植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)比較

1、植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)比較溫故而知新植物體細(xì)胞雜交（馬鈴薯番茄）融合的原生質(zhì)體AB再生出細(xì)胞壁植物細(xì)胞的融合雜種細(xì)胞AB雜種植株脫分化愈傷組織再分化植物組織培養(yǎng)原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A去 壁去 壁人工誘導(dǎo)植物細(xì)胞A植物細(xì)胞B動(dòng)物細(xì)胞可以融合嗎？如果可以，兩者相同嗎？2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體帶著問(wèn)題走進(jìn)課堂？2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程自主閱讀，p52第2自然段，思考下列問(wèn)題：什么叫動(dòng)物細(xì)胞融合 ？（概念要點(diǎn)）兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用 兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞 一個(gè)細(xì)胞（雜交單核細(xì)胞）動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程示意圖不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞 滅活的病毒有絲分裂兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞一、動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)

2、胞雜交）1、概念：指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。2、結(jié)果：形成單核的雜交細(xì)胞3、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性4、誘導(dǎo)方式物理法：離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒思考討論：為什么細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？ 因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合，不滅活的話會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。5、過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)，融合2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）注意：動(dòng)物細(xì)胞的融合也需要把多個(gè)兩種細(xì)胞放在一起，讓它們隨機(jī)融合后，再?gòu)闹泻Y選雜交細(xì)胞6、意義：突破了有性雜交方法的局

3、限，使遠(yuǎn)緣雜交（種間、屬間、科間、動(dòng)植物之間）成為可能。7、應(yīng)用：成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體思考題1.植物體細(xì)胞雜交時(shí)首先應(yīng)用什么方法去掉細(xì)胞壁？ 酶解法，如纖維素酶或果膠酶2.動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需要進(jìn)行去壁處理嗎？為什么？無(wú)需，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞無(wú)細(xì)胞壁3.植物體細(xì)胞雜交誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；PEG等化學(xué)方法4.動(dòng)物細(xì)胞融合能利用上述兩類(lèi)方法嗎？還有其他方法嗎？能 還可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)5.植物體細(xì)胞雜交應(yīng)先進(jìn)行原生質(zhì)體的融合再進(jìn)行組織培養(yǎng)形 成完整的雜種個(gè)體，動(dòng)物細(xì)胞融合后能形成雜種動(dòng)物個(gè)體

4、嗎？不能植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法用途獲得雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理（離心、振蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒主要用于制備單克隆抗體2.動(dòng)物細(xì)胞融合的概念 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱(chēng)為雜交細(xì)胞。1、抗體1.1 概念： 抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白 。1.2 來(lái)源： B

5、淋巴細(xì)胞。二、單克隆抗體 B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系：B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。自主閱讀P52：傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？怎樣解決這個(gè)問(wèn)題？2.1 、單克隆 由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖(多次有絲分裂)形成的一個(gè)細(xì)胞群，叫一個(gè)克隆，即單克隆。2、單克隆抗體的概念2.2 、單克隆抗體 由一個(gè)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖形成的一個(gè)細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體，即單克隆抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。3、原理：雜交瘤細(xì)胞具有兩個(gè)

6、親本的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數(shù)量的單一抗體。4、過(guò)程B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合B-B細(xì)胞B-瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（ B-瘤細(xì)胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體6.單克隆抗體的應(yīng)用：特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大 作為診斷試劑：準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合 優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速用于運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療5、單克隆抗體的特點(diǎn)：思考問(wèn)題：1、本過(guò)程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)

7、，因而可以獲得大量單克隆抗體2、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？知識(shí)結(jié)構(gòu)兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活的病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)1、動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是 （ ） A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 2、 動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中所用的誘導(dǎo)劑滅活的病毒，抗原性和感染力的有無(wú)是 （ ） A.失去抗原性，具有感染力 B.具有抗原性，也具有感染力 C.失去抗原性，也失去感染力 D.具有抗原性，失去感染力B課堂練習(xí)D 3、“生物導(dǎo)彈”是指 （ ） A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D4、科學(xué)家們用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是 （ ） A.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 B.未經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞 D.未經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞 C5. 單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是 （ ）淋