班 學(xué) 號 3211001806 學(xué)生姓名 練利芳 指導(dǎo)教師 鄭俊霞 2015年6 月中藥蓮子心中總生物堿的提取及特征圖譜研究 練利芳 輕 工 化 工 學(xué) 院 梁華杰 輕工化工學(xué)院復(fù)合支架材料的制備及其性能研究摘 要目的：本實驗是對蓮子心藥材中的化學(xué)成分進行初步分離，并對所得到的總生物堿成分進行HPLC分析，根據(jù)特征圖譜來確定蓮子心總生物堿的種類以及成分。相信隨著科學(xué)技術(shù)的進一步發(fā)展，也會有越來越多的相關(guān)研究，能夠早日實現(xiàn)其最大的藥用價值。方法

2、：經(jīng)過前期查閱文獻從而確定本次實驗方案，本實驗將蓮子心藥材（10.5 kg）粉碎，加12倍80%乙醇，回流提取3次，每次2 h。合并提取液，濃縮至無醇味，濃縮液用1%鹽酸調(diào)至pH = 3，紗布過濾；濾液加氨水調(diào)PH至9，二氯甲烷萃取，濃縮萃取液，得到暗黃色沉淀200 g，即為蓮子心總生物堿部分。對蓮子心總生物堿部分進行HPLC分析，探索總生物堿的HPLC分析條件，確定了最優(yōu)的分析條件。在最優(yōu)的分析條件下，建立了HPLC特征圖譜。 結(jié)果：結(jié)合所得的特征圖譜發(fā)現(xiàn)蓮子心中所含生物堿成分遠遠多于文獻報道的十幾個化合物。這表明其中包含有大量結(jié)構(gòu)未知的生物堿類化合物，需要進一步系統(tǒng)研究。 結(jié)論：通過此次實

3、驗所得到的實驗數(shù)據(jù)，可以為蓮子心總生物堿成分的探索和技術(shù)開發(fā)提供理論基礎(chǔ)，為日后研究蓮子心總生物堿的藥理作用奠定基礎(chǔ)。 關(guān)鍵詞：蓮子心，總生物堿，特征圖譜。AbstractObjective： This experiment is to preliminary separate the chemical composition of Plumula，and HPLC analysis the total alkaloids，which make sure the kind and composition of total alkaloids separate from separate. I

4、believe that with the further development of science and technology , there will be more and more relevant research , as early as possible to achieve its maximum medicinal value.Method: After a preliminary literature review to determine this experimental program , This experiment crushed the Plumula

5、（10.5 kg），added 12 times 80% ethanol to the powder，refluxed and extracted them three times，each time two hours.And combined the extract,concentrated it until we couldt smell the taste of alcohol, the concentrate was adjusted to pH=3 with 1% hydrochloric acid, then filtered with gauze. The filtrate w

6、as adjusted to pH=9 with ammonia, the solvent extraction with dichloromethane,concentrated the extracts, we got 200g dark yellow precipitate., which was the total alkaloids of plumula. After a HPLC analysis to the total alkaloids, explored the analytical conditions of HPLC, made sure the best of the

7、 analytical conditions of HPLC.The characteristic spectrum was bulit in the best of the analytical conditions of HPLC.Results: It was found that the kind of alkaloids in Plumula contained far more than reported in the literature through the result of characteristic spectrum. It indicated that the Pl

8、umula contains a large number of unknown structure of alkaloids. Conclusion:The experimental data obtained in this experiment may provided a theoretical basis for the exploration and technology odevelopment of Plumula total alkaloids, and lay the foundation for future study of the pharmacological ef

9、fects .Keywords : Plumula, total alkaloids, the characteristic spectrum. 廣東工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文目 錄1 緒論12 理論基礎(chǔ)2 2. 1 植物蓮的簡介2 2.1.1 蓮子的藥食同源3 2. 2 蓮子心的研究簡介3 2.2.1 蓮子心的植物基源4 2.2.2 蓮子心的鑒別4 2.2.3 蓮子心的化學(xué)成分4 2.2.4 蓮子心的臨床運用4 2.2.5 蓮子心的發(fā)展瞻望6 2.3 蓮子心總生物堿研究6 2.3.1 生物堿6 2.3.2 蓮子心的生物堿7 2.3.3 蓮子心生物堿的藥理作用82.3.4 蓮子心總生物堿的提取93

10、實驗部分13 3.1 藥材13 3.2 化學(xué)試劑13 3.3 儀器原理介紹133.3.1 超聲清洗器13 3.3.2 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀143.3.3 高效液相色譜儀14 3.4 實驗操作153.4.1蓮子心總生物堿的提取15 3.4.2總生物堿HPLC的分析的研究164 結(jié)果與分析16 4.1總生物堿HPLC的分析的研究.16 4.1.1探究總生物堿HPLC的特征圖譜檢測波長選擇的結(jié)果.16 4.1.2探究優(yōu)化總生物堿HPLC的分析條件的結(jié)果.16 4.2總生物堿特征圖譜的結(jié)果.18 4.3展望.18參考文獻21致謝231. 緒論隨著人們生活水平提高，保健意識增強，蓮子心作為天然保健品已走入了尋常百

11、姓家，用量急劇增加。據(jù)相關(guān)部門對中國30個城市中藥材、保健品、食品三個市場調(diào)查顯示，從1999年至2015年，蓮子心市場需求逐年增加，價格連年上漲。我國蓮子總產(chǎn)量10萬噸左右，從中所得蓮子心據(jù)初步估算約1 500 t1。據(jù)目前研究報道的蓮子心主要成分有生物堿、生物堿類化合物、甾醇類、此外蓮子心中還含有水溶性多糖成分及鋅、銅、鐵、鈣、鎂、鈉、鉀、鎳、錳、鎘等微量元素。通過現(xiàn)代藥理的研究，可以發(fā)現(xiàn)蓮子心具有清心安神，交通心腎，澀精止血等療效，用于治療熱入心包，神昏譫語，心腎不交，失眠遺精，血熱吐血的癥狀。蓮子心自被發(fā)現(xiàn)可入藥以來，憑借其藥效顯著，就一直在中藥中占據(jù)著非常重要的地位。在歷史的醫(yī)書藥典

12、中，因其具有非常高的營養(yǎng)活性和藥用價值而被廣泛應(yīng)用。近一個世紀以來，隨著科技的日益發(fā)達，學(xué)者們對蓮子心生物堿類成分進行了大量的生物活性和體內(nèi)藥物學(xué)等方面的研究。為進一步探明蓮子心中主要化學(xué)成分的類型及結(jié)構(gòu)，也可以為蓮子心生物堿類成分的探索和技術(shù)開發(fā)提供堅實的基礎(chǔ)，為日后研究總生物堿的藥理學(xué)提供支持，實現(xiàn)蓮子心藥用價值的最大化。由于蓮子心產(chǎn)地又遍布全國各地，因此確定其產(chǎn)量相對較大的地區(qū)作為產(chǎn)品開發(fā)的藥材資源提供了便利的條件。本試驗是對蓮子心藥材中的化學(xué)成分進行初步分離，對蓮子心總生物堿部分進行HPLC分析。通過探索總生物堿的HPLC分析條件，確定了最優(yōu)的分析條件：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯

13、度洗脫：0-5-15-40-50 min，40-50-60-80-100 A%。并在最優(yōu)的分析條件下，對總生物堿部分建立HPLC特征圖譜進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蓮子心中所含生物堿成分遠遠多于文獻報道的十幾個化合物。這表明其中包含有大量結(jié)構(gòu)未知的生物堿類化合物，需要進一步系統(tǒng)研究。為早日實現(xiàn)蓮子心的藥用價值最大化提供研究基礎(chǔ)，造福百姓。2.理論基礎(chǔ)2.1植物蓮的簡介我國蓮栽培約有3 000年歷史，自生或栽培于池塘內(nèi)，至今在南北各地均有種植。蓮(Nelumbo nucifera Gaertn)為睡蓮科蓮屬多年生水生草本，原產(chǎn)印度和中國。蓮生于水澤、池塘、湖沼或水田內(nèi)，有野生或栽培。長江流域以“清明”前后

14、最適宜。北方4月下旬均可栽培。若用蓮子種植，5到7月也可種植。栽植地必須保持每天有10小時以上的光照。此外，荷花易被草類等魚類吞食，因此在種植前，應(yīng)先清除湖塘中的有害魚類，并用圍欄加以圍護，以免魚類侵入。我國蓮資源豐富，分布廣泛，種類繁多，開發(fā)潛力巨大。我國蓮的主要品種有：湖南安鄉(xiāng)的湘蓮；福建建寧的建蓮；江西鄱陽的紅花和白花子蓮；江蘇吳江的青蓮子等。蓮的部位分蓮子、荷葉、蓮子心，荷梗、藕節(jié)、蓮須、還有石蓮子等。蓮?fù)ㄉ矶伎扇胨?，夏季的常用藥就有荷葉、蓮子肉、藕節(jié)、蓮子心等等。 （1）荷葉的采收與功效荷葉為蓮的葉，是生水生草本植物。67月花未開放時采收，除去葉柄，曬至七八成，對折成半圓形，曬干。夏

15、季亦用初生嫩葉或鮮葉。荷葉具有清熱解暑，升發(fā)清陽，涼血止血的功效，用于暑熱煩渴，脾虛泄瀉，暑濕泄瀉，便血崩漏。荷葉炭可以收澀化瘀止血，治療多種出血癥及產(chǎn)后血暈，是臨床上必不可少的常用藥。此外，源于荷葉可以去除體內(nèi)蓄存的痰濕，從而達到排毒輕身的效果，具有的減脂輕身的功效，更是深受女性朋友和“三高”人群的青睞。 （2）蓮肉的形狀與功效在夏末初秋的時節(jié)，街頭小巷買到的新鮮的蓮蓬，掰開墨綠色的蓮蓬摳出嫩綠色的蓮子，再剝開那層嫩綠色的外皮就是蓮子肉了。新鮮的蓮子肉水吃起來有淡淡甜味，清新的氣息充盈于口腔，是一道美味佳肴。曬干的蓮子肉可以作為食材也可以入藥，蓮子肉鮮者甘平，干者甘澀平，具有補脾止瀉，益腎澀

16、精、養(yǎng)心安神的功效。人們餐桌上常吃的蓮藕也是來源根莖。 （3）藕的形狀與功效藕性味甘溫，能健脾開胃、益血補心。故有主補五臟，有消食、止渴、生津的功效。制成藕粉是婦孺和體弱多病者的滋補佳品。蓮須為花的雄蕊，具有固腎澀精的功效，也是一味比較珍貴的中藥。2.1.1蓮子的藥食同源無論是從藥品還是從食品的角度來看，蓮子心的臨床運用前景很廣闊，很具有開發(fā)價值。 藥食同源是蓮子心的重要的特性，中國人民不僅將蓮子與其他藥物配伍治病，更在日常生活中，用蓮子做成蓮子湯、蓮子羹、蓮子糕、蓮子酥、蓮蓉、蓮子罐頭、冰糖蓮子等，還把蓮子和其他食物燉煮成蓮子紅棗湯、蓮子銀耳湯、八寶粥、八寶飯等等。以下都是一些在尋常百姓家常

17、見的食療案例。 （1）蓮子百合麥冬湯 蓮子百合麥冬湯是用蓮子(帶心)、百合各30克、麥門冬12克，加合適的水煎服而成。麥門、百合冬是味甘微寒之品，具有清心寧神的效果。用于病后余熱未盡，心陰不足，心煩口干，心悸不眠脾虛腹瀉，小便淋濁，婦女帶下，尿頻等癥狀。 （2）蓮肉糕蓮子肉、糯米(或大米)各200克炒香，茯苓100克(去皮)，共研為細末加白糖適量，然后一同拌勻，加水至泥狀，蒸熟待冷后壓平均塊即成。茯苓可以補脾利濕藥，味甘平，與蓮子肉、糯米同蒸糕食，增加補脾益胃的功效。用于治療亞健康者脾腎虛弱、飲食不化、大便稀溏等癥狀。 （3）健脾益胃散2白術(shù)、薏苡仁、蓮子肉、扁豆、芡實、山藥各120克、人參1

18、5克(或黨參60克)、茯苓10克，炒后研末即可。食用時可以加適量白糖。每次用1530克，以鮮開水沖調(diào)服。這其實是去甘草的四君子湯，加入甘平補脾之物而成的處方。藥性較平和，能健運脾胃，滋養(yǎng)補益。用于脾虛少食、小兒疳積消瘦、腹瀉、肺結(jié)核病人肺脾兩虛，也用于腎病者納減、少氣、咳嗽的癥狀。類似于上述的關(guān)于蓮的食療法還有很多，這些食品中的蓮子，也能或多或少產(chǎn)生保健作用。豐富的藥食同源的中醫(yī)藥開啟了中醫(yī)食療的大門，它們使中醫(yī)在調(diào)理上跨越了行醫(yī)的限制，進入一個安全，有效，無毒副作用的階段，尤其是在治未病上，發(fā)揮著低成本，高效驗的作用。2.2蓮子心的研究簡介2.2.1蓮子心的植物基源蓮子心（Plumula n

19、elumbinis）又名薏、苦薏等，為睡蓮科植物蓮的成熟的種子干燥幼葉及胚根。干燥的蓮子心，呈細圓柱形，長11.4厘米。直徑約0.2cm,幼葉綠色，有2個分歧，一長一短，卷成箭形，先端反折，兩葉可見2片盾狀卷曲的幼葉。中央的胚芽直立，長約2毫米。基部胚根黃綠色，略呈圓柱形，長33毫米。質(zhì)脆，易折斷，斷面有多數(shù)小孔3。2.2.2蓮子心的鑒別 （1）蓮子心的顯微鑒別方法：藥材粉碎，過60目篩。取粉末制片，按常規(guī)的水合氯醛透化，觀察淀粉粒不加熱；其它特征需加熱，均加甘油1滴，再加蓋玻片封存，置顯微鏡下觀察。粉末特征：粉末灰綠色1。氣微，味苦。子葉：薄壁細胞呈長圓形或多角形，壁稍厚，有的作連珠狀，隱約

20、可見層紋域，紋孑L類三角形或稍延長，排列緊密。葉肉：細胞呈類圓形，壁薄，細胞內(nèi)含淀粉?；蚓G色色素；胚根：細胞長方形，排列整齊，壁菲薄，有的含脂肪油滴。淀粉粒：眾多，單粒橢圓形、廣卵圓形或蚌殼形，長525 m，直徑513 m，臍點點狀、裂縫狀或星狀，層紋不明顯；復(fù)粒少，23分粒。表皮：細胞長方形，徑向延長，壁薄。 （2）蓮子心的理化鑒別 取本品粉末2g,加甲醇30 ml，超聲處理30分鐘， 濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇l ml使溶解，作為供試品溶液。另取蓮心堿高氯酸鹽對照品 ，加甲醇制成每lml含1mg 的溶液,作為對照品溶液。照薄層譜法 （試驗吸取供試品溶液 46 1、對照品溶液4 1 , 分別

21、點于同一硅膠G薄層板上，以三氯烷-乙酸酯-二乙胺( 5 : 4 : 1 )為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照色譜相的位置上，顯相同顏的斑點 3。2.2.3蓮子心的化學(xué)成分 蓮子心藥材存在著很多的有機成分和無機成分，同時又受到產(chǎn)地及各種生態(tài)因子等因素的影響，蓮子心的各種化學(xué)成分跟含量也會有些不同。經(jīng)過科學(xué)家們的漫長探索，蓮子心的成分逐漸被發(fā)現(xiàn)。早在2 0 世紀6 0 年代, 國外已報道蓮子心中含有蓮心堿（liensinine）、異蓮心堿（isoliensinine）、蓮心季銨堿（lotusine)、甲基蓮心堿（neferine）、荷葉堿（nuciferine）

22、、前荷葉堿（pronuciferine）、牛角花堿（lorusine）、甲基紫堇杷靈（methylcorypalline）、去甲基衡州悟烏藥堿（demethylcoclaurine或higenamine）。前三者居多，這三者同屬雙芐基喹啉類生物堿。除上述的生物堿外，還有木犀草素、蘆丁(rutin)4、金絲桃苷(hyperin)等黃酮類化合物1。在后續(xù)的報道中，蓮子心中的弱極性部位還存在棕櫚酸，-谷甾醇、-谷甾醇正辛烷酸酯、-谷甾醇-3-O-D-葡萄糖甙等甾醇類化合物，有機酸類，揮發(fā)油類化合物5-6。另外，多種無機微量元素也在蓮子心中被發(fā)現(xiàn)，如鋅、銅鐵、鈣、鎂、鎳、錳、鎘等1。伴隨著科學(xué)技術(shù)的進

23、一步發(fā)展，人們賦予中藥全新的認識，刺激著人們對中藥的進行更加深入的探究。目前，對蓮子心化學(xué)成分的研究也達到一定的高度，雖然對其中大部分的成分都已經(jīng)較為熟悉，但是還是會有一些還有待認識開發(fā)的成分。因此，在前人的研究基礎(chǔ)上，利用日漸臻美的科學(xué)技術(shù)，將蓮子心的活性成分以及藥用價值完全展現(xiàn)出來，這將是一筆巨大的人類醫(yī)藥財富。2.2.4蓮子心的臨床運用早在本草綱目中就記載蓮子心能“清心去熱”，在中藥中的四氣五味中就有明確地說明：苦，能泄、能燥、能堅。具有清心安神、交通心腎和澀精止血的功效。用于治療熱入心包，神昏譫語，心腎不交，失眠遺精，血熱吐血 。在民間，飲用蓮子心茶有去煩清心，降血壓、治失眠和便秘的作

24、用6。在臨床上，當(dāng)前某些蓮子心中具有藥用功能的成分，已做成制劑運用于臨床，在治療心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、神經(jīng)、精神系統(tǒng)等疾病上有顯著的效果7。，如由蓮子心合杜仲、玄參、牡丹皮、鉤藤組成清心膠囊方，治療高血壓病34例，結(jié)果顯示對輕、中度的高血壓病患者具有比較好的降壓作用，比單用卡托普利組更好；蓮子心在治療血液系統(tǒng)疾病方面，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)常規(guī)西藥，以蓮子心、竹葉、連翹等清心降火，與當(dāng)歸、茯苓、棗仁等配伍可補血、健脾、安神，基本治愈9例，緩解6例，明顯進步3例；蓮子心合黃連清心火配伍半夏、竹茹、石菖蒲、蒼術(shù)、佩蘭、膽南星等化痰開竅、芳香化濁。2.2.5蓮子心的發(fā)展瞻望 蓮子心作為一種歷史悠久的

25、中藥材，為人類在抵制疾病方面奠定了堅實的基礎(chǔ)。實驗研究和臨床實踐都已證實蓮子心生物堿成分能夠起到降壓以及增抗心律失常機能的作用，還具有協(xié)同抗腫瘤作用等功能，從而深化了對蓮子心傳統(tǒng)療效的認識。雖然伴著提取、分離、鑒別技術(shù)的發(fā)展而得到快速的認識，但是還有某些成分是未知的。我國蓮子心資源豐富，開發(fā)潛力巨大，在利用蓮子心這樣具有廣譜、高效、無副作用的天然資源方面，研發(fā)工作還是有欠缺的2。 如果能夠確切地充分探究蓮子心的成分，為蓮子心的藥理作用及作用機制的研究提供了支持，而作用機制又能夠為臨床治療提供堅實的科學(xué)根據(jù)。這將能夠很好的提高對蓮子心的成分的認識以及蓮子心生物堿藥理作用的探究。中藥蓮子心總生物堿

26、成分的提取與特征圖譜研究這一課題，對開發(fā)利用中草藥資源及實現(xiàn)蓮子心藥用價值的最大化有積極的意義。2.3蓮子心總生物堿研究2.3.1生物堿生物堿（alkaloids）是科學(xué)家研究最早的一類有生物活性的重要天然有機化合物6。1803年Derosne首先從鴉片中分離得到第一個生物堿那丁丁之后。科學(xué)家又陸續(xù)從植物中提取到其他生物堿?，F(xiàn)在隨著體天然產(chǎn)物的分離與結(jié)構(gòu)研究的新方法、新技術(shù)的不斷出現(xiàn)，大大加速了生物堿的研究過程。生物堿是一類存在生物體的含氮有機化合物，但是排除了氨基酸、蛋白質(zhì)、肽及核酸、含硝基和亞硝基的化合物如卟啉類的一類化合物。目前，人們共識的生物堿至少應(yīng)具備以下幾個特點:結(jié)構(gòu)中至少含有一個

27、氮原子；一般不包括分子量大于1500的肽類化合物；是具有堿性和酸性的；氮原子來源于氨基酸或嘌呤母核或甾體與萜類的氨基化；排除上述簡單定義中所有例外的化合物。多數(shù)生物堿為結(jié)晶形固體，少數(shù)是無定形的粉末，個別生物堿為液態(tài)，如煙堿、毒藜堿、檳榔堿等。固體生物堿一般具有確定的熔點，極個別的生物堿也會出現(xiàn)雙熔點的現(xiàn)象。生物堿多數(shù)具有苦味，有些味非?？?，如鹽酸小檗堿等；有些生物堿具有辣味，如胡椒堿等；還有一些生物堿具有甜味。生物堿一般為無色，少數(shù)具有較長共軛體系的生物堿而表現(xiàn)出各種顏色。生物堿的生理活性與其旋光性有關(guān)，通常左旋體的生物活性會較右旋體強9。生物堿在不同溶劑中的溶解性能與結(jié)構(gòu)中氮原子的存在狀態(tài)

28、、分子的大小、結(jié)構(gòu)中的官能團的種類和數(shù)目以及溶劑的性質(zhì)等因素有關(guān)。根據(jù)溶解性能可以分為親脂性生物堿和水溶性生物堿，親脂性生物堿易溶于苯、乙醚、鹵代烷烴等親脂性有機溶劑；在甲醇、乙醇、丙酮等親水性有機溶劑也有較好的溶解度；但在水中溶解度是幾乎不溶的。水溶性生物堿數(shù)目很少，主要包括季銨型生物堿及少數(shù)小分子叔胺堿，該類生物堿易溶于水、酸水和堿水，也可溶于甲醇、乙醇和正丁醇等極性大的有機溶劑，在極性小的有機溶劑幾乎不溶解。有些生物堿的結(jié)構(gòu)既具有堿性氮原子，又有酸性基團，如酚羥基、羧基等，這類生物堿稱為兩性生物堿。含酚羥基的兩性生物堿類似于親脂性生物堿，且可溶于苛性堿溶液，如藥根堿、嗎啡等。含羧基的兩性

29、生物堿常形成分子內(nèi)鹽，其溶解性類似于水溶性生物堿，如那碎因等。具有堿性的生物堿能和酸結(jié)合生成鹽，生物堿鹽一般易溶于水，難溶或不溶于親脂性有機溶劑，可溶于甲醇或乙醇。有些生物堿鹽又可溶于親脂性有機溶劑，如奎寧、小檗堿等一些鹵代季酸鹽。2.3.2蓮子心的生物堿 關(guān)于蓮子心的生物堿的研究從19 世紀末開始就一直不斷，富田真雄等人從荷葉里提取分離得到三個單體：荷葉堿、蓮堿以及 O-去甲基荷葉堿3。 早在 60 年代 , 國外就報道了蓮子心中含有蓮心堿，異蓮心堿，荷葉堿，蓮心季銨堿，甲基蓮心堿 ，除生物堿外，還有木犀草素、蘆丁等黃酮類化合物。八十年代我國學(xué)者們，郭毛娣等對大陸產(chǎn)蓮子心中酚性生物總堿進行研

30、究,分離得到了蓮心堿、蓮心季銨堿、異蓮心堿、荷葉堿以及前荷葉堿。還有潘競先等從蓮心中分離到2個新的化合物，經(jīng)過鑒定，確定為S-N-甲基烏藥堿，以及dl-杏黃罌粟堿10。 在分離提取蓮子心生物堿方面，董蘭等采用乙醇從蓮子心中提取蓮心總堿，經(jīng)正交實驗確定醇提取法提取的最佳工藝條件。劉產(chǎn)明等采用正交試驗設(shè)計法，以蓮子心總生物堿產(chǎn)率為指標，同時考察了其他7個條件因素，得出了蓮子心總生物堿最佳提取工藝條件11。黃先菊等用2HCl的酸液滲漉法提取蓮心堿，簡化了工藝，總收率為6。用該方法提取得到的蓮心堿與醇提法(0.57)相當(dāng)，減少了醇提時甲醇、乙醚等有機試劑對人體的危害，更符合工業(yè)化生產(chǎn)的要求,但提取物有

31、較多雜質(zhì)，需有成熟的柱色譜分離方法配合，才能有高純度產(chǎn)品11。 在測定蓮子心生物堿含量方面，張先洲等用高效液相測定了蓮子心中3 種主要生物堿的含量，其中蓮心堿、甲基蓮心堿含量高于異蓮心堿。壽國香等建立離子對RPHPLC法測定十個產(chǎn)地蓮子心中甲基蓮心堿的含量，以蓮心堿、異蓮心堿和甲基蓮心堿各峰都達到基線分離的基礎(chǔ)，大大縮短了分析的時間11。2.3.3蓮子心生物堿的藥理作用關(guān)于蓮子心的研究，關(guān)于蓮子心生物堿的研究是最多的，迄今為止， 文獻報道從蓮子心中分離出11個生物堿類化合物, 且多為異喹啉生物堿12-13。蓮子心的生物堿主要的活性成分是蓮心堿、甲基蓮心堿、蓮心季銨堿、異蓮心堿，我們就著重介紹一

32、下蓮子心這四種主要活性成分的藥理作用。 （1）蓮心堿的藥理作用蓮心堿屬于雙芐基異喹啉類生物堿，有很好的抗心律失常14的作用。能顯著預(yù)防烏頭堿誘發(fā)的大鼠及哇巴因誘發(fā)的豚鼠心律失常；對抗腎上腺素所致豚鼠室顫發(fā)生；還對抗心肌缺血復(fù)灌所致大鼠心律失常有效。 在蓮心堿的酚羥基上引入親脂性基團，經(jīng)過其它修飾，抗心律失常的活性將顯著增強。蓮心堿有短時的降壓作用, 若轉(zhuǎn)變成季銨鹽后, 降壓作用能明顯增強, 作用時間會延長 。蓮心堿能有效地抑制血管平滑肌細胞增殖,經(jīng)研究表明與癌基因調(diào)控的分子生物學(xué)機制有關(guān)14。能顯著減少缺血再灌注大鼠神經(jīng)功能障礙和梗死體積比，保護實驗性缺血。它還具有一定的抗艾滋病的活性11。

33、（2）甲基蓮心堿的藥理作用甲基蓮心堿是從睡蓮科植物蓮成熟種子的芽胚中提取的一種雙芐基異喹啉生物堿。主要藥理作用集中在保護心肌缺血、抗心律失常、再灌注損傷和抗血小板聚集等血管藥理方面。同時，甲基蓮心堿稱得上是有效的植物來源抗氧化劑，具有清除氧自由基的功能，能保護氧自由基帶來的血管內(nèi)皮細胞損傷。在抑制多種誘聚劑誘導(dǎo)高脂血癥患者和健康成人血小板聚集的功效上，甲基蓮心堿的作用效果明顯強于阿斯匹林。甲基蓮心堿以濃度依賴方式顯著抑制體外培養(yǎng)的瘢痕成纖維細胞的增殖，表現(xiàn)為潛在的抗增性瘢痕作用15。 （3）蓮心季銨堿的藥理作用 蓮心季銨堿是一種水溶性單芐基異喹啉類季銨生物堿 ,化學(xué)式為 1 -二甲基-6-羥基

34、-7-甲氧基-10-芐基(對-羥基)四氫異喹啉。 蓮心季銨堿有強而持久的降壓作用16-17，機制可能是增加L型通道的可利用度，從而促鈣內(nèi)流。蓮心季銨堿劑量依賴性地增加離體心肌的收縮力，其正肌作用機制除與 PDE 抑制有關(guān)外,還與延長動作電位時程,促鈣內(nèi)流有關(guān)。它還具有擴張血管,提高血小板環(huán)核苷酸的含量,也能提高心肌及陰莖海綿體的環(huán)核苷酸含量的功能。蓮心季銨堿無明顯的抗心律失常作用，但對綠膿桿菌有一定的抑菌作用。 （4）異蓮心堿的藥理作用 異蓮心堿是從中藥蓮子心分離出來的雙芐基喹啉生物堿單體，主要的藥理作用也是集中在心血管方面。異蓮心堿改善了結(jié)扎性的左心室肥大的纖維化、心臟重量、心功能等，表明其

35、能夠有效地減輕心臟肥厚程度和保護心臟18。 異蓮心堿能清除氧自由基，有體外抗氧化效能，能減輕脂質(zhì)過氧化損傷的作用。王輝等人的實驗研究表明對紅細胞和肝組織細胞及亞細胞膜性結(jié)構(gòu)有保護作用19。2.3.4蓮子心總生物堿的提取 傳統(tǒng)的生物堿的提取方法是建立在生物堿的理化性質(zhì)，尤其是對于不同溶劑包括：堿、酸等的溶解性能的基礎(chǔ)上的。一般來說，絕大多數(shù)生物堿是利用溶劑提取法和離子交換樹脂法進行提取的，少數(shù)具有揮發(fā)性的生物堿可用水蒸氣蒸餾法，具有升華性的生物堿可采用升華法。 (1)溶劑法 溶劑法是常用的方法，一般包括：水或酸水-有機溶劑提取法，醇-酸水-有機溶劑提取法，堿化-有機溶劑提取法等等。水或酸水-有機

36、溶劑提取法：提取原理是生物堿鹽類易溶于水，難溶于有機溶劑；而游離堿易溶于有機溶劑，難溶于水?？芍苯佑?.5%1%的無機酸水來提取。常用的酸有鹽酸、醋酸、硫酸或酒石酸等。可用浸漬法、滲漉法，提取液濃縮到一定體積后，再用石灰乳或氨水等堿化，使生物堿游離出，然后用苯或氯仿萃取，再濃縮萃取液得到親脂性總生物堿。該提取法簡單易行，但是水溶性雜質(zhì)較多，濃縮純化較困難20。醇-酸水-有機溶劑提取法21：本方法是依據(jù)生物堿及其鹽類易溶于甲醇或乙醇，實驗室或工業(yè)一般采用乙醇，提取方式可以是浸漬法、滲漉法或回流法22。先將提取液濃縮至一定體積，加酸水酸化，過濾，所得的濾液分別用氨水或石灰乳堿化，用氯仿、苯等有機溶

37、劑萃取，濃縮萃取液得到中等堿性或強堿性總生物堿。對于酚性生物堿，也可以在酸水溶液分別加1%2%氫氧化鈉，碳酸氫鈉溶液處理，然后用有機溶劑萃取，從而達到初步分離的效果。醇提法的優(yōu)點：醇提取液易濃縮23。堿化-有機溶劑提取法：將植物材料用10%氨水或石灰乳充分潤濕，使其以鹽形式存在的生物堿游離出來，然后用有機溶劑（氯仿等）提取，再濃縮回收溶劑，得到親脂性總生物堿。弱堿性總生物堿的提取除是用水或稀有機酸潤濕外，其余操作都相同。本法所得的總生物堿較純凈，但是存在提取時間較長、溶劑毒性大、易燃，有時候提取不完全的缺點。（2）離子交換樹脂法離子交換樹脂法有很重要的實用價值。許多藥用植物如奎寧、東莨菪堿、咖

38、啡因等都是應(yīng)用此法生產(chǎn)的。該提取法的過程是將酸水提取液與磺酸型陽離子樹脂交換，使生物堿鹽類的陽離子被交換而吸附，一些不能離子化的雜質(zhì)則隨溶液流出，從而分離出來，交換后的樹脂，用堿水或10%氨水堿化。再用有機溶劑如乙醚、氯仿等進行洗脫，回收溶劑，得總生物堿。 （3）沉淀法 季銨生物堿極性大，易溶于水和堿水中，除離子交換樹脂法外，往往很難用一般溶劑法將其提取出來，此時常常采用沉淀法提取。該法提取過程：將季銨生物堿水溶液調(diào)至弱酸性，加入新鮮配制的雷氏銨鹽至不再出現(xiàn)沉淀為止，再過濾取沉淀，抽干后溶于丙酮或乙醇，過濾，濾液中加飽和Ag2SO4，形成雷氏生物堿復(fù)鹽沉淀，再一次過濾，于濾液中加入適量氯化鋇溶

39、液，過濾除去沉淀，最后所得濾液即為季銨生物堿的鹽酸鹽。 （4）超臨界流體萃取法(SFE)該法的提取原理：由于超臨界 CO2是非極性溶劑，所以能夠很好的溶解非極性和分子量較低的極性物質(zhì)，但是較難溶解極性比較強的物質(zhì)。為降低成本，所以在實際操作過程當(dāng)中，常常會在超臨界 CO2中加入另一種能夠改變其極性物質(zhì)。被加入的這種物質(zhì)稱為夾帶劑。日用使用的夾帶劑有主要有甲醇、水、乙醇、丙酮、三氯甲烷、乙酸乙酯等不同極性的物質(zhì)。該法提取效率更高，而且不會有殘留溶劑污染的危險，尤其是活性成分和熱不穩(wěn)定成分不會被分解破壞，還可以有選擇性的提取和分離純化，而且溶劑和溶質(zhì)便以分離。（5）大孔吸附樹脂法大孔吸附樹脂法近年

40、來廣泛用于天然產(chǎn)物有效成分的分離、純化，是分離有機化合物尤其是水溶性化合物的有效手段23。一般操作為：將植物原料用醇類溶劑或酸水提取后，回收溶劑，加水溶解，通過大孔吸附樹脂柱，用少量水洗柱體，然后用含酸水或水醇洗脫，濃縮洗脫液，得到總生物堿。2.3.5蓮子心生物堿的分離采用上述方法提取得到的總生物堿，大多數(shù)情況下是一些結(jié)構(gòu)十分相似的生物堿混合物，如果想了解蓮子心中生物堿的種類和結(jié)構(gòu)，往往需要進一步的分離。我們主要是利用待離分生物堿之間的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)差異來進行生物堿單體的分離。例如：利用生物堿堿性的差異進行分離，如：pH梯度萃取；利用生物堿及其鹽的溶解度不同進行分離；利用生物堿的特殊官能團進行

41、分離等等。由于蓮子心原料中所含生物堿種類繁多，而且它們的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)又比較相近。采用上述的方法往往不能完全地分離，需利用色譜分離法得到生物堿單體。以下就是常用的色譜分離法。 （1）薄層層析法（TLC） 薄層層析法一般可分為離心薄層層析和制備型薄層層析，離心薄層層析可以在較短時間內(nèi)快速分離大量的物質(zhì)，還可以替代制備型的薄層層析，甚至在一些情況下還能替代柱層析；相對離心薄層層析而言，制備型薄層層析較常使用在小量的純化處理上。 （2）硅膠柱層法 硅膠為一多孔性物質(zhì)，分子中具有硅氧烷的交鏈結(jié)構(gòu)，同時在顆粒表面又有很多硅醇基。硅膠吸附作用的強弱與硅醇基的含量多少有關(guān)。 硅膠柱層析法是根據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附

42、力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質(zhì)易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。硅膠柱層析法的操作步驟：裝柱（柱子必須裝平整、均勻）， 加樣，洗脫劑的選擇（根據(jù)根據(jù)TLC方法篩選好洗脫劑，使兩相鄰物質(zhì)Rf值之差最大化），樣品的收集，最后的處理。 （3）高效液相色譜法（HPLC）HPLC正相系統(tǒng)的固定相一般是硅膠柱和氨基柱，反相系統(tǒng)的固定相則有 C2 柱、C8 柱、C18 柱、苯基柱及氨基柱等。由于乙腈有劇毒，所以一般會選擇使用甲醇水系統(tǒng)作為流動相，并添加少量的酸 (乙酸、甲酸) 用來改善分離的效果，防止出現(xiàn)拖尾。雖然跟紙色譜、柱色譜、薄層

43、色譜相比較，HPLC的分離效果更理想，但HPLC分離的成本比上述幾種方法要高得多，所以HPLC更多時候是應(yīng)用在生物堿類化合物的定量分析、定性檢測或少量樣品的制備等方面。在實際工作中，往往由于植物中生物堿種類很多、結(jié)構(gòu)相似，僅僅依靠某一種方法很難得到生物堿單體，一般需要采用幾種方法配合應(yīng)用才能取得良好的分離效果。3 .實驗部分3.1藥材實驗藥材：蓮子心藥材（10. 5kg）3.2 化學(xué)試劑乙醇，鹽酸，氨水，二氯甲烷，甲醇（以上試劑均為分析純）；色譜甲醇（色譜純），超純水。3.3 儀器原理介紹表3.3主要實驗儀器名稱型號/規(guī)格生產(chǎn)廠家TD低溫微型提取濃縮機組TD-200中國溫州天眾機械制造有限公司

44、超聲清洗器KQ-5200E昆山市超聲儀器有限公司高壓四元泵帶真空脫氣機DGU-20A5日本島津儀器有限公司高壓泵LC-20AT日本島津儀器有限公司系統(tǒng)控制器CBM-20A日本島津儀器有限公司自動進樣器SIL-20A日本島津儀器有限公司旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀EYELA上海亞榮生化儀器循環(huán)水式真空泵SHZ-D()鞏義市子華儀器有限責(zé)任公司高效液相色譜儀LC-20AT日本島津儀器有限公司3.3.1超聲清洗器超聲清洗器應(yīng)用廣泛，在生化，物理，化學(xué)，醫(yī)學(xué)，科研及大專院校的實驗中可作提取，脫氣，混勻，細胞粉碎等等之用。主要由超聲波清洗槽和超聲波發(fā)生器兩部分構(gòu)成。超聲波清洗槽用堅固彈性好、耐腐蝕的優(yōu)質(zhì)不銹鋼制成，底部安

45、裝有超聲波換能器振子。超聲波發(fā)生器產(chǎn)生高頻高壓，通過電纜聯(lián)結(jié)線傳導(dǎo)給換能器，換能器與振動板一起產(chǎn)生高頻共振，從而使清洗槽中的溶劑受超聲波作用對污垢進行洗凈。工作原理：由超聲波發(fā)生器發(fā)出的高頻振蕩信號，通過換能器轉(zhuǎn)換成高頻機械振蕩而傳播到介質(zhì)清洗溶劑中，超聲波在清洗液中疏密相間的向前輻射，存在于液體中的微小氣泡在聲場的作用下振動。這些氣泡在超聲波縱向傳播的負壓區(qū)形成、生長，而在正壓區(qū)，當(dāng)聲壓達到一定值時，氣泡迅速增大，然后突然閉合。并在氣泡閉合時產(chǎn)生沖擊波，在其周圍產(chǎn)生上千個大氣壓，破壞不溶性污物而使分散于清洗液中，當(dāng)團體粒子被油污裹著而黏附在清洗件表面，油被乳化，從而達到清洗件凈化的目的。在這

46、種被稱之為“空化”效應(yīng)使物件的表面及縫隙中的污垢迅速剝落，從而達到物件表面清洗凈化的目的。3.3.2旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器主要用于醫(yī)藥、化工和生物制藥等行業(yè)的濃縮、結(jié)晶、干燥、分離及溶劑回收。其結(jié)構(gòu)為:蒸餾燒瓶是一個帶有標準磨口接口的梨形或圓底燒瓶，通過一個高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連，回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連接，用于接收被蒸發(fā)的有機溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一個三通活塞，當(dāng)體系與大氣相通時，可以將蒸餾燒瓶，接液燒瓶取下，轉(zhuǎn)移溶劑，當(dāng)體系與減壓泵相通時，則體系應(yīng)處于減壓狀態(tài)。工作原理：通過電子板控制，使蒸發(fā)燒瓶在最恰當(dāng)?shù)乃俣认?，恒速旋轉(zhuǎn)用來增大蒸發(fā)面積。同時，通過抽真空水泵

47、使蒸發(fā)燒瓶處在負壓狀態(tài)。將蒸發(fā)燒瓶放在水浴鍋中恒溫加熱并旋轉(zhuǎn)，瓶內(nèi)溶液處在負壓狀態(tài)下在旋轉(zhuǎn)燒瓶內(nèi)進行加熱擴散蒸發(fā)。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器系統(tǒng)可以密封減壓至400600毫米汞柱；用加熱浴加熱蒸餾瓶中的溶劑，加熱溫度可非常接近該溶劑的沸點；此外，在高效冷卻器作用下，可將熱蒸氣迅速液化，加快蒸發(fā)速率。3.3.3高效液相色譜儀高效液相色譜儀是使用高效液相色譜法對物質(zhì)進行定性檢測以及定量分析的一種儀器。它的填料顆粒雖然相對較小但每粒都較均勻，小顆粒會引起高柱效應(yīng)，但也會增加較高的阻力，所以要用到高壓來輸送流動相，因此才又被稱高壓液相色譜。高效液相色譜法是現(xiàn)在最經(jīng)常應(yīng)用的一種色譜分析方法，高效液相色譜的系統(tǒng)是由流動相

48、儲液體瓶、檢測器、輸液泵、色譜柱、進樣器和記錄儀構(gòu)成，它的整體構(gòu)造跟氣相色譜很相似，但由于其流動相是液體，所以在很多方面都進行了改良。因為液體流動相的粘度遠比氣體的要大的多，所以為了能夠控制柱壓，高效液相色譜的色譜柱會顯得更粗大，但長度卻要遠比氣相色譜柱小得多。工作原理：高壓泵將儲液器中的流動相送入到系統(tǒng)，用進樣器將樣品溶液送入流動相中，伴隨被流動相一起進入色譜柱(固定相) 里面，因為樣品溶液中的各個組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，因此在兩相中要作相對運動的時候，要重復(fù)多次吸附- 解吸的這一分配過程，各個組分在移動速率上也會引起較大的差異，進而被分離成單個的組分能夠依次從柱里流出來，在經(jīng)過檢測

49、器的時候，樣品濃度將會被轉(zhuǎn)變成電信號傳達到記錄儀中，那數(shù)據(jù)就會以圖譜的形式被打印出來。3.4實驗操作3.4.1蓮子心總生物堿的提取將購買的蓮子心藥材（10. 5kg）粉碎后可得到蓮子心粉末，加入TD低溫微型提取濃縮機組的提取罐中，用12倍的80%乙醇（固液比12:1）進行回流提取，時間為2個小時，提取3次，并將3次提取液合并在一起，經(jīng)過紗網(wǎng)過濾，去掉藥渣，進行減壓濃縮，濃縮溫度在100，濃縮到聞不到醇味，可得到總濃縮液（500mL）。往總濃縮液滴加1%鹽酸，直至濃縮液PH調(diào)至3。經(jīng)過紗網(wǎng)過濾，去掉藥渣。將得到的濾液里滴加氨水，調(diào)節(jié)PH值至9。靜置過夜后過濾，在過濾后轉(zhuǎn)入TD低溫微型提取濃縮機組

50、的提取罐中，濃縮濾液得暗黃色沉淀。3.4.2蓮子心總生物堿的特征圖譜的建立探索總生物堿的流動相條件，在分離條件1：甲醇（A）-水（B）梯度洗脫，0-60min，10-100 A%；分離條件2：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫，0-60min，10-100 A%。根據(jù)所得的圖譜情況，來確定總生物堿的流動相的條件。探索總生物堿的HPLC分析條件，在PNA優(yōu)化條件1：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-15-25-50 min,10-25-50-60-100A%；PNA優(yōu)化條件2：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-10-20-55 min,25-40-50-60-10

51、0 A%；PNA優(yōu)化條件3：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-15-40-50 min，40-50-60-80-100 A%。根據(jù)根據(jù)所得的圖譜情況，確定了最優(yōu)的分析條件。在最優(yōu)分析條件下，對蓮子心總生物堿進行HPLC分析，建立特征圖譜進行分析研究。4. 結(jié)果與分析4.1實驗結(jié)果4.1.1探究總生物堿TLC的結(jié)果圖3.1 總生物堿TLC結(jié)果圖通過薄層分析法對比，總生物堿和非生物兩部分浸膏，本實驗已將大部分生物堿富集，說明用酸提堿沉法提取蓮子心總生物堿效果不錯。4.1.2探究優(yōu)化總生物堿HPLC的分析條件的結(jié)果1、 確定總生物堿HPLC的特征圖譜檢測波長圖3.2 各種檢測波長色譜圖

52、經(jīng)對比PNA不同波長的HPLC色譜圖，210-240 nm檢出的色譜峰數(shù)較多，強度大，254 nm、280 nm 下色譜圖基線平穩(wěn)，故選定210 nm和280 nm波長進行檢測 。2、 確定流動相（1）分離條件1：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫，0-60min，10-100 A%。圖3.3 分離條件1色譜圖（2）分離條件2：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫，0-60min，10-100 A%。圖3.4 分離條件2色譜圖經(jīng)對比2個分離條件的HPLC色譜圖，確定流動相采用甲醇水（1氨水）系統(tǒng)。3、 色譜條件優(yōu)化根據(jù)以上HPLC圖譜結(jié)果，選擇甲醇水（1氨水）系統(tǒng)進一步優(yōu)化。(1)PNA

53、優(yōu)化條件1：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-15-25-50 min,10-25-50-60-100A%。圖3.5 PNA優(yōu)化條件1色譜圖(2)PNA優(yōu)化條件2：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-10-20-55 min,25-40-50-60-100 A%。圖3.6 PNA優(yōu)化條件2色譜圖(3)PNA優(yōu)化條件3：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-15-40-50 min，40-50-60-80-100 A%。圖3.7 PNA優(yōu)化條件3色譜圖根據(jù)以上HPLC圖譜結(jié)果，確定采用PNA優(yōu)化條件3作為蓮子心色譜分離條件。4.2總生物堿特征圖譜的結(jié)果在最優(yōu)的

54、分析條件：甲醇（A）-水（1氨水）（B）梯度洗脫：0-5-15-40-50 min，40-50-60-80-100 A%下，建立了HPLC特征圖譜。結(jié)合所得的特征圖譜發(fā)現(xiàn)蓮子心中所含生物堿成分遠遠多于文獻報道的十幾個化合物。這表明其中包含有大量結(jié)構(gòu)未知的生物堿類化合物，需要進一步系統(tǒng)研究。4.3展望蓮子心是寶貴的中藥材，具有降壓以及增抗心律失常機能的作用24，還具有協(xié)同抗腫瘤作用25-27等功能。在我國幾千年的歷史中，蓮子心一直顯示著多方面的藥用價值和保健功能。長期的實踐證明，蓮子心沒有不良反應(yīng)和毒副作用的記載。還有，我國蓮資源豐富，分布廣泛，種類繁多，開發(fā)潛力巨大，而且價廉易得。如果我們能有

55、效地開發(fā)利用這一廣闊的資源，將帶來可觀的社會效益跟經(jīng)濟效益，提高蓮子心的藥用價值與經(jīng)濟價值，對醫(yī)藥行業(yè)，對食品工業(yè)都有一定的促進作用。生物堿是科學(xué)家研究最早的一類重要的天然有機化合物，多具有生物活性，常常是許多藥用植物的有效成分28?，F(xiàn)在，隨著天然產(chǎn)物分離與結(jié)構(gòu)研究新方法和新技術(shù)的不斷出現(xiàn)，大大加速了生物堿的研究過程，生物堿的種類以及數(shù)量都增加得很快。經(jīng)大量的研究證明，蓮子心主要的活性成分是生物堿。生物堿的研究一直是天然藥物化學(xué)的重要研究領(lǐng)域之一。所以，研究蓮子心中的總生物堿這一課題是具有一定研究意義與價值。本試驗對蓮子心藥材中的化學(xué)成分進行初步分離，并對所得到的總生物堿成分進行HPLC分析，根據(jù)特征圖譜來確定蓮子心總生物堿的種類以及成分。結(jié)果發(fā)現(xiàn)蓮子心中所含生物堿成分遠遠多于文獻報道的十幾個化合物，這表明其中包含有大量結(jié)構(gòu)未知的生物堿類化合物