真核基因表達(dá)調(diào)控-3

1、v Discoveryv BiogenesisBiogenesisComplex loading selectionv Compare with siRNAv FunctionsmRNA degradationRibosome drop-offInitiation blockv Technical applicationArtificial miRNAv Discovery1993年,Lee RC等在線蟲(C.elegans)中意外地發(fā)現(xiàn)了一種定時調(diào)控胚胎后期發(fā)育的miRNA-lin4,它是一種非編碼RNA,長度為22 nt。2000年,miRNA-let7的發(fā)現(xiàn)掀起了尋找miRNA的熱潮。在

2、線蟲（C. elegans）當(dāng)中,通過功能缺失突變體的篩選，找到了let-7/lin-41基因不同物種中的不同物種中的let-7基因具有序列保守性基因具有序列保守性,且均可與且均可與lin-41基因的基因的3UTR區(qū)域互補(bǔ)區(qū)域互補(bǔ) 在lin-41基因的3UTR區(qū)域發(fā)現(xiàn)了let-7的互補(bǔ)區(qū)Transcription of miRNA genes by RNA Pol II Transcribed by pol II to pri-miRNA (primary precursor) Pri-miRNA contains the 7-methylguanosine cap and a poly(A)

3、 tail Pol II is physically associated with miRNA gene promoters miRNA gene transcription is sensitive to -amanitin Pol II dependent transcription enables temporal and spatial regulation of miRNA production.v BiogenesisDu and Zamore, Development 132, 4645-4652.animalsplantsv Biogenesis Complex loadin

4、g selectionMallory et al., Current Opinion in Plant Biology (2008)5 terminal dependent miRNA sortingmicroRNA的作用機(jī)理的作用機(jī)理 Reduction of mRNA stability Plant miRNAs guide cleavage of target mRNAs (however only a few miRNA targets have been examined at the protein level) Animal miRNAs also reduce stabilit

5、y of target mRNAs Inhibition of mRNA translation lin-4 mediated regulation of lin-14; let-7 mediated regulation of lin-41 Other animal miRNAs cause reduced target protein levels without affecting target mRNA levels in cell culture At least three examples of plant miRNAs affecting target protein but

6、not mRNA levelsmiRNA介導(dǎo)的翻譯抑制機(jī)制介導(dǎo)的翻譯抑制機(jī)制與小分子siRNA相比，miRNA在分子特性等方面是相似的，但也存在不少的差異。siRNA是雙鏈RNA，3端有2個非配對堿基，通常為UU； miRNA是單鏈RNA。 siRNAs是由dsDNA在Dicer酶切割下產(chǎn)生，而成熟miRNAs的產(chǎn)生要復(fù)雜一些。與siRNA所介導(dǎo)的基因沉默機(jī)制不同的是，miRNA是一種內(nèi)源基因的調(diào)控機(jī)制，代表了生物自身的一套正常程序。miRNA對靶基對靶基因的調(diào)控并不依賴于其與靶基因序列的高度因的調(diào)控并不依賴于其與靶基因序列的高度互補(bǔ)性，互補(bǔ)性，如果miRNA與靶基因mRNA存在完全或者近乎完

7、全互補(bǔ)配對，則通過靶基因mRNA的斷裂方式調(diào)控基因表達(dá)；反之，miRNA則是通過翻譯抑制調(diào)控靶基因的表達(dá)，miRNAs的這種調(diào)控方式主要依賴于miRNA的5端2-8寡核苷酸序列“seed region”與靶基因mRNA的3UTR互補(bǔ)得以實現(xiàn)。8.5.1 蛋白質(zhì)磷酸化對基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控 細(xì)胞是生命活動的基本單位。細(xì)胞通過DNA的復(fù)制和細(xì)胞分裂將本身所固有的遺傳信息由親代傳至子代，實現(xiàn)增殖繁衍。它們還不斷地“感知”環(huán)境變化，并對其作出特定的應(yīng)答。 細(xì)胞應(yīng)答可以分為3個階段： 外界信息的“感知”，即由細(xì)胞膜到細(xì)胞核內(nèi)的信息傳遞, 染色質(zhì)水平上的基因活性調(diào)控, 特定基因的表達(dá)，即從DNARNA蛋白質(zhì)的遺

8、傳信息傳遞過程。8.5 真核基因其他水平上的表達(dá)調(diào)控蛋白質(zhì)的磷酸化與去磷酸化過程是生物體內(nèi)普遍存在的信息傳導(dǎo)調(diào)節(jié)方式，幾乎涉及所有的生理及病理過程，如糖代謝、光合作用、細(xì)胞的生長發(fā)育、神經(jīng)遞質(zhì)的合成與釋放甚至癌變等等。真核細(xì)胞主要跨膜信號傳導(dǎo)途徑細(xì)胞表面的三類受體示意圖 受體分子活化細(xì)胞功能的途徑主要有兩條： 受體本身或受體結(jié)合蛋白具有內(nèi)源酪氨酸激酶活性，胞內(nèi)信號通過酪氨酸激酶途徑得到傳遞； 配體與細(xì)胞表面受體結(jié)合，通過G蛋白介異的效應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生介質(zhì)，活化絲氨酸/蘇氨酸或酪氨酸激酶，從而傳遞信號。 到目前為止，已發(fā)現(xiàn)的蛋白激酶基因多達(dá)2000余個。根據(jù)底物蛋白質(zhì)被磷酸化的氨基酸殘基種類可分為三大

9、類：1、絲氨酸/蘇氨酸型，2、酪氨酸型，3、組氨酸型。 根據(jù)是否有調(diào)節(jié)物參與蛋白激酶的活性可分為兩大類：信使依賴型和非信使依賴型。細(xì)胞表面受體與配體分子的高親和力特異性結(jié)合，能誘導(dǎo)受體蛋白構(gòu)象變化，使胞外信號順利通過質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，或使受體發(fā)生寡聚化而被激活。蛋白質(zhì)磷酸化和GTP結(jié)合蛋白參與的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程G蛋白（蛋白（GTP binding proteins）所有能與GTP結(jié)合的蛋白質(zhì)都可以稱為“G蛋白”，并不是都參與細(xì)胞信號傳遞。所有的GTP結(jié)合蛋白都具有水解GTP生成GDP的能力，即具有GTP酶的特性，所以把所有GTP結(jié)合蛋白都?xì)w屬于“G蛋白超家族”（GTP-binding protein

10、 superfamily）。在研究信號傳遞時特指與細(xì)胞表面受體偶聯(lián)的異三聚體G蛋白（heterotrimeric GTP binding protein）。G蛋白的基本結(jié)構(gòu)：100kD左右，由、三種亞基組成，在天然電泳中與仍緊密結(jié)合在一起。亞基分子量在39-46kD之間，差別最大，被用作G蛋白的分類依據(jù)。其共同的特點是，具有一個GTP結(jié)合位點，本身具有GTP酶的活性，即可以把GTP水解成GDP和無機(jī)磷酸 .異質(zhì)G蛋白介導(dǎo)的生理效應(yīng)配體配體受體受體效應(yīng)物效應(yīng)物生理效應(yīng)生理效應(yīng)腎上腺素-腎上腺受體腺苷酸環(huán)化酶糖原水解血清緊張素血清緊張素受體腺苷酸環(huán)化酶行為敏感好學(xué)光視紫紅質(zhì)cGMP磷酸二酯酶視覺興

11、奮IgE抗原復(fù)合物肥大細(xì)胞Ig-受體磷脂酶C 分泌f-Met肽趨化受體磷脂酶C趨化性乙酰膽堿毒蠅堿受體K+通道降低起搏活性配體受體效應(yīng)物不同的G激發(fā)不同的調(diào)節(jié)途徑1. 受受cAMP水平調(diào)控的水平調(diào)控的A激酶激酶 依賴于cAMP的蛋白激酶稱為A激酶（PKA），它能把ATP分子上的末端磷酸基團(tuán)加到某個特定蛋白質(zhì)的絲氨酸或蘇氨酸殘基上。 被A激酶磷酸化的氨基酸N端上游往往存在兩個或兩個以上堿性氨基酸，特定氨基酸的磷酸化（X-Arg-Arg-X-Ser-X）改變了這一蛋白的酶活性。 在不同的細(xì)胞中，A激酶的反應(yīng)底物不一樣，所以，cAMP能在不同靶細(xì)胞中誘發(fā)不同的反應(yīng)。A激酶 非活性狀態(tài)的PKA全酶由4

12、個亞基R2C2所組成，分子量約為150-170，調(diào)節(jié)亞基與cAMP相結(jié)合，引起構(gòu)象變化并釋放催化亞基，后者隨即成為有催化活性的單體。糖原代謝時，激素與其受體在肌肉細(xì)胞外表面相結(jié)合，誘發(fā)細(xì)胞質(zhì)cAMP的合成并活化A激酶，后者再將活化磷酸基團(tuán)傳遞給無活性的磷酸化酶激酶，活化糖原磷酸化酶，最終將糖原磷酸化，進(jìn)入糖酵解過程并提供ATP。2. C激酶與激酶與PIP2、IP3和和DAG該蛋白激酶活性是依賴于Ca2+的，故稱C激酶（PKC）。IP3(肌醇-1,4,5-三磷酸)引起細(xì)胞質(zhì)Ca2+濃度升高，導(dǎo)致C激酶從胞質(zhì)轉(zhuǎn)運到靠近原生質(zhì)膜內(nèi)側(cè)處，并被DAG(二?；视?和Ca2+的雙重影響所激活。DAG提高了

13、C激酶對于Ca2+的親和力。C激酶是一個7.7104的蛋白質(zhì)，主要實施對絲氨酸、蘇氨酸的磷酸化，具有一個催化結(jié)構(gòu)域和一個調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域。與DAG結(jié)合以后還能解除調(diào)節(jié)區(qū)所造成的抑制作用，提高酶活性。C激酶磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸二酰基甘油肌醇-1,4,5-三磷酸激酶信號傳遞及基因表達(dá)示意圖磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸二?；视虳AG肌醇-1,4,5-三磷酸3. CaM激酶及激酶及MAP激酶激酶 Ca2+的細(xì)胞學(xué)功能主要通過鈣調(diào)蛋白激酶（CaM-kinase）來實現(xiàn)的，它們也是一類絲氨酸/蘇氨酸激酶，但僅應(yīng)答于細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平。 MAP激酶（mitogen activated protein kin

14、ase，絲裂原活化蛋白激酶 ）活性受許多外源細(xì)胞生長、分化因子的誘導(dǎo)。MAP-激酶活性取決于該蛋白中僅有一個氨基酸之隔的酪氨酸、絲氨酸殘基是否都被磷酸化。能同時催化這兩個氨基酸殘基磷酸化的酶被稱為MAP-激酶-激酶，它的反應(yīng)底物是MAP激酶。MAP-激酶-激酶本身能被MAP-激酶-激酶-激酶所磷酸化激活，后者能同時被C激酶或酪氨酸激酶家族的Ras蛋白等激活，從而在信息傳導(dǎo)中發(fā)揮功能。4. 蛋白質(zhì)磷酸化與細(xì)胞分裂調(diào)控蛋白質(zhì)磷酸化與細(xì)胞分裂調(diào)控細(xì)胞通過p53及p21蛋白控制CDK（cyclin-dependent protein kinase,周期蛋白依賴的蛋白激酶 ）活性，調(diào)控細(xì)胞分裂的進(jìn)程。P

15、21蛋白過量時，大量周期蛋白（cyclin）E-CDK2復(fù)合物與P21蛋白相結(jié)合，使CDK2喪失磷酸化PRb蛋白（retinoblastoma protein，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白）的功能。沒有被磷酸化的PRb蛋白與轉(zhuǎn)錄因子E2F相結(jié)合并使后者不能激活與DNA合成有關(guān)的酶，導(dǎo)致細(xì)胞不能由G1期進(jìn)入S期，細(xì)胞分裂受阻。 如果細(xì)胞中P53基因活性降低，P21蛋白含量急劇下降，周期蛋白E-CDK2復(fù)合物就能有效地將PRb蛋白磷酸化。此時，PRb蛋白不能與E2F相結(jié)合，后者發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的作用， 激活許多與DNA合成有關(guān)的基因表達(dá)，細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，開始分裂。CDK（周期蛋白依賴的蛋白激酶）活性受

16、雙重調(diào)控 沒有周期蛋白，CDK無活性。 隨著周期蛋白的合成和積累，逐步形成周期蛋白-CDK復(fù)合物。 CDK上的酪氨酸位點被磷酸化，掩蓋了其ATP結(jié)合位點，ATP不能有效地與之相結(jié)合，CDK仍然無活性。 CDK蛋白T-環(huán)中的蘇氨酸位點被磷酸化，并將其酪氨酸位點上的磷酸基團(tuán)去掉，其才能發(fā)揮生物學(xué)活性。 同時，CDK蛋白還能使細(xì)胞中的磷酸酯酶磷酸化，以加速脫去自身酪氨酸位點上的磷酸基團(tuán)。 有生物活性的周期蛋白-CDK復(fù)合物能將DBRP(destruction box recognizing protein)磷酸化，激活泛素連接酶，把大量泛素加到周期蛋白上并使之迅速降解，CDK失活，新的周期開始。8.

17、5.3 激素對基因表達(dá)的影響激素（Hormone）是高度分化的內(nèi)分泌細(xì)胞合成并直接分泌入血的化學(xué)信息物質(zhì)，它通過調(diào)節(jié)各種組織細(xì)胞的代謝活動來影響人體的生理活動。它是它是由內(nèi)分泌腺或內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的高效生物活性物質(zhì)，在體由內(nèi)分泌腺或內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的高效生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)作為信使傳遞信息，對機(jī)體生理過程起調(diào)節(jié)作用。內(nèi)作為信使傳遞信息，對機(jī)體生理過程起調(diào)節(jié)作用?，F(xiàn)在把凡是通過血液循環(huán)或組織液起傳遞信息作用的化學(xué)物質(zhì)，都稱為激素。激素的分泌均極微量，為毫微克（十億分之一克）水平，但激素的分泌均極微量，為毫微克（十億分之一克）水平，但其調(diào)節(jié)作用均極明顯。其調(diào)節(jié)作用均極明顯。激素作用甚廣，但不參加具體的

18、代謝過程，只只對特定的代謝和生理過程起調(diào)節(jié)作用對特定的代謝和生理過程起調(diào)節(jié)作用，調(diào)節(jié)代謝及生理過程的進(jìn)行速度和方向，從而使機(jī)體的活動更適應(yīng)于內(nèi)外環(huán)境的變化。激素的作用激素的作用機(jī)制是通過與細(xì)胞膜上或細(xì)胞質(zhì)中的專一性受體蛋白結(jié)合而將信息傳機(jī)制是通過與細(xì)胞膜上或細(xì)胞質(zhì)中的專一性受體蛋白結(jié)合而將信息傳入細(xì)胞，引起細(xì)胞內(nèi)發(fā)生一系列相應(yīng)的連鎖變化，最后表達(dá)出激素的入細(xì)胞，引起細(xì)胞內(nèi)發(fā)生一系列相應(yīng)的連鎖變化，最后表達(dá)出激素的生理效應(yīng)。生理效應(yīng)。幾種常見的疏水性小分子激素的結(jié)構(gòu)式1 1 激素對靶基因的影響激素對靶基因的影響l 許多類固醇激素（如雌激素、孕激素、醛固酮、糖皮質(zhì)激素和雄激素）以及一般代謝性激素（

19、如胰島素）的調(diào)控作用都是通過起始基因轉(zhuǎn)錄而實現(xiàn)的。l 體內(nèi)存在的許多糖皮質(zhì)類激素應(yīng)答基因都有一段大約20bp的順式作用元件（激素應(yīng)答元件，簡稱HRE），該序列具有類似增強(qiáng)子的作用，其活性受激素制約。靶細(xì)胞中含有大量激素受體蛋白，而非靶細(xì)胞中沒有或很少有這類受體。激素元件序列糖皮質(zhì)糖皮質(zhì)GRETGGTACANNNTGTTCG雌激素雌激素EREGGTCANNNTGTCC甲狀腺素甲狀腺素TRECAGGGACGTGACCGCA 固醇類激素的受體蛋白分子有相同的結(jié)構(gòu)框架，包括保守性極高并位于分子中央的DNA結(jié)合區(qū)結(jié)合區(qū)，位于C端的激素結(jié)激素結(jié)合區(qū)合區(qū)和保守性較低的N端端。 研究表明，激素、受體與順式元件

20、的結(jié)合位點三者缺一不可，其中無論是受體蛋白與激素的結(jié)合，還是激素本身，都不是與DNA結(jié)合并激活轉(zhuǎn)錄所必需的。 通常情況下，受體蛋白中激素結(jié)合結(jié)構(gòu)域妨礙了通常情況下，受體蛋白中激素結(jié)合結(jié)構(gòu)域妨礙了DNA結(jié)合結(jié)合區(qū)及轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)發(fā)揮生理功能，只有與相應(yīng)激素結(jié)合后才區(qū)及轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)發(fā)揮生理功能，只有與相應(yīng)激素結(jié)合后才能打破這種障礙。能打破這種障礙。Glucocorticoids regulate gene transcription by causing their receptor to transport into the nucleus and bind to an enhancer whose

21、action is needed for promoter function.2. 激素的作用機(jī)制有激素的作用機(jī)制有3種較為流行的假說：種較為流行的假說： 受體流動假說受體流動假說。激素-受體復(fù)合物可在膜內(nèi)移動并與腺苷酸環(huán)化酶結(jié)合，激活環(huán)化酶，引發(fā)后續(xù)效應(yīng)。通過激素的稀釋或解離，使受體和環(huán)化酶回復(fù)到非耦聯(lián)狀態(tài)。 中介物假說中介物假說。受體與酶之間可能通過膜脂耦聯(lián)在一起。有人用適量的高純磷脂酶A處理肝細(xì)胞膜后發(fā)現(xiàn)，此時氟離子仍可刺激膜上的腺苷酸環(huán)化酶活性，但對胰高血糖素的作用完全喪失。若加入膜脂則激素的作用恢復(fù)，說明去膜脂后激素的信息傳遞中斷。 鄰位互調(diào)假說鄰位互調(diào)假說。根據(jù)GTP能影響激素與受

22、體結(jié)合并進(jìn)而影響腺苷酸環(huán)化酶活性的現(xiàn)象，認(rèn)為該酶系統(tǒng)至少存在3個活性部位，即激素-受體結(jié)合部位、Mg2+-ATP作用中心和核苷酸調(diào)節(jié)部位。因為腺苷酸環(huán)化酶有幾種不同的立體構(gòu)象，激素與GTP協(xié)同作用可使這幾種不同的構(gòu)象之間發(fā)生互變。8.5.4 熱激蛋白誘導(dǎo)的基因表達(dá) 能與某個（類）專一蛋白因子結(jié)合，從而控制基因特異表達(dá)的DNA上游序列稱為應(yīng)答元件應(yīng)答元件。應(yīng)答元件主要有： 熱激應(yīng)答元件（HSE） 糖皮質(zhì)應(yīng)答元件（GRE） 金屬應(yīng)答元件（MRE） 應(yīng)答元件與細(xì)胞內(nèi)專一的轉(zhuǎn)錄因子相互作用，協(xié)調(diào)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。調(diào)控因子應(yīng)答元件DNA序列結(jié)合蛋白熱激熱激HSECNNGAANNTCCNNGHSF鎘鎘MRE

23、CGNCCCGGNCNC？佛波酯佛波酯TRETGACTCAAP1血清血清SRECCATATTAGGSRF許多生物在最適溫度范圍以上，能受熱誘導(dǎo)合成一系列熱休克蛋白（heat shock protein）。受熱后，果蠅細(xì)胞內(nèi)Hsp70 mRNA水平提高1000倍，就是因為熱激因子（heat shock factor，HSF）與hsp70基因TATA區(qū)上游60bp處的HSE相結(jié)合，誘發(fā)轉(zhuǎn)錄起始。熱激蛋白調(diào)控的基因表達(dá)機(jī)制8.5.5 RNA的加工成熟 各種基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物都是RNA，無論是rRNA、tRNA還是mRNA，初級轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物只有經(jīng)過加工，才能成為有生物功能的活性分子。1. rRNA和tRNA

24、的加工成熟rRNA加工有兩個內(nèi)容，一個是分子內(nèi)的切割，另一個是化學(xué)修飾。加工有兩個內(nèi)容，一個是分子內(nèi)的切割，另一個是化學(xué)修飾。真核生物的rRNA基因轉(zhuǎn)錄時先產(chǎn)生一個45S的前體rRNA，然后前體rRNA很快就會被加工降解，生成不同相對分子質(zhì)量的成熟rRNA。rRNA的化學(xué)修飾主要是核糖甲基化。tRNA基因轉(zhuǎn)錄時也可能先生成前體tRNA，tRNA基因的初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后，首先經(jīng)過核苷的修飾，生成4.5S前體tRNA，再剪接成為成熟tRNA(4S)。原核rRNA前體加工示意2 mRNA的加工成熟編碼蛋白質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA。這類基因產(chǎn)物在轉(zhuǎn)錄后要進(jìn)行一系列的加工變化，才能成為成熟的有生

25、物功能的mRNA。這些加工主要包括在mRNA的5末端加帽子，在其3末端加上poly(A)，進(jìn)行RNA的剪接以及核苷酸的甲基化修飾等。由于mRNA的這些結(jié)構(gòu)與它作為蛋白質(zhì)合成模板的功能有密切關(guān)系，所以是基因表達(dá)的重要調(diào)控環(huán)節(jié)。編碼蛋白質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄時首先生成前體pre-mRNA(或稱核不均一RNA，hnRNA)，然后再加工剪接為成熟mRNA。3 真核生物基因轉(zhuǎn)錄后加工的多樣性真核生物的基因可以按其轉(zhuǎn)錄方式分為兩大類： 簡單轉(zhuǎn)錄單位 復(fù)雜轉(zhuǎn)錄單位。這兩種轉(zhuǎn)錄方式雖然最終都產(chǎn)生蛋白質(zhì)，但它們的轉(zhuǎn)錄后加工方式是不同的。簡單轉(zhuǎn)錄單位。這類基因只編碼產(chǎn)生一個多肽，其原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有時需要加工，有時則不需要加工

26、。有3種不同形式： 第一種簡單轉(zhuǎn)錄單位，如組蛋白基因，它們沒有內(nèi)含子，因此不存在轉(zhuǎn)因此不存在轉(zhuǎn)錄后加工問題錄后加工問題，其mRNA3末端沒有poly(A)，但有一個保守的回文序列作為轉(zhuǎn)錄終止信號。 第二種簡單轉(zhuǎn)錄單位包括腺病毒蛋白IX、-干擾素和許多酵母蛋白質(zhì)基因，它們沒有內(nèi)含子，所編碼的所編碼的mRNA不需要剪接，但需要加不需要剪接，但需要加poly(A)。 第三種簡單轉(zhuǎn)錄單位包括和-珠蛋白基因及許多細(xì)胞蛋白基因，這些基因雖然都有內(nèi)含子，需要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后加工剪接，還要加需要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后加工剪接，還要加poly(A)，但它們只產(chǎn)生一個有功能的mRNA，所以仍然是簡單轉(zhuǎn)錄單位。簡單轉(zhuǎn)錄單位轉(zhuǎn)錄后加工

27、有3種不同形式復(fù)雜轉(zhuǎn)錄單位。含有復(fù)雜轉(zhuǎn)錄單位的主要是一些編碼組織和發(fā)育特異性蛋白質(zhì)的基因，它們除了含有數(shù)量不等的內(nèi)含子以外，其原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物能通過多種不同方式加工成兩個或兩個以上的mRNA。也有三種情況： 利用多個利用多個5端轉(zhuǎn)錄起始位點或剪接位點產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)端轉(zhuǎn)錄起始位點或剪接位點產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì) 利用多個加利用多個加poly(A)位點和不同的剪接方式產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。位點和不同的剪接方式產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。這類基因調(diào)控點不在5末端和內(nèi)含子的不同剪接，而在于有兩個或多個加poly(A)位點，因此可通過不同的剪接方式得到不同的蛋白質(zhì)。 雖無剪接，但有多個轉(zhuǎn)錄起始位點或加雖無剪接，但有多個轉(zhuǎn)錄起

28、始位點或加poly A位點的基因。位點的基因。 前前mRNA不同的剪接方式造成了不同組織中不同的降鈣素樣蛋白不同的剪接方式造成了不同組織中不同的降鈣素樣蛋白mRNA有效性的調(diào)控真核生物能否長時間、及時地利用成熟的mRNA分子翻譯出蛋白質(zhì)以供生長、發(fā)育的需要，是與mRNA的穩(wěn)定性以及屏蔽狀態(tài)的解除密切相關(guān)的。原核生物mRNA的半衰期很短，平均大約3min。高等真核生物迅速生長的細(xì)胞中mRNA的半衰期平均約為3h。在高度分化的終端細(xì)胞中許多mRNA極其穩(wěn)定，有的壽命長達(dá)幾天或十幾天，加上強(qiáng)啟動子的轉(zhuǎn)錄，使一些終端細(xì)胞特有的蛋白質(zhì)合成達(dá)到驚人的水平。例如，家蠶絲心蛋白基因具有很強(qiáng)的啟動子，幾天內(nèi)即可轉(zhuǎn)錄出105個絲心蛋白mRNA，而它的壽命長達(dá)4天，每個mRNA分子能重復(fù)翻譯出105個絲心蛋