多倍體與單倍體植物

1、第第8 8章章 多倍體與單倍體植物多倍體與單倍體植物本節(jié)主要內(nèi)容：1.染色體工程染色體工程2.多倍體植物育種多倍體植物育種3.單倍體與純合二倍體植物育種單倍體與純合二倍體植物育種8.1 染色體工程染色體工程概念：按照一定的設(shè)計(jì)，有計(jì)劃地概念：按照一定的設(shè)計(jì)，有計(jì)劃地消減、添加或代換消減、添加或代換同種或異種染色體，從而達(dá)到定向同種或異種染色體，從而達(dá)到定向改變遺傳性和選育改變遺傳性和選育新品種新品種的目的的技術(shù)。的目的的技術(shù)。幾個(gè)基本概念幾個(gè)基本概念1.染色體組染色體組（Chromosomeset/Genome）生物體配子的全部染色體稱為一生物體配子的全部染色體稱為一個(gè)染色體組個(gè)染色體組。同一

2、物種的染色體。同一物種的染色體數(shù)目是相對(duì)穩(wěn)定的。數(shù)目是相對(duì)穩(wěn)定的。配子染色體配子染色體為單倍體（為單倍體（Haploid），用），用n表示表示，稱為一個(gè)染色體組。體細(xì)胞為，稱為一個(gè)染色體組。體細(xì)胞為二倍體（二倍體（Diploid）以）以2n表示。表示。多數(shù)生物體是二倍體多數(shù)生物體是二倍體：體細(xì)胞中：體細(xì)胞中染色體是染色體是兩兩成對(duì)兩兩成對(duì)的。例如，果的。例如，果蠅有蠅有4對(duì)共對(duì)共8條染色體條染色體(如圖如圖)，這，這4對(duì)染色體可以分成對(duì)染色體可以分成兩兩組組，每一，每一組中包括組中包括3條常染色體和條常染色體和1條性條性染色體染色體。2.整倍體整倍體（euploid）體細(xì)胞內(nèi)含有完整的染色體組

3、的類型為整倍體。體細(xì)胞內(nèi)含有完整的染色體組的類型為整倍體。以小麥屬為例，以小麥屬為例，普普通小麥通小麥n=7，6n=42， 是是六倍體。六倍體。3.非整倍體（非整倍體（aneuploid）體細(xì)胞內(nèi)的染色體數(shù)目不是染色體組的完整倍體細(xì)胞內(nèi)的染色體數(shù)目不是染色體組的完整倍數(shù)的稱為非整倍體。數(shù)的稱為非整倍體。多或少一個(gè)以至若干個(gè)多或少一個(gè)以至若干個(gè)染染色體，如色體，如2n+1。4.染色體變異染色體變異染色體變異可體現(xiàn)在染色體染色體變異可體現(xiàn)在染色體數(shù)目數(shù)目和和結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)兩個(gè)方面。兩個(gè)方面。染色體數(shù)目染色體數(shù)目能以能以單個(gè)染色體或以染色體組單個(gè)染色體或以染色體組為單位的為單位的增加或減少。增加或減少。染

4、色體組數(shù)量改變?nèi)旧w組數(shù)量改變：成倍性增減。：成倍性增減。染色體結(jié)構(gòu)改變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)改變：包括基因刪除、重排、倒位及異：包括基因刪除、重排、倒位及異染色質(zhì)化。染色質(zhì)化。1 1、定義、定義多倍體多倍體（polyploid）：是指）：是指?jìng)€(gè)體細(xì)胞中含有超過正常染色個(gè)體細(xì)胞中含有超過正常染色體組數(shù)的個(gè)體。體組數(shù)的個(gè)體。同源多倍體同源多倍體（autopolyploid）：多倍體的）：多倍體的染色體來自于同染色體來自于同一物種或在原有染色組的基礎(chǔ)上加倍而成。一物種或在原有染色組的基礎(chǔ)上加倍而成。異源多倍體異源多倍體（allopolyploid）：多倍體的）：多倍體的染色體來自于不染色體來自于不同一物種。同

5、一物種。自然界中存在的多倍體大多是異源多倍體。自然界中存在的多倍體大多是異源多倍體。 常見多倍體有三、四、五、六和八倍體。在被子植物中，常見多倍體有三、四、五、六和八倍體。在被子植物中，至少有至少有1/3的物種的物種是多倍體。例如，普通小麥、棉花、煙草是多倍體。例如，普通小麥、棉花、煙草、蘋果、梨、菊、水仙等都是多倍體、蘋果、梨、菊、水仙等都是多倍體 。馬鈴薯是四倍體馬鈴薯是四倍體 ，普通小麥?zhǔn)橇扼w普通小麥?zhǔn)橇扼w 。8.2 多倍體植物2.2.多倍體植物特點(diǎn)多倍體植物特點(diǎn)（1 1）形態(tài)上的形態(tài)上的巨大性巨大性：表現(xiàn)在果實(shí)、種子、莖、葉、氣孔等。表現(xiàn)在果實(shí)、種子、莖、葉、氣孔等。（2 2）育性

6、低）育性低：同源多倍體：同源多倍體常表現(xiàn)出高度不育（常表現(xiàn)出高度不育（Why?)，可獲無籽，可獲無籽，可通過無性繁殖；但異源多倍體是可育的，自交親和，結(jié)實(shí)率較高?？赏ㄟ^無性繁殖；但異源多倍體是可育的，自交親和，結(jié)實(shí)率較高。（3 3）抗逆性強(qiáng)：）抗逆性強(qiáng)：多倍體新陳代謝旺盛，多倍體新陳代謝旺盛，對(duì)對(duì)逆境逆境的耐抗性方面增強(qiáng)。的耐抗性方面增強(qiáng)。（4）營養(yǎng)成分高營養(yǎng)成分高：碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素等含量都會(huì)增加。：碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素等含量都會(huì)增加。多倍體植物一般光合效率高、多倍體植物一般光合效率高、生長速度快。生長速度快。但是多倍體動(dòng)物少但是多倍體動(dòng)物少，并多為，并多為同源多倍體同源多倍體

7、。4倍體葡萄小麥：2倍體與6倍體3倍體無籽西瓜多倍體菊花多倍體人參Chapter 8細(xì)胞工程Copyright 2011 Wang Weidong, All rights reserved.煙草2倍體，4倍體和8倍體葉片表皮細(xì)胞、氣孔的比較思考問題：為什么多倍體植株高度不育呢？思考問題：為什么多倍體植株高度不育呢？同源多倍體在減數(shù)分裂同源多倍體在減數(shù)分裂聯(lián)會(huì)期，同源染色體配紊亂，聯(lián)會(huì)期，同源染色體配紊亂，多數(shù)不能形成正常配子。多數(shù)不能形成正常配子。以有以有 3個(gè)染色個(gè)染色體組的三倍體香蕉為例體組的三倍體香蕉為例在同源染色體聯(lián)匯時(shí)可能有四種取向的排列方式：在同源染色體聯(lián)匯時(shí)可能有四種取向的排列方

8、式：四種中只有四種中只有A形成形成的配子具有完整染的配子具有完整染色組的單倍體或者色組的單倍體或者二倍體完整染色體二倍體完整染色體的配子。占的配子。占25%。其余其余3種組合所形種組合所形成成的配子都是的配子都是非整倍非整倍體染色體體染色體的配子，的配子，這種配子由于劑量這種配子由于劑量不同，一般不同，一般不成活不成活。3n(n=3)2.2.多倍體植物特點(diǎn)多倍體植物特點(diǎn)（1 1）形態(tài)上的形態(tài)上的巨大性巨大性：表現(xiàn)在果實(shí)、種子、莖、葉、氣孔等。表現(xiàn)在果實(shí)、種子、莖、葉、氣孔等。（2 2）育性低）育性低：同源多倍體：同源多倍體常表現(xiàn)出高度不育（常表現(xiàn)出高度不育（Why?)，可獲無籽，可獲無籽，可通

9、過無性繁殖；但異源多倍體是可育的，自交親和，結(jié)實(shí)率較高?？赏ㄟ^無性繁殖；但異源多倍體是可育的，自交親和，結(jié)實(shí)率較高。（3 3）抗逆性強(qiáng)：）抗逆性強(qiáng)：多倍體新陳代謝旺盛，多倍體新陳代謝旺盛，對(duì)對(duì)逆境逆境的耐抗性方面增強(qiáng)。的耐抗性方面增強(qiáng)。（4）營養(yǎng)成分高營養(yǎng)成分高：碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素等含量都會(huì)增加。：碳水化合物、蛋白質(zhì)、維生素等含量都會(huì)增加。多倍體植物一般光合效率高、多倍體植物一般光合效率高、生長速度快。生長速度快。但是多倍體動(dòng)物少但是多倍體動(dòng)物少，并多為，并多為同源多倍體同源多倍體。（1）多倍體）多倍體產(chǎn)生原理產(chǎn)生原理主要是體細(xì)胞在有絲分裂的過程中，染色體完成主要是體細(xì)胞在有絲分裂的過

10、程中，染色體完成了了復(fù)制復(fù)制，但是細(xì)胞受到外界環(huán)境條件，但是細(xì)胞受到外界環(huán)境條件(如溫度驟變?nèi)鐪囟润E變)或生物內(nèi)部因素的干或生物內(nèi)部因素的干擾，擾，紡錘體的形成受到破壞紡錘體的形成受到破壞，以致染色體不能被拉向兩極，以致染色體不能被拉向兩極，細(xì)胞也不能分裂，細(xì)胞也不能分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，于是就形成成兩個(gè)子細(xì)胞，于是就形成染色體數(shù)目加倍染色體數(shù)目加倍的細(xì)的細(xì)胞。胞。3 3 多倍體產(chǎn)生原理與誘導(dǎo)方法多倍體產(chǎn)生原理與誘導(dǎo)方法（2 2）多倍體）多倍體誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法A A 化學(xué)誘導(dǎo)法化學(xué)誘導(dǎo)法細(xì)胞松弛素細(xì)胞松弛素B B：能抑制肌動(dòng)蛋白聚合成微絲，從而抑制細(xì)：能抑制肌動(dòng)蛋白聚合成微絲，從而抑制細(xì)胞分裂。胞

11、分裂。秋水仙素秋水仙素：分子式為：分子式為C C2222H H2525O O6 612H12H2 2O O，是從一種百合科秋水，是從一種百合科秋水仙屬植物器官中提取的一種仙屬植物器官中提取的一種生物堿生物堿。能特異性地與細(xì)胞中能特異性地與細(xì)胞中的微管蛋白質(zhì)分子結(jié)合的微管蛋白質(zhì)分子結(jié)合，從而使正在分裂的細(xì)胞中的，從而使正在分裂的細(xì)胞中的紡錘紡錘絲合成受阻絲合成受阻，導(dǎo)致復(fù)制后的染色體，導(dǎo)致復(fù)制后的染色體無法向細(xì)胞兩極移動(dòng)無法向細(xì)胞兩極移動(dòng)，最終形成染色體加倍的核。細(xì)胞可以在藥劑去除后最終形成染色體加倍的核。細(xì)胞可以在藥劑去除后恢復(fù)恢復(fù)正正常分裂。常分裂。秋水仙素是目前誘導(dǎo)植物多倍體應(yīng)用秋水仙素是

12、目前誘導(dǎo)植物多倍體應(yīng)用最為廣泛最為廣泛的誘導(dǎo)劑。的誘導(dǎo)劑。秋水仙素秋水仙素處理方法處理方法處理部位處理部位：只有處理：只有處理正在分裂的細(xì)胞正在分裂的細(xì)胞才能獲得多才能獲得多倍體。通常以植物倍體。通常以植物莖端分生組織或發(fā)育期的幼胚莖端分生組織或發(fā)育期的幼胚為材料。為材料。處理方式處理方式：秋水仙素一般用：秋水仙素一般用0.1-0.5%水溶液，選擇水溶液，選擇處理處理方法方法：浸漬法、涂抹法、浸漬法、涂抹法、噴霧法、注射法、藥劑噴霧法、注射法、藥劑培養(yǎng)基法培養(yǎng)基法等。以前兩種方法最常用，見等。以前兩種方法最常用，見P76.浸漬法：浸漬法：種子浸泡催芽，胚根露白時(shí)，種子浸泡催芽，胚根露白時(shí)， 0

13、.1-0.5%秋水仙素秋水仙素處理處理24h，沖洗，播種。，沖洗，播種。涂抹法：涂抹法：涂抹在芽生長點(diǎn)上，早晚各涂抹在芽生長點(diǎn)上，早晚各1次。次。藥劑濃度藥劑濃度：不同植物對(duì)秋水仙素的敏感性不：不同植物對(duì)秋水仙素的敏感性不同。實(shí)踐證明，秋水仙素的有效濃度一般在同。實(shí)踐證明，秋水仙素的有效濃度一般在0.01-0.5%，以以0.2%左右的濃度最為常用左右的濃度最為常用。處理溫度處理溫度：一般在：一般在18-25之間。高溫成功率大。之間。高溫成功率大。處理時(shí)間處理時(shí)間：一般：一般不少于不少于24h24h。過于幼嫩、濃度。過于幼嫩、濃度高時(shí)處理時(shí)間可相應(yīng)短些。高時(shí)處理時(shí)間可相應(yīng)短些。間歇處理間歇處理比

14、持續(xù)處理比持續(xù)處理效果好。處理時(shí)間過長會(huì)使分生組織停長死亡。效果好。處理時(shí)間過長會(huì)使分生組織停長死亡。B 生物法生物法雜交法：雜交法：主要指體細(xì)胞，利用染色體加倍個(gè)體與未加倍主要指體細(xì)胞，利用染色體加倍個(gè)體與未加倍個(gè)體雜交繁殖多倍體后代，經(jīng)常與化學(xué)和物理方法結(jié)合個(gè)體雜交繁殖多倍體后代，經(jīng)常與化學(xué)和物理方法結(jié)合使用。使用。異源多倍體一個(gè)代表性的異源多倍體一個(gè)代表性的例子是人工培育的例子是人工培育的小黑麥小黑麥。胚乳培養(yǎng)法：胚乳培養(yǎng)法：胚乳培養(yǎng)可獲得三倍體植株，胚乳培養(yǎng)可獲得三倍體植株，Why?。胚乳胚乳=3n（一個(gè)染色體組來自雄配（一個(gè)染色體組來自雄配子，子，2個(gè)來自雌配子，故加倍后可獲個(gè)來自雌

15、配子，故加倍后可獲得三倍體。得三倍體。八倍體小黑麥八倍體小黑麥培育出的八倍體小黑麥具有許多新的特點(diǎn)：穗子、籽粒顯培育出的八倍體小黑麥具有許多新的特點(diǎn)：穗子、籽粒顯著大于小麥，增產(chǎn)效果明顯，同時(shí)能抗寒冷、干旱、貧瘠著大于小麥，增產(chǎn)效果明顯，同時(shí)能抗寒冷、干旱、貧瘠等不良條件，營養(yǎng)價(jià)值（如蛋白質(zhì)）也有較大改善。等不良條件，營養(yǎng)價(jià)值（如蛋白質(zhì)）也有較大改善。4 多倍體植物的鑒定多倍體植物的鑒定人工誘導(dǎo)處理過的群體可能是由多倍體、二倍體甚至是嵌合人工誘導(dǎo)處理過的群體可能是由多倍體、二倍體甚至是嵌合體等體等混合群體混合群體，所以需要鑒定、篩選出需要的多倍體。，所以需要鑒定、篩選出需要的多倍體。（1 1）

16、核體積測(cè)量法）核體積測(cè)量法：一般而言，細(xì)胞核大小與染色體數(shù)目成比：一般而言，細(xì)胞核大小與染色體數(shù)目成比例，為了維持恒定的例，為了維持恒定的核質(zhì)比例核質(zhì)比例，隨著細(xì)胞核的增大，細(xì)胞大小，隨著細(xì)胞核的增大，細(xì)胞大小也按比例增加。因此也按比例增加。因此多倍體細(xì)胞及細(xì)胞核通常要比二倍體大一多倍體細(xì)胞及細(xì)胞核通常要比二倍體大一些些。因此，通過體細(xì)胞核體積的測(cè)定可以鑒定染色體的倍性。因此，通過體細(xì)胞核體積的測(cè)定可以鑒定染色體的倍性。缺點(diǎn)是比較費(fèi)時(shí)、準(zhǔn)確性不高。缺點(diǎn)是比較費(fèi)時(shí)、準(zhǔn)確性不高。間接法：間接法：（2 2）染色體計(jì)數(shù)法：）染色體計(jì)數(shù)法：將細(xì)胞固定制片、將細(xì)胞固定制片、染色后觀察染色染色后觀察染色體個(gè)

17、數(shù)體個(gè)數(shù)。由于染色體制片技術(shù)比較成熟，因此該方法仍。由于染色體制片技術(shù)比較成熟，因此該方法仍是目前鑒定多倍體倍性的一種直觀、準(zhǔn)確的方法是目前鑒定多倍體倍性的一種直觀、準(zhǔn)確的方法，缺點(diǎn)，缺點(diǎn)是是比較費(fèi)時(shí)比較費(fèi)時(shí)。（3 3）DNADNA含量測(cè)定：含量測(cè)定：可以測(cè)定單個(gè)細(xì)胞的可以測(cè)定單個(gè)細(xì)胞的DNADNA含量，含量，再再根據(jù)細(xì)胞根據(jù)細(xì)胞DNADNA比較來推斷出細(xì)胞的倍性比較來推斷出細(xì)胞的倍性。如果發(fā)現(xiàn)。如果發(fā)現(xiàn)雜種的雜種的DNADNA含量是其親本的一倍半，就可以確定這些雜種含量是其親本的一倍半，就可以確定這些雜種是三倍體。是三倍體。DNADNA含量測(cè)定法含量測(cè)定法快速準(zhǔn)確，能測(cè)出嵌合體快速準(zhǔn)確，能測(cè)

18、出嵌合體，但，但是缺點(diǎn)是是缺點(diǎn)是需要專門儀器，如核酸檢測(cè)儀需要專門儀器，如核酸檢測(cè)儀。直接鑒定法：直接鑒定法：1、單倍體概念、單倍體概念：細(xì)胞中含有：細(xì)胞中含有正常體細(xì)胞的一半正常體細(xì)胞的一半染色染色體數(shù)，即具有配子染色體數(shù)目的個(gè)體。體數(shù)，即具有配子染色體數(shù)目的個(gè)體。思考：?jiǎn)伪扼w是不是就是一倍體？思考：?jiǎn)伪扼w是不是就是一倍體？水稻是二倍體水稻是二倍體, ,其單倍體是一倍體其單倍體是一倍體(n=x=12)(n=x=12)普通煙草是異源四倍體，單倍體是二倍體（普通煙草是異源四倍體，單倍體是二倍體（n=2x=Ts=24n=2x=Ts=24）普通小麥?zhǔn)钱愒戳扼w普通小麥?zhǔn)钱愒戳扼w 單倍體是三倍體（單

19、倍體是三倍體（n=3x=ABD=21n=3x=ABD=21）8.3 單倍體與純合二倍體Chapter 8細(xì)胞工程2、單倍體特點(diǎn)、單倍體特點(diǎn)單倍體高度不育單倍體高度不育：減數(shù)分裂聯(lián)會(huì)紊亂：減數(shù)分裂聯(lián)會(huì)紊亂-沒有配對(duì)的同源染色體。沒有配對(duì)的同源染色體。由于單倍體只具有一套染色體，由于單倍體只具有一套染色體，染色體上的每個(gè)基因都染色體上的每個(gè)基因都能表現(xiàn)相應(yīng)的性狀，所以極易發(fā)現(xiàn)所產(chǎn)生的突變能表現(xiàn)相應(yīng)的性狀，所以極易發(fā)現(xiàn)所產(chǎn)生的突變，尤其，尤其是隱性突變，所以單倍體是進(jìn)行染色體是隱性突變，所以單倍體是進(jìn)行染色體遺傳分析的理想遺傳分析的理想實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料。由于通過人工方法使單倍體的染色體加倍就可以獲得

20、由于通過人工方法使單倍體的染色體加倍就可以獲得純純合二倍體合二倍體，可縮短育種年限可縮短育種年限，因此在育種上具有極高價(jià)值。，因此在育種上具有極高價(jià)值。Chapter 8細(xì)胞工程單倍體大大縮短育種周期單倍體大大縮短育種周期3、單倍體植物的培養(yǎng)、單倍體植物的培養(yǎng)途徑：花藥和花粉培養(yǎng)途徑：花藥和花粉培養(yǎng)（Anther and pollen culture）指離體培養(yǎng)指離體培養(yǎng)花藥和花粉花藥和花粉（雄配雄配子，子，n ），形成花粉植株，從，形成花粉植株，從中鑒定出單倍體植株，經(jīng)染中鑒定出單倍體植株，經(jīng)染色體二倍化后獲得的純合二色體二倍化后獲得的純合二倍體植物。屬于倍體植物。屬于雄核發(fā)育雄核發(fā)育(An

21、drogenesis)或孤雄生或孤雄生殖殖：卵細(xì)胞不受精，：卵細(xì)胞不受精，卵核消失卵核消失，或卵細(xì)胞受精前失活，或卵細(xì)胞受精前失活，由精核在卵細(xì)胞內(nèi)由精核在卵細(xì)胞內(nèi)單獨(dú)發(fā)育成單倍體，單獨(dú)發(fā)育成單倍體，因此只含有一套雄配子染色體。因此只含有一套雄配子染色體。這類單倍體的發(fā)生頻率很低。這類單倍體的發(fā)生頻率很低。Chapter 8細(xì)胞工程Chapter 8細(xì)胞工程（1）花藥和花粉的制備花藥和花粉的制備 花藥：花藥：采集未開放花蕾，采集未開放花蕾，消毒，剝?nèi)』ㄋ幭?，剝?nèi)』ㄋ帲臃N。，接種。 花粉制備：花粉制備：自然釋放法：自然釋放法：花藥接種于聚蔗糖溶液中漂浮培養(yǎng)花藥接種于聚蔗糖溶液中漂浮培養(yǎng)1-7

22、d，藥，藥壁開裂釋放出花粉，過濾收集，接種培養(yǎng)。壁開裂釋放出花粉，過濾收集，接種培養(yǎng)。機(jī)械分離法：機(jī)械分離法： 分離：分離：用用注射器或磁力攪拌器擠壓花藥注射器或磁力攪拌器擠壓花藥（溶解在蔗糖或培養(yǎng)（溶解在蔗糖或培養(yǎng)液中），釋放出花粉。液中），釋放出花粉。 過篩：過篩：用用30-50目篩網(wǎng)過濾目篩網(wǎng)過濾釋放出的花粉混合液。釋放出的花粉混合液。 清洗：清洗：離心離心2-3次次（用蔗糖或培養(yǎng)液懸?。?，收集花粉沉淀，（用蔗糖或培養(yǎng)液懸?。占ǚ鄢恋?，最后用培養(yǎng)液稀釋到適當(dāng)密度。接種培養(yǎng)。最后用培養(yǎng)液稀釋到適當(dāng)密度。接種培養(yǎng)。Chapter 8細(xì)胞工程水稻花藥培養(yǎng)程序剝?nèi)テ烊~鞘，取出稻穗10NaC

23、l 10 min，無菌水洗5次。70酒精手洗兩遍培養(yǎng)5天后，花藥變黑褐色，20天花藥裂開，長出淡黃色的花粉愈傷組織，先形成芽，后長出根，形成幼苗。旗葉鞘用70酒精擦洗一遍左手持穗，右手用鑷子取出花藥，無菌培養(yǎng)皿中用接種環(huán)接種到培養(yǎng)基上Chapter 8細(xì)胞工程 再生途徑：再生途徑：器官發(fā)生途徑：器官發(fā)生途徑：由花粉脫分化形成愈傷組織（即分化程序很由花粉脫分化形成愈傷組織（即分化程序很低的薄壁細(xì)胞團(tuán)），再由愈傷組織再分化出根和芽，最后形成低的薄壁細(xì)胞團(tuán)），再由愈傷組織再分化出根和芽，最后形成植株。植株。胚狀體途徑：胚狀體途徑：由花粉分裂由花粉分裂直接形成胚狀體直接形成胚狀體（不是由合子發(fā)育（不是

24、由合子發(fā)育成的胚叫胚狀體），或先形成成的胚叫胚狀體），或先形成胚性愈傷組織再分化出胚狀體胚性愈傷組織再分化出胚狀體，然后由胚狀體長成植株。然后由胚狀體長成植株。培養(yǎng)方法：培養(yǎng)方法：直接培養(yǎng)、看護(hù)培養(yǎng)等直接培養(yǎng)、看護(hù)培養(yǎng)等 培養(yǎng)基種類：培養(yǎng)基種類：MSMS、B5B5、NTHNTH（2）植株再生培養(yǎng)）植株再生培養(yǎng)Chapter 8細(xì)胞工程Chapter 8Copyright 2011 Wang Weidong, All rights reserved.Chapter 8細(xì)胞工程 培養(yǎng)產(chǎn)物培養(yǎng)產(chǎn)物：?jiǎn)伪扼w、二倍體（藥壁）、多倍體和：?jiǎn)伪扼w、二倍體（藥壁）、多倍體和非整倍體。非整倍體。篩選方法：篩選方法： 形態(tài)鑒定法：形態(tài)鑒定法：觀察植株形態(tài)，準(zhǔn)確性低