實(shí)驗(yàn)一、獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求及基本技術(shù)

1、 通過實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)相結(jié)合的方法，以學(xué)生自己動(dòng)通過實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)相結(jié)合的方法，以學(xué)生自己動(dòng)手操作為主，鍛煉學(xué)生的動(dòng)手能力，熟練用藥技手操作為主，鍛煉學(xué)生的動(dòng)手能力，熟練用藥技能和技巧，加深鞏固藥理知識(shí)。同時(shí)使能和技巧，加深鞏固藥理知識(shí)。同時(shí)使大家大家掌握掌握動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的基本操作技術(shù)，掌握動(dòng)物動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的基本操作技術(shù)，掌握動(dòng)物藥理的實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)設(shè)計(jì)，熟悉實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的過程，藥理的實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)設(shè)計(jì)，熟悉實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的過程，并具有整理和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及編寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的并具有整理和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及編寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的能力，為生產(chǎn)中記錄、整理、分析臨床病例，制能力，為生產(chǎn)中記錄、整理、分析臨床病例，制定正確的治

2、療方案，合理地使用藥物，有效地防定正確的治療方案，合理地使用藥物，有效地防治動(dòng)物疾病打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。治動(dòng)物疾病打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。一、實(shí)驗(yàn)前 1、仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，了解實(shí)驗(yàn)的目的、要求、實(shí)驗(yàn)步驟和操作程序。 2、結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)理論，做到充分理解。 3、預(yù)測該實(shí)驗(yàn)各個(gè)步驟應(yīng)得的結(jié)果。 4、注意和估計(jì)實(shí)驗(yàn)中可能發(fā)生的誤差。二、實(shí)驗(yàn)中 1、實(shí)驗(yàn)器材的安放力求整潔、清潔、有條不紊。2 2、按照實(shí)驗(yàn)步驟，以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度循序操作，按照實(shí)驗(yàn)步驟，以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度循序操作，不得進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。注意保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)不得進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。注意保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和標(biāo)本，節(jié)省實(shí)驗(yàn)器材和藥品。物和標(biāo)本，節(jié)省實(shí)驗(yàn)器材

3、和藥品。3 3、仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象；要、仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象；要隨時(shí)記錄并聯(lián)系講授內(nèi)容進(jìn)行思考。隨時(shí)記錄并聯(lián)系講授內(nèi)容進(jìn)行思考。 如：如：1.1.發(fā)生了什么現(xiàn)象？發(fā)生了什么現(xiàn)象？ 2. 2.為什么出現(xiàn)這種現(xiàn)象？為什么出現(xiàn)這種現(xiàn)象？ 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后1、將實(shí)驗(yàn)用具整理就緒，所用器械擦洗干凈。如有損壞或短少，應(yīng)立即報(bào)告負(fù)責(zé)教師。臨時(shí)借用的器械或物品，實(shí)驗(yàn)完畢后，點(diǎn)交負(fù)責(zé)教師。2、整理實(shí)驗(yàn)記錄，作出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。3、撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，按時(shí)交給負(fù)責(zé)教師評閱。 如果如果出現(xiàn)與理論不符的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，應(yīng)出現(xiàn)與理論不符的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，應(yīng)尋找原因（是操作失誤？實(shí)驗(yàn)誤差？個(gè)體差尋找原因（是操

4、作失誤？實(shí)驗(yàn)誤差？個(gè)體差異？還是預(yù)測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不科學(xué)？）。不容異？還是預(yù)測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不科學(xué)？）。不容許擅自改動(dòng)數(shù)據(jù)，要在實(shí)驗(yàn)和書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告許擅自改動(dòng)數(shù)據(jù)，要在實(shí)驗(yàn)和書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告過程中培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作作風(fēng)和實(shí)是求是過程中培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作作風(fēng)和實(shí)是求是的科學(xué)態(tài)度。的科學(xué)態(tài)度。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別鑒定和標(biāo)志 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液、體液的采集 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的相關(guān)問題一、小鼠的抓取與固定一、小鼠的抓取與固定 一般小鼠不會(huì)咬人，但抓取時(shí)動(dòng)作也要輕緩。一般小鼠不會(huì)咬人，但抓取時(shí)動(dòng)作也要輕緩。 先用右手抓住鼠尾提起，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)等粗糙表面，在其向先用右手抓住鼠尾提起，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)等粗糙

5、表面，在其向前爬行時(shí)，用左手的拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚。前爬行時(shí)，用左手的拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚。 然后將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，用左手的無名指然后將鼠體置于左手心中，把后肢拉直，用左手的無名指及小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，即可作注射或其及小指按住尾巴和后肢，前肢可用中指固定，即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。他實(shí)驗(yàn)操作。二、大鼠的抓取與固定 大鼠的牙齒很尖銳，不要突然襲擊式地去抓它，這樣容易咬傷手指。初學(xué)者應(yīng)戴上較厚的棉布手套，其抓取動(dòng)作與小鼠相似，右手輕輕抓住大鼠的尾巴向后拉，左手抓緊鼠兩耳和頭頸部的皮膚，并將鼠固定在左手中，右手即可進(jìn)行操作。如果需要長時(shí)

6、間固定做手術(shù)時(shí)，可參照固定兔的方法，將鼠固定的大鼠固定臺(tái)上。 三、豚鼠的抓取與固定 先用手掌以穩(wěn)準(zhǔn)的手法迅速扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，將手張開，用手指握住頸部，或握住身體的四周，再拿起來。懷孕或體重較大的豚鼠，應(yīng)以另手托其臀部。 四、兔的抓取與固定 從籠中捉兔時(shí)，先輕輕打開籠門，勿使受驚，隨之用手伸入籠內(nèi)，從頭前阻攔，兔便匍伏不動(dòng)。 此時(shí)用右手把兩耳輕壓于手心內(nèi)，抓住頸部的被毛和皮，提起兔，然后用左手托住它的臀部，兔身的重量大部分落入左手上。切忌用手抓家兔的兩耳、提抓腰部或背部。染色法染色法 涂染紅色：涂染紅色：0.5%0.5%中性紅中性紅或品紅溶液。或品紅溶液。涂染黃色：涂染黃色：3 3

7、5%5%苦味酸苦味酸溶液。溶液。黑色：煤焦油的酒精溶黑色：煤焦油的酒精溶液。液。涂染咖啡色：涂染咖啡色：2%2%硝酸銀硝酸銀溶液。溶液。 號(hào)牌法號(hào)牌法 用金屬制的牌號(hào)固定于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上。用金屬制的牌號(hào)固定于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上。 大動(dòng)物可將號(hào)碼烙壓在圓形或方形金屬牌上（最大動(dòng)物可將號(hào)碼烙壓在圓形或方形金屬牌上（最好用塑料、鋁或不銹鋼的，它可長期使用不生銹），好用塑料、鋁或不銹鋼的，它可長期使用不生銹），或?qū)⑻?hào)碼按實(shí)驗(yàn)分組編號(hào)烙在栓動(dòng)物頸部的皮帶上，或?qū)⑻?hào)碼按實(shí)驗(yàn)分組編號(hào)烙在栓動(dòng)物頸部的皮帶上，將此頸圈固定在動(dòng)物頸部。該法適用于狗等大型動(dòng)將此頸圈固定在動(dòng)物頸部。該法適用于狗等大型動(dòng)物。物。 打孔或剪

8、缺口法打孔或剪缺口法 可用打孔機(jī)在兔耳一定位置打一小孔來表示一可用打孔機(jī)在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號(hào)碼。如用剪子剪缺口，應(yīng)在剪后用滑石粉捻定的號(hào)碼。如用剪子剪缺口，應(yīng)在剪后用滑石粉捻一下，以免愈合后看不出來。該法可以編至一下，以免愈合后看不出來。該法可以編至1 199999999號(hào)，此種方法常在飼養(yǎng)大量動(dòng)物時(shí)作為終身號(hào)采用。號(hào)，此種方法常在飼養(yǎng)大量動(dòng)物時(shí)作為終身號(hào)采用。一、大鼠、小鼠1、尾靜脈取血 剪尾或切破鼠尾靜脈采血：使鼠尾靜脈充分充血后，用剪刀剪去尾尖，尾靜脈知即可流出，用手輕輕從尾根部向尾尖部擠幾下，可以取到數(shù)滴血。2、摘除眼球采血（眼眶動(dòng)脈和靜脈） 用左手抓住鼠，拇指和食指盡

9、量將鼠頭部皮膚捏緊，使鼠眼球突出。右手取一無鉤彎小鑷，在鼠右側(cè)眼球根部將眼球摘去，關(guān)將鼠倒置，頭向下，此法由于取過程動(dòng)物未死，心臟不斷在跳動(dòng)，因此取血量比斷頭法多，一般約可取出4-5%鼠體重的血液量。 3、后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺 穿刺部位是在眼球和眼眶后界之間的后眼眶靜脈叢。采用特制的硬玻璃吸管，管長15厘米，前端拉成毛細(xì)管。 取血時(shí)，用手從背部捉住動(dòng)物，同時(shí)用食指和拇指握住頸部，利用對頸部所加的輕壓力，使頭部靜脈淤血，將消毒的吸管用抗凝劑濕潤其內(nèi)壁，從內(nèi)側(cè)眼角將吸管轉(zhuǎn)向前，并輕壓刺入，深約4-5mm就達(dá)到后眼眶靜脈叢，血液自然進(jìn)入吸管內(nèi)。 在得到所需血量后，除去加于頸部的壓力，同時(shí)抽出吸管。5

10、、心臟 左手固定鼠，在左側(cè)第3-4肋間，用左手食指摸到心搏，右手取注射器選擇心搏最強(qiáng)處穿刺。5、心臟 左手固定鼠，在左側(cè)第3-4肋間，用左手食指摸到心搏，右手取注射器選擇心搏最強(qiáng)處穿刺。 6、頸靜脈 作一般頸外靜脈分離手術(shù)。頸靜脈暴露楚后，用注射器針頭沿靜脈平行方向刺入，抽取所需血量，采用此法取血，體重20克的小鼠可取0.6ml左右，體重300克的大鼠可取血8ml左右。二、家兔和豚鼠 1、心臟： 將兔仰臥固定在手術(shù)臺(tái)上，把左側(cè)胸部相當(dāng)于心臟的部位的被毛剪去，用碘伏、酒精消毒皮膚。實(shí)驗(yàn)者用左手觸摸左側(cè)第3-4肋間，選擇心跳最明顯處作穿刺。一般由胸骨左緣外3mm處將注射針頭插入第三肋間隙。穿刺時(shí)最

11、好用左手觸診心跳，在觸診的配合下穿刺。 經(jīng)6-7天后，可以重復(fù)進(jìn)行心臟穿刺術(shù)。家兔一次可采取全血量的1/6-1/5。2、耳靜脈采血 拔去耳緣部被毛，用手指彈動(dòng)兔耳，促進(jìn)靜脈充血。然后用左手拇指和食指壓住耳根端，待靜脈血液充盈后，針頭由接近耳尖部刺入靜脈，并順血管平行方向深入1厘米，將針頭與兔耳固定，即可進(jìn)行采血。采血完畢后，用棉球壓住針刺孔，以免出血。 3、頸動(dòng)脈采血 動(dòng)脈插管術(shù)：動(dòng)脈插管術(shù)：將線一根在遠(yuǎn)心端結(jié)扎動(dòng)脈，將線一根在遠(yuǎn)心端結(jié)扎動(dòng)脈，用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈的近心端，在結(jié)扎線與動(dòng)脈用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈的近心端，在結(jié)扎線與動(dòng)脈夾之間的動(dòng)脈長度越長越好，一般至少有夾之間的動(dòng)脈長度越長越好，一般至少有

12、3cm左右。將另一條絲線置于此段動(dòng)脈下方以備插左右。將另一條絲線置于此段動(dòng)脈下方以備插管插入后結(jié)扎用。用銳利的眼科剪刀在盡可能管插入后結(jié)扎用。用銳利的眼科剪刀在盡可能靠遠(yuǎn)心端結(jié)扎處作一斜形切口，約切開管徑的靠遠(yuǎn)心端結(jié)扎處作一斜形切口，約切開管徑的一半，然后將動(dòng)脈插管向心臟方向插入血管，一半，然后將動(dòng)脈插管向心臟方向插入血管，用已穿好的絲線結(jié)扎牢固，并用此絲線在插管用已穿好的絲線結(jié)扎牢固，并用此絲線在插管的突起上縛緊固定，以防插管從動(dòng)脈切口滑出。的突起上縛緊固定，以防插管從動(dòng)脈切口滑出。一、小鼠1、小鼠灌胃給藥 將喂管順咽后壁輕輕往下推，喂管會(huì)順著食管滑入小鼠的胃，插入深度約3cm。 其要點(diǎn)在于

13、動(dòng)物要固定好，頭部和頸部保持很平；進(jìn)針方向正確，一定要沿著右口角進(jìn)針，再順著食管方向插入胃內(nèi)，決不可進(jìn)針不順硬向里插，否則會(huì)注入肺內(nèi)，造成死亡。2注射給藥（1）皮下注射給藥 作皮下注射常選項(xiàng)背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚。將皮膚提起，注射針頭取一鈍角角度刺入皮下，把針頭輕輕向左右擺動(dòng)，易擺動(dòng)則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸。注射量約為0.1-0.3ml/10g體重。（2）肌肉注射給藥 小鼠體積小，肌肉少，很少采用肌肉注射。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時(shí)，采用肌肉注射。用藥量不超過0.1ml/10g體重。(3)靜脈注射給藥 用75%酒精棉球反復(fù)擦拭尾部,以達(dá)到消毒和使尾部血管擴(kuò)張的目的. 以

14、左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈更為充盈, 右手持4號(hào)針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針, 注射量為0.05-0.1ml/10g體重。 鼠尾靜脈血管分布有一定特點(diǎn)：鼠尾左右兩側(cè)是兩根尾靜脈，其位置比較固定，容易注入。 （4）腹腔注射 使鼠腹部朝上，鼠頭略低于尾部，在下腹部靠近腹白線的兩惻進(jìn)行穿刺，保持針尖不動(dòng)，回抽針?biāo)?，如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量為0.1-0.2ml/10g體重。進(jìn)行腹腔注射時(shí)應(yīng)注意： 1、針頭刺入部不宜太近上腹部或太 深，以免刺破內(nèi)臟。 2、針頭與腹腔的角度不宜太小，否則容易刺入皮下。 3、用的針頭不要太粗，以免藥液注射后從注

15、射孔流出。注射后用棉球按一下注射部位。 4、為避免注射后藥液從針孔流出，也可在注射時(shí)先使針頭在皮下向前推一小段距離，然后再刺入腹腔。 1 1、灌胃給藥、灌胃給藥 使用開口器和導(dǎo)尿管灌胃。灌胃時(shí)，將動(dòng)物固定好，把張使用開口器和導(dǎo)尿管灌胃。灌胃時(shí)，將動(dòng)物固定好，把張口器放入上下腭之間，此時(shí)動(dòng)物自然會(huì)咬住張口器；實(shí)驗(yàn)者用口器放入上下腭之間，此時(shí)動(dòng)物自然會(huì)咬住張口器；實(shí)驗(yàn)者用左手抓住動(dòng)物的口，然后右手取適宜的粗細(xì)的導(dǎo)尿管，由張口左手抓住動(dòng)物的口，然后右手取適宜的粗細(xì)的導(dǎo)尿管，由張口器中央小孔插入，導(dǎo)管經(jīng)口沿頜后壁慢慢送入食管內(nèi)。器中央小孔插入，導(dǎo)管經(jīng)口沿頜后壁慢慢送入食管內(nèi)。 插時(shí)動(dòng)作要輕，防止插入氣

16、管。插后可在導(dǎo)管口用一根動(dòng)插時(shí)動(dòng)作要輕，防止插入氣管。插后可在導(dǎo)管口用一根動(dòng)物毛試一下有無隨動(dòng)物呼吸毛有擺動(dòng)現(xiàn)象，如無即表示已進(jìn)入物毛試一下有無隨動(dòng)物呼吸毛有擺動(dòng)現(xiàn)象，如無即表示已進(jìn)入胃內(nèi)。胃內(nèi)。 在導(dǎo)管口處連接裝有藥液的注射器，即可慢慢灌胃內(nèi)。在導(dǎo)管口處連接裝有藥液的注射器，即可慢慢灌胃內(nèi)。2、靜脈給藥 先拔去注射部位的被毛，用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳，使靜脈充盈，右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入，將藥液注入，然后拔出針頭，用手壓迫針眼片刻。3、肌肉注射給藥 多選用兩側(cè)臀部或股部進(jìn)行肌肉注射。固定動(dòng)物后，右手持注射器，使之與肌肉呈60夾角，一次刺入肌肉。注射完畢后用手輕輕按摩注射部位，幫助藥液吸收。4、涂布法給藥5、直腸給藥和陰道給藥一、術(shù)后護(hù)理二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死方法 1、頸椎脫臼法 用左手拇指和食指捏住小白鼠頭的后部，并用力下壓，右手抓住鼠尾，用力向后上方拉，即可使頸椎脫臼，瞬間死亡。2、空氣栓塞法 向動(dòng)物靜脈內(nèi)注入一定量的空氣，使之發(fā)生栓塞而死亡。兔一般選用耳緣靜脈。兔靜脈內(nèi)注入2040ml空氣即可致死。3、放血法 輕度麻醉動(dòng)物后，固定于手術(shù)臺(tái)上，行股部手術(shù)。暴露股三角區(qū)，分離股動(dòng)脈（向心端用動(dòng)脈夾夾?。?，并插入一根塑料管。打開動(dòng)脈