發(fā)酵工廠菌種選育的具體方法與實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)(共9頁)

1、 發(fā)酵工廠(gngchng)菌種選育的具體方法與實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì) 年級(ninj)： 2012級 專業(yè)(zhuny)： 食品科學(xué)與工程 姓名： xxx 學(xué)號： 1209014126 檸檬酸的菌種選育(xun y)的具體方法與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 微生物菌種是決定發(fā)酵產(chǎn)品的工業(yè)價值以及發(fā)酵工程成敗的關(guān)鍵，只有具備良好的菌種基礎(chǔ)，才能通過改進(jìn)發(fā)酵工藝(gngy)和設(shè)備以獲得理想的發(fā)酵產(chǎn)品。而自然界現(xiàn)有的菌種由于其產(chǎn)量較低，不能直接用于生產(chǎn)，目前，發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)(shngchn)中所使用的菌種，都是經(jīng)過人工選育的優(yōu)良菌種。本篇以檸檬酸的菌種選育為例，闡述發(fā)酵工廠菌種選育的具體方法與實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)。 檸檬酸是有機(jī)酸中第一大酸

2、，由于物理性能、化學(xué)性能、衍生物的性能，是廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、日化等行業(yè)最重要的有機(jī)酸。我國的檸檬酸產(chǎn)業(yè)，較早地進(jìn)入了國際市場，經(jīng)過多年的努力和奮斗已成為世界第一的生產(chǎn)和出口大國。特別是經(jīng)歷了近幾年的競爭與整合，全行業(yè)的面貌大為改觀。所以檸檬酸的菌種選育對于整個行業(yè)和國家來說都尤為重要。一檸檬酸的菌種的具體選育方法1.取樣：從腐爛水果上分離出一株檸檬酸產(chǎn)生菌黑曲霉。2.培養(yǎng)基的制備：2.1 分離培養(yǎng)基(%)：甘薯粉15%，檸檬酸l0%分裝在試管內(nèi)，1公斤(n jn)/厘米壓力(yl)滅菌20分鐘。2.2 生長(shngzhng)培養(yǎng)基：4Be麥芽汁，2%瓊脂。l公斤/厘米壓力滅菌15分鐘。2

3、.3 種子培養(yǎng)基(%)：甘薯粉8%，獻(xiàn)皮l%。每500毫升三角瓶裝100毫升，l公斤/厘米壓力滅菌30分鐘。2.4 發(fā)酵培養(yǎng)基：12%甘薯粉，每500毫升三角瓶裝100毫升，l公斤/厘米壓力滅菌30分鐘。3.菌種培養(yǎng)方法：采用迥轉(zhuǎn)搖床，193轉(zhuǎn)/分，偏心距25毫米，31振蕩培養(yǎng)，菌絲接種，接種量5%(v/v)，培養(yǎng)5天。4.菌種的分離與篩選： 采用酸性濾紙法，把少許試樣混入分離培養(yǎng)基中，搖勻，傾入無菌培養(yǎng)皿內(nèi)(內(nèi)有23層濾紙做支持物)，31培養(yǎng)45天，把長出的單菌落挑入生長培養(yǎng)基斜面上，31培養(yǎng)45天，即可見到抱子。初篩：將上述生長好的斜面種子，用無菌操作切取一小塊，投人發(fā)酵培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)

4、6天，測定總酸。復(fù)篩：根據(jù)初篩總酸產(chǎn)量，選取產(chǎn)酸較高者，按上述方法進(jìn)行平行發(fā)酵試驗(yàn)來考察其產(chǎn)酸能力。5.菌種誘變 從生長培養(yǎng)基上用無菌水洗下嫩抱子，倒人有玻璃球的無菌三角瓶中，搖振數(shù)分鐘，用帶有脫脂棉的滅菌(mi jn)漏斗過濾，制成105106個抱子/毫升(ho shn)的單抱子懸浮液，每支10100毫米的試管裝5毫升，用鈷60進(jìn)行照射。把照射過的懸浮液經(jīng)適當(dāng)稀釋(xsh)涂布于有生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿內(nèi)，31培養(yǎng)34天，挑出單株，進(jìn)行產(chǎn)酸試驗(yàn)。經(jīng)8萬倫琴劑量照射后，得到一株r-115，經(jīng)復(fù)篩，產(chǎn)酸能力達(dá)8.1%。為進(jìn)一步提高產(chǎn)酸能力，以r-115為出發(fā)菌，以靜電加速器產(chǎn)生的12萬淪琴的產(chǎn)射線進(jìn)

5、行第二次照射，獲得一株編號為r-144的菌株，總酸產(chǎn)率在9%左右。二實(shí)驗(yàn)室布局圖三房間(fngjin)用途及基本要素1.培養(yǎng)基制作(zhzu)室： 培養(yǎng)基室是制作、配制微生物培養(yǎng)所需培養(yǎng)基及檢驗(yàn)用試劑的場所(chn su)，其主要設(shè)備應(yīng)為操作臺與藥品柜。操作臺上要放置電爐，以滿足熔化煮沸培養(yǎng)基時用；還要放天平，以稱取藥品用；操作臺材料要耐高熱、耐酸堿；藥品柜分門別類 放一些(yxi)一般藥品及試劑。2.菌種培養(yǎng)(piyng)室 菌種培養(yǎng)室是菌種培養(yǎng)與檢驗(yàn)主要(zhyo)操作室，主要設(shè)施是實(shí)驗(yàn)臺，及相關(guān)處理菌種設(shè)備儀器。實(shí)驗(yàn)臺位置應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室中心位置，要有充足光線，實(shí)驗(yàn)臺兩側(cè)安裝小盆與水龍頭，實(shí)驗(yàn)

6、臺中間設(shè)置試劑架，架上裝有日光燈與插座，實(shí)驗(yàn)臺材料要 、以耐酸堿為宜。3.無菌室 無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實(shí)驗(yàn)提供一個相對無菌的工作環(huán)境，與外界用兩道緩沖間隔開。無菌室與緩沖間均裝有紫外燈，要求每3平米安裝30紫外燈一盞；無菌室是處理樣品和接種培養(yǎng)的主要工作間，應(yīng)與細(xì)菌檢驗(yàn)操作室緊密相連，無菌室與操作室之間設(shè)有雙層窗構(gòu)成小通道。4.洗滌室 洗滌室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿，培養(yǎng)基及污物。洗滌消毒室應(yīng)設(shè)有：1-2個洗滌池，洗滌池上下水網(wǎng)要暢通；器皿柜或?qū)嶒?yàn)臺，以放置洗滌好器皿；高壓滅菌鍋，其所用電源應(yīng)滿足用電負(fù)荷；室內(nèi)安有通風(fēng)裝置（通風(fēng)柜）或換氣扇；5.實(shí)驗(yàn)室 理化分析室是物理化學(xué)分析的主要操作室。實(shí)驗(yàn)臺與細(xì)菌操作室要求(yoqi)相同，設(shè)置通風(fēng)櫥以滿足加熱、消化、干燥、燒灼和化學(xué)處理等工作需要。四主要儀器設(shè)備型號(xngho)及廠家五功能和適用性進(jìn)行(jnxng)評價 經(jīng)由自然篩選和兩種不同能源的r-射線照射后獲得的產(chǎn)r-144是一支較優(yōu)良的糖質(zhì)檸檬酸產(chǎn)生菌，具有發(fā)酵(f jio)速度快，通風(fēng)量小，原料利用率高等優(yōu)點(diǎn)。給工業(yè)化生產(chǎn)帶來了便利。提高了企業(yè)的效益。內(nèi)容總結(jié)（1）本篇以檸檬酸的菌種選育為例，闡述發(fā)酵工廠菌種選育的具體方法與實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)（2）二實(shí)驗(yàn)室布局圖三房間用途及基本要素1.