生物科學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課

1、Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新授課老師：授課老師： 張金葉張金葉, ,龔慧明龔慧明授課班級(jí)：授課班級(jí)： 11/1211/12級(jí)生物科學(xué)級(jí)生物科學(xué)授課時(shí)間：授課時(shí)間： 2013-20142013-2014年度上半學(xué)期年度上半學(xué)期學(xué)學(xué) 時(shí)：時(shí)： 1818學(xué)時(shí)學(xué)時(shí)考考 核：核： 60%60%考試考試+40%+40%實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新服裝整潔、秩序井然、前后清服裝整潔、秩序井然

2、、前后清點(diǎn)、節(jié)約與賠償、清潔衛(wèi)生點(diǎn)、節(jié)約與賠償、清潔衛(wèi)生 ）實(shí)驗(yàn)報(bào)告及時(shí)完成，有所思考）實(shí)驗(yàn)報(bào)告及時(shí)完成，有所思考）鉛筆、清晰、突出典型特征、不抄鉛筆、清晰、突出典型特征、不抄繪、引線(xiàn)、注字及放大倍數(shù)）繪、引線(xiàn)、注字及放大倍數(shù)）Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)胞膜的通透性觀(guān)察細(xì)胞膜的通透性觀(guān)察實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 死活細(xì)胞的鑒別死活細(xì)胞的鑒別實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 人微量外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)人微量外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)

3、驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 人染色體標(biāo)本的制備人染色體標(biāo)本的制備實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 人染色體分帶技術(shù)人染色體分帶技術(shù)GG帶帶Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal Un

4、iversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新暗視野顯微鏡暗視野顯微鏡 以丁達(dá)爾現(xiàn)象為原理。以丁達(dá)爾現(xiàn)象為原理。 特點(diǎn)：利用拋物型聚光器進(jìn)行斜射照明特點(diǎn)：利用拋物型聚光器進(jìn)行斜射照明Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德

5、 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新正置顯微鏡正置顯微鏡倒置顯微鏡倒置顯微鏡倒置熒光顯微鏡倒置熒光顯微鏡Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新倒置激光共聚焦顯微鏡倒置激光共聚焦顯微鏡Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新 分辨率（分辨力）分辨率（分辨力） 指在指在25cm25cm的明視距離處能區(qū)分開(kāi)被檢物體上兩個(gè)相近質(zhì)點(diǎn)間的最小的明視距離處能區(qū)分開(kāi)被檢物體上兩個(gè)相近質(zhì)點(diǎn)間的最小距離。距離。 放大率與有效放大倍數(shù)放大率與有效放大倍數(shù)

6、放大率放大率/ /放大倍數(shù)放大倍數(shù)(M)=(M)=目鏡放大倍數(shù)目鏡放大倍數(shù)(Mob)(Mob)物鏡放大倍數(shù)物鏡放大倍數(shù)(Moc)(Moc)有效放大倍數(shù)：物鏡數(shù)值孔徑的有效放大倍數(shù)：物鏡數(shù)值孔徑的500-1000500-1000倍。倍。 清晰度清晰度 指顯微鏡形成輪廓明顯的物象的能力。指顯微鏡形成輪廓明顯的物象的能力。 焦點(diǎn)深度焦點(diǎn)深度 當(dāng)顯微鏡對(duì)標(biāo)本的某一點(diǎn)或平面聚焦時(shí)，焦點(diǎn)平面上下物象清晰的距當(dāng)顯微鏡對(duì)標(biāo)本的某一點(diǎn)或平面聚焦時(shí)，焦點(diǎn)平面上下物象清晰的距離或深度。離或深度。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)

7、志 創(chuàng)新材料：柿胞間連絲裝片、動(dòng)物細(xì)胞分裂裝片和浮游材料：柿胞間連絲裝片、動(dòng)物細(xì)胞分裂裝片和浮游 生物等。生物等。試劑：香柏油、二甲苯等試劑：香柏油、二甲苯等器材：生物顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡、器材：生物顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡、 熒光顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。熒光顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新 普通生物顯微鏡的構(gòu)造及使用方法。普通生物顯微鏡的構(gòu)造及使用方法。 觀(guān)察標(biāo)本，熟悉細(xì)胞的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)。觀(guān)察標(biāo)本，熟悉細(xì)胞的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)。 暗視野顯微鏡的簡(jiǎn)易制作及

8、浮游生物的觀(guān)察。暗視野顯微鏡的簡(jiǎn)易制作及浮游生物的觀(guān)察。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新u 顯微鏡的構(gòu)造及使用顯微鏡的構(gòu)造及使用u 暗視野顯微鏡的制作及使用暗視野顯微鏡的制作及使用Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新亮度調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān)亮度調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān)鏡筒鏡筒目鏡目鏡目鏡目鏡鏡臂鏡臂物鏡物鏡載物臺(tái)載物臺(tái)物鏡轉(zhuǎn)換器物鏡轉(zhuǎn)換器聚光鏡聚光鏡底座底座調(diào)焦器調(diào)焦器聚光鏡升降輪聚光鏡升降輪顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造頭部固定螺釘頭部

9、固定螺釘Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新顯微鏡的使用顯微鏡的使用柿細(xì)胞胞間連絲柿細(xì)胞胞間連絲動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過(guò)程Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新任何旋鈕轉(zhuǎn)動(dòng)有困難時(shí)，絕不能用力過(guò)大，而應(yīng)查明原因，排除障礙。任何旋鈕轉(zhuǎn)動(dòng)有困難時(shí)，絕不能用力過(guò)大，而應(yīng)查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時(shí)，要向老師說(shuō)明，幫助解決。如果自己不能解決時(shí)，要向老師說(shuō)明，幫助解決。保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰

10、塵落到鏡頭上；盡量避免試劑或溶液保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上；盡量避免試劑或溶液沾污或滴到顯微鏡上。顯微鏡用過(guò)后，應(yīng)用清潔棉布輕輕擦拭；鏡頭沾污或滴到顯微鏡上。顯微鏡用過(guò)后，應(yīng)用清潔棉布輕輕擦拭；鏡頭有灰塵，必須用擦鏡紙擦。有灰塵，必須用擦鏡紙擦。每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束，把顯微鏡以拿出時(shí)的樣子放回到鏡盒里（即轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束，把顯微鏡以拿出時(shí)的樣子放回到鏡盒里（即轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡頭，使之頭，使之“八八”字形向外；降低鏡筒至底部）。字形向外；降低鏡筒至底部）。制作暗視野紙片空隙大小適中才能取得較好的觀(guān)察效果。制作暗視野紙片空隙大小適中才能取得較好的觀(guān)察效果。注意根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂特征來(lái)辨別細(xì)胞分

11、裂的各個(gè)時(shí)相。注意根據(jù)動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂特征來(lái)辨別細(xì)胞分裂的各個(gè)時(shí)相。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新繪出你所觀(guān)察到的柿胞間連絲、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂及暗視繪出你所觀(guān)察到的柿胞間連絲、動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂及暗視野下浮游生物圖片。野下浮游生物圖片。為什么在觀(guān)察動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂標(biāo)本時(shí)，同一標(biāo)本中會(huì)出為什么在觀(guān)察動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂標(biāo)本時(shí)，同一標(biāo)本中會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞分裂的不同時(shí)相？現(xiàn)細(xì)胞分裂的不同時(shí)相？在制作暗視野時(shí)，應(yīng)注意哪些關(guān)鍵環(huán)節(jié)？在制作暗視野時(shí)，應(yīng)注意哪些關(guān)鍵環(huán)節(jié)？Chongqing Normal Universi

12、tyChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)胞膜的通透性觀(guān)察細(xì)胞膜的通透性觀(guān)察Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新觀(guān)察細(xì)胞膜的通透性。觀(guān)察細(xì)胞膜的通透性。了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。掌握普通光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞及細(xì)胞碎片的形態(tài)。掌握普通光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞及細(xì)胞碎片的形態(tài)。Chongqing Normal

13、UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新細(xì)胞膜細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性選擇通透性屏屏障。障。溶血現(xiàn)象：溶血現(xiàn)象：將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液的現(xiàn)象。蛋白溶液的現(xiàn)象。將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對(duì)將紅細(xì)胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細(xì)胞膜對(duì)各種溶質(zhì)的通透性不同，膜

14、兩側(cè)的滲透壓平衡會(huì)發(fā)各種溶質(zhì)的通透性不同，膜兩側(cè)的滲透壓平衡會(huì)發(fā)生改變，也會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象。生改變，也會(huì)發(fā)生溶血現(xiàn)象。因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時(shí)間長(zhǎng)短可作為測(cè)量物質(zhì)因此，發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時(shí)間長(zhǎng)短可作為測(cè)量物質(zhì)進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。進(jìn)入紅細(xì)胞速度的一種指標(biāo)。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新材料：材料：雞血細(xì)胞雞血細(xì)胞器材：器材：普通顯微鏡、試管、試管架、滴管、普通顯微鏡、試管、試管架、滴管、 載玻片、蓋玻片、擦鏡紙、記號(hào)筆等。載玻片、蓋玻片、擦鏡紙、記號(hào)筆等。試劑：試劑： 0.17 mol/L Na

15、Cl 0.17 mol/L NaCl 、0.17 mol/L NH0.17 mol/L NH4 4Cl Cl 、 0.17 mol/L 0.17 mol/L 醋酸銨醋酸銨 、0.17 mol/L 0.17 mol/L 硝酸銨、硝酸銨、 0.12 mol/L 0.12 mol/L草酸銨、草酸銨、 0.12 mol/L NaSO0.12 mol/L NaSO4 4溶液、溶液、 0.32 mol/L 0.32 mol/L 葡萄糖、葡萄糖、0.32 mol/L 0.32 mol/L 甘油、甘油、 0.32 mol/L 0.32 mol/L 乙醇、乙醇、 0.32 mol/L 0.32 mol/L 丙酮

16、、蒸餾水。丙酮、蒸餾水。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新雞紅細(xì)胞懸液的制備。雞紅細(xì)胞懸液的制備。低滲溶血的觀(guān)察。低滲溶血的觀(guān)察。顯微鏡檢查細(xì)胞的完整性。顯微鏡檢查細(xì)胞的完整性。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新五五. 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)膠頭滴管不可混用，以免造成溶液間的交叉污染。膠頭滴管不可混用，以免造成溶液間的交叉污染。試管中有紅細(xì)胞和測(cè)試溶液時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力搖晃，以試管中有紅細(xì)胞和測(cè)試溶液時(shí)，不應(yīng)強(qiáng)力搖晃

17、，以免造成人為的紅細(xì)胞破裂。免造成人為的紅細(xì)胞破裂。注意組實(shí)驗(yàn)過(guò)程的同步性，尤其滴加血液的操作要注意組實(shí)驗(yàn)過(guò)程的同步性，尤其滴加血液的操作要迅速。迅速。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新六六. 作作 業(yè)與思考業(yè)與思考記錄各種溶液所發(fā)生的溶血現(xiàn)象及溶血時(shí)間。記錄各種溶液所發(fā)生的溶血現(xiàn)象及溶血時(shí)間。比較并分析各種溶液發(fā)生溶血現(xiàn)象的原理。比較并分析各種溶液發(fā)生溶血現(xiàn)象的原理。為什么同一種溶液，有的同學(xué)會(huì)得出不同的結(jié)為什么同一種溶液，有的同學(xué)會(huì)得出不同的結(jié)論？論？思考溶血實(shí)驗(yàn)在研究中應(yīng)用的可能性。思考溶血實(shí)

18、驗(yàn)在研究中應(yīng)用的可能性。試管編號(hào)所加試劑是否溶血溶血時(shí)間結(jié)果分析Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新1. 溶血空斑實(shí)驗(yàn)溶血空斑實(shí)驗(yàn)是體外檢測(cè)單個(gè)抗體形成細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞）的一種方法，即將經(jīng)綿羊紅細(xì)胞（SRBC）免疫過(guò)的家兔淋巴結(jié)或小鼠脾臟制成細(xì)胞懸液，與一定量的SRBC結(jié)合，于37作用下，免疫活性淋巴細(xì)胞能釋放出溶血素，在補(bǔ)體的參與下，使抗體形成細(xì)胞周?chē)腟RBC溶解，從而

19、在每一個(gè)抗體形成細(xì)胞周?chē)?，形成肉眼可?jiàn)的溶血空斑。每個(gè)空斑表示一個(gè)抗體形成細(xì)胞，空斑大小表示抗體生成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。由于溶血空斑實(shí)驗(yàn)具有特異性高，篩選力強(qiáng)，可直接觀(guān)察等優(yōu)點(diǎn)，故可用做判定免疫功能的指標(biāo)，觀(guān)察免疫應(yīng)答的動(dòng)力學(xué)變化，并可進(jìn)行抗體種類(lèi)及亞類(lèi)的研究。2. 有時(shí)在提紅細(xì)胞膜蛋白時(shí)要用到，先用低滲溶液讓紅細(xì)胞脹破，高速離心收集、純化膜蛋白 。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué)

20、 勵(lì)志 創(chuàng)新學(xué)習(xí)并掌握死活細(xì)胞鑒別的原理及方法。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新死活細(xì)胞的鑒別方法：質(zhì)壁分離法 、染色法和儀器分析法染色法（化學(xué)染色和熒光染色）其原理是：許多酸性染料不容易穿過(guò)活細(xì)胞的質(zhì)膜進(jìn)入胞內(nèi)，卻能滲入死亡的細(xì)胞內(nèi)，使其著色，以此來(lái)鑒別死活細(xì)胞。 臺(tái)盼藍(lán)染色法、甲基藍(lán)染色、臺(tái)盼藍(lán)染色法、甲基藍(lán)染色、伊紅伊紅Y。微電極技術(shù)微電極技術(shù)（利用死活細(xì)胞膜兩側(cè)電位的差異）、全自全自動(dòng)分析細(xì)胞記數(shù)儀動(dòng)分析細(xì)胞記數(shù)儀和流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀。儀器分析法中性紅染色、美藍(lán)染色、美藍(lán)染色、熒光素雙醋

21、酸酯染色、二丙酸脂熒光素染色、 Hoechst、碘化丙啶（PI）。其原理是：許多堿性染料能夠滲入到活細(xì)胞內(nèi)，由于活細(xì)胞的代謝作用而是其顯色。死細(xì)胞染色活細(xì)胞染色死活細(xì)胞鑒定原理死活細(xì)胞鑒定原理依據(jù)死活細(xì)胞在依據(jù)死活細(xì)胞在生理機(jī)能生理機(jī)能和和性質(zhì)性質(zhì)上的差異不同。上的差異不同。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新圖圖1. 血球計(jì)數(shù)板示意圖血球計(jì)數(shù)板示意圖A：血球計(jì)數(shù)板正面；：血球計(jì)數(shù)板正面；B：血球計(jì)數(shù)板側(cè)面：血球計(jì)數(shù)板側(cè)面1. 血球計(jì)數(shù)板；血球計(jì)數(shù)板；2.蓋玻片；蓋玻片；3. 計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)室圖圖2. 血

22、球計(jì)數(shù)板血球計(jì)數(shù)板1mm25個(gè)中格：個(gè)中格：1mL培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)=N/5x25x10000 x稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)16個(gè)中格：個(gè)中格：1mL培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)培養(yǎng)液中細(xì)胞數(shù)= N/4x16x10000 x稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新材料：血細(xì)胞試劑：0.4臺(tái)盼藍(lán)溶液（生理鹽水配制）、PBS。器材：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管等。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新血細(xì)胞懸液的制備

23、 取一定量的新鮮血液加入20等份的PBS。染色制片 取0.5ml細(xì)胞懸液放入干凈試管中，加入1-2滴臺(tái)盼藍(lán)染液，混合，2min后制成臨時(shí)裝片，鏡檢。3. 細(xì)胞存活率的計(jì)算 細(xì)胞存活率=（細(xì)胞總數(shù)-死細(xì)胞數(shù)）/細(xì)胞總數(shù)100%Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)多選擇幾個(gè)視野，以多個(gè)視野內(nèi)的平均值作為細(xì)胞的存活率。以臺(tái)盼藍(lán)排除法在顯微鏡下計(jì)數(shù)死活細(xì)胞數(shù)目需注意染色時(shí)間。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)

24、新計(jì)數(shù)死活細(xì)胞數(shù)，計(jì)算出細(xì)胞存活率。討論細(xì)胞存活率在研究中的應(yīng)用和意義。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新 中性紅染色：常用染料之一，是細(xì)胞器的專(zhuān)有染料。利用細(xì)胞膜的通透性差 異，用來(lái)染原生動(dòng)物和顯示動(dòng)植物組織中活細(xì)胞的內(nèi)含物等。中性紅無(wú)毒，常做活體染色的染料。 臺(tái)盼藍(lán)染色：當(dāng)細(xì)胞損傷或死亡時(shí)，臺(tái)盼藍(lán)可穿透變性的細(xì)胞膜，與解體的DNA 結(jié)合，使其著色。而活細(xì)胞能阻止染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。故可以鑒別死細(xì)胞與活細(xì)胞。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)，臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)的是細(xì)胞膜的完整性， 通常認(rèn)為細(xì)胞膜喪失完整性，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。

25、通過(guò)顯微鏡很容易就能識(shí)別出死亡的被臺(tái)盼藍(lán)染色的細(xì)胞，并可使用細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。 美藍(lán)染色法：美藍(lán)是一種無(wú)毒性染料，它的氧化型是藍(lán)色的，而還原型是無(wú)色的，用它來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色，由于細(xì)胞中新陳代謝的作用，使細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o(wú)色的還原型，所以活細(xì)胞無(wú)色，而對(duì)于死細(xì)胞或代謝緩慢的老細(xì)胞，則因它們無(wú)此還原能力或還原能力極弱，而被美藍(lán)染成藍(lán)色或淡藍(lán)色。因此，用美藍(lán)水浸片不僅可觀(guān)察酵母的形態(tài)，還可以區(qū)分死、活細(xì)胞. 甲基藍(lán)染色法：甲基藍(lán)染色與臺(tái)盼藍(lán)類(lèi)似的染色機(jī)理。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal Universit

26、y厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新每個(gè)血球計(jì)數(shù)板上有兩個(gè)計(jì)數(shù)室（圖每個(gè)血球計(jì)數(shù)板上有兩個(gè)計(jì)數(shù)室（圖1）。血球計(jì)數(shù)板上的符號(hào)和數(shù)字（圖）。血球計(jì)數(shù)板上的符號(hào)和數(shù)字（圖1）的含義是：）的含義是：XB-K-25為計(jì)數(shù)板的型號(hào)和規(guī)格，表示此計(jì)數(shù)板中計(jì)數(shù)室分為計(jì)數(shù)板的型號(hào)和規(guī)格，表示此計(jì)數(shù)板中計(jì)數(shù)室分25個(gè)中格；個(gè)中格；0.1mm為蓋上蓋玻片后計(jì)數(shù)室的高；為蓋上蓋玻片后計(jì)數(shù)室的高；1/400mm2表示計(jì)數(shù)室面積是表示計(jì)數(shù)室面積是1mm2（計(jì)數(shù)室邊長(zhǎng)（計(jì)數(shù)室邊長(zhǎng)1mm），分），分400個(gè)小格，每小格面積是個(gè)小格，每小格面積是1/400mm2（圖（圖2），），9個(gè)大方格中只有中間的有小方格的中央大方格才是計(jì)數(shù)室。不要

27、認(rèn)為個(gè)大方格中只有中間的有小方格的中央大方格才是計(jì)數(shù)室。不要認(rèn)為9個(gè)大個(gè)大方格都是計(jì)數(shù)室。方格都是計(jì)數(shù)室。計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格：一種是計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格：一種是16x25型，即大方格內(nèi)分為型，即大方格內(nèi)分為16中格，每中格，每一中格又分為一中格又分為25小格（圖小格（圖2）；另一種是）；另一種是25x16型，即大方格內(nèi)分為型，即大方格內(nèi)分為25中格，每中格，每一中格又分為一中格又分為16小格。但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個(gè)共同的小格。但是不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，它們都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即每一大方格都是由特點(diǎn)，即每一大方格都是由16x25=25x16=400個(gè)小方格組成。個(gè)小方格

28、組成。計(jì)數(shù)時(shí)，若計(jì)數(shù)室是由計(jì)數(shù)時(shí)，若計(jì)數(shù)室是由16個(gè)中方格組成，數(shù)左上、左下、右上、右下的個(gè)中方格組成，數(shù)左上、左下、右上、右下的4個(gè)中方格（即個(gè)中方格（即100個(gè)小方格）的菌數(shù)。如果是由個(gè)小方格）的菌數(shù)。如果是由25個(gè)中方格組成的計(jì)數(shù)室，除個(gè)中方格組成的計(jì)數(shù)室，除數(shù)上述數(shù)上述4個(gè)中方格外，還需數(shù)中央個(gè)中方格外，還需數(shù)中央1個(gè)中方格（即個(gè)中方格（即80個(gè)小格方）的菌數(shù)（圖個(gè)小格方）的菌數(shù)（圖3）。）。計(jì)數(shù)時(shí)對(duì)壓在中格四條線(xiàn)上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其夾角上的細(xì)胞（一般計(jì)數(shù)時(shí)對(duì)壓在中格四條線(xiàn)上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其夾角上的細(xì)胞（一般選左邊和上邊的線(xiàn)）。選左邊和上邊的線(xiàn)）。Chongqing No

29、rmal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新死死活細(xì)胞活細(xì)胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。義。細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中要隨時(shí)記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，過(guò)程中要隨時(shí)記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，需要經(jīng)常測(cè)定細(xì)胞的存活率；在需要經(jīng)常測(cè)定細(xì)胞的存活率；在腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞的研究中，的研究中，為了檢驗(yàn)各種藥物對(duì)為了檢驗(yàn)各種藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞的殺傷力，也需要測(cè)的殺傷力，也需要測(cè)定定腫瘤細(xì)胞腫瘤細(xì)胞的存活率。在的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)臨床醫(yī)學(xué)中死中死活細(xì)胞活細(xì)胞的鑒的鑒定也有很大的應(yīng)用，例如為了檢測(cè)某一男子的生育定也有

30、很大的應(yīng)用，例如為了檢測(cè)某一男子的生育能力，測(cè)定精子細(xì)胞的存活力是比較常用的辦法。能力，測(cè)定精子細(xì)胞的存活力是比較常用的辦法。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongq

31、ing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新三三 試劑與器材試劑與器材材料：材料： 人指血。人指血。試劑：試劑：RPMI-1640RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清、肝素、培養(yǎng)基、胎牛血清、肝素、PHAPHA、 雙抗、雙抗、PBSPBS，2g/ml2g/ml的秋水仙素、酒精等。的秋水仙素、酒精等。器材：超凈工作臺(tái)、恒溫培養(yǎng)箱、注射器、燒杯、器材：超凈工作臺(tái)、恒溫培養(yǎng)箱、注射器、燒杯、 量筒、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、酒精燈等。量筒、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、酒精燈等。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Cho

32、ngqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新嚴(yán)格注意采血過(guò)程的無(wú)菌操作。嚴(yán)格注意采血過(guò)程的無(wú)菌操作。采血時(shí)，采血針不可混用。采血時(shí)，采血針不可混用。采血后，各自的培養(yǎng)瓶應(yīng)做好標(biāo)記。采血后，各自的培養(yǎng)瓶應(yīng)做好標(biāo)記。Chongqing Normal Univers

33、ityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新RPMI1640 培養(yǎng)基中由多種氨基酸、維生素、生物素、無(wú)機(jī)鹽等按培養(yǎng)基中由多種氨基酸、維生素、生物素、無(wú)機(jī)鹽等按不同比例配置而成，再加入酚紅作指示劑是細(xì)胞體外培養(yǎng)的不同比例配置而成，再加入酚紅作指示劑是細(xì)胞體外培養(yǎng)的必要營(yíng)養(yǎng)素。必要營(yíng)養(yǎng)素。10.4gRPM

34、I164010.4gRPMI1640干粉溶于干粉溶于900ml900ml三蒸水中，磁力三蒸水中，磁力攪拌攪拌2h2h，充分溶解，用，充分溶解，用NaHCO3NaHCO3調(diào)調(diào)pH=7.2pH=7.2，然后定容至，然后定容至1000ml1000ml，無(wú)菌室內(nèi)抽濾滅菌、分裝，無(wú)菌室內(nèi)抽濾滅菌、分裝，44保存，長(zhǎng)時(shí)間存放保存，長(zhǎng)時(shí)間存放英防御英防御-20.-20.抗凝劑抗凝劑 抗凝劑常采用肝素，肝素鈉?？鼓齽┏２捎酶嗡?，肝素鈉。肝素肝素：一種多糖，能阻止白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞集結(jié)在：一種多糖，能阻止白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞集結(jié)在一起而影響培養(yǎng)的質(zhì)量，但肝素濃度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致溶血。一般一起而影響培養(yǎng)的質(zhì)量

35、，但肝素濃度過(guò)大會(huì)導(dǎo)致溶血。一般劑量是劑量是100100單位肝素液可抗凝單位肝素液可抗凝5ml5ml外周血液。外周血液。肝素鈉肝素鈉為粉劑，每毫克為粉劑，每毫克130130單位。單位。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新植物凝集素：植物凝集素：PHA 從豆子中提取出來(lái)的，其化學(xué)成分為糖蛋白，具有刺激從豆子中提取出來(lái)的，其化學(xué)成分為糖蛋白，具有刺激淋巴細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂的作用。用量不足影響分裂細(xì)胞的數(shù)淋巴細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂的作用。用量不足影響分裂細(xì)胞的數(shù)量；用量過(guò)高則使培養(yǎng)的外周血凝集而影響淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)。量

36、；用量過(guò)高則使培養(yǎng)的外周血凝集而影響淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)。秋水仙素秋水仙素 是從地中海的一種名叫秋水仙的鱗莖中提取的一種植物是從地中海的一種名叫秋水仙的鱗莖中提取的一種植物堿，他的作用是：堿，他的作用是： （1 1）抑制細(xì)胞紡錘死的形成，使細(xì)胞分裂停止在中期，）抑制細(xì)胞紡錘死的形成，使細(xì)胞分裂停止在中期，從而起到積累大量中期細(xì)胞的作用。從而起到積累大量中期細(xì)胞的作用。 （2 2）是染色體單體縮短分開(kāi)，呈現(xiàn)明顯的外形。秋水仙）是染色體單體縮短分開(kāi)，呈現(xiàn)明顯的外形。秋水仙素的使用濃度范圍比較寬，可差幾十倍之多，一般終濃度為素的使用濃度范圍比較寬，可差幾十倍之多，一般終濃度為1.2-1.51.2-1.5微克

37、微克/ /毫升。處理毫升。處理4-64-6小時(shí)。秋水仙素作用時(shí)間越長(zhǎng)，被小時(shí)。秋水仙素作用時(shí)間越長(zhǎng)，被阻止的中期細(xì)胞越多，但染色體也會(huì)收縮，收縮過(guò)度會(huì)影響阻止的中期細(xì)胞越多，但染色體也會(huì)收縮，收縮過(guò)度會(huì)影響形態(tài)。形態(tài)。 Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新一一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馊旧w制備原理。掌握染色體制備方法。Chongqing Normal Uni

38、versityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新三三 試劑與器材試劑與器材Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新四四 操作方法操作方法Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing

39、 Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新低滲溶液：低滲溶液：0.075M KCl 低滲溶液使細(xì)胞膨脹，便于染色體分散而易于觀(guān)察和計(jì)數(shù)。低滲溶液使細(xì)胞膨脹，便于染色體分散而易于觀(guān)察和計(jì)數(shù)。（1 1）染色體輪廓較清楚。）染色體輪廓較清楚。（2 2）染色性增強(qiáng)，可縮短染色時(shí)間。）染色性增強(qiáng)，可縮短染色時(shí)間。（3 3）用于）用于

40、G G帶技術(shù)更能顯示其優(yōu)越性。帶技術(shù)更能顯示其優(yōu)越性。固定液固定液 穩(wěn)定染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)，清除染色體外層物質(zhì)對(duì)染色體在玻片穩(wěn)定染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu)，清除染色體外層物質(zhì)對(duì)染色體在玻片上展開(kāi)的影響，通過(guò)更換固定液上展開(kāi)的影響，通過(guò)更換固定液2-32-3次，清除紅細(xì)胞的碎片，使標(biāo)次，清除紅細(xì)胞的碎片，使標(biāo)本片的背景更為清晰，廣泛使用的固定液為本片的背景更為清晰，廣泛使用的固定液為CarnoyCarnoy固定液，即甲固定液，即甲醇與冰醋酸醇與冰醋酸3:13:1混合液?；旌弦?。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新淋

41、巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)表明培養(yǎng)物生長(zhǎng)發(fā)育良好，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)表明培養(yǎng)物生長(zhǎng)發(fā)育良好，但制成的標(biāo)本質(zhì)量不佳時(shí)，其原因?yàn)椋旱瞥傻臉?biāo)本質(zhì)量不佳時(shí)，其原因?yàn)椋呵锼伤靥幚聿划?dāng)：一般秋水仙素溶液的濃度與處理時(shí)間有一定關(guān)系，若處理秋水仙素處理不當(dāng)：一般秋水仙素溶液的濃度與處理時(shí)間有一定關(guān)系，若處理時(shí)間太短，則標(biāo)本中分裂細(xì)胞就少，相反，雖然標(biāo)本中的分裂細(xì)胞雖多，若處時(shí)間太短，則標(biāo)本中分裂細(xì)胞就少，相反，雖然標(biāo)本中的分裂細(xì)胞雖多，若處理時(shí)間太長(zhǎng)，染色體縮得太短，以致形態(tài)特征模糊，不容易觀(guān)察。理時(shí)間太長(zhǎng)，染色體縮得太短，以致形態(tài)特征模糊，不容易觀(guān)察。低滲處理不當(dāng)：低滲處理細(xì)胞時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞膜旺旺過(guò)早破裂，以致分裂細(xì)

42、胞低滲處理不當(dāng)：低滲處理細(xì)胞時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞膜旺旺過(guò)早破裂，以致分裂細(xì)胞或染色體丟失；若處理時(shí)間不足，細(xì)胞膨脹不夠，則染色體分散不佳，難以進(jìn)或染色體丟失；若處理時(shí)間不足，細(xì)胞膨脹不夠，則染色體分散不佳，難以進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)分析。行染色體計(jì)數(shù)分析。離心速度不合適：若從培養(yǎng)瓶收集細(xì)胞后進(jìn)行離心時(shí)的速度太低，細(xì)胞可能被離心速度不合適：若從培養(yǎng)瓶收集細(xì)胞后進(jìn)行離心時(shí)的速度太低，細(xì)胞可能被丟失；如果細(xì)胞被低滲后離心速度過(guò)高，旺旺使分裂細(xì)胞過(guò)早破裂，分散良好丟失；如果細(xì)胞被低滲后離心速度過(guò)高，旺旺使分裂細(xì)胞過(guò)早破裂，分散良好的分裂相丟失，以致制出的標(biāo)本分裂相較少或大部分為剩余的分散不好的分裂的分裂相丟失，以致

43、制出的標(biāo)本分裂相較少或大部分為剩余的分散不好的分裂相。相。標(biāo)本固定不充分：若固定液不新鮮，甲醇、冰醋酸的質(zhì)量不佳，此時(shí)染色體形標(biāo)本固定不充分：若固定液不新鮮，甲醇、冰醋酸的質(zhì)量不佳，此時(shí)染色體形態(tài)模糊、不分散，其周?chē)屑?xì)胞漿的藍(lán)色背景。態(tài)模糊、不分散，其周?chē)屑?xì)胞漿的藍(lán)色背景。載玻片清洗不徹底：玻片有油跡，致使滴在在玻片上的細(xì)胞懸液不能均勻分散，載玻片清洗不徹底：玻片有油跡，致使滴在在玻片上的細(xì)胞懸液不能均勻分散，且細(xì)胞隨液體流動(dòng)而丟失。且細(xì)胞隨液體流動(dòng)而丟失。1. 1.載玻片冷凍不夠：合適的冰濕玻片，從低溫中拿出時(shí)，其表面有一層霜雪。如載玻片冷凍不夠：合適的冰濕玻片，從低溫中拿出時(shí)，其表面有

44、一層霜雪。如冷凍不夠則無(wú)此現(xiàn)象，此時(shí)細(xì)胞難以貼附在在玻片上。冷凍不夠則無(wú)此現(xiàn)象，此時(shí)細(xì)胞難以貼附在在玻片上。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新 如果染色體上某一區(qū)域的如果染色體上某一區(qū)域的DNADNA為重復(fù)序列，轉(zhuǎn)錄活性低，相應(yīng)地包裝它們?yōu)橹貜?fù)

45、序列，轉(zhuǎn)錄活性低，相應(yīng)地包裝它們的蛋白質(zhì)也較穩(wěn)定，可能通過(guò)較強(qiáng)的二硫鍵形成很穩(wěn)定的疏水的的蛋白質(zhì)也較穩(wěn)定，可能通過(guò)較強(qiáng)的二硫鍵形成很穩(wěn)定的疏水的a- a-螺旋結(jié)螺旋結(jié)構(gòu)，成為染料沉淀物積累的環(huán)境，從而顯示出陽(yáng)帶構(gòu)，成為染料沉淀物積累的環(huán)境，從而顯示出陽(yáng)帶( (暗帶暗帶) )。反之，如果染色。反之，如果染色體上某一區(qū)域的體上某一區(qū)域的DNADNA富含具轉(zhuǎn)錄活性的結(jié)構(gòu)基因，則功能上相對(duì)活躍，包富含具轉(zhuǎn)錄活性的結(jié)構(gòu)基因，則功能上相對(duì)活躍，包裝它們的蛋白質(zhì)也較疏松，構(gòu)象上類(lèi)似裝它們的蛋白質(zhì)也較疏松，構(gòu)象上類(lèi)似b-b-折疊結(jié)構(gòu)，經(jīng)處理后二硫鍵斷裂折疊結(jié)構(gòu)，經(jīng)處理后二硫鍵斷裂，還原為巰基，成為親水性蛋白，

46、不利于染料沉淀物的積累，所以著色淺，還原為巰基，成為親水性蛋白，不利于染料沉淀物的積累，所以著色淺，顯示陰帶，顯示陰帶( (明帶明帶) )。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新其特性是顯帶方法簡(jiǎn)單恒定，帶型穩(wěn)定，保存時(shí)間長(zhǎng)。其特性是顯帶方法簡(jiǎn)單恒定，帶型穩(wěn)定，保存時(shí)間長(zhǎng)。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal Universi

47、ty厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新置70烤箱中處理2小時(shí)，然后轉(zhuǎn)入37培養(yǎng)箱中備用，一般在第3-7天進(jìn)行顯帶。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新男性男性G顯帶顯帶(10100)女性女性G顯帶顯帶(10100)Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新人類(lèi)人類(lèi)23對(duì)染色體的對(duì)染色體的G顯帶記憶口顯帶記憶口訣訣一禿二蛇三蝶飄，一禿二蛇三蝶飄，四像鞭炮五黑腰；四像鞭炮五黑腰；六號(hào)像個(gè)小白臉，六號(hào)像個(gè)小白臉，七蓋八下九苗條；七蓋

48、八下九苗條；十號(hào)長(zhǎng)臂近帶好，十號(hào)長(zhǎng)臂近帶好，十一低來(lái)十二高；十一低來(lái)十二高；十三、四、五、四二一；十三、四、五、四二一；十六長(zhǎng)臂縊痕大；十六長(zhǎng)臂縊痕大；十七長(zhǎng)臂帶腳鐐，十七長(zhǎng)臂帶腳鐐，十八白頭肚子飽；十八白頭肚子飽；十九中間一點(diǎn)腰，十九中間一點(diǎn)腰，二十頭重腳飄飄；二十頭重腳飄飄；二十一好像黑葫蘆瓢，二十一好像黑葫蘆瓢，二十二頭上一點(diǎn)黑；二十二頭上一點(diǎn)黑；X X染色一擔(dān)挑，染色一擔(dān)挑，Y Y染色長(zhǎng)臂帶黑腳。染色長(zhǎng)臂帶黑腳。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal Univer

49、sityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新A組：組：1-3號(hào)染色體。號(hào)染色體。 1號(hào)染色體。號(hào)染色體。 短臂：近側(cè)段有短臂：近側(cè)段有2條深帶，第條深帶，第2深帶稍寬，在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段可顯出深帶稍寬，在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段可顯出34條條淡染的深帶。此臂分為淡染的深帶。此臂分為3個(gè)區(qū)，近

50、側(cè)的第個(gè)區(qū)，近側(cè)的第1深帶為深帶為lp 21；第；第2深帶為深帶為1p31。 長(zhǎng)臂：副縊痕緊貼著絲粒，染色濃。其遠(yuǎn)側(cè)為一寬的淺帶，近中段與遠(yuǎn)側(cè)段各有兩條長(zhǎng)臂：副縊痕緊貼著絲粒，染色濃。其遠(yuǎn)側(cè)為一寬的淺帶，近中段與遠(yuǎn)側(cè)段各有兩條深帶，此中段第深帶，此中段第2深帶染色較濃，中段兩條深帶稍靠近，此臂深帶染色較濃，中段兩條深帶稍靠近，此臂 分為分為4個(gè)區(qū)，副縊痕遠(yuǎn)側(cè)的個(gè)區(qū)，副縊痕遠(yuǎn)側(cè)的淺帶為淺帶為lp21號(hào)帶、中段第號(hào)帶、中段第2深帶為深帶為lp31號(hào)帶，遠(yuǎn)側(cè)段第號(hào)帶，遠(yuǎn)側(cè)段第1深帶為深帶為lp41號(hào)帶。號(hào)帶。2號(hào)染色體。號(hào)染色體。短臂：可見(jiàn)短臂：可見(jiàn)4條深帶，中段的條深帶，中段的2條深帶稍靠近，此臂

51、分為條深帶稍靠近，此臂分為2個(gè)區(qū)，中段兩條深帶之間的淺個(gè)區(qū)，中段兩條深帶之間的淺帶為帶為2p21。 長(zhǎng)臂：可見(jiàn)長(zhǎng)臂：可見(jiàn)7條深帶，第條深帶，第3和第和第4深帶有時(shí)融合。此臂分為深帶有時(shí)融合。此臂分為3個(gè)區(qū)，第個(gè)區(qū)，第2和第和第3深深帶之間的淺帶為帶之間的淺帶為2p21帶，第帶，第4和第和第5深帶之間的淺帶為深帶之間的淺帶為2p31號(hào)帶。號(hào)帶。3號(hào)染色體。在長(zhǎng)臂與短臂的近中段各具有號(hào)染色體。在長(zhǎng)臂與短臂的近中段各具有1條明顯的寬的淺帶。條明顯的寬的淺帶。短臂：一般在近側(cè)段可見(jiàn)短臂：一般在近側(cè)段可見(jiàn)1條較寬的深帶，遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)條較寬的深帶，遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)2條深帶，其中遠(yuǎn)側(cè)條深帶，其中遠(yuǎn)側(cè)1條較窄，且條較

52、窄，且著色淡，這是區(qū)別著色淡，這是區(qū)別3號(hào)染色體短臂的顯著特征。在處理較好的標(biāo)本上，近側(cè)段的深帶可分號(hào)染色體短臂的顯著特征。在處理較好的標(biāo)本上，近側(cè)段的深帶可分為為2條深帶，此臂分條深帶，此臂分2個(gè)區(qū)，中段淺帶為個(gè)區(qū)，中段淺帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。長(zhǎng)臂：一般在近側(cè)段和遠(yuǎn)側(cè)段各有長(zhǎng)臂：一般在近側(cè)段和遠(yuǎn)側(cè)段各有1條較寬的深帶，在處理好的標(biāo)本上，近側(cè)段的深帶條較寬的深帶，在處理好的標(biāo)本上，近側(cè)段的深帶可分為可分為2條深帶，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶可分為條深帶，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶可分為3條深帶，此臂分為條深帶，此臂分為2個(gè)區(qū)，中段淺帶為個(gè)區(qū)，中段淺帶為2區(qū)區(qū)1帶。該帶。該染色體的染色體的G帶圖有點(diǎn)象蝴蝶結(jié)。帶圖有點(diǎn)象蝴蝶結(jié)

53、。Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新B組：組：4-5號(hào)染色體。號(hào)染色體。4號(hào)染色體號(hào)染色體短臂：可見(jiàn)短臂：可見(jiàn)2條深帶，近側(cè)深帶染色較淺，短臂只有條深帶，近側(cè)深帶染色較淺，短臂只有1個(gè)區(qū)。個(gè)區(qū)。長(zhǎng)臂：可見(jiàn)均勻分布的長(zhǎng)臂：可見(jiàn)均勻分布的4條深帶，在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的條深帶，在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的2條深帶可條深帶可各自分為各自分為2條較寬的深帶。此臂分為條較寬的深帶。此臂分為3區(qū)，近側(cè)段第區(qū)，近側(cè)段第1和第和第2深帶之間的淺帶為深帶之間的淺帶為2區(qū)區(qū)1帶，遠(yuǎn)側(cè)段兩條深帶之間的淺帶為帶，遠(yuǎn)側(cè)

54、段兩條深帶之間的淺帶為3區(qū)區(qū)1帶。帶。5號(hào)染色體號(hào)染色體短臂：可見(jiàn)短臂：可見(jiàn)2條深帶，其遠(yuǎn)側(cè)的深帶寬且著色濃，此臂僅條深帶，其遠(yuǎn)側(cè)的深帶寬且著色濃，此臂僅1個(gè)區(qū)。個(gè)區(qū)。長(zhǎng)臂：近側(cè)段長(zhǎng)臂：近側(cè)段2條深帶，染色較淡，有時(shí)不明顯，中段可見(jiàn)條深帶，染色較淡，有時(shí)不明顯，中段可見(jiàn)3條深帶，染色較條深帶，染色較濃，有時(shí)融合成濃，有時(shí)融合成1條寬的深帶，遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)條寬的深帶，遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)2條深帶，近末端的條深帶，近末端的1條著色較濃，此條著色較濃，此臂分為臂分為3個(gè)區(qū)，中段第個(gè)區(qū)，中段第2深帶為深帶為2區(qū)區(qū)l帶，中段深帶與遠(yuǎn)側(cè)深帶之間的寬闊的淺帶為帶，中段深帶與遠(yuǎn)側(cè)深帶之間的寬闊的淺帶為3區(qū)區(qū)1帶。帶。Cho

55、ngqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新C組：組：6-12號(hào)和號(hào)和X染色體染色體6號(hào)染色體號(hào)染色體短臂：中段有短臂：中段有1條明顯寬闊的淺帶，形如條明顯寬闊的淺帶，形如“小白臉小白臉”，是此染色體的特征，近側(cè)段和遠(yuǎn)側(cè)段各有，是此染色體的特征，近側(cè)段和遠(yuǎn)側(cè)段各有1條深帶，近側(cè)深帶貼著絲粒。在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶可分為兩條深帶。此臂分為條深帶，近側(cè)深帶貼著絲粒。在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶可分為兩條深帶。此臂分為2個(gè)區(qū)個(gè)區(qū)，中段的明顯而寬的淺帶為，中段的明顯而寬的淺帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。長(zhǎng)臂：可見(jiàn)長(zhǎng)臂：

56、可見(jiàn)5條深帶，近側(cè)條深帶，近側(cè)1條緊貼著絲粒，遠(yuǎn)側(cè)末端的條緊貼著絲粒，遠(yuǎn)側(cè)末端的1條深帶著色較淡；此臂分為條深帶著色較淡；此臂分為2個(gè)區(qū)，第個(gè)區(qū)，第2和第和第3深帶之間的淺帶為深帶之間的淺帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。7號(hào)染色體號(hào)染色體 著絲粒著色濃。著絲粒著色濃。短臂：有短臂：有3條深帶，中段深帶著色較淡，有時(shí)不明顯，遠(yuǎn)測(cè)深帶著色濃，形似條深帶，中段深帶著色較淡，有時(shí)不明顯，遠(yuǎn)測(cè)深帶著色濃，形似“瓶塞瓶塞”。此臂分。此臂分為為2個(gè)區(qū)，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶為個(gè)區(qū)，遠(yuǎn)側(cè)段的深帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。長(zhǎng)臂：有長(zhǎng)臂：有3條明顯深帶，遠(yuǎn)側(cè)近末端的條明顯深帶，遠(yuǎn)側(cè)近末端的1條著色較淡；第條著色較淡；第2和第和第3帶稍接近。此

57、臂分為帶稍接近。此臂分為3個(gè)區(qū)，近側(cè)個(gè)區(qū)，近側(cè)第第1深帶為深帶為2區(qū)區(qū)1帶、中段的第帶、中段的第2深帶為深帶為3區(qū)區(qū)1帶。帶。8號(hào)染色體。號(hào)染色體。 短臂：有短臂：有2條深帶，中段有條深帶，中段有1條較明顯的淺帶，這是與條較明顯的淺帶，這是與10號(hào)染色體相鑒別的主要特征。此臂分為號(hào)染色體相鑒別的主要特征。此臂分為2個(gè)區(qū)，中段的淺帶為個(gè)區(qū)，中段的淺帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。 長(zhǎng)臂：可見(jiàn)長(zhǎng)臂：可見(jiàn)3條分界極不明顯的深帶，此臂分條分界極不明顯的深帶，此臂分2個(gè)區(qū)，中段的深帶為個(gè)區(qū)，中段的深帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。9號(hào)染色體號(hào)染色體 著絲粒著色濃。著絲粒著色濃。短臂：近側(cè)段和中段各有短臂：近側(cè)段和中段各有1條深

58、帶，在處理較好的標(biāo)本上，中段可見(jiàn)條深帶，在處理較好的標(biāo)本上，中段可見(jiàn)2條較窄的深帶。此臂分為條較窄的深帶。此臂分為2個(gè)區(qū)，中段深帶為個(gè)區(qū)，中段深帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。長(zhǎng)臂：可見(jiàn)明顯的長(zhǎng)臂：可見(jiàn)明顯的2條深帶，次縊痕一般不著色，在有些標(biāo)本上呈現(xiàn)出特有的頸部區(qū)。此臂分為條深帶，次縊痕一般不著色，在有些標(biāo)本上呈現(xiàn)出特有的頸部區(qū)。此臂分為3個(gè)區(qū)，近側(cè)的個(gè)區(qū)，近側(cè)的1條深帶為條深帶為2區(qū)區(qū)1帶，遠(yuǎn)側(cè)的帶，遠(yuǎn)側(cè)的1條深帶為條深帶為3區(qū)區(qū)1帶。帶。 10號(hào)染色體號(hào)染色體 著絲粒著絲濃。著絲粒著絲濃。短臂：近側(cè)段和近中段各有短臂：近側(cè)段和近中段各有1條深帶，在有些標(biāo)本上近中段可見(jiàn)條深帶，在有些標(biāo)本上近中段可見(jiàn)2

59、條深帶，但與條深帶，但與8號(hào)染色體短臂比號(hào)染色體短臂比較，其上深帶的分界欠清晰。此臂只有較，其上深帶的分界欠清晰。此臂只有1個(gè)區(qū)。個(gè)區(qū)。 長(zhǎng)臂：可見(jiàn)明顯的長(zhǎng)臂：可見(jiàn)明顯的3條深帶，遠(yuǎn)側(cè)段的條深帶，遠(yuǎn)側(cè)段的2條深帶稍靠近，這是與條深帶稍靠近，這是與8號(hào)染色體相鑒別的一個(gè)主要特征號(hào)染色體相鑒別的一個(gè)主要特征，此臂分為，此臂分為2個(gè)區(qū)，近側(cè)段的個(gè)區(qū)，近側(cè)段的1條深帶為條深帶為2區(qū)區(qū)1帶。帶。 Chongqing Normal UniversityChongqing Normal University厚德 篤學(xué) 勵(lì)志 創(chuàng)新11號(hào)染色體號(hào)染色體 短臂：近中段可見(jiàn)短臂：近中段可見(jiàn)1條深帶，在處理較好的標(biāo)本

60、上，這條深帶可分為條深帶，在處理較好的標(biāo)本上，這條深帶可分為3條較窄的深帶。條較窄的深帶。此臂只有此臂只有1個(gè)區(qū)。個(gè)區(qū)。長(zhǎng)臂：近側(cè)有長(zhǎng)臂：近側(cè)有1條深帶，緊貼著絲粒。遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)條深帶，緊貼著絲粒。遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)1條明顯的較寬的深帶，這條深帶與條明顯的較寬的深帶，這條深帶與近側(cè)的深帶之間是近側(cè)的深帶之間是1條寬闊的淺帶，這是與條寬闊的淺帶，這是與12號(hào)染色體相鑒別的一個(gè)明顯的特征，在處理號(hào)染色體相鑒別的一個(gè)明顯的特征，在處理較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的這條較寬的深帶可分為較好的標(biāo)本上，遠(yuǎn)側(cè)段的這條較寬的深帶可分為2條較窄的淺帶，兩深帶之間有條較窄的淺帶，兩深帶之間有1條很窄條很窄的淺帶，一般極難辨認(rèn)，但它