VEGF和Ecadherin在胃癌中的表達(dá)及意義

1、VEGF和E-cadherin在胃癌中的表達(dá)及意義羅秉慶，鄭紹光，唐青梅，龔廣【摘要】目的探究血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF和鈣粘附分子E-adherin，E-ad在胃癌中的表達(dá)及意義。要領(lǐng)應(yīng)用核酸原位雜交要領(lǐng)檢測(cè)62例胃癌構(gòu)造中VEGF和E-adRNA表達(dá)環(huán)境。效果62例胃癌中VEGF和E-adRNA陽(yáng)性表達(dá)率別離為90.3256/62和32.2620/62，VEGFRNA在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常胃粘膜上皮構(gòu)造；E-adRNA陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常胃粘膜上皮構(gòu)造(P0.01)。VEGFRNA高表達(dá)和E-adRNA低表達(dá)與胃癌構(gòu)造分化、TN分期、淋逢迎轉(zhuǎn)移有關(guān)(P0.01)。胃癌中VEGF和

2、E-adRNA表達(dá)呈負(fù)相干(P0.01)。結(jié)論VEGFRNA過(guò)表達(dá)與E-adRNA失活可加快胃癌的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。VEGF和E-adRNA檢測(cè)可作為評(píng)價(jià)胃癌的惡性程度和斷定預(yù)后的緊張指標(biāo)?！娟P(guān)鍵詞】胃腫瘤；腫瘤轉(zhuǎn)移；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；鈣粘附分子；原位雜交Abstrat：bjetiveTassayvasularendthelialgrthfatr(VEGF)andE-adherin(E-ad)expressinandutlinethEirlinialsignifianes.ethdsAsituhybridizatinasusedtdetettheexpressinfVEGFandE-adRNAin62

3、patientsithstahaner.ResultsThepsitiveratesfVEGFandE-adRNAin62sapletissuesfstahanerere90.32%(56/62)and32.26%(20/62).TheVEGFRNAstainingasrestrnginstahanerellsthannralgastriusa，andtheE-adRNAstainingaseaker(P0.01).ThehighexpressinfVEGFRNAandthelexpressinfE-adRNAarepsitivelyrrelatediththedifferentiatinfa

4、nertissues，theTNstageandtheetastasisflyphnde(P0.01).Instahaner，theexpressinfVEGFRNAisadverselyassiatedithE-adRNAexpressin(P0.01).nlusinverexpressinfVEGFRNAandinativatinfE-adRNAenhanetheinfiltratinandetastasisfstahaner.DetetingfVEGFandE-adRNAanbeservedassignifiantarkersfrevaluatingthealignaneandprgns

5、isfstahaner.Keyrds：stahneplass;neplasetastasis;vasularendthelialgrthfatrs;E-adherin;insituhybridizatin癌的侵襲轉(zhuǎn)移是多階段的龐大歷程，腫瘤新生血管的形成和細(xì)胞粘附體系的瓦解導(dǎo)致癌細(xì)胞分開(kāi)母癌是始動(dòng)侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵1，2。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)能促進(jìn)新生血管的形成，腫瘤新生血管的形成在為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)提扶養(yǎng)分時(shí)，也為腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移制造了條件，而腫瘤新生血管一旦被啟動(dòng)，便會(huì)無(wú)窮制地增生且不受機(jī)體制約3。鈣粘附分子(E-adherin)代表一組到場(chǎng)細(xì)胞間或細(xì)胞與基質(zhì)間作用的細(xì)胞外貌分子，其表達(dá)喪失會(huì)

6、導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞分開(kāi)癌灶，啟動(dòng)轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)4。我們應(yīng)用核酸原位雜交技能，檢測(cè)胃癌中VEGF和E-adRNA的表達(dá)程度，探究它們對(duì)胃癌生物學(xué)舉動(dòng)的影響及臨床病理意義。1質(zhì)料和要領(lǐng)1.1質(zhì)料網(wǎng)絡(luò)柳州醫(yī)埋頭附院及柳州市腫瘤病院病理科20002022年資料完備的胃癌標(biāo)本62例，此中男41例，女21例，年事3372歲，均勻53.5歲。全部患者術(shù)前均未擔(dān)當(dāng)化療和放療。術(shù)后經(jīng)病理明白診斷，此中高分化腺癌3例，中分化腺癌24例，低分化腺癌27例，粘液腺癌含印戒細(xì)胞癌8例。TN分期：T1期6例，T2期11例，T3期27例，T4期18例，有淋逢迎轉(zhuǎn)移38例，無(wú)淋逢迎轉(zhuǎn)移24例。以20例癌旁正常胃粘膜上皮構(gòu)造為比擬。1.

7、2核酸原位分子雜交insituhybridizatin，ISH切片經(jīng)二甲苯脫蠟入水，50g/l卵白酶K消化，經(jīng)4多聚甲醛0.1l/LPBSpH7.4結(jié)實(shí)10in，0.1l/LPBSpH7.4搖洗5in3次，表露RNA核酸片斷，預(yù)雜交后，用地高辛隨機(jī)引物標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟寡核苷酸探針VEGF、E-ad雜交，再滴加生物素化地高辛檢測(cè)體系，DAB顯色。VEGF和E-ad探針、探針標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟及原位雜交試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司，探針標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟、雜交、雜交后檢測(cè)步伐按試劑盒說(shuō)明書(shū)舉行。雜交時(shí)設(shè)不加探針和不加抗辣根過(guò)氧化物酶抗體的比擬片作為陰性比擬，用陽(yáng)性片作為陽(yáng)性比擬。1.3效果斷定雜交陽(yáng)性信號(hào)為棕黃色顆

8、粒，定位于細(xì)胞質(zhì)。按照染色強(qiáng)度及顯色細(xì)胞比例，將染色效果分為：陰性、陽(yáng)性、強(qiáng)陽(yáng)性。按切片中細(xì)胞有無(wú)顯色及深淺評(píng)分：無(wú)顯色為0分，棕黃色為1分，棕褐色為2分。按照顯色細(xì)胞的比例評(píng)分：30為1分，3070為2分，70為3分。以上2種評(píng)分之和為每例的積分。按積分凹凸分為：0分為陰性，13分為陽(yáng)性+，46分為強(qiáng)陽(yáng)性+。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處置懲罰計(jì)數(shù)資料接納2查驗(yàn)，由SPSS10.00版本統(tǒng)計(jì)軟件處置懲罰。2效果2.1VEGF、E-adRNA在正常胃粘膜上皮和胃癌差異病理分型中的表達(dá)見(jiàn)表1。VEGF、E-adRNA陽(yáng)性定位于胞質(zhì)(見(jiàn)圖1、圖2)。VEGFRNA在正常胃粘膜上皮呈陰性表達(dá)，在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為

9、90.32%(56/62)，明顯高于正常胃粘膜(P0.01)。E-adRNA在正常胃粘膜上皮陽(yáng)性表達(dá)率為100%20/20見(jiàn)圖3，在胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為32.25%(20/62)。明顯低于正常胃粘膜P0.01)。2.2VEGF、E-adRNA在胃癌差異臨床分期中的表達(dá)見(jiàn)表2。VEGFRNA高表達(dá)和E-adRNA低表達(dá)與胃癌TN分期、淋逢迎轉(zhuǎn)移有關(guān)(P0.01)。表1VEGF、E-adRNA在正常胃粘膜和胃癌差異病理分型中的表達(dá)略注：與正常胃粘膜比力，a：2=56.97，b：256.97，P均0.01圖1中分化腺癌VEGFRNA呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。SP100略圖2中分化腺癌E-adRNA呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。

10、SP100略圖3正常胃粘膜上皮E-adRNA呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。SP100略表2VEGF、E-adRNA在胃癌差異臨床分期中的表達(dá)略注：T3、T4與T1、T2比力，213.78，P0.01，轉(zhuǎn)移與無(wú)轉(zhuǎn)移比力，27.85，P0.012.3胃癌VEGF、E-adRNA表達(dá)的相干性見(jiàn)表3。經(jīng)品級(jí)相干闡發(fā)，胃癌中VEGF和E-adRNA表達(dá)呈負(fù)相干(r-1，P0.01)。表3胃癌中VEGF、E-adRNA表達(dá)的相干性略3討論胃癌是一種多基因作用，多步調(diào)演進(jìn)的惡性腫瘤。腫瘤快速生長(zhǎng)必須有大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)方能得以維持，而大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供給那么必要更多興隆的養(yǎng)料運(yùn)輸通道血管的形成，以提供不竭生長(zhǎng)所需的血液。由于腫瘤

11、誘導(dǎo)產(chǎn)生的新生血管，其基底膜薄并且易斷裂，腫瘤細(xì)胞很輕易進(jìn)入這些血管，以是腫瘤新生血管的形成不但是腫瘤可連續(xù)性生長(zhǎng)的底子，也為其侵襲和轉(zhuǎn)移制造了非常有利的條件5。由此可見(jiàn)，腫瘤血管形成在腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤患者預(yù)后中起著非常緊張的作用。VEGF能促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，其作用包羅以下三方面6，7：特異性促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖；進(jìn)步血管壁通透性，促使血漿卵白從血管內(nèi)滲漏到血管外地區(qū)；刺激內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生PAS，從而促使?jié)B漏到血管外地區(qū)的血漿卵白形成纖維卵白凝塊，作為血管新生的支持物。比來(lái)研究創(chuàng)造8，VEGF在很多腫瘤中均有表達(dá)，并與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相干，我們的研究效果表現(xiàn)，VEGFRNA在胃正常粘膜上皮呈陰性表

12、達(dá)，而在胃癌中呈高陽(yáng)性表達(dá)。其陽(yáng)性表達(dá)率及強(qiáng)度：低分化高于高分化。T3、T4期高于T1、T2期，淋逢迎轉(zhuǎn)移組高于非淋逢迎轉(zhuǎn)移組，提示在胃癌腫瘤血管新生存潑，新生血管形成既是腫瘤生長(zhǎng)所必須，也是腫瘤轉(zhuǎn)移的底子之一，而VEGF在腫瘤新生血管形成中起著緊張作用，腫瘤生長(zhǎng)會(huì)刺激VEGF的過(guò)量表達(dá)，而VEGF表達(dá)又促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)，VEGF高表達(dá)與胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移和患者預(yù)后不良有關(guān)。E-ad是分子量為120kda的細(xì)胞膜整合卵白，普及漫衍于上皮細(xì)胞9。比年來(lái)研究證明10，E-ad陽(yáng)性表達(dá)的癌細(xì)胞粘附本領(lǐng)強(qiáng)于陰性表達(dá)的癌細(xì)胞。E-ad活性削弱可引起細(xì)胞與細(xì)胞間粘附的粉碎，而E-ad過(guò)表達(dá)可引起細(xì)胞粘附性加強(qiáng)

13、。E-ad表達(dá)落落或缺失，細(xì)胞間的彼此粘附力削弱，造成腫瘤細(xì)胞輕易疏散而向外浸潤(rùn)生長(zhǎng)，分開(kāi)原發(fā)灶而產(chǎn)生轉(zhuǎn)移。一些研究表白11，與正常胃粘膜上皮比擬，17%92%的胃癌E-ad表達(dá)削弱。我們研究創(chuàng)造，E-adRNA在胃癌中表達(dá)陽(yáng)性率及強(qiáng)度顯著低于正常胃粘膜上皮，E-ad低表達(dá)與胃癌構(gòu)造分化差、TN分期高及淋逢迎轉(zhuǎn)移比力差異有高度明顯性，與文獻(xiàn)報(bào)道同等。在惡性腫瘤產(chǎn)生的癌基因研究中，很多學(xué)者提出了基因協(xié)同作用假說(shuō)，以為在惡性腫瘤產(chǎn)生、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的各階段，至少有兩個(gè)或兩個(gè)以上成效差異的非常激活的基因各自覺(jué)揮差異作用，并在時(shí)間和空間上相共同，協(xié)同促進(jìn)了細(xì)胞的癌變12。我們的研究效果表現(xiàn)：在胃癌中VEG

14、FRNA表達(dá)與E-adRNA表達(dá)呈負(fù)相干，以為VEGF表達(dá)增高，E-ad表達(dá)低落到場(chǎng)了胃癌的侵襲歷程，表白VEGF與E-ad大概具有負(fù)調(diào)治的協(xié)同作用。這也驗(yàn)證了腫瘤生物學(xué)舉動(dòng)的改變是一個(gè)多階段多基因協(xié)同到場(chǎng)的龐大歷程。因此，檢測(cè)VEGF、E-adRNA表達(dá)可作為臨床評(píng)估胃癌侵襲轉(zhuǎn)移及斷定預(yù)后的客不雅生物學(xué)指標(biāo)。【參考文獻(xiàn)】1周彩云，姚濟(jì)芬，陳曉端，BFGF、VEGF和VD在原發(fā)性輸尿管癌中的表達(dá)J.臨床與實(shí)行病理學(xué)雜志，2022，19(3)：342.2羅秉慶，鄭紹光，唐青梅.E-adherin和EGFR表達(dá)與胃癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的干系J.有用癌癥雜志，2022，19(6)：588.3陳天星，楊宣濤，陳

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