天然藥物質(zhì)量監(jiān)控技術(shù)(共7頁)

1、 本科生課程(kchng)論文(lnwn)論文題目鼻淵片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)控課程名稱天然藥物質(zhì)量監(jiān)控技術(shù)學(xué)生姓名 張志強(qiáng)所在專業(yè)制藥工程所在班級(jí)1111指導(dǎo)教師杜建喜職稱教授日期2014 年 6 月 14 日評(píng)分鼻淵片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)監(jiān)控(jin kn)1、概述本產(chǎn)品中含兩種主要(zhyo)成分，分別是藿香葉和豬膽汁。藿香為唇形科多年生草本植物，它不僅是一種(y zhn)中草藥，還是一種天然香料植物。作為中草藥，它有芳香化濁，開胃止嘔，發(fā)表解暑的功效；可用于濕濁中阻，嘔吐泄瀉，腕痞不行，暑濕倦怠(jun di)，寒濕閉暑，發(fā)熱無汗，鼻淵頭痛。作為天然香料植物，可從中提取藿香浸膏和藿香油。藿香浸膏進(jìn)一步加工可制

2、得藿香凈油和藿香精油，二者都具有特征性藥草香、壤香和木香底蘊(yùn)，香氣濃郁而持久，可用于調(diào)配多種日用香精和食用香精。豬膽汁是一種苦味較濃的有色液體，富含膽酸、膽鹽、膽固醇等多種無機(jī)鹽，具有清熱通便、清熱解毒、止咳平喘籌功效。首先將藿香葉粉碎，進(jìn)行水蒸氣蒸餾得到有效藿香葉揮發(fā)油，然后用氣相色譜做定量試驗(yàn)；至于豬膽汁濃縮成浸膏狀，用薄層色譜法定性，為完成對(duì)鼻淵片藥品質(zhì)量穩(wěn)定可控，做出對(duì)其性狀、處方、活性成分、提取工藝、控制項(xiàng)目等的標(biāo)準(zhǔn)檢測。2、情況分析2、1藥材來源 藿香為唇形科多年生草本植物，分布較廣，常見栽培。 喜溫旺濕潤扣陽光充足環(huán)境，宜疏松肥沃和排水良好的沙壤土，中國各地廣泛分布，主產(chǎn)于 HY

3、PERLINK /view/7627.htm t _blank 四川、 HYPERLINK /view/4141.htm t _blank 江蘇、 HYPERLINK /view/4150.htm t _blank 浙江、 HYPERLINK /view/8581.htm t _blank 湖南、 HYPERLINK /view/7340.htm t _blank 廣東等地。豬膽汁為豬科動(dòng)物豬的膽汁。宰殺后，剖腹取出膽囊，取膽汗鮮用或?qū)⒛懩覓炱鹆栏?，或在半干時(shí)稍稍壓扁，再干燥之。2、2形態(tài)特征 藿香，又名：合香、蒼告、山茴香等，屬 HYPERLINK /view/8614825.htm t _

4、blank 管狀花目， HYPERLINK /view/132030.htm t _blank 唇形科多年生草本植物，莖直立，高0.5-1.5m，四棱形，粗達(dá)7-8mm，葉心狀卵形至長圓狀披針形，花冠淡紫藍(lán)色，長約8mm，成熟小堅(jiān)果卵狀長圓形，長約1.8mm，寬約1.1mm，花期6-9月，果期9-11月。豬膽汁取于豬膽囊，帶有腥味。2、3主要化學(xué)成分豬膽汁中主要成分為膽汁酸類、膽色素、粘蛋白、脂類及 HYPERLINK /view/42610.htm t _blank 無機(jī)物等。膽汁酸中有 HYPERLINK /view/2115485.htm t _blank 鵝脫氧膽酸(C11enodeo

5、xy- cholic acid)、3a- HYPERLINK /view/27034.htm t _blank 羥基- 6- 氧- 5-膽烷酸(3- Hydroxy-6- oxo-5 -cholanic acid)和 HYPERLINK /view/901717.htm t _blank 石膽酸(Llthocholic acid)，它們幾乎完全與 HYPERLINK /view/513071.htm t _blank 甘氨酸結(jié)合而存在。另含豬 HYPERLINK /view/207720.htm t _blank 膽酸和 HYPERLINK /view/758989.htm t _blank

6、豬去氧膽酸(Hyodeoxycholic acid)。豬膽汁主要含豬去氧膽酸(hyodesoxycholic acid)，尚含去氧膽酸和多種氨基酸。 藿香(hu xin)葉揮發(fā)油中含24種成分。包括單萜1種、倍半萜及其衍生物11種、揮發(fā)性酚及醚類7種，以及長鏈酸、醇、酮等5種；葉油的主要成分為甲基胡椒酚、d-檸檬(nn mn)烯和丁香烯等1。2、4與產(chǎn)品相關(guān)成分及現(xiàn)代研究(ynji)情況本鼻淵片有藿香葉揮發(fā)油和豬膽汁浸膏，以下為它們的研究進(jìn)展情況：首先，藿香葉揮發(fā)油采用的超臨界CO2萃取，并進(jìn)行氣相色譜定量。其次，豬膽汁經(jīng)醇處理后的得中藥浸膏，特別是通過、多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、無機(jī)鹽類等親水性

7、成分，可有效地防止吸濕。另外，高速離心法、沉降分離法、冷凍水沉法、膜分離技術(shù)、大孔吸附樹脂分離技術(shù)、絮凝沉淀法以及為解決中藥浸膏制劑有吸潮、軟化、結(jié)塊現(xiàn)象的包衣技術(shù)等現(xiàn)代研究手段都日益成熟。2、5產(chǎn)品形式或劑型情況 鼻用制劑品種多樣，有固體制劑、半固體制劑和液體制劑等。本產(chǎn)品屬于鼻用片劑，現(xiàn)代片劑是使用最廣泛的劑型，以其低廉的價(jià)格，良好的穩(wěn)定性，成熟的制劑工藝迅速占領(lǐng)市場，現(xiàn)在對(duì)鼻用片劑的研究也有突破性的進(jìn)展。2、6質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制項(xiàng)目的設(shè)定 根據(jù)提取鼻淵片的成分，以及其生產(chǎn)工藝，提出對(duì)成品以下幾點(diǎn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制項(xiàng)目：氣味、顏色、片中差異、崩解時(shí)限、有效成分含量、片劑裝量差異、微生物限度、熱原（細(xì)

8、菌內(nèi)毒素）等項(xiàng)目因素。3、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目的研究方案 3、1性狀與鑒定 3、1、1 性狀鑒別莖直立，高0.5-1.5m，四棱形，粗達(dá)7-8mm，上部被極短的細(xì)毛，下部無毛，在上部具能育的分枝。葉心狀卵形至長圓狀披針形，長4.5-11cm，寬3-6.5cm，向上漸小，先端尾狀長漸尖，基部心形，稀截形，邊緣具粗齒，紙質(zhì)，上面橄欖綠色，近無毛，下面略淡，被微柔毛及點(diǎn)狀腺體；葉柄長1.5-3.5cm。輪傘花序多花，在主莖或側(cè)枝上組成頂生密集的圓筒形穗狀花序，穗狀花序長2.5-12cm，直徑1.8-2.5cm；喜高溫、陽光充足環(huán)境，在蔭蔽處生長欠佳，年平均氣溫19-26的地區(qū)較宜生長，溫度高于35或低于16

9、時(shí)生長緩慢或停止。中國各地廣泛分布，主產(chǎn)于 HYPERLINK /view/7627.htm t _blank 四川、 HYPERLINK /view/4141.htm t _blank 江蘇、 HYPERLINK /view/4150.htm t _blank 浙江、 HYPERLINK /view/8581.htm t _blank 湖南、 HYPERLINK /view/7340.htm t _blank 廣東等地。3、1、2 理化(lhu)鑒定（1）取藿香(hu xin)葉揮發(fā)油1滴，加氯仿(l fn)0.5ml，再加5%溴的氯仿溶液數(shù)滴，有顏色反應(yīng) （2）取藿香葉揮發(fā)油1滴，加苯0.

10、5ml，再加5%醋酸銅溶液少量，充分混合，放置分層，吸取上層苯液，點(diǎn)于栽玻片上，待苯揮發(fā)后，于殘留物上加乙醇1-2滴，放置后，于顯微鏡下觀察有針狀結(jié)晶。3、1、3薄層色譜鑒別2方法：采用TLC法鑒別豬膽汁中豬去氧膽酸，并與易混淆品牛、羊膽汁進(jìn)行鑒別；用薄層掃描法測定豬膽汁中豬去氧膽酸的含量。具體內(nèi)容：取豬膽汁約0.7g，精密稱定，加l0%氫氧化鈉溶液5ml，120加熱4h，放冷，滴加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至23 ，搖勻 ，用醋酸乙酯提取4次，15ml/次,合并提取液 ，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，轉(zhuǎn)移至lOm1量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻 ，作為豬膽汁供試品溶液。另取牛、羊膽汁各0.7g，同法制成牛、羊膽汁

11、對(duì)照藥材溶液。再精密稱取在五氧化二磷干燥器中減壓干燥24h的豬去氧膽酸對(duì)照品適量 ，加乙醇制成每1m1含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述4種溶液各2微升， 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以新配制的異辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水( 10：5：5：3：1 ) 的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以lO%硫酸乙醇溶液 ，在105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈( 365nm) 下檢視。豬膽汁供試品色譜中，在與對(duì)照 品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)，不顯與牛、羊膽汁對(duì)照藥材相同的斑點(diǎn)。3、2 定量(dngling)控制 3、2、1鼻淵片中的藿香(hu xin)葉揮發(fā)油的

12、提取3采用(ciyng)儀器：HA221-50-02超臨界萃取裝置（江蘇華安超臨界有限公司）；GC6890氣相色譜儀（安捷倫公司）。采用試劑：以乙酸苯酚酯為內(nèi)標(biāo)，購自上?；瘜W(xué)試劑公司；其余試劑均為分析純；樣品：藿香，購自廣州藥材市場。方法：將5000g藿香葉適當(dāng)破碎后，置于超臨界萃取裝置進(jìn)行萃取。準(zhǔn)確稱取藿香葉揮發(fā)油0.1 g于100mL容量瓶中。加1ml( 0.1mg/mL)乙酸苯酚酯(內(nèi)標(biāo)) ，用乙醇定容，搖勻，進(jìn)行定量分析，根據(jù)各香味成分和內(nèi)標(biāo)的峰面積及內(nèi)標(biāo)質(zhì)量按下式計(jì)算各成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)。 3、2、2 測定鼻淵片中的藿香葉的活性成分揮發(fā)油的含量4GC法色譜條件：色譜柱，Hp -5 ( 3

13、0 m0.2 5mm i.d0.2 5微升d.f ) ；分流/不分流進(jìn)樣溫度：250；檢測器溫度：270；高純氮作載氣；H2流 量4 5mL/min ；空氣流400mL/min ；柱頭壓58 .6 kPa；柱流速1.0 mL/min ；分流比：5：1 ；進(jìn)樣量1微升；程序升溫：初始溫度60，保持1min后，以6/min 升至270，保持1min。 利用毛細(xì)管GC法：（1）取6份樣品，在相同條件下進(jìn)行GC分析，根據(jù)測定結(jié)果計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 R S D；（2）將各化合物配制成 6個(gè)不同濃度混合物的乙醇溶液，加入準(zhǔn)確量的乙酸苯酚酯溶液（0.1mg/ml）作內(nèi)標(biāo)，進(jìn)行線性關(guān)系考察；（3）采用加樣回收法

14、，即將一定量的標(biāo)樣化合物加入5000g的藿香葉中，然后將加與未加標(biāo)樣的藿香葉平行超臨界萃取與GC分析。根據(jù)各項(xiàng)香味成分的測定值 、添加量計(jì)算回收率。3、3檢查項(xiàng)目3、3、1總灰分(hu fn)測定 按照(nzho)中國藥典一部1995年版附錄55頁總灰分測定法檢驗(yàn)豬膽汁(dnzh),應(yīng)符合規(guī)定。3、3、2外觀性狀5 片劑表面應(yīng)色澤均勻、光潔，無雜斑，無異物。3、3、3片中差異 照重量差異檢查法，應(yīng)符合規(guī)定。3、3、4崩解時(shí)限 照崩解時(shí)限檢查法（附錄 A）檢查，應(yīng)符合規(guī)定。3、3、5重量差異除另有規(guī)定外，鼻用固體制劑照下述方法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。檢查法：取供試品20個(gè)，分別稱定（或稱內(nèi)容物），計(jì)算

15、平均重量，超過平均重量10%者不得過2，并不得有超過平均重量20%者。凡規(guī)定檢查含量均勻度的鼻用制劑，一般不再進(jìn)行重量差異的檢查。3、3、6 微生物限度 照微生物限度檢查法（附錄 G）檢查，應(yīng)符合規(guī)定。3、3、7熱原照熱原檢查法（附錄 D）檢查，豬膽汁提取液中每1ml中含細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)小于0.5 EU內(nèi)毒素。4、 總結(jié)（工作評(píng)價(jià)）通過對(duì)藿香葉、豬膽汁的來源、性質(zhì)、作用等的了解，結(jié)合現(xiàn)代藥物分析、質(zhì)量監(jiān)控等。用超臨界流體萃取一毛細(xì)管氣相色譜分析的方法定性測定藿香葉其中的有效成分甲基胡椒酚、d-檸檬烯、丁香烯等，并做定量分析；用薄層色譜定性測定豬膽汁，與牛、羊的豬膽汁區(qū)分。根據(jù)相關(guān)的制作手段與劑型特

16、點(diǎn)，制定一系列的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制項(xiàng)目。我覺得這個(gè)方案可行性很高，薄層色譜定性分析和超臨界流體萃取一毛細(xì)管氣相色譜定量分析的技術(shù)已經(jīng)相當(dāng)成熟，在區(qū)分豬膽汁與牛、羊膽汁的實(shí)驗(yàn)和藿香葉揮發(fā)油的定量等方面已有前人的基礎(chǔ)。但也存在一些不足，如超臨界的條件比較難控制，很容易造成誤差；豬膽汁要注意保鮮；藿香葉中存在很多雜質(zhì)等等。參考文獻(xiàn)：中華人民共和國藥典(yodin)二部 2010年版中華人民共和國藥典(yodin)一部 1995年版1楊得坡，王發(fā)松，蘇鏡娛，等.藿香(hu xin)莖、葉和花揮發(fā)油成分分析J.中藥材，2000,23（3），149-1512莫少紅，陳曉軍，譚洪盛，等.豬膽汁質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究J.時(shí)珍國醫(yī)國藥, 2004, 15(3),146-1473劉玉平，孫寶國，石華治，等.超臨界二氧化碳萃取藿香梗和藿香葉浸膏J.化工學(xué)報(bào)，2008,59（3），791-7954姚二民，張峻松，王花俊，等.用氣相