飽食、饑餓、腎上腺素、胰島素對肝糖原含量的影響.

1、飽食、饑餓、腎上腺素、胰島素飽食、饑餓、腎上腺素、胰島素對肝糖原含量的影響對肝糖原含量的影響組號：34成員：王陣華、王振國、王瑤實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?、實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證影響肝糖原含量的幾種因素2、學(xué)習(xí)肝糖原的定量測定方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 肝臟是哺乳動物調(diào)節(jié)血糖濃度的重要器官，對血糖濃度變化很敏感。當(dāng)動物飽食后，為防止血糖濃度過高，肝糖原合成增強(qiáng)，儲備糖；饑餓時為防止血糖濃度下降，肝糖原分解，釋出葡萄糖。血糖濃度的恒定受激素信號的調(diào)節(jié)控制，如腎上腺素和胰島素是作用相互抗拮的兩種激素，通過一系列酶促機(jī)制，調(diào)節(jié)血糖，影響肝糖原的含量：腎上腺素加速糖原分解，使血糖水平升高；胰島素則促進(jìn)糖原合成，是體內(nèi)唯一降低血糖

2、濃度的激素。 糖原是一種高分子化合物，微溶于水，無還原性。提取肝糖原時利用三氯乙酸破壞肝組織中的酶，使肝組織中的蛋白質(zhì)沉淀，而糖原仍留在溶液中。加熱時，糖原被酸水解為葡萄糖。蒽酮試劑中的濃硫酸可使糖原水解的葡萄糖進(jìn)一步脫水生成糠醛衍生物，后者和蒽酮作用形成的藍(lán)綠色物質(zhì)在620nm處有最大吸收值，可與同法處理的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行肝糖原含量的測定。實(shí)驗(yàn)器材與試劑實(shí)驗(yàn)器材與試劑 器材： 可見分光光度計、玻璃勻漿器、注射器、50ml容量瓶、移液器、刻度移液管、剪刀、鑷子、小漏斗、濾紙、解剖盤、小白鼠（成年，30g左右） 試劑： 5%（m/v)三氯乙酸溶液 0.9（m/v）生理鹽水 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液（ 含

3、純葡萄糖0.1mg/ml) 腎上腺素 ： （將0.1%（m/v）腎上腺素注射液用生理鹽水準(zhǔn)確稀釋50倍，使其濃度為20微克每毫升胰島素： 將市售胰島素用生理鹽水稀釋至0.1U/ml蒽酮試劑： 取蒽酮2g，溶于1000ml80%（V/V）硫酸中，當(dāng)日配制使用實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1.處理動物 將成年小白鼠（30g左右）分為4組，三組飽喂（飽食），一組禁食（至實(shí)驗(yàn)時應(yīng)禁食1824h左右）。試驗(yàn)前0.51h取兩只飽食小白鼠，1只腹腔注射腎上腺素15微克，另1只注射胰島素0.050.1U。2.制備肝勻漿 4只小白鼠（飽食、饑餓、注射腎上腺素、注射胰島素），在解剖盤中斷頭處死，取肝臟，用生理鹽水沖洗并吸干，分

4、別稱取0.5g(或1g），置勻漿器中，加入5%三氯乙酸溶液3ml,勻漿。3.水解糖原 將勻漿液分別轉(zhuǎn)入 4支試管中，沸水浴煮沸15min,使肝糖原水解。水解液冷卻后，分別過濾于4支50ml容量瓶中，以去離子水定容。4.顯色定量 取試管6支，按下表操作，分別讀出各測定管及標(biāo)準(zhǔn)管的A620 值。5.結(jié)果計算 按公式：(A測/A標(biāo))(1/1.11)，計算出100g肝臟所含肝糖原的克數(shù)。 注：1.11為轉(zhuǎn)換系數(shù)，葡萄糖的相對分子質(zhì)量為180，糖原中葡萄糖殘基的相對分子質(zhì)量為162，葡萄糖轉(zhuǎn)換成糖原需除以1.11。要點(diǎn)提示要點(diǎn)提示1、不要戲弄動物，否則影響血糖水平，以致影響肝糖原含量。2、肝臟離體后，肝糖原會迅速分解，故在殺死動物后，所得肝臟須用三氯乙酸溶液處理。思考題思考題1.肝糖原含量的動態(tài)變化對維持血糖水平有何意義？ 當(dāng)動物飽食后，為防止血糖濃度過高，肝糖原合成增強(qiáng)，儲備糖；饑餓時為防止血糖濃度下降，肝糖原分解，釋出葡萄糖。血糖必須保持一定的水平才能維持體內(nèi)各器官和組織的需要。2.腎上腺素、胰島素調(diào)節(jié)血糖水平的機(jī)制是什么？ 腎上腺素和胰島素是作用相互拮抗的兩種激素，通過一系列酶促機(jī)制，調(diào)節(jié)血糖，影響肝糖原