分光光度計的使用

1、分光光度計的使用分光光度計的使用張國川光源光源單色器單色器吸收池吸收池檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)穩(wěn)壓電源穩(wěn)壓電源通過棱鏡或光柵得到一束近似的單色光通過棱鏡或光柵得到一束近似的單色光.波長可調(diào)波長可調(diào), 故選擇性好故選擇性好, 準確度高準確度高.分光光度法的主要部件框架分光光度法的主要部件框架（1 1）分光光度計的主要部件）分光光度計的主要部件光源光源：發(fā)出所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠：發(fā)出所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠 的光強度的光強度, ,穩(wěn)定。穩(wěn)定。 可見光區(qū)：可見光區(qū)：鎢燈，碘鎢燈鎢燈，碘鎢燈(320(3202500nm)2500nm) 紫外區(qū)：紫外區(qū)：氫燈，氘燈氫燈，氘燈(180(1803

2、75nm)375nm)單色器單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的 裝置。裝置。棱鏡棱鏡: :玻璃玻璃3503503200nm, 3200nm, 石英石英1851854000nm4000nm光柵光柵: :波長范圍寬波長范圍寬, , 色散均勻色散均勻, ,分辨性能好分辨性能好, , 使用方便使用方便吸收池吸收池：( (比色皿比色皿) )用于盛待測及參比溶液。用于盛待測及參比溶液。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池紫外區(qū)：石英池檢測器檢測器：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成 電流信號。電流信號。 光電池，光電管，

3、光電倍增管光電池，光電管，光電倍增管指示器指示器： 低檔儀器：刻度顯示低檔儀器：刻度顯示 中高檔儀器：數(shù)字顯示，自動掃描記錄中高檔儀器：數(shù)字顯示，自動掃描記錄（2）分光光度計的類型）分光光度計的類型722722型分光光度計結(jié)構(gòu)方框圖型分光光度計結(jié)構(gòu)方框圖光光源源吸收池吸收池檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)分光分光系統(tǒng)系統(tǒng) 分光光度計的使用分光光度計的使用 （1）選擇波長）選擇波長擰動此旋鈕擰動此旋鈕至所需波長至所需波長（2）將測試溶液裝入吸收池（操作如下）將測試溶液裝入吸收池（操作如下） 手拿毛玻璃面，手拿毛玻璃面， 先用待裝液漂洗先用待裝液漂洗 3 遍，遍， 裝入量為吸收池高度的裝入量為吸收池高度的 3 /

4、 4， 透光面透光面毛面毛面容容量量的的3/4用鏡頭紙擦凈透光面，用鏡頭紙擦凈透光面，不要將紙團成球，不要將紙團成球，不要來回擦，不要來回擦，而要向同一方向擦。而要向同一方向擦。所有關(guān)于吸收池的操作所有關(guān)于吸收池的操作均在實驗臺面之上的空均在實驗臺面之上的空間進行，這樣可保證一間進行，這樣可保證一旦吸收池滑落時掉在臺旦吸收池滑落時掉在臺面上，不至于摔破。面上，不至于摔破。通過手柄將池架推到頭，通過手柄將池架推到頭，此時黑體對著入射光。此時黑體對著入射光。遮光遮光黑體黑體2 號號1 號號0 號號放入吸收池架（透光面向著透光窗一側(cè)）。放入吸收池架（透光面向著透光窗一側(cè)）。放置順序為：放置順序為：

5、透透光光窗窗然后蓋上蓋子。然后蓋上蓋子。按按 MODE 鍵鍵（3）調(diào)節(jié)投射比為）調(diào)節(jié)投射比為 0.000至投射比（至投射比（T）燈亮）燈亮T 方式方式“0%”鍵鍵按一下按一下“0%”鍵，此時儀器自動校正后顯示鍵，此時儀器自動校正后顯示“0.000”。（有的分光光度計沒有黑體，需要在打開試樣（有的分光光度計沒有黑體，需要在打開試樣室蓋（起黑體的作用）的情況下調(diào)室蓋（起黑體的作用）的情況下調(diào) T = 0.000）（4）調(diào)透射比為）調(diào)透射比為 100%將手柄向操作者方向拉出一檔（聽到將手柄向操作者方向拉出一檔（聽到“咔嚓咔嚓”一一聲），此時參比（聲），此時參比（0 號）溶液進入光路。號）溶液進入光路

6、。按一下按一下“100% T”鍵，鍵，此時儀器顯示此時儀器顯示“BLA”表示儀器正在自動校表示儀器正在自動校正，校正完畢后顯示正，校正完畢后顯示“100.0”。100% TB L A100.0（5）重復(fù)（驗證）（）重復(fù)（驗證）（3）、（）、（4）兩步，直至透）兩步，直至透射比為射比為 0.000 和和 100% 不變。不變。 按按“MODE”鍵至鍵至“ABSORBANCE”燈亮（此燈亮（此時轉(zhuǎn)換到測吸光度功能上）。時轉(zhuǎn)換到測吸光度功能上）。將手柄向操作者方向再拉出一檔（聽到將手柄向操作者方向再拉出一檔（聽到“咔嚓咔嚓”一聲），此時被測（一聲），此時被測（1 號）溶液進入光路。號）溶液進入光路。

7、此時儀器所顯示的數(shù)值即為此時儀器所顯示的數(shù)值即為 1 號被測溶液的吸光號被測溶液的吸光度值（記錄下來）。度值（記錄下來）。- 0.0000.186再拉出一檔，儀器所顯示的數(shù)值為再拉出一檔，儀器所顯示的數(shù)值為 2 號溶液的吸號溶液的吸光度值。光度值。 將將 1、2 號吸收池換裝入號吸收池換裝入 3 、4 號溶液（黑體號溶液（黑體和和 0 號參比溶液不動），然后同法測定各溶液的號參比溶液不動），然后同法測定各溶液的吸光度、并一一記錄下來，記錄格式如下表。吸光度、并一一記錄下來，記錄格式如下表。1Lmg/(Fe) 1Lmg/(Fe) 吸吸光光度度(A)繪制標準曲線：繪制標準曲線： 根據(jù)未知溶液（根據(jù)未知溶液（6 號號溶液）的吸光度從標準溶液）的吸光度從標準曲線上查得試液濃度。曲線上查得試液濃度。原試液含鐵質(zhì)量濃度原試液含鐵質(zhì)量濃度 = 查得的濃度查得的濃度 稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)1Lmg550 查查得得 實驗報告格式實驗報告格式一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康?二、實驗原理二、實驗原理 三、實驗步驟三、實驗步驟mL/ClNH4V四、數(shù)據(jù)記錄四、數(shù)據(jù)記錄1Lmg/(Fe) 五、標準曲線（圖）五、標準曲線（圖） 六、從標準曲線上查得的六、從標準曲線上查