乙肝病毒核心抗體體外診斷試劑盒說(shuō)明書-羅氏(共5頁(yè))

1、11899066001V17Anti-HBc乙肝病毒核心抗體PAGE 2 2008-06 V5 中文 Elecsys 和cobas e分析儀11820559 122 100 人份試劑盒適用(shyng)于以下分析儀Elecsys 2010MODULARANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途：用免疫學(xué)方法(fngf)定性測(cè)定人血清或血漿中的針對(duì)(zhndu)乙肝核心抗原(HBcAg)IgG和IgM抗體。電化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測(cè)定分析儀。臨床應(yīng)用: 乙肝病毒(HBV)由外殼HBsAg和內(nèi)核HBcAg組成。后者含

2、有183-185個(gè)氨基酸。HBV感染期間，一般會(huì)產(chǎn)生抗HBcAg抗體，并可持續(xù)存在。在HBV感染發(fā)病HBsAg出現(xiàn)后即可從血清中檢測(cè)到HBcAg抗體。在HBV感染康復(fù)者和HBsAg攜帶者中，抗HBcAg可持續(xù)存在，因此，抗HBcAg 是提示過(guò)去或現(xiàn)在感染HBV的指標(biāo)。偶爾，也有抗HBcAg陰性的HBV感染者（多見(jiàn)于免疫抑制病人）。由于抗HBcAg可長(zhǎng)時(shí)間存在，因此，在特殊人群中開展抗HBcAg篩選試驗(yàn)對(duì)預(yù)防乙型肝炎的傳播有重要參考價(jià)值?？笻Bc試驗(yàn)與其它乙型肝炎試驗(yàn)一同檢測(cè)有助于乙型肝炎的診斷和監(jiān)測(cè)。在其它乙型肝炎標(biāo)志（HBsAg陰性者）缺乏的情況下，抗HBc可能是提示現(xiàn)存HBV感染的唯一指標(biāo)

3、。原理：采用競(jìng)爭(zhēng)法原理，整個(gè)過(guò)程27分鐘完成。 第1步：40l標(biāo)本用還原試劑預(yù)處理。 第2步：加入HBc抗原液，標(biāo)本中的抗- HBc與HBc抗原結(jié)合形成復(fù)合物。 第3步：加入生物素化的和釕標(biāo)記的抗HBc抗體以及鏈霉親和素包被的微粒，HBc抗原上仍然游離的位點(diǎn)被占據(jù)。形成的免疫復(fù)合物通過(guò)生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 第4步：反應(yīng)混和液吸到測(cè)量池中，微粒通過(guò)磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過(guò)光電倍增管進(jìn)行測(cè)定。Elecsys和cobas e分析儀自動(dòng)將標(biāo)本產(chǎn)生的光電信號(hào)與從抗HBc定標(biāo)液得出的Cutoff值相比較。試劑：M：鏈霉親和素包被的微粒（

4、透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結(jié)合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R0：DTT（白蓋），1瓶，5ml：二硫蘇糖醇，濃度110mmol/l；枸櫞酸緩沖液50mmol/l。R1：HBcAg（灰蓋），1瓶，8ml：HBcAg（E.coli，rDNA）濃度高于25ng/ml，磷酸緩沖液0.1mol/l，pH7.4，含防腐劑。R2：生物素化的抗HBcAg抗體;Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗HBcAg抗體（黑蓋），1瓶，8ml：生物素化的抗HBcAg單克隆抗體濃度高于800ng/ml；Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗HBcAg單克隆抗體濃度高于130ng/ml；磷

5、酸緩沖液0.1mol/l，pH7.4，含防腐劑。Cal 1 陰性定標(biāo)液（白蓋），2瓶，1.0ml/瓶 人血清, 含防腐劑Cal 2 陽(yáng)性定標(biāo)液（黑蓋），2瓶，1.0ml/瓶，抗HBc（人）濃度高于8PEIU/ml, 人血清, 抗HCV和抗HIV1+2無(wú)反應(yīng)性。含防腐劑。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)單。所有人來(lái)源材料必須(bx)視為有潛在感染性的物質(zhì)。來(lái)源于人血液的所有產(chǎn)品(chnpn)由捐贈(zèng)者血液?jiǎn)为?dú)特殊制備而成，并經(jīng)檢測(cè)HBSAg、HCV抗體(kngt)、HIV抗體，均為陰性

6、。所應(yīng)用的檢測(cè)方法經(jīng)FDA認(rèn)可或符合歐洲法令98/79/EC附件II列表A。但由于任何實(shí)驗(yàn)方法都不能絕對(duì)地排除潛在感染的危險(xiǎn)，故該產(chǎn)品仍需視作病人標(biāo)本一樣仔細(xì)處理。接觸者必須遵循健康專業(yè)機(jī)構(gòu)相應(yīng)的法規(guī)9.10。若試劑超過(guò)保質(zhì)期，則不能再使用。避免試劑和標(biāo)本（標(biāo)本、校準(zhǔn)液和質(zhì)控液）產(chǎn)生泡沫。試劑處理校正液置于與系統(tǒng)相容的瓶?jī)?nèi)即可立即使用.Elecsys2010/cobas e 411分析儀：在2025C定標(biāo)過(guò)程中定標(biāo)液應(yīng)放在分析儀上。使用后，應(yīng)盡快關(guān)閉瓶蓋，并將其儲(chǔ)存在28C。因?yàn)榭赡軙?huì)發(fā)生蒸發(fā)，每瓶定標(biāo)液定標(biāo)次數(shù)不宜超過(guò)5次。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601

7、分析儀：除非定標(biāo)需要全部量，否則將即用型定標(biāo)液裝入空的有蓋小瓶，并將提供的標(biāo)簽貼在分裝的其余小瓶上，儲(chǔ)存在28C。每瓶分裝定標(biāo)液只可用一次。正確操作的有關(guān)信息請(qǐng)參見(jiàn)各試劑條形碼。儲(chǔ)存和穩(wěn)定性：存放在2-8 度，請(qǐng)垂直擺放試劑盒，以確保使用前微粒自動(dòng)混合完全有效。未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。M，R0、R1 ，R2試劑開封后，2-8 度, 8周；在儀器上(Elecsys 2010和cobas e 411)，8周，在儀器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，8周。Cal 1，Cal 2開封后， 28 度, 8周；在儀器上(Elecsys 2010和cobas

8、e 411)，5小時(shí)，在儀器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，只能使用一次。注意：請(qǐng)勿倒置定標(biāo)液，保證定標(biāo)液不污染瓶蓋。標(biāo)本采集和準(zhǔn)備：只有下列標(biāo)本可以用來(lái)檢測(cè)血清：使用標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)本管或含分離膠管采集。血漿：肝素鈉、EDTA-K3、枸櫞酸鈉抗凝。標(biāo)準(zhǔn)：合理分配陽(yáng)性和陰性標(biāo)本。標(biāo)本在28度可穩(wěn)定5天，-20度可穩(wěn)定3個(gè)月。標(biāo)本可凍融5次。所示標(biāo)本種類均和商品化標(biāo)本采集管一起進(jìn)行測(cè)定。不同生產(chǎn)商制造的標(biāo)本采集管含不同材料可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果。在樣品采集管中處理樣品過(guò)程中，謹(jǐn)遵標(biāo)本采集管生產(chǎn)商的操作規(guī)程。注意：凍融過(guò)的標(biāo)本、有沉淀的標(biāo)本、反復(fù)測(cè)定過(guò)的標(biāo)本使用前需離

9、心。加熱滅活的標(biāo)本可使用。請(qǐng)勿使用疊氮化物穩(wěn)定的標(biāo)本或?qū)φ铡４_?；颊邩?biāo)本、定標(biāo)液和質(zhì)控液在測(cè)定前置于室溫。因?yàn)榭赡軙?huì)發(fā)生蒸發(fā)，標(biāo)本和定標(biāo)液需在2小時(shí)內(nèi)完成測(cè)定。檢測(cè)步驟：提供的材料： 貨號(hào)11876325, PreciControl 抗-HBc, 8 x 1.3 mL PreciControl Anti-HBc 1 and 2 貨號(hào)11732277, 通用稀釋液, 2 x 16 mL 或貨號(hào)03183971, 通用稀釋液, 2 x 36 mL sample diluent 貨號(hào)11776576,定標(biāo)液Vials, 2 x 56帶蓋小瓶 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室儀器 Elecsys 2010, MODULAR

10、 ANALYTICS E170 或 cobas e 分析儀Elecsys 2010 and cobas e 411 分析儀配件:系統(tǒng)緩沖液,ProCell,貨號(hào)11662988, 6 x 380 mL 測(cè)量(cling)池清潔液, CleanCell,貨號(hào)11662970,6 x 380 mL 附加(fji)洗液,Elecsys SysWash,貨號(hào)11930346, 1 x 500 mL SysClean接合(jih)器,貨號(hào)11933159, Elecsys 2010 反應(yīng)杯,貨號(hào)11706802, 60 x 60 Elecsys 2010 吸頭,貨號(hào)11706799, 30 x 120

11、MODULAR ANALYTICS E170 and cobas e 601 分析儀配件:系統(tǒng)緩沖液, ProCell M，貨號(hào)04880340, 2 x 2 L 測(cè)量池清潔液，CleanCell M,貨號(hào)04880293, 2 x 2 L PC/CC-杯, 貨號(hào)0302314112 杯，用于測(cè)定前預(yù)熱 ProCell M和 CleanCell M 探針清潔液，ProbeWash M,貨號(hào)03005712, 12 x 70 mL，用于更換試劑后的清潔。檢測(cè)清潔液, PreClean M,貨號(hào)03004899 , 吸頭/反應(yīng)杯試劑盒 M，貨號(hào)12102137, 48 盒x 84 反應(yīng)皿 或 吸頭

12、, 廢物袋廢物袋,貨號(hào)03023150 SysClean Adapter M，貨號(hào)03027651, 所有 分析儀配件:系統(tǒng)清潔液, Elecsys SysClean，貨號(hào)11298500, 5 x 100 mL 檢測(cè)方法：按儀器操作說(shuō)明進(jìn)行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過(guò)掃描試劑盒條形碼自動(dòng)輸入測(cè)試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無(wú)法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 and cobas e： 將冷藏試劑預(yù)溫到20 度后放置于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生泡沫。系統(tǒng)自動(dòng)控制試劑溫度

13、和開/關(guān)試劑瓶蓋。將抗HBc Cal 1和Cal 2放在分析儀的標(biāo)本測(cè)試區(qū)。只在定標(biāo)時(shí)打開瓶蓋。條形碼自動(dòng)提供定標(biāo)所需的數(shù)據(jù)資料。定標(biāo)完成后，將Cal 1和Cal 2放回28 度保存或直接棄取。定標(biāo)：溯源性：該方法已經(jīng)過(guò)Paul-Ehrlich研究所HBc參考材料82（抗HBc IgG抗體）標(biāo)準(zhǔn)化。定標(biāo)頻率：每批試劑盒必須用新鮮試劑和抗HBc Cal 1,Cal 2定標(biāo)一次（如試劑盒在分析儀上運(yùn)作不超過(guò)24小時(shí)）。另外，以下情況需要再次定標(biāo)： 一個(gè)月（同一批號(hào)試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒） 根據(jù)要求進(jìn)行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)； 根據(jù)規(guī)定進(jìn)行多次標(biāo)定。定標(biāo)范圍（電化學(xué)發(fā)光信號(hào)計(jì)數(shù)）：

14、陰性定標(biāo)液（Cal 1）： 42，000-250，000 (Elecsys 2010 和cobas e 411 分析儀)100000-650000 (MODULAR ANALYTICS E170 和 cobas e 601 分析儀).陽(yáng)性定標(biāo)液（Cal 2）： 100-3000 (Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 和 cobas e 分析儀).質(zhì)控：Elecsys抗HBc質(zhì)控品1和2（PreciControl）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時(shí)或每一次定標(biāo)后測(cè)定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實(shí)驗(yàn)室的具體要求。檢測(cè)值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外

15、，應(yīng)采取校正措施。如果需要，重復(fù)測(cè)定相關(guān)標(biāo)本。注意(zh y)：由于技術(shù)原因，同一批號(hào)試劑(shj)或?qū)φ罩匦略O(shè)定靶值需手工輸入。因此需在制定(zhdng)靶值時(shí)參考包裝或PreciControl試劑盒中的表單中的數(shù)據(jù)。使用新批號(hào)的試劑或?qū)φ张鷷r(shí)，分析儀會(huì)使用對(duì)照批條形碼中的原有數(shù)值。計(jì)算：儀器會(huì)自動(dòng)根據(jù)Cal 1和Cal 2的測(cè)定值計(jì)算Cut-off值。每一個(gè)標(biāo)本的結(jié)果以有反應(yīng)性或無(wú)反應(yīng)性以及Cutoff指數(shù)（標(biāo)本信號(hào)/ Cutoff）報(bào)告。干擾因素：該方法不受黃疸（膽紅素428mol/L或25mg/dL）、溶血（血紅蛋白 1.0 mmol/L 或1.6g/dl）、脂血（脂質(zhì)1000mg/d

16、l）和生物素（生物素5mg/天）治療的病人，至少要等最后一次攝入生物素8小時(shí)后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（676U/ml）。19種常用藥物經(jīng)試驗(yàn)對(duì)本測(cè)定無(wú)干擾。接受過(guò)小鼠單抗治療或診斷的病人可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。偶爾會(huì)遇到抗鏈酶親和素抗體的干擾。Elecsys 抗HBc測(cè)定結(jié)果應(yīng)結(jié)合病人病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來(lái)進(jìn)行診斷。稀釋：可用Elecsys通用稀釋液或HBV陰性的人血清、血漿或胎牛血清稀釋標(biāo)本。參考范圍：標(biāo)本的Cutoff指數(shù)1.0判斷為抗HBc無(wú)反應(yīng)性?？膳卸ㄔ摌?biāo)本抗HBc陰性，不需進(jìn)一步的試驗(yàn)。標(biāo)本的Cutoff指數(shù)= 1.0判斷為抗HBc有反應(yīng)性。必須用該試劑重復(fù)測(cè)定兩次：如

17、兩次結(jié)果均為無(wú)反應(yīng)性，則判定該標(biāo)本抗HBc陰性；如兩次檢測(cè)中有一次是有反應(yīng)性，則判定該標(biāo)本抗HBc重復(fù)有反應(yīng)性。特異性參數(shù)：以下所列舉為Elecsys分析儀具代表性資料。各實(shí)驗(yàn)室所測(cè)結(jié)果可能有所差異。精密度：利用Elecsys試劑,重復(fù)檢測(cè)人類混合血清和質(zhì)控液（批內(nèi)n21，批間n10）,按照修正NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards)公布的實(shí)驗(yàn)方法(EP5-A)執(zhí)行 :每天測(cè)試6次,進(jìn)行10天(n=60),在E170上測(cè)試一次運(yùn)轉(zhuǎn)內(nèi)的精確度,重復(fù)21次,得到下列結(jié)果:Elecsys 2010 and cobas e

18、 411分析儀批內(nèi)精密度批間精密度樣品均值COIcSDCOICV%均值COISDCOICV%HSd，陰性1.730.0201.21.780.0241.4HS，弱陽(yáng)性0.700.0273.90.900.0101.1HSe，陽(yáng)性0.310.0103.40.010.00011.3PCeA-HBC11.460.0281.91.420.0141.0PC A-HBC20.320.0072.30.300.0041.6c) COI = cutoff 值d) HS = 人血清 e) PC = PreciControlElecsys 2010 and cobas e 411分析儀批內(nèi)精密度批間精密度樣品均值COI

19、cSDCOICV%均值COISDCOICV%HSd，陰性2.260.0331.52.20.1205.5HS，弱陽(yáng)性0.740.0192.60.730.0598.1HSe，陽(yáng)性0.0040.000061.70.0040.00011.8PCeA-HBC12.260.0261.22.210.1034.7PC A-HBC20.430.0081.90.490.0336.8分析(fnx)靈敏度（最低檢測(cè)(jin c)限）： 0.8 PEI U/mL靈敏度是由符合(fh)cut-off 值信號(hào)的抗HBc濃度決定的，cut-off 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的。標(biāo)準(zhǔn)曲線由不含HBV 的人血清稀釋的抗HBc 參考物所得的

20、一系列稀釋液而獲得。稀釋液經(jīng)過(guò)Paul-Ehrlich-Institute 標(biāo)準(zhǔn)(subtype ad, 1987) 和世界衛(wèi)生組織80/549 (subtype ad, 1985) 認(rèn)證。分析特異性：所使用的單株抗體對(duì)HBc具高度特異性,未測(cè)到針對(duì)HAV, HCV, CMV, EBV, HSV, 弓形蟲, 風(fēng)疹病毒和 E. coli的任何交叉反應(yīng)。以上各抗原均至少使用6份針對(duì)該抗原的抗體陽(yáng)性或含自身抗體（AMA,ANA,SLE）血清或血漿樣品檢測(cè)。臨床靈敏度：樣品特點(diǎn)Elecsys 抗-HBc 檢測(cè)非重復(fù)反應(yīng)性抗-HBc 對(duì)照檢測(cè)方法非重復(fù)反應(yīng)性靈敏度HBsAg 陽(yáng)性457457100抗HB

21、s 陽(yáng)性HBsAg 陰性6767100臨床特異性：運(yùn)用健康獻(xiàn)血員和住院病人標(biāo)本檢測(cè)臨床特異性。確定的陽(yáng)性標(biāo)本未計(jì)入特異性計(jì)算中。分組檢測(cè)數(shù)反應(yīng)性標(biāo)本數(shù)特異性重復(fù)反應(yīng)性標(biāo)本數(shù)特異性確定陽(yáng)性標(biāo)本數(shù)獻(xiàn)血員511111299.610699.791高發(fā)區(qū)住院患者24595-89-87參考文獻(xiàn)：1. Sllberg M, et al. Characterisation of a Linear BindingAntibody to Hepatitis B Core Antigen. J Med Virol2. Hoofnagle JH. Type B Hepatitis: Virology, SerologyCourse. Seminars in Liver Disease: I 1981;1:7-3. Kumar S, Pound DC. Serologic diagnosis of viral Postgraduate Medicine 1992;92(4):55-65.4. Decker RH. Section 9, Viral Hepatit