臨床微生物標本規(guī)范化采集和送檢中國專家共識

1、中國專家共識牽頭專家：胡必杰、倪語星、馬小軍、肖永紅編寫專家（按首字母拼音排序）：蔡紹曦、陳佰義、褚云卓、高曉東、顧兵、黃勛、李光輝、李衛(wèi)光、劉思遠、劉運喜、陸群、盧曉陽、呂媛、孫自鏞、索瑤、湯靈玲、王輝、王明貴、王選錠、吳安華、徐英春、顏青、俞云松、戰(zhàn)榕、張衛(wèi)紅、宗志勇2017年 1 月總則 3第一節(jié)：血培養(yǎng)標本 5第二節(jié)：呼吸道標本 8第三節(jié)：尿液標本 13第四節(jié)：其它無菌體液標本 15第五節(jié)：胃腸道標本： 20第六節(jié)：生殖道標本 24第七節(jié)：皮膚、軟組織標本 27總則感染性疾病的正確診治需要以正確的病原學檢測作為指導，而正確的病原學檢測其前提是采集和送檢合格標本。因此，必須規(guī)范微生物標本

2、的采集和運送，避免因標本的不合格，產(chǎn)生錯誤的病原學檢測結果而誤導臨床治療。一、微生物標本采集的基本原則1. 在抗菌藥物使用前采集標本。臨床疑似感染的患者，必須先采集微生物標本送檢，再使用抗菌藥物進行治療。2. 無菌部位的標本更具有臨床價值，有菌部位采集的標本需要清除正常菌群和定植細菌才有意義。應盡量送檢無菌部位的標本，尤其是血培養(yǎng)。有菌部位標本應避免“正 常菌群導致標本的污染”。人體很多部位，如下呼吸道（痰液標本） 、鼻竇、皮膚傷口等處的正常菌群極易污染標本。因此，從這些部位采集標本，要盡可能降低這些部位正常菌群或定植細菌對標本污染的可能性。有菌部位的標本不是最理想的微生物標本。3. 標本的標

3、簽和申請單信息要完整。對于每一份標本，實驗室都需要了解該患者和標本的詳細信息以及醫(yī)生的送檢目的。事實上，實驗室對于標本所做的所有分析，都必須基于這些信息。申請單的內容應包括：1）患者信息：姓名、性別、年齡、患者唯一編碼（如住院號）等；2）申請科室或病區(qū)、申請醫(yī)生；3）標本信息：標本類型、采集日期及時間、采集部位、采集方法；4）臨床診斷；5）檢測目的，尤其是一些特殊檢測項目；6）是否已使用抗菌藥物。每份標本上必須貼有標簽，無論手工書寫、條形碼、二維碼標簽，都應含有以下信息：1）患者姓名；2）患者唯一編碼（如住院號）； 3）申請醫(yī)生；（ 4）標本采集部位；（ 5）檢測目的；（ 6）標本采集的日期和

4、時間。4. 嚴格無菌操作。應嚴格執(zhí)行無菌操作，避免標本被污染。盛放標本的容器須經(jīng)滅菌處理。滅菌宜采用壓力蒸汽等物理滅菌方法，不得使用化學消毒劑滅菌。采集無菌標本時應注意對局部及周圍皮膚的消毒。如使用消毒液消毒皮 膚，須作用一定時間，待其干燥后采樣。二、微生物標本運送的基本原則1. 所有標本采集后都應盡快送往實驗室，多數(shù)標本應在2 小時內送達。有些樣本量小的標本應在采樣后15-30 分鐘內送達。實驗室應與臨床共同設計標本采樣和送檢的流程，在人力、物力上保證標本可按要求送達實驗室。2. 保證必要的運送條件：不同種類的標本因檢測的目標致病微生物不同，對標本保存和運送的環(huán)境條件有不同的要求（詳見附表）

5、。對溫度敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應保溫并立即送檢。標本運輸通用原則標本檢測項目標本采集方法收集裝置、溫度和理想運輸時間需氧細菌培養(yǎng)組織、體液、提取物和組織活體檢查（活檢）等一般拭子或flocked 拭子（一種新型拭子，由多個不同型號的拭子組成）無菌容器，室溫，立即送檢；拭子運輸容器，室溫，2 小時內厭氧細菌培養(yǎng)組織、體液、提取物和組織活檢等一般拭子或flocked 拭子無菌厭氧容器，室溫，立即送檢；厭氧拭子運輸容器，室溫，2 小時內真菌培養(yǎng)和抗酸桿菌 培養(yǎng)組織、體液、提取物和組織活檢等 拭子（酵母及表面分枝桿菌感染）無菌容器，室溫，2 小時內；拭子運輸容器，室溫，2

6、 小時內病毒培養(yǎng)組織、體液、提取物和組織活檢等采用無菌容器或拭子置于內置冰塊病毒運輸容器內，立即送達；病毒拭子運輸容器，室溫，2 小時內血清學5 ml 血清干燥管，室溫，2 小時內抗原檢測5 ml 血清密閉容器，室溫，2 小時內核酸擴增實驗室5 ml 血漿EDTA 管，室溫，2 小時內其他類型標本密閉容器，室溫，2 小時內注：盡量不采用拭子送檢標本，一定要用拭子的，應采用運送拭子。1. 實驗室應拒收質量不合格的標本。實驗室要建立標本質量管理要求，制定拒收標準，建立退檢機制。實驗室有責任嚴格執(zhí)行標本驗收和拒收標準，并通過 溝通、培訓使臨床充分掌握標本拒收標準和退檢機制。微生物實驗室對標本的拒收標

7、準1) 標本采集至實驗室接收過程間隔過長，或無標本采集時間，或保存的溫度不當。2) 標本運送條件不正確：如厭氧培養(yǎng)標本卻在有氧條件下送檢。3) 容器不規(guī)范：如容器有裂縫或被打破導致標本泄露、容器非無菌等。4) 未貼標簽或貼錯標簽：標本與檢驗目的不符合，如痰培養(yǎng)送檢尿標本；患者信息與標本不符，如女性患者送檢前列腺標本。5) 標本明顯被污染，如痰標本中混有食物殘渣等。6) 拭子上的標本已經(jīng)干涸。7) 標本不符合檢驗要求，如痰標本以唾液為主。8) 標本使用了固定劑或防腐劑。9) 標本量太少。10) 一支拭子要求檢驗項目太多。11) 24 小時內重復送檢的標本(血培養(yǎng)除外)。標本拒收標準實施中與臨床溝

8、通的方法：標本拒收不應輕易將標本丟棄，應電話 聯(lián)系臨床醫(yī)生再決定標本的處置方式。如醫(yī)生堅持繼續(xù)檢測，則應在報告中說明標本質量情況，并注明“應臨床要求，完成檢測”。2. 提供臨床隨時可查閱的標本采集規(guī)范手冊。每所醫(yī)療機構都要制訂標本采集送檢規(guī)范的手冊，采取書面或電子化的方式提供給臨床醫(yī)護人員，以保證臨床醫(yī)護人員可以隨時查閱。要制訂計劃，定期對臨床醫(yī)護人員進行培訓。第一節(jié)：血培養(yǎng)標本血液作為無菌標本，血液培養(yǎng)對感染性疾病的診斷、治療和預后有重要的臨床意義。血培養(yǎng)檢測可以為臨床進行血流感染和其它部位感染的診斷提供有力依據(jù)?？焖?、準確的血培養(yǎng)檢測結果，對臨床的治療和患者的預后有著至關重要的作用。臨床采

9、樣指征：1. 菌血癥：患者出現(xiàn)發(fā)熱（38）或低溫（36），或寒戰(zhàn)；白細胞計數(shù)增多（計數(shù) >10.0 × 109/ L ，中性粒細胞增多；或白細胞計數(shù)減少（計數(shù)<3.0 ×109/L ） ；有皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、休克等全身感染癥狀體征，只要具備其中之一，又不能排除細菌、真菌血流感染的，就應進行血培養(yǎng)。尤其伴有以下情況之一時，應立刻進行血培養(yǎng)：（1） 醫(yī)院獲得性肺炎；（2） 留置中心靜脈導管、PICC等血管導管大于48小時；（3） 有免疫缺陷伴全身感染癥狀。2. 感染性心內膜炎：凡原因未明的發(fā)熱，持續(xù)在1 周以上，伴有心臟雜音或心臟超聲發(fā)現(xiàn)贅生物，或原有

10、心臟基礎疾病、人工心臟瓣膜植入患者，均應多次進行血培養(yǎng)檢 測。3. 導管相關血流感染：患者帶有血管內導管超過1 天或者拔除導管未超過48 小時，出現(xiàn)發(fā)熱（ >38）、寒顫或低血壓等全身感染表現(xiàn)，不能除外由血管內導管引起感染可能的，應多次進行血培養(yǎng)檢測。標本采集：1. 菌血癥：（ 1） 盡可能在患者寒戰(zhàn)開始時，發(fā)熱高峰前30-60分鐘內采血。（ 2） 盡可能在使用抗菌藥物治療前采集血培養(yǎng)標本；如患者已經(jīng)使用抗菌藥物治療，應在下一次用藥之前采血培養(yǎng)。（ 3） 采血部位：通常為肘靜脈，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血。除非懷疑有導管相關的血流感染，否則不應從留置靜脈或動脈導管取血，因為導管常伴有

11、定植菌存在。（ 4） 采 血工具：建議采用商業(yè)化的真空血培養(yǎng)瓶，如果血培養(yǎng)瓶的儲存溫度為 2-8 ，應先將血培養(yǎng)瓶在室溫放置30 分鐘左右，平衡至室溫再采血。同一部位采集兩瓶血培養(yǎng)時不建議更換針頭。（ 5） 采 血次數(shù)、血培養(yǎng)瓶選擇：對于成人患者，應同時分別在兩個部位采集血標本；每個部位應需氧和厭氧培養(yǎng)各一瓶。對于兒童患者，應同時分別在兩個部位采集血標本，分別注入兒童瓶，厭氧瓶一般不需要，除非懷疑患兒存在厭氧菌血流感染。（ 6） 采 血量：采血量是影響血培養(yǎng)檢出陽性率的重要因素，采血量過少會明顯降低血培養(yǎng)陽性率。成人每次每培養(yǎng)瓶應采血5-10ml 注入成人瓶；嬰幼兒根據(jù)孩子的體重確定采血總量，

12、每培養(yǎng)瓶（兒童瓶）采血2-4ml。（ 7） 皮 膚、血培養(yǎng)瓶消毒：為減少皮膚、培養(yǎng)瓶口等對血培養(yǎng)造成的污染，在穿刺前，應對皮膚和培養(yǎng)瓶口進行消毒并充分干燥，以減少假陽性的發(fā)生機率。（ 8） 避 免采血管內空氣注入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶。（ 9） 避 免在靜脈留置導管連接處（如肝素帽處）采血標本，避免標本污染。2. 感染性心內膜炎（ 1） 建議在經(jīng)驗用藥前30 分鐘內 在不同部位采集2-3 套外周靜脈血培養(yǎng)標本。 如果 24 小時內 3 套血培養(yǎng)標本均為陰性，建議再采集3 套血培養(yǎng)標本送檢。（ 2） 懷疑左心心內膜炎時，采集動脈血提高血培養(yǎng)陽性率。3. 導管相關血流感染：分為保留導管和不保留導管兩種情況。

13、（ 1） 保留導管：分別從外周靜脈和導管內各采取1 套血培養(yǎng)標本，在培養(yǎng)瓶上標注采集部位，送往微生物實驗室，同時進行上機培養(yǎng)。2 套血培養(yǎng)檢出同種細菌，且來自導管的血培養(yǎng)標本報陽時間比來自外周的血培養(yǎng)標本報陽時間早2 小時以上，可診斷導管相關血流感染。（ 2） 不保留導管：在外周靜脈采集2 套血培養(yǎng)標本。同時，通過無菌操作剪取已拔出的導管尖端5cm，在血平板上交叉滾動4 次進行送檢?；虿捎贸曊鹗幏羧【航臃N。從導管尖端和外周血培養(yǎng)培養(yǎng)出同種同源細菌，且導管尖端血平皿的菌落計數(shù)超過15CFU有意義。3、 標簽和申請單：每套血培養(yǎng)瓶上標簽應有唯一標識號或條碼，并注明標本采集時間和部位。如疑似感

14、染性心內膜炎或疑似導管相關血流感染患者的標本，申請單除應包括患者基本信息外，一定要注明疑似診斷。4、 標本運輸：1. 血液標本采集后應立即送檢，最好在2 小時內送達實驗室。不能及時送檢者，應置室溫暫存。血培養(yǎng)瓶接種前后都禁止放冰箱。2. 運送的裝置要足夠安全，避免血培養(yǎng)瓶的運送過程中因碰撞發(fā)和破裂。5、 實驗室拒收標準：由于血培養(yǎng)標本采取不易，且血流感染患者往往病情急重，實驗室應盡可能接受血培養(yǎng)標本，并盡快進行培養(yǎng)檢測。除非以下幾種情況：1. 血培養(yǎng)瓶破裂、滲漏；2. 血培養(yǎng)瓶內注入非無菌標本；第二節(jié)：呼吸道標本呼吸道感染分為上呼吸道感染和下呼吸道感染。不同部位的感染病原菌差異較大，上呼吸道感

15、染多以病毒為主，下呼吸道感染病原菌多樣，選擇合適的標本尤為重要，因為標本很容易受到口咽部菌群的污染，導致檢測結果與臨床不符，誤導臨床診斷與治療。1、 咽拭子標本咽拭子標本僅用于診斷上呼吸道感染，常規(guī)僅報告A群鏈球菌。一） 臨床采樣指征：突發(fā)的咽痛、扁桃體腫大、頸部或頜下淋巴結腫痛，常伴有發(fā)熱，通常沒有咳嗽和明顯的鼻溢。Centor 標準可作為A群鏈球菌上呼吸道感染的臨床預測指標。Centor 標準包括下列4 項內容：扁桃體膿性滲出；頸部或頜下淋巴結腫大伴壓痛；發(fā)熱；無咳嗽。對符合3 條或以上Centor 標準的成人患者建議進行咽拭子培養(yǎng)。 二）標本采集囑病人張口發(fā)“啊”音，以暴露咽喉部，必要時

16、用壓舌板；取出咽拭子中的無菌長棉簽，快速擦拭兩側腭弓和咽、扁桃體的分泌物，扁桃體有膿點時最好擠破膿點并采集膿性物，將棉簽插入運送管，蓋緊送檢。三）標簽和申請單申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測目的，一定要注明標本采集時間。標本盒上的標簽要求有唯一標識號或條碼，注明標本采集時間、檢測目的。四）標本運送咽拭子標本的運送宜采用帶保濕功能的運送培養(yǎng)基，避免由于送檢時間過長而干燥。如未采用運送培養(yǎng)基，應于半小時內送檢。即使采用運送培養(yǎng)基，室溫保存也不應超過24 小時。2、 痰液標本痰培養(yǎng)僅用于下呼吸道感染，主要是肺部感染的診斷。但它不是診斷肺部感染的最佳標本

17、。血培養(yǎng)、肺泡灌洗液或經(jīng)氣管吸取物的培養(yǎng)結果更加準確。痰標本不能進行厭氧菌培養(yǎng)。痰標本采集前，要判斷患者是否有能力配合完成深部咳痰。要向患者充分說明口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義，指導患者如何正確留取痰標本?；颊邞卺t(yī)生或護士直視下留取痰液標本。實驗室要建立痰標本的質量控制流程，對于被口咽部菌群污染的標本，要予以拒收，并建議臨床再次采集合格標本送檢。一）臨床采樣指征咳嗽、膿性痰，伴有發(fā)熱，影像學檢查出現(xiàn)新的或擴大的浸潤影；氣道開放患者，出現(xiàn)膿痰或血性痰；考慮下呼吸道感染患者采集痰液標本，同時送血培養(yǎng)標本。二）采集要求由于肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌等苛養(yǎng)菌是最常見的肺部感染病

18、原體，標本盒內細菌在室溫環(huán)境下很容易自溶死亡，如不能在采集標本后2 小時內接種將明顯影響檢出率。因此痰標本的采集時機十分關鍵，應嚴格遵循以下原則采集標本：1. 爭取首劑抗菌藥物治療使用前及更換抗菌藥物前采集；2. 標本采集后保證2 小時內送達實驗室并得到接種；3. 只要有可能得到合格的痰標本，應馬上采集、送檢；4. 宜在醫(yī)護人員直視下留取合格痰標本；5. 送檢痰標本后三天內不主張再次送檢。三）標本采集采集前準備無菌杯（螺口、有蓋、密封）、清水。并向患者提供口頭及書面采樣指導，以保證患者充分理解口腔清潔、深咳、避免口咽部菌群污染的意義和方法。1. 用清水漱口2-3 次，有假牙者應先取下假牙；再用

19、力咳嗽咳出深部痰液；2. 將痰液咳入無菌杯內；3. 蓋好并擰緊杯蓋，盡快送達實驗室。四）標簽及申請單申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測目的，標識是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標本采集時間。標本盒上的標簽要求有唯一標識號或條碼，注明痰標本采集時間和檢測目的。五）標本運輸1. 標本采集后需盡快送到實驗室，不能超過2 小時。不及時運送可導致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡；2. 不能及時送達或待處理標本應置于4冰箱保存（疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列），以免雜菌生長。但不能超過24 小時；六）

20、實驗室拒收標準1. 質量不合格標本：顯微鏡下細胞學檢查發(fā)現(xiàn)標本受口咽部菌群污染。合格痰標本應鱗狀上皮細胞<10個 /低倍視野，白細胞>25個 /低倍視野，或白細胞 : 鱗狀上皮細胞>2.5；2. 沒有標簽或標簽貼錯；3. 標識信息不明，未提供采集時間及送檢目的等；4. 超過 2 小時送達實驗室，且沒有正確保存的標本；5. 運送容器有滲漏；6. 同一天同一項目重復送檢的痰標本。三、支氣管鏡- 肺泡灌洗液（BAL）采集肺泡灌洗液進行檢測，可減少口咽部菌群的污染，提高檢測結果的準確性。須做定量或半定量接種培養(yǎng)。一）臨床采樣指征對于疑似肺炎患者，如有機會進行氣管鏡檢查，則可同時采集肺

21、泡灌洗液進行培養(yǎng)。不能進行深部咳痰的患者，也可考慮通過氣管鏡獲取標本。二）標本采集患者咽喉局部麻醉后，導入纖維支氣管鏡。通過纖維支氣管鏡對病灶所在支氣管以下肺段或亞肺段水平，用37或室溫無菌生理鹽水多次灌洗，每次注入2060ml（常規(guī)進行4 5 次） ，直到總共灌洗100 300ml，并充分吸引回收，從回收液中取出10ml 標本，放入無菌管中，旋緊蓋子，即刻送達實驗室。三）標簽及申請單申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、檢測目的，標識是普通培養(yǎng)、抗酸桿菌還是真菌培養(yǎng)。一定要注明標本種類為肺泡灌洗液，以及采集時間。無菌管上的標簽要求有唯一標識號或條碼，注明

22、標本采集時間、檢測目的。四）標本運輸標本采集后需盡快送到實驗室；不要冷藏標本。五）實驗室拒收標準1. 沒有標簽或標簽貼錯；2. 標識信息不明，未提供采集時間及送檢目的等；3. 無菌管無蓋子，有污染可能；4. 未及時送至實驗室的標本；5. 運送容器有滲漏。四、氣道吸取標本一）臨床采樣指征有氣管插管或氣管切開等人工氣道患者，無法自行咳痰，可通過吸痰管從氣道吸取標本。二）標本采集通過氣管內插管將一次性無菌吸痰管推進呼吸道直至遇到阻力后開始抽吸，留取標本在吸痰杯內。三）標簽及申請單每個標本都應在申請單上詳細填寫患者姓名、病歷號、采集日期時間、診斷、檢驗項目等。在標本上粘貼條碼，條碼中應包括患者姓名、病

23、歷號、采集時間等。標本標識要求有唯一標識號或條碼。四）標本運輸1. 標本采集后需盡快送到實驗室，不能超過2 小時。不及時運送可導致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡；2. 不能及時送達或待處理標本應置于4冰箱保存（疑為肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌不在此列），以免雜菌生長。但不能超過24 小時；3. 對可疑烈性呼吸道傳染?。⊿ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者標本，在采集、運送或保存過程中必須注意生物安全保護。五）實驗室拒收標準1. 沒有標簽或標簽貼錯；2. 標識信息不明，未提供采集時間等；3. 超過 2 小時送達實驗室，且沒有正確保存的標本；4. 運送容器選擇

24、不當或有滲漏；5.第三節(jié)：尿液標本泌尿系統(tǒng)感染可分為單純性尿路感染、復雜性尿路感染及尿膿毒血癥，診斷主要通過采集尿液標本進行微生物學檢測。其中90%的門診病人和50%左右的住院病人，其病原菌是大腸埃希菌；其致病微生物還包括其它細菌、念珠菌等。泌尿系統(tǒng)感染微生物學檢測的方法為尿培養(yǎng)、免疫學檢測等。尿液標本通常是無菌的或有暫時性少量定植菌存在。但在標本采集過程中，應避免尿液被尿道或尿道周圍的正常菌群污染。1、 臨床采樣指征：1. 當患者出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛、血尿、腎區(qū)疼痛等癥狀，同時可能伴有寒戰(zhàn)、高熱、白細胞計數(shù)升高，懷疑存在泌尿系感染時；2. 尿常規(guī)結果提示泌尿系感染時；3. 無癥狀的患者不建議

25、常規(guī)進行尿培養(yǎng)檢測；4. 留置導尿管患者出現(xiàn)發(fā)熱時。2、 標本采集：1. 清潔中段尿1) 清潔的中段尿標本，是泌尿系感染診斷的主要標本；如何避免采集過程中周圍皮膚粘膜及尿道定植菌的污染，是標本采集的關鍵。中段尿標本的采集往往由患者獨立完成，應向患者充分說明留取無污染中段尿的意義和具體采集方法。盡可能在未使用抗菌藥物前送檢，晨尿最佳。采集方法如下：A. 女性：在采集標本前充分清洗或消毒尿道口部位。i. 分 開兩腿；ii. 用 肥皂水清洗尿道口部位，或用碘酒、碘伏消毒尿道口；iii. 手 持采樣杯外側，避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入廁所，然后用采樣杯采集半杯尿液；將蓋子蓋好、旋緊；iv. 檢

26、查杯蓋是否密封，避免溢灑。B. 男性：在采集標本前充分清洗尿道口i. 縮回包皮(如果沒有割包皮)，充分暴露龜頭；ii. 用肥皂清洗尿道口；iii. 手持采樣杯外側，避免接觸杯口邊緣。先將少量尿液排入廁所，然后用采樣杯采集半杯尿液；將蓋子蓋好、旋緊；iv. 檢查杯蓋是否密封，避免溢灑。2. 導尿管采集尿液因存在著極大的污染可能，禁止從集尿袋中采集標本，?？芍苯哟┐虒蚬芙藗缺诓杉蛞簶吮?。具體操作如下：1) 夾閉導尿管不超過30 分鐘；2) 用酒精棉球消毒清潔導管近端采樣部位周圍外壁；3) 將注射器針頭穿刺進入導管腔，抽吸出尿液；4) 收集的尿液置于無菌尿杯或試管中；5) 檢查杯蓋是否密封，避

27、免灑溢。3. 恥骨上膀胱穿刺如需進行厭氧菌培養(yǎng)或兒童及其他無法配合獲得清潔尿液標本時，應采用恥骨上膀胱穿刺；1) 消毒臍部至尿道之間區(qū)域的皮膚；2) 對穿刺部位進行局麻；3) 在恥骨聯(lián)合和臍部中線部位將針頭插入充盈的膀胱；4) 用無菌注射器從膀胱吸取尿液；5) 無菌操作將尿液轉入無菌螺口杯，盡快送至實驗室培養(yǎng)。標簽及申請單申請單除應包括患者基本信息外，一定注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用注明標本種類和采集時間，此信息尤其重要。4、 標本運輸1. 尿標本采集后應立即送檢。2. 如不能在采集30 分鐘內進行培養(yǎng)，應放入4冰箱保存，但也不能超過24小時。5、 實驗室拒收標準1. 標識不明，未提供采

28、集時間及采集方法；2. 標本類型與標簽信息不符；3. 尿標本采集后超過30 分鐘送達實驗室，且未冷藏保存的；4. 患者集尿袋中的尿液標本；5. 申請做厭氧菌培養(yǎng)但未從恥骨弓上穿刺采集尿液。6. 容器破損、尿液滲漏；7. 明顯污染的標本；8. 標本量太少。第四節(jié)：其它無菌體液標本一、腦脊液腦脊液是診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染最主要的標本。一 ) 臨床采樣指征：臨床出現(xiàn)不明原因的頭痛、發(fā)熱、腦膜刺激征(頸強直、克氏征、布氏征陽性)、腦神經(jīng)病理征象；腦積水；腦性低鈉血癥等癥狀，懷疑中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時應送檢腦脊液培養(yǎng)標本，并同時送檢血培養(yǎng)標本。二 ) 標本采集：懷疑患者細菌性腦膜炎時，應立即采集腦脊液和血培養(yǎng)

29、，應在抗菌藥物使用前采集。懷疑分枝桿菌、隱球菌或慢性腦膜炎時，可能需多次采集腦脊液標本。如懷疑存在顱內壓增高時，應先行檢查頭顱CT，必要時，可先予以脫水治療再行穿刺。懷疑細菌性腦膜炎時，建議同時送檢2-4套血培養(yǎng)。由臨床醫(yī)師采集，嚴格執(zhí)行無菌操作。消毒采集部位皮膚，通常在第3、4腰椎或第4、 5腰椎間隙插入帶有管芯針的空針，進針至蛛網(wǎng)膜間隙，拔去管芯針，收集腦脊液5ml 10ml ，分別臵于3支無菌試管中，第一管做化學或免疫學檢查，第二管做細菌學檢查，第三管做細胞學檢查。細菌學檢查要求適量標本：細菌 1ml ，真菌 2ml ，分枝桿菌 2ml。腦脊液采集量不能少于1ml 。盡可能多收集腦脊液，

30、可以提升培養(yǎng)的陽性檢出率，尤其是針對真菌和分枝桿菌的培養(yǎng)。如送檢T-SPOT.TB，還需注意添加肝素抗凝。三 ) 標簽及申請單：標本標識要求有唯一標識號或條碼。血培養(yǎng)瓶及無菌管需清晰標注患者基本信息、標本來源、標本采集時間、送檢目的、臨床診斷、申請醫(yī)師等。應注明是否已經(jīng)使用抗菌素。特殊病原菌檢查如奴卡菌、真菌、分枝桿菌應注明。腦室分流的標本應注明“腦室分流液”，而不是“腦脊液”。四 ) 標本運輸：標本采集后應立即送檢，不超過1 小時；腦脊液標本不可冷藏。五 ) 實驗室拒收標準1. 樣本容器上未貼標簽，或標簽與檢驗申請單不符；2. 樣本外漏、容器破損或明顯受到污染；標本量少，送檢延遲，未按規(guī)定保

31、存。3.胸水以細菌性胸膜炎最為常見，也可見于膈下炎癥、肺結核、肺炎、肺結核等疾病。低蛋白或腫瘤性疾病也可以引起的胸腔積液。一 ) 臨床采樣指征：患者聽診、影像學檢查發(fā)現(xiàn)胸腔積液，胸腔穿刺后發(fā)現(xiàn)胸腔積液渾濁、乳糜性、血性或膿性，考慮感染性胸腔積液( 肺結核、肺炎、胸膜炎) 患者應送檢，進行涂片染色、細菌培養(yǎng)等細菌學檢測。二 ) 標本采集：盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得；嚴格執(zhí)行無菌操作。通過影像學或叩診定位穿刺部位，消毒穿刺部位皮膚，麻醉穿刺部位，用中空孔針穿刺至胸膜腔內，抽取胸水標本；標本采集后可注入可直接注入血培養(yǎng)瓶送檢，或將標本收集到帶螺旋帽內無菌管送檢，以便

32、微生物室進行涂片檢查。標本量分別為細菌培養(yǎng) 1ml ，真菌培養(yǎng) 10ml ，分枝桿菌培養(yǎng) 10ml 。不要拭子蘸取標本。如送檢T-SPOT.TB，還需注意添加肝素抗凝。三 ) 標簽及申請單：申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標本來源、檢測目的，注明胸水的類型、性狀，以及特殊檢驗需求。血培養(yǎng)瓶及無菌管要求有唯一標識號或條碼。需標注患者基本信息、標本來源、標本采集時間、送檢目的等。四 ) 標本運輸：標本采集后應立即送檢，通常室溫15分鐘內應送至實驗室，若不能及時送檢，不可冷藏。室溫保存不得超過24小時。五 ) 實驗室拒收標準1. 樣本容器上未貼標簽，或標簽

33、與檢驗申請單不符；2. 樣本外漏、容器破損或明顯受到污染；3. 標本量過少，或凝固；4. 送檢延遲，未按規(guī)定保存腹腔積液分為漏出液和滲出液，滲出液多由感染引起，常見細菌、結核分枝桿菌、厭氧菌感染。一 ) 臨床采樣指征：出現(xiàn)但不局限于發(fā)熱、腹脹、腹部疼痛、壓痛、反跳痛；并經(jīng)影像學檢查發(fā)現(xiàn)腹腔內積液者。二 ) 標本采集：盡可能在抗菌藥物使用前采集。由臨床醫(yī)師經(jīng)皮穿刺或外科方式獲得；嚴格執(zhí)行無菌操作?？捎沙暥ㄎ?。消毒采集部位皮膚，麻醉穿刺部位，用中空孔針穿刺，標本采集后可注入無菌瓶或無菌試管送檢。三 ) 標簽及申請單：申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標本

34、來源、檢測目的，注明腹水的類型、性狀，以及特殊檢驗需求。標本標識要求有唯一標識號或條碼。無菌管需標注患者基本信息、標本來源、標本采集時間、送檢目的等。四 ) 標本運輸：標本采集后應立即送檢，通常室溫15分鐘內應送至實驗室，若不能及時送檢，不可冷藏。室溫保存不得超過24小時。五 ) 實驗室拒收標準1. 樣本容器上未貼標簽，或標簽與檢驗申請單不符；2. 樣本外漏、容器破損或明顯受到污染；3. 標本量過少，或凝固；4. 送檢延遲，未按規(guī)定保存感染是導致關節(jié)滑膜炎一個主要原因。常見細菌感染，偶見病毒、真菌、分枝桿菌感染?？沙槿￡P節(jié)腔積液進行革蘭氏染色、細菌培養(yǎng)、厭氧菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)、結核分枝桿菌等細菌

35、學檢測。一 ) 臨床采樣指征：影像學發(fā)現(xiàn)關節(jié)腔積液，伴有關節(jié)腫脹、疼痛，活動受限，病因不明、治療無效，懷疑感染性關節(jié)炎應送檢。二 ) 標本采集：盡可能在抗菌藥物使用前采集。關節(jié)腔穿刺應由有經(jīng)驗的臨床醫(yī)師在嚴格的無菌操作下進行。嚴格的皮膚消毒，局部麻醉穿刺部位，中空針頭穿刺入關節(jié)腔，盡可能多地抽取關節(jié) 液標本?？芍苯幼⑷胙囵B(yǎng)瓶或無菌管內送檢。如果考慮厭氧菌培養(yǎng)，需要在厭氧條件下運送標本。如有全身發(fā)熱癥狀，應同時采集血培養(yǎng)標本。三 ) 標簽及申請單：申請單除應包括患者基本信息外，注明患者的臨床診斷、癥狀、是否使用了抗菌藥物、標本來源、檢測目的，注明關節(jié)液的性狀，以及特殊檢驗需求。標本標識要求有唯

36、一標識號或條碼。需標注患者基本信息、標本來源、標本采集時間、送檢目的等。四 ) 標本運輸：標本采集后應立即送檢，通常室溫15分鐘內應送至實驗室，若不能及時送檢，不可冷藏。室溫保存不得超過24小時。五 ) 實驗室拒收標準1. 樣本容器上未貼標簽，或標簽與檢驗申請單不符；2. 樣本外漏、容器破損或明顯受到污染；3. 標本量過少，或凝固；4. 送檢延遲，未按規(guī)定保存第五節(jié)：胃腸道標本：胃腸道感染，包括細菌性痢疾、微生物引起的胃腸炎、細菌性食物中毒、腸道感染、消化性潰瘍和抗生素相關性腹瀉等疾病，是細菌、真菌、病毒、原蟲和寄生蟲經(jīng)口腔進入消化道后一定條件下引起的胃腸道功能障礙。由于引起胃腸道感染的微生物

37、種類繁多，診斷比較困難，因此加強對胃腸道標本的病原微生物檢測具有重要臨床意義。正確的標本采集和及時送檢是保證胃腸道感染細菌學檢驗質量的關鍵。一、糞便標本糞便是診斷胃腸道感染的最主要標本。一 ） 臨床采樣指征：當患者出現(xiàn)腹痛、腹瀉（水樣便、膿血便），或伴有發(fā)熱；糞便常規(guī)鏡檢異常，建議采集糞便標本，進行細菌培養(yǎng)。二 ） 標本采集與要求標本的采集盡可能在應用抗菌藥物治療前，標本應收集在寬口便盒內，并加蓋密封。如考慮空腸彎曲菌需要無血彎曲菌瓊脂培養(yǎng)基。艱難梭狀桿菌需在厭氧環(huán)境中生存，建議在床旁進行標本的采集及接種。接種后的標本立即放入?yún)捬醮鼉?，送至實驗室。重復采集標本，可提高陽性檢出率。1. 自然排便

38、法患者在干燥清潔便盆（避免使用坐式或蹲式馬桶）內自然排便后，挑取有膿血、黏液部分的糞便2-3g（液體糞便則取絮狀物1-3ml ）放入無菌便盒內送檢。若無黏液、膿血，則在糞便上多點采集送檢。此為常規(guī)方法。2. 直腸拭子法用肥皂水將肛門周圍洗凈，將占有無菌生理鹽水的棉拭子插入肛門4-5cm（兒童為2-3cm）。棉拭子與直腸粘膜表面接觸，輕輕旋轉拭子，可明顯在拭子上見到糞便。將帶有糞便標本的棉拭子插入運送培養(yǎng)基，立即送檢。本方法僅適用于排便困難的患者或嬰幼兒，不推薦使用拭子做常規(guī)標本。三 ) 標簽及申請單申請單上應包括患者姓名、病歷號、采集日期時間、診斷、相關旅行史等。標本標識要求有唯一標識號或條碼

39、。標本上的標簽中應包括患者姓名、病歷號、采集時間等。送檢的新鮮標本應報告糞便的性狀，標本表面或標本里面存在血液也應注明。四 ) 標本運輸糞便標本應盡快送檢，室溫下運送標本時間不超過2小時。若不能及時送檢，可加入pH7.0 磷酸鹽甘油緩沖保存液或使用- CaryBlair 運送培養(yǎng)基臵于4冰箱保存，保存時間不超過24小時。直腸拭子采集的標本必須臵入-CaryBlair 運送培養(yǎng)基或GN肉湯中送檢。室溫下運送時間不應超過2小時， 4冰箱保存不超過24小時。高度懷疑霍亂弧菌感染的標本需專人運送，必須符合特殊標本的安全要求。五 ) 實驗室拒收標準標本容器上未貼標簽或貼錯標簽、送檢時間超過規(guī)定時間、保存

40、不當、標本有泄漏、送檢容器不合格(如容器被壓碎或有破裂)、標本量不足、干燥的拭子、含鋇糞便、干便、明顯污染的糞便以及一日內重復送檢的標本，不做實驗室相關檢測，并應設法與臨床醫(yī)師聯(lián)系，可要求重新留取標本，做好記錄。在沒有與醫(yī)師溝通之前標本不應丟棄，仍按實驗室標本保存原則存放。4保存超若采集2小時后未使用運輸培養(yǎng)基運送、以運輸培養(yǎng)基送檢但過48小時或 35保存超過24小時的標本不能送檢，應在報告單上標記“樣本運送延遲，培養(yǎng)可能出現(xiàn)假陰性”。胃鏡活檢組織培養(yǎng)適用于胃炎、消化性潰瘍的患者，主要用于幽門螺桿菌的檢測。一 ） 臨床采樣指征：一般不建議只為幽門螺旋桿菌診斷進行胃鏡檢查。接受胃鏡檢查者，可進行

41、活組織染色鏡檢。幽門螺旋桿培養(yǎng)因其生長條件要求復雜，不能常規(guī)進行培養(yǎng)。二 ） 標本采集與要求經(jīng)胃鏡用活檢鉗在胃竇小彎側距幽門5cm（鄰近胃角處）、胃竇大彎側正對胃角處或病變鄰近處采集1-2塊樣品。為了明確內鏡所見病變的性質，可選擇病變處局部黏膜進行活檢。隆起性病灶在其頂部（充血、糜爛等）及其基底部（糜爛、凹凸不平、色澤改變等）活檢，息肉的隆起性病灶也可完整切除后送檢；平坦性病灶在病灶周邊或中央、黏膜皺襞中斷處活檢；潰瘍性病灶在潰瘍邊緣黏膜隆起的頂部或內側黏膜多點活檢；局部黏膜病灶也可根據(jù)染色、放大內鏡觀察的結果，針對最可疑或最典型的病變部位進行活檢。標本采集應在停服鉍劑或抗菌藥物7天后進行。三

42、 ） 標簽及申請單申請單上應包括患者姓名、病歷號、采集日期時間、診斷等，要明確注明標本采集的部位，以及檢測目的，如“幽門螺旋桿菌培養(yǎng)”。標本標識要求有唯一標識號或條碼。標本上的標簽中應包括患者姓名、病歷號、采集時間、采集部位等。送檢的新鮮標本應報告糞便的性狀，標本外觀。四 ) 實驗室拒收原則對于沒有將患者和采集信息標識完整的標本應及時聯(lián)系臨床醫(yī)師，補全信息；對于標本容器貼錯標簽、送檢容器不合格、送檢時間超過規(guī)定時間、樣本保存不當、有明顯的污染等時應拒收。第六節(jié)：生殖道標本生殖系統(tǒng)感染主要包括外陰部病變、尿道炎、陰道炎、陰道病、宮頸炎、子宮內膜炎和盆腔炎。病原體包括細菌、真菌、淋病奈瑟菌、解脲脲

43、原體和人型支原體、沙眼衣原體等。各類感染的臨床癥狀和體征比較相似，臨床不易區(qū)分。通過檢測明確診斷對于治療，尤其是保證患者治療依從性至關重要。大多數(shù)生殖道感染為性傳播性疾病(STD) , 當疑為生殖道感染性疾病時，首先了解是否有不潔性交史，然后根據(jù)癥狀確定檢查方向。對于男性患者來講，先檢查尿道是否有膿性分泌物，再依次是前列腺液、精液。對于女性患者，采集陰道后穹隆處或宮頸分泌物作培養(yǎng)或涂片鏡檢。一 )臨床采樣指征：具有外陰潰瘍、瘙癢及灼熱感，出現(xiàn)分泌物、贅生物等癥狀者。二 )采樣要求病原體培養(yǎng)應在抗菌藥物應用前或停藥一周后采集標本。1.2.生殖器是開放性器官，標本采集過程中應遵循無菌操作以減少雜菌

44、污染。3. 陰道內有大量正常菌群存在，采取宮頸標本應避免觸及陰道壁。4. 沙眼衣原體在宿主細胞內繁殖，采集時盡可能多的取上皮細胞。） 采集方法1. ?òàé?ú ?（ 1） 男性：取樣前至少1小時內不要小便。用無菌生理鹽水清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦干，用男性拭子采取從尿道口溢出的膿性分泌物或將男性拭子插入尿道內2 4厘米取分泌物，臵無菌試管中。如無膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。（ 2） 女性：取樣前至少1小時內不要小便。用無菌生理鹽水清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦干，然后經(jīng)陰道內診壓迫尿道，從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出

45、，用無菌女性拭子采樣。無肉眼可見的分泌物時，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內，轉動并停留10 20秒鐘，拔出后，臵入無菌試管內送檢。2. ò?àé?ú?o?à?ò?÷à ?ò ?à ?e? ú?Dòê?× ?2?è?ò?à ?ú ?ú 4à ?×?ú2à±ú?òoóe? | é?ú? í ?3? 

46、34;±2?òa￥? ?±ê ?a? è?3. 1? ±é?ú ? o?à ?ò ?÷à ?ò ?à ?è ?T? ú ?T?ò 2á 3y1? ± ?úé?ú ? ?òü ?D òê ?× ?2?è ?1? ± 1ê 2à ?× ?á ?á×a?2

47、 íá?10 ?30? ?× 2? èùê ?× ?é ?è ?T? úêò 1ê ?ú ?í ?ì ?4. × ?1? é ?ú ? o?à ?ò ?÷à?ò ?à?òú 1?± ?ú?é ? ?1ê?í¨ 1y ?1ê 2?è ?à&#

48、232;?ê ?× ? ?a?2 2? ×?1? ú ?é ?ú ? àé1?￥ 1?± e¤ ?¤? ü ?è ?ê ?× ?é ?ú ?T? úêò 1ê ?ú ?í ?ì ?5. °íê ?ü?òà?ò ?ü o? ?ò?é2? ?è?o

49、43;è 1?è?üD?ê?T? úê ?× ?2? èù?6. ?è ? §é×? ?|? ò ?à oó ?DDoó e ? ? D ? é± 3| × ?1?°?Y |3 éè ?±ê± ?7. ?°áD?üòo o?êòíoí ? ò ? ￥

50、í ?- é± 3|? °áD?ü°?°áD?üòo ?T? úê ?× ?2? ?°áD?üòo? ±ê±?é ?ú ?T? úèY÷ ?ú ?í ?ì ?8. ?ò o oêê ?ì ?| òú 5Dì ?ú ? ? ? ?&

51、#242;à?ú?D?í a? ?ú ?e? úèY?÷?ú?í ?ì ?9. àè eé?ú?o?è ? úàíè? ?| ?òü?e? ú ?Tê?× ?è?ò?ò? ù× 2?é?ú?±ê±?é?ú ?e? úêò 1ê?ú?í?ì?四 ） 標簽及申請單每份標本都應貼上標簽并標明必要信息，在檢驗申請單上填寫足夠的有關臨床資料。包括病人情況（病區(qū)、病人姓名、住院號）、標本情況（標本類型、檢驗目的、采集部位、采集方法、采集時間等）和病人用藥等信息。五 ）標本運輸標本應在室溫下15分鐘內送到檢驗科。如果超過2小時送達，冷藏保存。六 ）實驗室拒收標準1. 申請錯誤：如下生殖道標本要求做厭氧培養(yǎng)，陰道分泌物要求做淋病奈瑟菌涂片2. 標識錯誤：無標簽或標簽不完整，或標本