新版第四章、定量分析樣品

1、2022-6-1711.1.取乙酰唑胺取乙酰唑胺2g2g，加水，加水100ml100ml加熱溶解后，迅速放冷，加熱溶解后，迅速放冷，濾過，取濾液濾過，取濾液25ml25ml，依法檢查氯化物，規(guī)定含氯，依法檢查氯化物，規(guī)定含氯化物不得超過化物不得超過0.014%0.014%，應(yīng)取標準氯化鈉溶液（每，應(yīng)取標準氯化鈉溶液（每1ml1ml相當于相當于0.01mgCl0.01mgCl）多少）多少mlml？2.2.溴化鈉中檢查砷鹽雜質(zhì)，規(guī)定含砷量不得超過百溴化鈉中檢查砷鹽雜質(zhì)，規(guī)定含砷量不得超過百萬分之四，取標準砷溶液（每萬分之四，取標準砷溶液（每1ml1ml相當于相當于0.001mgAs0.001mgA

2、s）2ml2ml，依法檢查，應(yīng)取供試品多少克。，依法檢查，應(yīng)取供試品多少克。計算題計算題2022-6-172第四章第四章 藥物的含量測定方法與驗證藥物的含量測定方法與驗證主要內(nèi)容主要內(nèi)容2022-6-173藥品含量測定方法與特點藥品含量測定方法與特點藥品分析的前處理藥品分析的前處理藥品質(zhì)量標準分析方法驗證藥品質(zhì)量標準分析方法驗證有效數(shù)字的處理有效數(shù)字的處理第一節(jié)第一節(jié) 藥物的含量測定方法與驗證藥物的含量測定方法與驗證一、藥品一、藥品含量測定含量測定方法方法2022-6-174 1 1、重量分析法、重量分析法 原料原料 揮發(fā)法、萃取法、沉淀法揮發(fā)法、萃取法、沉淀法 2 2、容量分析法、容量分析法

3、 原料原料 直接滴定、間接法、返滴定法直接滴定、間接法、返滴定法 3 3、光譜法、光譜法 制劑制劑 UVUV法法 熒光法熒光法 AASAAS法法 4 4、色譜法、色譜法 原料、制劑原料、制劑 HPLC GC TLCHPLC GC TLC 5 5、其他方法如電化學分析法，熱分析法等、其他方法如電化學分析法，熱分析法等2022-6-175用化學或儀器法或效價法測定，以用化學或儀器法或效價法測定，以% %表示表示重量法重量法容量法容量法UVUV、VisVis、FRFR、 AASAAS、IRIR、GCGC、 TLCTLC、HPLCHPLC原料藥原料藥精密度高準精密度高準確度好確度好靈敏度高專靈敏度高專

4、屬性好屬性好制劑、中成藥制劑、中成藥（一）常用的測定方法（一）常用的測定方法2022-6-176（1 1）選擇選擇含量測定法的含量測定法的基本原則基本原則 化學化學原料藥原料藥（西藥）的含量測定（西藥）的含量測定應(yīng)首選容量分析法應(yīng)首選容量分析法。滴定終點的確定，應(yīng)用適宜的電化學方法確定等當點滴定終點的確定，應(yīng)用適宜的電化學方法確定等當點的變色域，例如酸堿滴定可用電位滴定法。的變色域，例如酸堿滴定可用電位滴定法。2022-6-177 制劑制劑的含量測定的含量測定應(yīng)首選色譜法應(yīng)首選色譜法。當輔料不干擾測定時，也可選用當輔料不干擾測定時，也可選用UVUV法。對于復方制劑法。對于復方制劑常用常用HPL

5、CHPLC法。法。 對于對于酶類藥品應(yīng)首選酶分析法酶類藥品應(yīng)首選酶分析法抗生素藥品應(yīng)首選抗生素藥品應(yīng)首選HPLCHPLC法及微生物法法及微生物法，放射性藥品應(yīng)首選放射性藥品應(yīng)首選放射性測定法放射性測定法等等等等在上述方法均不適合時在上述方法均不適合時，可考慮使用計算分光光度法。，可考慮使用計算分光光度法。對于新藥的研制對于新藥的研制，應(yīng)選用原理不同的，應(yīng)選用原理不同的兩種方法兩種方法進行對照性進行對照性測定。測定。2022-6-178 （2 2）含量限度的確定含量限度的確定 含量限度的制訂一般可依據(jù)下列三種情況來綜合考慮含量限度的制訂一般可依據(jù)下列三種情況來綜合考慮 根據(jù)不同的劑型根據(jù)不同的劑

6、型例如維生素例如維生素B B1 1，口服用口服用的含量標準不得少于的含量標準不得少于98.5%98.5%，供注射用供注射用的不得少于的不得少于99.0%99.0%，片劑片劑的含量應(yīng)為標示量的的含量應(yīng)為標示量的90.0%90.0%110.0%110.0%，注射液注射液的含量應(yīng)為標示量的的含量應(yīng)為標示量的93.0%93.0%107.0%107.0%。不同品種的相同劑型的藥物，其含量限度也不同。不同品種的相同劑型的藥物，其含量限度也不同。 2022-6-179根據(jù)生產(chǎn)的實際水平根據(jù)生產(chǎn)的實際水平由植物中提取得到的原料藥，因原料中含有多由植物中提取得到的原料藥，因原料中含有多種成分，藥品的純度要由提取

7、分離水平而定，故含量種成分，藥品的純度要由提取分離水平而定，故含量限度也應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)的實際水平而定。限度也應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)的實際水平而定。如硫酸長春新堿如硫酸長春新堿因開始生產(chǎn)時不易提純，故原因開始生產(chǎn)時不易提純，故原料藥規(guī)定含量為料藥規(guī)定含量為不得低于不得低于92%92%，中國藥典（，中國藥典（19901990年版）年版）根據(jù)根據(jù)近幾年的實際生產(chǎn)水平，改為近幾年的實際生產(chǎn)水平，改為95.0%95.0%105.0%105.0%；其；其供注射用的本品訂為標示量的供注射用的本品訂為標示量的90.0%90.0%110.0%110.0%；2022-6-1710、根據(jù)主藥含量的多少、根據(jù)主藥含量的多少 主藥含量

8、大，分布均勻，要求嚴些主藥含量大，分布均勻，要求嚴些 主藥含量少，難以分布均勻，要求寬些主藥含量少，難以分布均勻，要求寬些 、根據(jù)所選方法、根據(jù)所選方法 容量分析法容量分析法 99.0-101.0% 99.0-101.0% UV UV法法 97.0-103.0%97.0-103.0% HPLC 96.0-104.0% HPLC 96.0-104.0% 氧瓶燃燒法氧瓶燃燒法 93.0-107.0%93.0-107.0%（二）、含量表示方式（二）、含量表示方式原料藥用質(zhì)量百分含量表示；原料藥用質(zhì)量百分含量表示；制劑用制劑用標示量的百分含量標示量的百分含量表示：表示： 標示量標示量%=%=測得量測得

9、量/ /標示量標示量100%100%2022-6-1711二、二、 定量分析方法特點定量分析方法特點2022-6-1712 一、容量分析法一、容量分析法 （一）容量分析法的特點：（一）容量分析法的特點： 操作簡單、快速；操作簡單、快速； 比較準確（比較準確（RSDRSD0.2%0.2%）；）； 儀器普通易得；儀器普通易得； 主要用于原料藥的測定；主要用于原料藥的測定；2022-6-1713 （二）容量分析法的計算問題（二）容量分析法的計算問題 1. 1. 滴定度（滴定度（T T）的概念）的概念 每每1ml1ml溶液相當于被測物質(zhì)的質(zhì)量溶液相當于被測物質(zhì)的質(zhì)量(mg)(mg)用碘量法測定維生素用

10、碘量法測定維生素C的含量時，的含量時，中國藥典中國藥典規(guī)定：每規(guī)定：每1ml碘滴定液（碘滴定液（0.05mol/L）相當于）相當于8.806mg的維生素的維生素C（C2H8O6）2022-6-1714第一節(jié)第一節(jié) 定量分析方法的分類與特點定量分析方法的分類與特點dDcCbBaA被測藥物被測藥物 滴定液滴定液容量分析法有容量分析法有關(guān)計算關(guān)計算滴定度計算滴定度計算用用B來來滴定滴定AWAWBaMAbMB=滴定液反應(yīng)的質(zhì)量滴定液反應(yīng)的質(zhì)量被測藥物反應(yīng)的質(zhì)量被測藥物反應(yīng)的質(zhì)量被測藥物的摩爾質(zhì)量被測藥物的摩爾質(zhì)量滴定液的摩爾質(zhì)量滴定液的摩爾質(zhì)量2022-6-1715第一節(jié)第一節(jié) 定量分析方法的分類與特

11、點定量分析方法的分類與特點ABABBAMbanMbMWWABBMbaVm容量分析法有容量分析法有關(guān)計算關(guān)計算滴定度計算滴定度計算用用B來來滴定滴定A滴定液滴定液待測液待測液等于等于1ml濃度乘體濃度乘體積積=nB計算有一個從計算有一個從質(zhì)質(zhì)量量到到物質(zhì)的量物質(zhì)的量，再到再到濃度濃度再到再到滴滴定度定度的轉(zhuǎn)變過程的轉(zhuǎn)變過程濃度濃度mB2022-6-1716示例一 計算Vc的滴定度T碘量法測定Vc含量M(C6H6O6)=176.13，C(I2)=0.05mol/LHI2OHCIOHC6662686Mbam)ml/mg(TT =mbaM=0.0511176.13=8.806(mg/ml)Mb=0.0

12、5mol/L11MA=176.132022-6-1717示例二 異煙肼的滴定度溴酸鉀法測定溴酸鉀法測定異煙肼異煙肼含量含量M(C6H7N3O)=137.14，C溴酸鉀溴酸鉀=0.01667 mol/LOH3KBr2N3NOHC3KBrO2ONHC3222563376Mbam)ml/mg(TT =mbaM=0.0166732137.14=3.429(mg/ml)ab2022-6-1718%100(%)WTV含量含量計算方法直接滴定法直接滴定法間接滴定法間接滴定法直接滴定法直接滴定法在實際工作中，滴定液的濃度可能與藥典規(guī)定的濃度并不一致，所以應(yīng)該進行校正在實際工作中，滴定液的濃度可能與藥典規(guī)定的濃

13、度并不一致，所以應(yīng)該進行校正規(guī)定摩爾濃度實際摩爾濃度F2022-6-1719%100(%)WFTV含量直接滴定法的直接滴定法的含量計算方法含量計算方法直接讀取直接讀取藥典規(guī)定藥典規(guī)定自己標定自己標定取樣量取樣量2022-6-1720間接滴定法間接滴定法不直接對待測物進不直接對待測物進行滴定，而采用間行滴定，而采用間接途徑滴定接途徑滴定生成物滴定法生成物滴定法剩余量滴定法剩余量滴定法被測藥物與化合物被測藥物與化合物A作用生成作用生成 化合物化合物B，再用滴定液滴，再用滴定液滴定化合物定化合物B也稱回滴法，本法先加入定也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液量過量滴定液A與藥物作用，與藥物作用，再用滴

14、定液再用滴定液B與剩余的滴定液與剩余的滴定液A反應(yīng)，然后再進行含量計算反應(yīng)，然后再進行含量計算2022-6-1721%100(%)WFTV含量間接滴定法的間接滴定法的生成物滴定法生成物滴定法注意滴定度注意滴定度T的計算的計算Mbam)ml/mg(T先計算先計算T再計算含量再計算含量正確求正確求a和和b2022-6-1722示例三 葡萄糖酸銻鈉的含量測定0.3g供試品供試品水水100ml鹽酸鹽酸15ml碘化鉀試液碘化鉀試液10ml密塞，振搖后暗處放置密塞，振搖后暗處放置10min碘量法碘量法2642322235OSI2OS2IISbI2SbSb5+2S2O32-本法先用葡萄糖酸銻鈉與碘離子反應(yīng)生

15、成碘，再用碘與硫代硫酸本法先用葡萄糖酸銻鈉與碘離子反應(yīng)生成碘，再用碘與硫代硫酸鈉反應(yīng)生成碘離子，相當于是用硫代硫酸鈉在滴定葡萄糖酸銻鈉，鈉反應(yīng)生成碘離子，相當于是用硫代硫酸鈉在滴定葡萄糖酸銻鈉，因此要找出它們兩者的量反應(yīng)關(guān)系，也就是因此要找出它們兩者的量反應(yīng)關(guān)系，也就是a和和b滴定度滴定度T的計的計算示例如下算示例如下2022-6-1723%100(%)WFTV含量間接滴定法的間接滴定法的生成物滴定法生成物滴定法注意滴定度注意滴定度T的計算的計算)/(088. 676.121211 . 0)/(mlmgMbammlmgT請讀取請讀取請校正請校正2022-6-1724%100)(%)WTFVFV

16、ABBAA含量間接滴定法的間接滴定法的剩余量滴定法剩余量滴定法也稱回滴法，本法先加入定也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液量過量滴定液A與藥物作用，與藥物作用，再用滴定液再用滴定液B與剩余的滴定液與剩余的滴定液A反應(yīng)，然后再進行含量計算反應(yīng)，然后再進行含量計算計算的關(guān)鍵在于求計算的關(guān)鍵在于求出滴定液出滴定液A應(yīng)用于藥應(yīng)用于藥物反應(yīng)的實際量物反應(yīng)的實際量2022-6-1725間接滴定法的間接滴定法的剩余量滴定法剩余量滴定法也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液A與藥物作用，再用滴定液與藥物作用，再用滴定液B與剩余的滴與剩余的滴定液定液A反應(yīng)，然后再進行含量計算反

17、應(yīng)，然后再進行含量計算計算的關(guān)鍵在于求出滴定液計算的關(guān)鍵在于求出滴定液A應(yīng)用于藥物反應(yīng)的實際量應(yīng)用于藥物反應(yīng)的實際量常涉及化學反應(yīng)、加熱、分取等操常涉及化學反應(yīng)、加熱、分取等操作等步驟，使測定誤差顯著增加作等步驟，使測定誤差顯著增加空白試驗校正空白試驗校正沒有藥物存在時的滴定，方?jīng)]有藥物存在時的滴定，方法步驟與有藥物存在時相同法步驟與有藥物存在時相同計算公式相應(yīng)計算公式相應(yīng)修正如下：修正如下：2022-6-1726%100)(%)0WTFVVABSBB含量間接滴定法的間接滴定法的剩余量滴定法剩余量滴定法也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液也稱回滴法，本法先加入定量過量滴定液A與藥物作用，再用滴

18、定液與藥物作用，再用滴定液B與剩余的滴與剩余的滴定液定液A反應(yīng)，然后再進行含量計算反應(yīng)，然后再進行含量計算計算的關(guān)鍵在于求出滴定液計算的關(guān)鍵在于求出滴定液A應(yīng)用于藥物反應(yīng)的實際量應(yīng)用于藥物反應(yīng)的實際量常涉及化學反應(yīng)、加熱、分取等操常涉及化學反應(yīng)、加熱、分取等操作等步驟，使測定誤差顯著增加作等步驟，使測定誤差顯著增加沒有藥物存在時，滴定液沒有藥物存在時，滴定液A全部與滴定液全部與滴定液B反應(yīng)反應(yīng)藥物存在時，剩余滴定液藥物存在時，剩余滴定液A全部與滴定液全部與滴定液B反應(yīng)反應(yīng)濃度校正作用濃度校正作用Example as follows2022-6-1727示例四示例四 司可巴比妥鈉的含量測定司可巴

19、比妥鈉的含量測定 取本品約取本品約0.1g，精密稱定精密稱定，置，置250ml碘瓶中，加水碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，振搖使溶解，精密加溴滴定液精密加溴滴定液( (0.05mol/L) ) 25ml，再加鹽酸，再加鹽酸5ml，立即密塞，并振搖，立即密塞，并振搖1min，在暗，在暗處放置處放置15min后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液后，注意微開瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉硫代硫酸鈉滴定液滴定液( (0.1mol/L) )滴定，至終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消滴定，至終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定得的結(jié)果用空白試驗

20、校正。失，并將滴定得的結(jié)果用空白試驗校正。本法用溴與司可巴比妥鈉反應(yīng)，再用硫代硫酸鈉反滴定溴，本法用溴與司可巴比妥鈉反應(yīng)，再用硫代硫酸鈉反滴定溴，屬反滴定法，并用空白試驗校正屬反滴定法，并用空白試驗校正,滴定液滴定液A為溴，為溴，B為硫代為硫代硫酸鈉，含量計算只需先求溴滴定度，再求出硫代硫酸鈉硫酸鈉，含量計算只需先求溴滴定度，再求出硫代硫酸鈉空白試驗空白試驗V0體積與樣品測定體積體積與樣品測定體積Vs2022-6-1728示例四 司可巴比妥鈉的含量測定已知：已知：司可巴比妥鈉司可巴比妥鈉M=260.23;司可巴比妥鈉與溴反應(yīng)摩爾司可巴比妥鈉與溴反應(yīng)摩爾=1:1； W=0.1022 g； 硫代硫

21、酸鈉濃度校正因子硫代硫酸鈉濃度校正因子=1.038 ； 供試品滴定供試品滴定Vs=15.73ml ;空白試驗滴定空白試驗滴定V0 =23.21ml;)/(01.1327.2601105. 0)/(mlmgMbammlmgT%100)(%)0WTFVVABSBB含量2022-6-1729%100)(%)0WTFVVABSBB含量本公式適本公式適用于空白用于空白校正情形校正情形%100)(%)WTFVFVABBAA含量本公式適用于沒有做空本公式適用于沒有做空白校正情形白校正情形見上例見上例見下例見下例見見P1462022-6-1730習題一 剩余碘量法測定異煙肼含量 異煙肼在弱堿性溶液中，加定量過

22、量的碘滴定液異煙肼在弱堿性溶液中，加定量過量的碘滴定液(0.1mol/L)氧氧化，反應(yīng)完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸鈉滴定液化，反應(yīng)完成后，酸化，剩余碘滴定液用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定滴定( (以淀粉為指示劑以淀粉為指示劑) )。NCONHNH2+2I2+5NaHCO3COOH+N2+ 4NaI+ 5CO2+4H2OI2 + 2Na2S2O3+ 2NaINa2S4O6100WT)V-F(V%(mg/ml)858. 614.134210.1T 12: 2322322222IOSNaOSNaIII2FI含量：異煙肼2022-6-1731習題二 非那西丁含量測定 精密稱取本品精

23、密稱取本品0.3630g加稀鹽酸回流加稀鹽酸回流1小時后，放冷，小時后，放冷，用亞硝酸鈉液用亞硝酸鈉液（0.1010mol/L）滴定，用去滴定，用去20.00ml。每每1ml1ml亞硝酸鈉液亞硝酸鈉液（0.1mol/L）相當于相當于17.92mg的的C10H13O2N，請計算非那西丁的含量。，請計算非那西丁的含量。%72.9910010003630. 01. 01010. 000.2092.17%非那西丁2022-6-1732光譜分析法光譜分析法藥典藥典收載收載紫外可見紫外可見分光度法分光度法原子吸收分原子吸收分光光度法光光度法紅外分光紅外分光度法度法熒光分析熒光分析法法火焰光度火焰光度法法本

24、章本章講敘講敘紫外可見紫外可見分光度法分光度法熒光分析熒光分析法法 二、光譜分析法二、光譜分析法2022-6-1733 1. 1. 儀器校正和檢定儀器校正和檢定 波長校正波長校正用汞燈中較強譜線用汞燈中較強譜線37.38,253.65,275.28,296.73,37.38,253.65,275.28,296.73, 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nm 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nm與與576.96nm576.96nm或用儀器中氘燈的或用儀器中氘燈的486.02nm486.02nm與與6

25、56.10nm656.10nm進行校正。進行校正。 吸收度吸收度的檢定：用的檢定：用K K2 2CrOCrO7 7(60mg)+0.005mol/LH(60mg)+0.005mol/LH2 2SOSO4 4液至液至1000ml1000ml 波長波長(nm) 235(nm) 235(最小最小) 257() 257(最大最大) 313() 313(最小最小) 350() 350(最大最大) ) E E1%1%1 1cmcm 124.5 144.0 48.62 106.6 124.5 144.0 48.62 106.6 雜散光雜散光檢查：檢查： 試劑試劑 濃度濃度(g/ml) (g/ml) 測定波長

26、測定波長 透光率透光率(%)(%) NaI 1.00 220nm NaI 1.00 220nm 0.80.8 NaNO NaNO2 2 5.00 340nm 5.00 340nm 0.80.8（一）紫外（一）紫外- -可見分光光度法（可見分光光度法（200nm200nm760nm)760nm)2022-6-1734 對溶劑的要求對溶劑的要求: : 220 220240nm 241240nm 241250nm 251250nm 251300nm 300nm300nm 300nm以上以上 溶劑溶劑+吸收池吸收池A 0.41 0.41 0.20 0.20 0.10 0.10 0.050.05 測定方

27、法測定方法： 要求供試品溶液的要求供試品溶液的A A應(yīng)在應(yīng)在0.3 0.3 0.70.7 靈敏度高，可達靈敏度高，可達1010-4-4g/ml g/ml 1010-7-7g/ml g/ml 特點特點 準確度高，準確度高，SRDSRD（% %）為）為2% 2% 5%5% 儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應(yīng)儀器價格低廉，操作簡單，易普及，應(yīng) 用范圍廣。用范圍廣。 2022-6-1735紫外可見紫外可見分光度法分光度法基于物質(zhì)對紫外區(qū)基于物質(zhì)對紫外區(qū)(200400nm)和可見光區(qū)和可見光區(qū)(400760nm)的單色光輻的單色光輻射建立起來的光譜分析法射建立起來的光譜分析法朗伯朗伯-比比爾定律爾定律基

28、基礎(chǔ)礎(chǔ)EclTA1lg%11)100/(cmEAmlgc2. 2. 原理原理2022-6-1736紫外可見分光度紫外可見分光度法含量測定方法法含量測定方法4種種方方法法對照品對照品比較法比較法吸收系吸收系數(shù)法數(shù)法計算光計算光度法度法比色比色法法2. 2. 方法方法2022-6-1737（1）.對照品比較法;:;:;:%100%100(%):供試品的量稀釋體積供試品濃度稱樣量測得量含量對原料藥WDCWDCxx對應(yīng)于稀釋對應(yīng)于稀釋體積濃度體積濃度;,;對應(yīng)吸光度對照品溶液濃度供試品溶液濃度RxRxRRxxAACCACAC2022-6-1738;:);(:%100(%):制劑的標示量裝量制劑平均重量

29、標示量對于固體制劑BWBWWDCx2022-6-1739%1001001000(%)%11BVEVDAcm標示量%1001001000(%)%11BWEWDAcm標示量Mg轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化單位化單位（2）.吸收系數(shù)法吸收系數(shù)法2022-6-1740液體制劑公式推導液體制劑公式推導)(1:100%100100(%)%11%11含量標示量的百分比量之后等于實際供試品含再乘液的含量稀釋液體積相當于供試取樣的意義標示量VBDmlVEAVBDVEAcmcm%1001001000(%)%11BVEVDAcm標示量2022-6-1741)(:100%100100(%)%11%11含量標示量的百分比量之后等于實際供試品

30、含再乘試液的含量取樣單位質(zhì)量相當于供的意義標示量WBDWEAWBDWEAcmcm%1001001000(%)%11BWEWDAcm標示量固體制劑公式推導如下：固體制劑公式推導如下：2022-6-1742(3).計算分光光度法(4).比色法看書！2022-6-1743 （二）熒光分光光度法（二）熒光分光光度法 靈敏度高，可達靈敏度高，可達10-10g/ml 10-12g/ml 在低濃度進行測定，防止在低濃度進行測定，防止F與與C不成正比及自熄滅作用不成正比及自熄滅作用 1. 特點特點 用基準物溶液校正儀器靈敏度，防止樣品液熒光衰減用基準物溶液校正儀器靈敏度，防止樣品液熒光衰減 靈敏度高，但干擾因

31、素多。靈敏度高，但干擾因素多。 制備熒光衍生物，可提高其靈敏度和選擇性。制備熒光衍生物，可提高其靈敏度和選擇性。 用樣品量少，操作簡單，方法快速，應(yīng)用范圍較廣。用樣品量少，操作簡單，方法快速，應(yīng)用范圍較廣。 2022-6-17442. 熒光分析儀熒光分析儀 有二個單色光器有二個單色光器激發(fā)單色光器與發(fā)射單色光激發(fā)單色光器與發(fā)射單色光 器；且激發(fā)光源、樣品池和檢測器成直角。器；且激發(fā)光源、樣品池和檢測器成直角。3. 含量測定含量測定 常用的方法對照品比較法常用的方法對照品比較法:Ci = (Ri-Rib)/(Rr-Rrb) C Cr r Ch.P收載地高辛片、利血平片、洋地黃毒苷片。收載地高辛片

32、、利血平片、洋地黃毒苷片。2022-6-1745 三、色譜分析法三、色譜分析法 按分離原理分為：吸附；分配；離子交換；排阻色譜按分離原理分為：吸附；分配；離子交換；排阻色譜 方法分類方法分類 按分離方法分為：按分離方法分為：PC；TLC；柱色譜；柱色譜；GC；HPLC。 （一）（一）HPLC法法 1. 對對HPLC儀器一般要求儀器一般要求 色譜柱色譜柱、檢測器檢測器、流動相流動相按品種項按品種項 下要求。下要求。 色譜柱的理論板數(shù)：色譜柱的理論板數(shù)：n = 5.54(tR /Wh/2)2 2. 系統(tǒng)性試驗系統(tǒng)性試驗 分離度：分離度：R = 2（tR1 tR2)/(W1 + W2); 要大于要大

33、于1.5 拖尾因子：拖尾因子：T = W0.05h/2d1 應(yīng)在應(yīng)在0.9 1.05 RSD2% 2022-6-1746 內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量3. 測定方法測定方法 標準曲線法標準曲線法 外標法測定供試品中主成分含量外標法測定供試品中主成分含量 外標一點法外標一點法 應(yīng)用示例：應(yīng)用示例： RP-HPLC法測定鹽酸黃酮哌酯片含量，用標準曲線法法測定鹽酸黃酮哌酯片含量，用標準曲線法 如頭孢拉?。活^孢羥氨芐；頭孢唑啉鈉用外標一點法如頭孢拉??；頭孢羥氨芐；頭孢唑啉鈉用外標一點法2022-6-1747示例一 炔諾酮的含量測定 照高效液相色譜法照高效

34、液相色譜法( (附錄附錄DD測定測定) )色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用用十八烷基硅烷鍵合硅膠十八烷基硅烷鍵合硅膠為為填充劑；以甲醇填充劑；以甲醇- -水水(65:35)(65:35)為流動相，檢測波長為為流動相，檢測波長為244nm244nm。理理論塔板數(shù)論塔板數(shù)按炔諾酮峰計算不低于按炔諾酮峰計算不低于15001500，炔諾酮峰與內(nèi)標物質(zhì)，炔諾酮峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的峰的分離度分離度及主成分峰后一雜質(zhì)峰與主成分峰的分離度均應(yīng)及主成分峰后一雜質(zhì)峰與主成分峰的分離度均應(yīng)符合要求。符合要求。內(nèi)標溶液的制備內(nèi)標溶液的制備 取黃體酮約取黃體酮約25mg25mg，精密稱定，置，精密稱定，

35、置25ml25ml量瓶量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度。中，加甲醇溶解并稀釋至刻度。2022-6-1748測定法測定法 取本品約取本品約25mg25mg，精密稱定，置，精密稱定，置25ml25ml量瓶中，加甲醇溶解并量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液2ml2ml與內(nèi)標溶液與內(nèi)標溶液3ml3ml，置，置10ml10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，取2020l l注入液相色譜儀，記注入液相色譜儀，記錄色譜儀，記錄色譜圖；另取炔諾酮對照品適量，精密稱定，同錄色譜儀，記錄色譜圖；另取炔諾酮對照品適量，精密稱定，同法測

36、定。按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。法測定。按內(nèi)標法以峰面積計算，即得。對照品對照品樣品測得量WA/A/ArrssA2022-6-1749 （二）（二）GC法法 1. 對對GC儀器一般要求儀器一般要求 載氣為載氣為氮氣氮氣；色譜柱為填充或毛細管柱；色譜柱為填充或毛細管柱 色譜柱的理論板數(shù)：色譜柱的理論板數(shù)：n = 5.54(tR /Wh/2)2 2. 系統(tǒng)性試驗系統(tǒng)性試驗 分離度：分離度：R = 2（tR1 tR2)/(W1 + W2); 要大于要大于1.5 拖尾因子：拖尾因子：T = W0.05h/2d1 應(yīng)在應(yīng)在0.9 1.05注：注：HPLC與與GC系統(tǒng)性實驗要求同。系統(tǒng)性實驗要求同。 20

37、22-6-1750 內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量內(nèi)標法加校正因子測定供試品中主成分含量 3. 測定方法測定方法 標準曲線法標準曲線法 外標法測定供試品中主成分含量外標法測定供試品中主成分含量 外標一點法外標一點法 2022-6-1751示例 松節(jié)油的含量測定 照氣相色譜法照氣相色譜法( (附錄附錄 E E測定測定) )色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用聚乙二醇用聚乙二醇(PEG)-20M(PEG)-20M為固定相，為固定相，涂布密度為涂布密度為20%20%；柱溫為；柱溫為9090C。理論塔板數(shù)按。理論塔板數(shù)按- -蒎烯峰計算應(yīng)蒎烯峰計算應(yīng)低于低于15001500。校

38、正因子測定校正因子測定 取正丁醇適量，精密稱定，加石油醚取正丁醇適量，精密稱定，加石油醚(30(306060C)C)制成每制成每1ml1ml含含20mg20mg的溶液，作為內(nèi)標溶液。另取的溶液，作為內(nèi)標溶液。另取- -蒎烯對照品約蒎烯對照品約30mg30mg，精密稱定，置，精密稱定，置10ml10ml棕色量瓶中，精密加入內(nèi)標溶液棕色量瓶中，精密加入內(nèi)標溶液2ml2ml，加，加石油醚石油醚(30(306060C)C)至刻度，搖勻，吸取至刻度，搖勻，吸取1 1l l注入氣相色譜儀，計注入氣相色譜儀，計算校正因子。算校正因子。2022-6-1752測定法測定法 取本品約取本品約35mg35mg，精密

39、稱定，置，精密稱定，置10ml10ml棕色量瓶中，精密加入棕色量瓶中，精密加入內(nèi)標溶液內(nèi)標溶液2ml2ml，用石油醚，用石油醚(30(306060C)C)溶解并稀釋至刻度，搖勻，溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取吸取1 1l l注入氣相色譜儀，測定，即得。注入氣相色譜儀，測定，即得。 本品含本品含- -蒎烯蒎烯(C(C1010H H1616) )不得少于不得少于70%70%。RRssC/AC/Af 校正因子SSxxC/AAf)C(含量外標法:AisAx=Cx+ CxCx或Cx= Cx(Ais/Ax) -1含量(Cx)=CRAxAR2022-6-1753n標準加入法:20102010版增補版增補202

40、2-6-1754核磁共振波譜法核磁共振波譜法含量分析（多組份抗生素）含量分析（多組份抗生素）離子色譜法離子色譜法常用于無機陰離子、無機陽離子、有機酸、糖醇類、氨常用于無機陰離子、無機陽離子、有機酸、糖醇類、氨基糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、糖蛋白等物質(zhì)的定性和定基糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、糖蛋白等物質(zhì)的定性和定量分析；量分析；分析方法同分析方法同HPLC;HPLC;2022-6-1755第二節(jié)第二節(jié) 樣品分析前處理方法樣品分析前處理方法2022-6-1756IIICOOHCH3COHNNHCOCH3泛影酸泛影酸IIICH2CHCOOHNH2C2H5碘番酸碘番酸CH3HCICOOC2H5CH28碘苯酯碘苯酯

41、 一、一、概概 述述2022-6-1757BrBrBrBrHOOHOOSSOONaNaOOOO磺溴酞鈉磺溴酞鈉CH3CH3O HCCl3C12H2O三氯叔丁醇三氯叔丁醇 一、一、概概 述述2022-6-1758OCC HC HCOOOOO-OOOSbSbO-C HOCC HCO2K+3H2OHCCOOCCH OOFe酒石酸銻鉀酒石酸銻鉀富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵 一、一、概概 述述2022-6-1759含金屬有機藥物含金屬有機藥物OAsHOOHNHCONH2卡巴胂卡巴胂金屬有機藥物金屬有機藥物 一、一、概概 述述2022-6-1760不經(jīng)有機破壞經(jīng)有機破壞直接測定配位滴定法氧化還原滴定法水解后測定酸

42、水解堿水解經(jīng)還原分解后測定濕法破壞凱氏定氮法干法破壞高溫灼燒法氧瓶燃燒法二、定量分析樣品前處理方法二、定量分析樣品前處理方法2022-6-1761直接測定法直接測定法含金屬或含金屬或C-MC-M不牢固的有機金屬不牢固的有機金屬經(jīng)水解后測定法經(jīng)水解后測定法鹵素聯(lián)脂肪碳鏈（溶于適當溶劑再水解）鹵素聯(lián)脂肪碳鏈（溶于適當溶劑再水解） 直接回流后測定；堿化回流后測定；硫酸水解后測定直接回流后測定；堿化回流后測定；硫酸水解后測定經(jīng)氧化還原后測定法經(jīng)氧化還原后測定法鹵素聯(lián)芳環(huán)牢固（一般用于測碘）鹵素聯(lián)芳環(huán)牢固（一般用于測碘） 堿性還原后測定法如泛影酸堿性還原后測定法如泛影酸 酸性還原后測定法如碘番酸酸性還原

43、后測定法如碘番酸 利用藥物中可利用藥物中可游離游離的金屬離子的氧化性測定含量的金屬離子的氧化性測定含量1.1.不經(jīng)有機破壞的分析方法不經(jīng)有機破壞的分析方法: :2022-6-17622 2、經(jīng)有機破壞的分析方法、經(jīng)有機破壞的分析方法 含氮、硫、硫柳汞、氯化鈉的生物制品、含氮有機含氮、硫、硫柳汞、氯化鈉的生物制品、含氮有機合成藥物測定的前處理和生物制品中金屬元素測定時生合成藥物測定的前處理和生物制品中金屬元素測定時生物基質(zhì)的去除物基質(zhì)的去除。u H2SO4-HNO3u H2SO4-HClO4u H2SO4-H2SO4u HNO3-KMnO4分解劑/消化劑輔助分解劑凱氏定氮法凱氏定氮法測定含有氨基

44、和酰胺結(jié)測定含有氨基和酰胺結(jié)構(gòu)的藥物結(jié)構(gòu)構(gòu)的藥物結(jié)構(gòu)( (一一) )濕法破壞濕法破壞凱氏定氮法測定氮含量凱氏定氮法測定氮含量2022-6-1763中國藥典主要用于含有氨基或酰胺結(jié)構(gòu)藥物的含量測中國藥典主要用于含有氨基或酰胺結(jié)構(gòu)藥物的含量測定；定；包括三個過程：包括三個過程： 消化或消解；消化或消解；氨的蒸餾；氨的蒸餾；氨的吸收；氨的吸收；2022-6-1764K2SO4( (提高消解溫度提高消解溫度) )CuSO4( (加快消解速度加快消解速度) )凱氏燒瓶硫酸硫酸2022-6-1765原原 理理 將含氮藥物與硫酸在凱氏燒瓶中共熱，藥物分子將含氮藥物與硫酸在凱氏燒瓶中共熱，藥物分子中有機結(jié)構(gòu)被

45、中有機結(jié)構(gòu)被“消化消化”成成COCO2 2和和H H2 2O O，有機結(jié)合的氮轉(zhuǎn)，有機結(jié)合的氮轉(zhuǎn)化為無機氮，與過量的硫酸結(jié)合為硫酸氫銨和硫酸銨，化為無機氮，與過量的硫酸結(jié)合為硫酸氫銨和硫酸銨，經(jīng)堿化經(jīng)堿化后后釋放出氨氣，隨水蒸氣餾出，用硼酸溶液或釋放出氨氣，隨水蒸氣餾出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或堿滴定液滴定。定量的酸滴定液吸收后，再用酸或堿滴定液滴定。n 常量法常量法含氮量含氮量 252530mg30mgn 半微量法半微量法含氮量含氮量 1.01.02.0mg2.0mg2022-6-1766堿液堿液硼酸硼酸( (吸收液吸收液) )甲基紅甲基紅- -溴甲酚綠指示劑溴甲酚綠指示劑

46、硫酸滴定空白校正適用于含鹵素、硫、磷等有機藥物定量分析的前處理。分為高溫灼灼法：主要適用于含鹵素藥物的測定 氧瓶燃燒法：適用于含鹵素或硫、磷等藥物 的測定2022-6-1767( (二二) )干法破壞干法破壞空心空心2022-6-1768A.A.燃燒瓶燃燒瓶 B.B.鉑絲網(wǎng)鉑絲網(wǎng) C.D.C.D.盛固體樣品濾紙及其折疊法盛固體樣品濾紙及其折疊法 E.F.G.E.F.G.稱取液體樣品方法稱取液體樣品方法7mm50mm30mm尾部尾部7mm13mm20mm25mm35 6mm16 6mm濾紙濾紙濾紙濾紙AGFEDCB氧瓶燃燒裝置及稱樣方法氧瓶燃燒裝置及稱樣方法氧瓶燃燒法氧瓶燃燒法2022-6-17

47、69 樣品樣品 吸收液吸收液 測測定方法定方法含含氟氟有機藥物有機藥物 H H2 2O O pH4.3 pH4.3 HAc-NaAcHAc-NaAc Buffer Buffer 茜素氟藍茜素氟藍 分光光度法分光光度法 含含氯氯有機藥物有機藥物 NaOHNaOH溶液溶液 銀量法銀量法 汞量法汞量法 分光法分光法 含含溴溴有機藥物有機藥物 H H2 2O O2 2-NaOH-NaOH液液 或或NaOHNaOH液液- - 銀量法銀量法 分光法分光法 硫酸肼飽和液硫酸肼飽和液 含含碘碘有機藥物有機藥物 NaOHNaOH液液- - 銀量法銀量法 碘量法碘量法 硫酸肼飽和液硫酸肼飽和液 汞量法汞量法 分光

48、法分光法案例：碘苯酯含量測定案例：碘苯酯含量測定2022-6-1770 取本品約取本品約20mg20mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機，精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機破壞，用破壞，用NaOHNaOH T.S. 2ml T.S. 2ml與與H H2 2O 10mlO 10ml為吸收液，待吸收完全后，為吸收液，待吸收完全后，加加溴醋酸溴醋酸溶液溶液10 ml10 ml，密塞，振搖放置數(shù)分鐘，加，密塞，振搖放置數(shù)分鐘，加甲酸甲酸約約1ml1ml，用水洗滌瓶口，并通入空氣流約用水洗滌瓶口，并通入空氣流約3-5min3-5min，以除去剩余的溴蒸，以除去剩余的溴蒸氣，加氣，加KIKI 2g 2g，密塞

49、，搖勻，用，密塞，搖勻，用NaNa2 2S S2 2O O3 3液液 ( (0.02mol/L0.02mol/L) )滴定，滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每定的結(jié)果用空白試驗校正。每1ml1ml的硫代硫酸鈉液的硫代硫酸鈉液(0.02mol/L)(0.02mol/L)相當于相當于1.388mg1.388mg的的C C1919H H2929IOIO2 22HIO3+10KI+10CH3COOH6I2I2+2Na2S2O32NaI +Na2S4O6第三節(jié)第三節(jié) 藥品質(zhì)量標準分析方法的驗證藥品質(zhì)量標

50、準分析方法的驗證2022-6-1771驗證的意義驗證的意義驗證的項目驗證的項目驗證的內(nèi)容驗證的內(nèi)容不同項目的具體要求不同項目的具體要求2022-6-1772目的目的： 證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測要求證明所采用的分析方法適合于相應(yīng)的檢測要求效能指標效能指標： 評價分析方法的尺度評價分析方法的尺度 效能指標包括效能指標包括: 精密度精密度, , 準確度準確度, , 檢測限檢測限, ,定量限定量限, ,選擇性選擇性, ,線性與范圍線性與范圍, , 耐用性耐用性2022-6-1773一、準確度（一、準確度（accuracy） 系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度。( (一一) )

51、含量測定方法含量測定方法%100(%)%100(%)加入量本底量測得量回收率加入量測得量回收率回收率回收率( (Recovery) )回收試驗回收試驗加樣回收試驗加樣回收試驗33，至少，至少9個測定結(jié)果個測定結(jié)果2022-6-1774 1. 1. 原料藥原料藥 可用已知純度對照品或樣品進行測定；或可用已知純度對照品或樣品進行測定；或與已建準確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較。與已建準確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較。 2. 2. 制劑制劑 要考察輔料對回收率的影響。采用在空白輔要考察輔料對回收率的影響。采用在空白輔料中加入原料對照品的方法作回收率試驗，然后計算料中加入原料對照品的方法作回收率試驗

52、，然后計算RSDRSD。 具體做法：測定高、中、低三個濃度，具體做法：測定高、中、低三個濃度，n=3, n=3, 共共9 9個數(shù)個數(shù)據(jù)來評價?；厥章实膿?jù)來評價?；厥章实腞SDRSD2%2%；UVUV和和HPLCHPLC法，一般回收率可達法，一般回收率可達98%98%102%102%；容量法可達容量法可達99.7%99.7%100.3%100.3% 2022-6-1775（二）數(shù)據(jù)要求（二）數(shù)據(jù)要求 回收率回收率% = （測定平均值（測定平均值 空白值）空白值）/加入量加入量100% 用高、中、低三濃度的用高、中、低三濃度的9次回收率數(shù)據(jù)進行評價。應(yīng)次回收率數(shù)據(jù)進行評價。應(yīng)報告已知加入量的回收率

53、，或測定結(jié)果平均值與真實值報告已知加入量的回收率，或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其可信限。之差及其可信限。2022-6-1776二、精密度二、精密度(Precision) 系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之接近的程度接近的程度。表示：表示：偏差偏差( (d d) )、標準偏差、標準偏差( (s s),),、 相對標準偏差相對標準偏差( (RSDRSD) )重復性重復性: : 同一實驗室同一實驗室, ,同一人多次測定的精密度；同一人多次測定的精密度；中間精密度中間精密度: :同一實驗室，不同人，不同

54、儀器測定的精同一實驗室，不同人，不同儀器測定的精 密度；密度； 重現(xiàn)性重現(xiàn)性: : 不同實驗室，不同人測定的精密度；不同實驗室，不同人測定的精密度；2022-6-1777（三）數(shù)據(jù)要求（三）數(shù)據(jù)要求 應(yīng)報告應(yīng)報告S或或SD、RSD和可信限。用統(tǒng)計學的可和可信限。用統(tǒng)計學的可信性分析信性分析(t或或f）。）。2022-6-1778 三、專屬性三、專屬性 是指在其他成分是指在其他成分(如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等)可能存在下，可能存在下，采用的方法能準確測定出被測物的特性。采用的方法能準確測定出被測物的特性。 （一）鑒別反應(yīng)（一）鑒別反應(yīng) 應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，

55、不含被測組分應(yīng)能與其它共存的物質(zhì)或相似化合物區(qū)分，不含被測組分 的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負反應(yīng)。的樣品均應(yīng)呈現(xiàn)負反應(yīng)。2022-6-1779 （二）含量測定和雜質(zhì)測定（二）含量測定和雜質(zhì)測定 色譜法和其他分離法，應(yīng)附代表性的圖譜，以說色譜法和其他分離法，應(yīng)附代表性的圖譜，以說明專屬性。明專屬性。 圖中應(yīng)注明各組分的位置，色譜法中分離度應(yīng)符合要圖中應(yīng)注明各組分的位置，色譜法中分離度應(yīng)符合要求。在能獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對結(jié)果求。在能獲得雜質(zhì)的情況下，可加到試樣中，考察對結(jié)果的干擾。在雜質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用以驗證的干擾。在雜質(zhì)和降解物不能獲得的情況下，可用以驗證方法和藥典方法進行對

56、照；也可用對試樣加速破壞的方法，方法和藥典方法進行對照；也可用對試樣加速破壞的方法，比較兩種方法。比較兩種方法。2022-6-1780 四、檢測限（四、檢測限（limit of detection, LOD) 是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或量，是限度檢驗是指試樣中被測物能被檢測出的最低濃度或量，是限度檢驗 指標。它無需測定，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可指標。它無需測定，只要指出高于或低于該規(guī)定的濃度或量即可。 （一）（一）常用的方法常用的方法 1.1.非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用已知濃度被測物，試驗出能被可靠地用已知濃度被測物，試驗出能被可靠地 檢測出的最低濃度或量。

57、檢測出的最低濃度或量。 2.2.儀器分析方法儀器分析方法 UVUV法：法：LODLOD = = f f.3.3S S空空 = = C C樣樣/ /A A樣樣 3 3S S空空 FluFlu法：法：LODLOD = = f f.3.3S S空空 = = C C樣樣/(/(F F樣樣- -F F空空) ) 3 3S S空空 GCGC和和HPLCHPLC法：法： LODLOD = = S S/ /N N = 2 = 2或或3 3 2022-6-17810.05.010.015.020.025.0min-0.125-0.100-0.075-0.050-0.0250.0000.0250.0500.075

58、0.1000.125mAU280nm,4nm (1.00)9.47817.92022.872SN2022-6-1782（二）數(shù)據(jù)要求（二）數(shù)據(jù)要求 應(yīng)附測試圖，說明測試過程和檢測限結(jié)果。應(yīng)附測試圖，說明測試過程和檢測限結(jié)果。 2022-6-1783 五、定量限（五、定量限（limit of quantitation, LOQ) 是指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)是指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng) 具一定準確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進行定量測定時，要求具一定準確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物進行定量測定時，要求 LOQLOQ. .常用信噪比法確定定量限，一般以常用信

59、噪比法確定定量限，一般以S/N=10S/N=10時相應(yīng)的濃度進行時相應(yīng)的濃度進行 測定。測定。2022-6-1784 六、線性六、線性 是指在設(shè)定的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接是指在設(shè)定的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接 呈正比關(guān)系的程度。呈正比關(guān)系的程度。 UVUV法：首先制備一個標準系列，濃度點法：首先制備一個標準系列，濃度點n =5; A = 0.3n =5; A = 0.3.0.7.0.7 建立回歸方程建立回歸方程C = aA + b ;r C = aA + b ;r 0.99990.9999。 HPLCHPLC法：制備一個標準系列，濃度點法：制備一個標準系列，濃度點n

60、 =5 n =5 7; 7; 以以C C對對h h或或A A或與或與 內(nèi)標物的峰面積之比，建立回歸方程內(nèi)標物的峰面積之比，建立回歸方程r r 0.99990.9999。 數(shù)據(jù)要求數(shù)據(jù)要求：列出回歸方程；列出回歸方程；r;r;線性圖線性圖。2022-6-1785七、范圍七、范圍 是指達到一定精密度、準確度和線性、測試是指達到一定精密度、準確度和線性、測試方法適用的高低限度或量的區(qū)間。方法適用的高低限度或量的區(qū)間。 原料藥和制劑含量測定：范圍應(yīng)為測試濃度的原料藥和制劑含量測定：范圍應(yīng)為測試濃度的80%- 120%。 制劑含量均勻度檢查：范圍應(yīng)為測試濃度的制劑含量均勻度檢查：范圍應(yīng)為測試濃度的70%