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3、C9090CGGAATTCCG9090CCGGAATTCCGG9090HaeIIIGGGGCCCC9090AGCGGCCGCT9090TTGCGGCCGCAA9090HindIIICAAGCTTG00CCAAGCTTGG00CCCAAGCTTGGG1075KpnIGGGTACCC00GGGGTACCCC9090CGGGGTACCCCG9090PCR設(shè)計引物時酶切位點的保護堿基表4酶寡核苷酸序列切割率2hr20hrMluIGACGCGTC00CGACGCGTCG2550NcoICCCATGGG00CATGCCATGGCATG5075NdeICCATATGG00CCCATATGGG00CGCCAT

4、ATGGCG00GGGTTTCATATGAAACCC00GGAATTCCATATGGAATTCC7590GGGAATTCCATATGGAATTCCC7590NheIGGCTAGCC00CGGCTAGCCG1025CTAGCTAGCTAG1050PCR設(shè)計引物時酶切位點的保護堿基表5酶寡核苷酸序列2hr20hrNotITTGCGGCCGCAAATTTGCGGCCGCTTTAAAATATGCGGCCGCTATAAAATAAGAATGCGGCCGCTAAACTATAAGGAAAAAAGCGGCCGCAAAAGGAAAANsiITGCATGCATGCACCAATGCATTGGTTCTGCAGTT010

5、10252510900101090909090PacITTAATTAAGTTAATTAACCCTTAATTAAGG025090PmeIGTTTAAACGGTTTAAACCGGGTTTAAACCCAGCTTTGTTTAAACGGCGCGCCGG000750255090PstIGCTGCAGCTGCACTGCAGTGCAAACTGCAGAACCAATGCATTGGAAAACTGCAGCCAATGCATTGGAACTGCAGAACCAATGCATTGGATGCAT0109090001090900酶切位點保護堿基表6切割率酶寡核苷酸序列2hr20hrPvuICCGATCGGATCGATCGATTCGC

6、GATCGCGA010002510SacICGAGCTCG1010SacIIGCCGCGGCTCCCCGCGGGGA050090SalIGTCGACGTCAAAAGGCCATAGCGGCCGCGCGTCGACGTCTTGGCCATAGCGGCCGCGGACGCGTCGACGTCGGCCATAGCGGCCGCGGAA0101005075SeaIGAGTACTCAAAAGTACTTTT10752575SmaICCCGGGCCCCGGGGCCCCCGGGGGTCCCCCGGGGGA00109010105090SpeIGACTAGTC1090GGACTAGTCC1090CGGACTAGTCCG050CTAGACTAGTCTAG050酶切位點保護堿基表7酶寡核苷酸序列切割率2hr20hrSphIGGCATGCC00CATGCATGCATG025ACATGCATGCATGT1050StuIAAGGCCTT9090GAAGGCCTTC9090AAAAGGCCTTTT9090XbaICTCTAGAG00GCTCTAGAGC9090TGCTCTAGAGCA7590CTAGTCTAGACTAG7590XhoICCTCGAGG00CCCTCGAGGG1025CCGCTCGAGCGG1075XmaICCCCGGGG00CCCCCGGGGG2575CCCCCCGGGGGG

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