疑難配血處理

1、王俐王俐血液標(biāo)本的采集及準(zhǔn)備血液標(biāo)本的采集及準(zhǔn)備 1. 輸血申請(qǐng)單：必須含有病人姓名、身份號(hào)、住院號(hào)、床號(hào)及負(fù)責(zé)醫(yī)師的簽名。還應(yīng)包含申請(qǐng)日期、用血原因及時(shí)間、用血種類及數(shù)量；病人出生年月、性別、種族、疾病診斷、輸血史、妊娠史、輸血反應(yīng)史、有無(wú)不規(guī)則抗體及血型等。2. 受血者血樣： 認(rèn)真核對(duì)后，方可采集； 血液標(biāo)本必須收集到有正確標(biāo)記的帶塞子的試管里，且標(biāo)明病人姓名、住院號(hào)、采集日期及采集者； 血液標(biāo)本應(yīng)是不抗凝血，以避免纖維蛋白、抗凝劑成分對(duì)血清學(xué)試驗(yàn)的干擾； 溶血或混入靜脈輸注液體而致標(biāo)本稀釋的血液標(biāo)本不得使用； 須用輸血前3天以內(nèi)采集的血液標(biāo)本； 輸血后，病人的血液標(biāo)本須在14至少保存7天

2、，以備重復(fù)試驗(yàn)。3. 獻(xiàn)血員血樣： 從血袋上附著的血樣小辮獲得獻(xiàn)血員血液標(biāo)本； 在標(biāo)本收集管上粘貼血袋上有關(guān)血液制品號(hào)的條形碼標(biāo)簽； 準(zhǔn)確核對(duì)血袋上及標(biāo)本管上的號(hào)碼。 血清學(xué)試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn) 一、受血者試驗(yàn)（一）血型鑒定 1.ABO血型鑒定： 常規(guī)鑒定： 正定型：用抗A抗B試劑檢測(cè)受血者紅細(xì)胞。 反定型：用A和B型試劑紅細(xì)胞檢測(cè)血清中的抗體。人人ABO血型是由紅細(xì)胞的抗原和血漿血清中的抗血型是由紅細(xì)胞的抗原和血漿血清中的抗體所決定，因此正反定型的結(jié)果應(yīng)該一致。體所決定，因此正反定型的結(jié)果應(yīng)該一致。表表1 常規(guī)常規(guī)ABO正反定型試驗(yàn)正反定型試驗(yàn) 正定型反定型血型抗A抗BAB00+O+00+A0+0

3、B+00AB正定型 反定型 自身對(duì)照 抗-A 抗-B抗-AB 抗-A1 抗-H A B A2 O 如果正反定型不一致，則需進(jìn)一步鑒定?？稍谡ㄐ驮囼?yàn)中增加抗A1、抗AB及抗H，反定型試驗(yàn)中增加A2、O及自身紅細(xì)胞。表2 疑難ABO正反定型試驗(yàn)正定型試驗(yàn)中的抗AB是用來(lái)確認(rèn)弱A和弱B抗原，抗A1用于鑒定A1亞型，抗H用于鑒定亞型及孟買型。反定型試驗(yàn)中的A2細(xì)胞是用于鑒定A2亞型。O細(xì)胞用于鑒定是否存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體影響定型；自身對(duì)照用于是否存在自身抗體影響定型；如果與O細(xì)胞或自身對(duì)照為陽(yáng)性，則定型結(jié)果不可靠，必須進(jìn)一步進(jìn)行血型鑒定。 如果無(wú)法找到正反定型不一致的原因，則只能給病人輸注O

4、型紅細(xì)胞，病人血型可請(qǐng)血液中心血型參比試驗(yàn)室協(xié)助鑒定。 ABO定型不一致的原因：、反定型試驗(yàn)出現(xiàn)弱反應(yīng)或缺失抗體： 新生兒； 老人； 低球蛋白癥的白血病人或淋巴瘤病人（惡性）； 使用免疫抑制劑而致低球蛋白的病人； 先天丙球缺乏的病人； 免疫缺陷者； 骨髓移植病人； 雙胞胎嵌合體。、弱反應(yīng)或缺失抗原： A亞型、B亞型或AB亞型； 白血病導(dǎo)致A或B抗原減弱，何杰金病有時(shí)會(huì)抑制抗原表達(dá)，與白血病類似； 某種疾?。ㄈ绺骨话?、胰腺癌）導(dǎo)致血漿中存在大量的型物質(zhì)，中和抗A或抗B抗體，引起正定型為假陰性或弱陽(yáng)性；洗滌紅細(xì)胞可解決此問(wèn)題； 、蛋白或血漿不正常引起的正反定型不符： 某些疾病導(dǎo)致球蛋白水平增高引起

5、緡錢狀凝集;纖維蛋白原水平的增高也會(huì)引起緡錢狀凝集，導(dǎo)致假陽(yáng)性凝集； 血漿增溶劑（葡聚糖、PVP）也會(huì)引起緡錢狀凝集。 、其他原因引起的正反定型不符： 多凝集：當(dāng)病人感染細(xì)菌或病毒后，病毒或細(xì)菌產(chǎn)生的酶使紅細(xì)胞上掩蔽的T抗原暴露激活，由于正常人血清中都含有抗T抗體，因此可與正常人血清產(chǎn)生凝集反應(yīng)，正定型試驗(yàn)假陽(yáng)性； 冷自身抗體引起的自家凝集反應(yīng)，正反定型均可出現(xiàn)假陽(yáng)性； 存在ABO系統(tǒng)的意外抗體，如A2或A2B個(gè)體血清中可能存在天然抗A1，導(dǎo)致反定型試驗(yàn)多出抗體； 被檢者血清中存在ABO系統(tǒng)以外的同種抗體，反定型時(shí)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)； 非抗A及抗B的抗體與相應(yīng)抗原形成復(fù)合體吸附在紅細(xì)胞表面，引起正

6、定型非特異性凝集，如抗B的染料吖啶黃。 2. Rh（D）血型鑒定： Rh(D)抗原檢測(cè)原則： 對(duì)受血者常規(guī)一般只測(cè)Rh(D)抗原，而對(duì)獻(xiàn)血員不僅要檢查Rh(D)抗原，并在其為陰性的前提下必須進(jìn)一步確定是否為弱Rh(D)（即D U）。 Rh(D)陰性及弱陰性及弱D的受血者只能提供的受血者只能提供Rh(D)陰陰性血，不得使用性血，不得使用D陽(yáng)性及弱陽(yáng)性及弱D的血。即弱的血。即弱D針對(duì)受針對(duì)受血者而言為血者而言為D陰性，而對(duì)于供血者而言則為陰性，而對(duì)于供血者而言則為D陽(yáng)性陽(yáng)性。 對(duì)直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性的Rh(D)陰性紅細(xì)胞進(jìn)行Rh(D)定型時(shí)，易引起假陽(yáng)性反應(yīng)，因此必須按照試劑生產(chǎn)商的試劑使用說(shuō)明

7、書要求，增加對(duì)照試驗(yàn)。（二（二)不規(guī)則抗體的檢測(cè)和鑒定：不規(guī)則抗體的檢測(cè)和鑒定： 1. 血型不規(guī)則抗體檢測(cè)：必須對(duì)有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者及交叉配血不合者進(jìn)行抗體篩選試驗(yàn)。 抗體篩選的重要性：有利于早期發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)具有臨床意義的抗體，并可以在配血前鑒定此意外抗體，獲得充足的時(shí)間來(lái)選擇缺少相應(yīng)抗原的相配合的血，避免由于尋找不到相合的血液而造成患者病情的延誤。 抗體篩選用試劑紅細(xì)胞： 試劑紅細(xì)胞必須含有下列抗原：D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb 目前已商品化的試劑紅細(xì)胞有兩種，分別為雙人份細(xì)胞和三人份細(xì)胞組。 試劑紅

8、細(xì)胞是保存在保存液中，一旦用生理鹽水或Liss液洗滌后則應(yīng)該在24小時(shí)內(nèi)使用，否則會(huì)因污染、抗原丟失導(dǎo)致試驗(yàn)錯(cuò)誤。 抗體篩選技術(shù)：抗體篩選技術(shù)： 技術(shù)要求： 盡可能多的檢測(cè)出有臨床意義的抗體。 盡可能少的檢測(cè)出無(wú)臨床意義的抗體。 盡可能快的完成抗體檢測(cè)。 方法選擇：每種方法都有自己的特點(diǎn)，適應(yīng)于不同范圍及情況。 自身對(duì)照：即使用病人自己的血清和自己紅細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè)，有助于確定抗體篩選陽(yáng)性結(jié)果是同種抗體還是自身抗體、或是緡錢引起 。 2. 抗體鑒定：在病人血清不規(guī)則抗體檢查為陽(yáng)性時(shí)，且時(shí)間允許的情況下，在交叉配血之前，應(yīng)該可以進(jìn)行簡(jiǎn)單的抗體鑒定試驗(yàn)，確定抗體的特異性，會(huì)有助于選擇無(wú)對(duì)應(yīng)抗原的相

9、合血。如抗cE抗體在人群中的相合率為30%。二、供血者檢測(cè)從供血中心獲得的血液，交叉配血前須進(jìn)行ABO定型，對(duì)于Rh（D）陰性的血液還需確認(rèn)其非弱型，并把檢測(cè)結(jié)果與血袋上的標(biāo)識(shí)相比較，確保一致。 交叉配血交叉配血 一、血液的選擇 （一）、血型：1、ABO 系統(tǒng)：全血：必須選擇同樣血型的全血。成分血：選擇血型相配的血。 與病人血型相合血制品與病人血型相合血制品病人血型相合的紅細(xì)胞相合的血漿相合全血OOO,A,B,ABOO，AA,ABABO,BB,ABBO,A,B,AB ABAB2、Rh系統(tǒng):Rh(D)陽(yáng)性患者可以選擇陽(yáng)性血及陰性血Rh(D)陰性及弱患者只能選擇Rh(D)陰性血。3、其他系統(tǒng)：對(duì)于

10、已經(jīng)明確抗體特異性的病人，則應(yīng)選擇缺乏相應(yīng)抗原的血液。 （二）、儲(chǔ)存時(shí)間：一般來(lái)說(shuō)，首先使用較陳舊的血，但以下情況屬于例外，需用新鮮血1、病人將接受大量的血液（超過(guò)自身總血量）。2、新生兒換血及嬰幼兒輸血（病人本身血容量小，而用血量又大）。3、接受定期輸血的病人（如地中海貧血病人、腎透析病人、再障病人），使輸血間隔時(shí)間延長(zhǎng) 。二、交叉配血：交叉配血有兩個(gè)重要作用:l確認(rèn)供血者及受血者的ABO血型的相合性。l可檢測(cè)出受血者血清中不規(guī)則抗體，此抗體可能在抗體篩選試驗(yàn)中由于篩選試劑紅細(xì)胞缺乏相應(yīng)抗原而漏檢。1、主側(cè)交叉及次側(cè)交叉試驗(yàn)：主側(cè)交叉：由病人血清及供血者紅細(xì)胞組成次側(cè)交叉：由病人紅細(xì)胞及供血

11、者血清組成（由于我市尚未對(duì)供血者進(jìn)行抗體篩選，因此次側(cè)交叉是非常必要的）。 自身對(duì)照：病人自身血清及病人自身紅細(xì)胞組成，自身對(duì)照有助于分析解釋交叉配血試驗(yàn)中出現(xiàn)的陽(yáng)性結(jié)果。2、常規(guī)配血技術(shù)：選擇的技術(shù)不僅要能檢查出不配合的IgM抗體，還必須能檢查出盡可能多的不配合的IgG抗體。最大限度的減少抗體的漏檢。 立即離心技術(shù)配血法：用于檢查ABO的不配合及室溫反應(yīng)活性抗體引起的不配合。 抗人球蛋白配血法：用于檢查不規(guī)則抗體(IgG)引起的交叉配血不配合，有Liss抗人球法、PEG抗人球法、LIP抗人球法。3、特殊配血技術(shù)：預(yù)溫配血技術(shù)：主要用于解決室溫反應(yīng)活性的無(wú)臨床意義的抗體引起的交叉配血不配合。冷

12、型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身冷凝集引起的配血困難。溫型自家溶貧病人的配血試驗(yàn)，用于解決自身溫抗體引起的配血困難。纖原未完全析出的血樣，如腎透析、凝血功能差的病人，在配血時(shí)引起假陽(yáng)性。4、結(jié)果的解釋：主側(cè)交叉配血不相合的原因： 病人或供血者ABO定型不正確，或二者的ABO血型不配合病人血清中存在同種抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。 病人血清中存在自身抗體，與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原反應(yīng)。 供血者紅細(xì)胞上已經(jīng)包被了抗體，導(dǎo)致抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。 病人血清不正常，如白蛋白球蛋白比例不正常引起緡錢狀假凝集，血清中存在高分子聚合物的血漿擴(kuò)容劑引起假陽(yáng)性（用鹽水添加試驗(yàn)來(lái)解決）。 試驗(yàn)系統(tǒng)被

13、污染。 主側(cè)配血不相合原因分析主側(cè)配血不相合原因分析現(xiàn)象可能原因 解決方案 主側(cè)：自身：抗體篩選： 病人或供血者ABO錯(cuò)誤病人血清可能含ABO抗體病人血清中有抗體，但篩選細(xì)胞上無(wú)相應(yīng)抗原供血者紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性 重新定型檢查病人亞型、輸血史及移植史對(duì)病人血清進(jìn)行抗體鑒定檢查供血者直接抗球蛋白試驗(yàn) 主側(cè)：自身：抗體篩選：病人血清中的同種抗體與供血者紅細(xì)胞上相應(yīng)抗原反應(yīng) 對(duì)病人血清進(jìn)行抗體鑒定，選擇無(wú)對(duì)應(yīng)抗原的血主側(cè)：自身：抗體篩選： 病人血清中可能同時(shí)存在自身抗體和同種抗體病人血清不正常：白蛋白/球蛋白比值不正常 血漿擴(kuò)容物 污染 對(duì)病人血清自身吸收及抗體鑒定，用吸收后血清配血鹽水添加試

14、驗(yàn)解決緡錢抽去新標(biāo)本使用新器具 次測(cè)交叉配血不相合的原因： 供血者血漿中存在針對(duì)病人紅細(xì)胞抗原的抗體。 病人與供血者的ABO血型不相合。 病人的紅細(xì)胞已經(jīng)包被了抗體，直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。 交叉配血與抗體篩查不一致處理現(xiàn)象可能原因解決方案交叉配血：-抗體篩查：+交叉配血低靈敏度檢測(cè)不到潛在的不配合抗體鑒定（血站）（懷孕期間做滴度）緊急情況必須告之臨床：“有未鑒定抗體，有未鑒定抗體，有保留配合有保留配合”免疫性溶血免疫性溶血1、同種異體免疫溶血：同種異體抗體、妊娠（新生兒溶血）、輸血（溶血性輸血反應(yīng)）2、自身免疫性溶血：自身抗體（溫自身抗體）3、其他原因引起的溶血：藥物新生兒溶血癥新生兒溶血癥

15、（一）致病機(jī)制:胎兒血 母體血循環(huán)母體產(chǎn)生同種異體抗體(IgG) 通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血內(nèi)與胎兒紅細(xì)胞結(jié)合網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除與之結(jié)合的胎兒或新生兒紅細(xì)胞新生兒表現(xiàn)為出現(xiàn)貧血、水腫、黃疸等臨床癥狀。相關(guān)檢驗(yàn)指標(biāo)：Hb、網(wǎng)織紅 、有核紅 、總直膽總直膽（二）新生兒溶血癥種類：1、ABO不相容2、RH不相容3、 ABO、 RH系統(tǒng)以外不相容（三）新生兒溶血癥特點(diǎn)：1、母親多為O型。2、胎兒多為A型。3、RH溶血癥多發(fā)生于第2胎，少數(shù)見(jiàn)于有輸血史的第一胎。（四）、新生兒換血的血液選擇：1、ABO新生兒溶血?。哼x擇ABO血型與嬰兒及母親相配合的且Rh血型與嬰兒相同的紅細(xì)胞及AB型血漿組成的血液使用。2、Rh(

16、D)新生兒溶血?。哼x擇Rh(D)陰性ABO血型與嬰兒和母親相配合，或O型Rh(D)陰性的洗滌紅細(xì)胞及AB型血漿，用母血清進(jìn)行交叉配血。3、其他任何新生兒溶血：選擇不含特異性抗體所對(duì)應(yīng)抗原的ABO系統(tǒng)與嬰兒相同的血輸注。 新生兒溶血病換血用的ABO系統(tǒng)血型相合紅細(xì)胞選擇 嬰兒血型母血型供血者血型OO,A,BOA O,BOA,ABA，OBO,AOB,ABB,OABOOAA，OBB，OABAB，A，B，O父母血型子女可能有的血型子女不可能有的血型OOOA,B,ABAAA,OB,ABBBB,OA,ABABABA,B,ABOOAA,OB,ABOBB,OA,ABOABA,BAB,OABA,B,AB,O-A

17、ABA,B,ABOBABA,B,ABO抗體鑒定抗體鑒定 可以鑒定抗體的特異性，有助于給病人選擇相配合的血液，還可以預(yù)防新生兒溶血病。一. 一般程序：（一） 血液樣本：血清或血漿均可，但更多用血清。（二） 病史：記錄病人臨床診斷、輸血史、妊娠史和近期使用的藥物。（三） 試劑： 譜細(xì)胞：是挑選出的是挑選出的10個(gè)或更多個(gè)已知血型表現(xiàn)型的個(gè)或更多個(gè)已知血型表現(xiàn)型的O型細(xì)胞。型細(xì)胞。譜細(xì)胞必須含有Rh、Kell、Duffy、Kidd、P、Lewis和MNS系統(tǒng)的抗原，且對(duì)大部分單一的同種抗體有一個(gè)清楚的反應(yīng)格局。 增強(qiáng)介質(zhì)：LISS、PEG和LIP等，均有商品供應(yīng)。 抗人球蛋白試劑：抗-IgG和抗-I

18、gG+抗-C3；但抗-IgG使用的更多。 （四） 自身對(duì)照：有助于決定病人是否有同種抗體，或有自身抗體，或兩者兼有。二. 血清學(xué)方法的選擇： 無(wú)任何單一的方法可以檢查出所有的抗體。無(wú)任何單一的方法可以檢查出所有的抗體。在選擇方法時(shí)必須了解此方法的特異性、靈敏度、局限性、假陽(yáng)性和假陰性情況。影響抗原抗體反應(yīng)的因素有孵育溫度、提高血清對(duì)細(xì)胞的比例、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間、改變pH和低離子強(qiáng)度。1. 抗體鑒定技術(shù)：低離子強(qiáng)度液（LISS）IAT聚乙二醇（PEG）IAT微膠柱凝集技術(shù)聚凝胺（LIP）-IAT酶技術(shù)。2. 抗體鑒定中的特殊技術(shù)：使用硫醇試劑吸收試驗(yàn)放散試驗(yàn)效價(jià) *抗體鑒定可由血液中心來(lái)檢驗(yàn)抗體鑒定

19、可由血液中心來(lái)檢驗(yàn) 疑難交叉配血案例分析疑難交叉配血案例分析（一）病例簡(jiǎn)介（一）病例簡(jiǎn)介 劉世霞劉世霞 女女 5050歲歲 科室：感染科科室：感染科 血型：血型：B B型，型，RhRh（陽(yáng)性）抗體篩查（陰性）（陽(yáng)性）抗體篩查（陰性） 主要診斷：丙肝肝硬化失代償期主要診斷：丙肝肝硬化失代償期 其他診斷：慢性肝衰竭其他診斷：慢性肝衰竭 門脈高壓門脈高壓 腹腔積液腹腔積液 脾機(jī)能亢進(jìn)脾機(jī)能亢進(jìn) 重度貧血重度貧血病史：病史：“貧血貧血”病史病史2626年，年，“丙型肝炎丙型肝炎”病史病史1818年年 有妊娠史。有妊娠史。輸血史：輸血史：19911991年因年因“貧血貧血”于張掖市醫(yī)院輸血治療于張掖市醫(yī)

20、院輸血治療 1998 1998年于蘭大醫(yī)院行刨腹產(chǎn)間有輸血治療年于蘭大醫(yī)院行刨腹產(chǎn)間有輸血治療 并發(fā)現(xiàn)患有并發(fā)現(xiàn)患有“丙肝丙肝” 2006 2006年在省人民醫(yī)院行骨髓檢查診斷為年在省人民醫(yī)院行骨髓檢查診斷為“缺缺 鐵性貧血鐵性貧血” 2016 2016年年2 2月月2424日于蘭大二院住院期間有血漿日于蘭大二院住院期間有血漿 輸注史輸注史 實(shí)驗(yàn)室檢查實(shí)驗(yàn)室檢查20162016年年3 3月月3 3日日：血常規(guī)：血常規(guī)： WBC WBC 1.491.4910109 9/L /L Hb Hb 5050g/L g/L RBC RBC 2.372.3710101212/L /L HCT HCT 18.518.5% % MCV MCV78.178.1fl MCHfl MCH21.121.1pg pg PLT 24PLT 24 10109 9/L/L生化：生化： 總膽紅素總膽紅素 32.3umol/L32.3umol/L 直接膽紅素直接膽紅素 15.4umol/L15.4umol/L 間接膽紅素間接膽紅素 16.9umol/L16.9umol/L輸血治療：輸血治療：3 3月月4 4日輸注日輸注RBC 2uRBC 2u實(shí)驗(yàn)室檢查實(shí)驗(yàn)室檢查20162016年年3 3月月8 8日日：血常規(guī)：血常規(guī)： WBC WBC 1.791.7910109 9/L /L