總糖和還原糖的測定

1、總糖和還原糖的測定總糖和還原糖的測定 一、目的要求一、目的要求 掌握堿性銅試劑法測定還原糖的原理和操作方法。 二、原理二、原理 單糖和某些寡糖含有游離的醛基或酮基，有還原性，屬于還原糖；而多糖和蔗糖等屬于非還原性糖。利用多糖能被酸水解為單糖的性質可以通過測定水解后的單糖含量對總糖進行測定。 還原糖的測定方法多種，本實驗采用間接滴定法。其原理是：在堿性溶液中，二價銅離子被還原糖還原成一價的氧化亞銅，氧化亞銅在酸性環(huán)境中與一定量的過量碘起反應， 再用標準硫代硫酸鈉滴定剩余的碘，即可算出還原糖的含量。反應方程式是： 2NaOH + CuSO4=Cu(OH)2+ Na2SO4 COOK COOK Cu

2、(OH)2 + HCOH HCOHCOH HCO COONa COONaCu + 2 H2O COOK H C O HC O COONa Cu CHO （CHOH）4+ 2 H2O = 2 CH2OH COOK H C OH HCOH COONaCOOH （ CHOH）4+ Cu2OCH2OH + + 2 酒石酸甲鈉 可溶性的氧化銅絡合物 葡萄糖 酒石酸甲鈉 葡萄糖酸IO3 + 5 I + 6 H 3 I2 + 3 H2O+Cu2O + I2 + H Cu + I + H2 O+2+I2 + 2 S2O3 S4O6 + 2 I2-2- 因此，用硫代硫酸鈉滴定剩余的碘，在有已知濃度的標準還原糖濃

3、度時，可以間接地計算出未知樣品的還原糖的含量。三、試劑與器材 1. 試劑 銅試劑、0.005 mol/L硫代硫酸鈉溶液、2%碘化鉀溶液、 0.5 mg/mL標準葡萄糖溶液、1淀粉指示劑 2. 器材 堿式滴定管、恒溫水浴鍋四、操作步驟1.取6只試管，按照下表的次序加入試劑。另取6個小三角燒瓶，按相應的試管順序編號。 試劑管號H2O(mL)標準葡萄糖（mL）還原糖提取液（mL）總糖水解液（mL）銅試劑（mL） 沸 水 浴 中 煮 沸 15 分 鐘 空 白 試 驗124224 標 準 試 驗11142114總 糖 試驗1242242. 各試管冷卻后，搖動試管，使試管底部的紅色沉淀分散后傾入相應的三角瓶中；3. 分別在每個試管中加入2mL 2碘化鉀溶液和2mL 2 mol/L H2SO4，以洗滌管中的殘留物，并轉入相應的試管中，最后再用1mL蒸餾水洗滌試管2次；4. 用0.005 mol/L NaS2O3滴定至碘顏色接近消失時加入淀粉指示劑5滴，繼續(xù)滴定至藍色消失為止。五、計算 X = 0.5V空空 V標標X（V空空V未知未知）六、注意事項1.各試管的處理應一致，測定溶液應同時放入沸水中，再同時從沸水浴中取出。2.在用碘化鉀和硫酸洗滌試管時要洗凈，否則會影響滴定結果的準確性。3.滴定終點時溶液呈現二價銅離