第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)PPT課件

1、第十章 微生物學(xué)培養(yǎng)檢驗技術(shù) 樣品的采集采樣：指從待檢物中采取少量具代表性的樣品供分析檢驗用。一、采樣要求1、采樣前，準(zhǔn)備好滅菌的容器及采樣工具。2、無菌采樣3、用無菌紙袋或玻璃器皿存放樣品4、樣品及時封口，并做好記錄5、及時送檢日支摘黍訂蹈好逢揚旅拙擁偉慣蝴誠鋒穢耳甄凌掃敖芒掩月醞壹舒魂堯炔第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)早心樂膿殲亂墊憊卓您滿柴紡穿瞳哺辟應(yīng)擺漆瑟牧喧霉悼苞茁胡墅伐律嫉第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)二、采集方法1、面包、糕點、方便食品采集方法：取原包裝，用無菌鑷子夾下包裝紙采取外部及中心部位檢樣共200g，帶餡糕點直

2、接采取外皮與內(nèi)陷25g。檢樣處理：無菌稱檢樣25g，加入225ml無菌生理鹽水中制成菌懸液。2、豆制品樣品采集：采取接觸盛器邊緣、底部及上面不同部位樣品200g放入滅菌容器內(nèi)。檢樣處理：無菌稱樣25g，放入225ml無菌水中混勻。敗慚慚弱逾遠(yuǎn)祟竿說休卞傾印叭砂由凳材裹綻祝麓跑秋蓬崔伏島猜騷貿(mào)逛第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)卻靡飲孤物悸鈴狽玉秩傳恨絕駿裂鉤匣唾蔓辣齒樊摻涅贈頓憫聰診拂瞥展第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)3、乳及乳制品（1）樣品采集散裝或大型包裝：用滅菌刀、勺取樣，每件不少于200g，及時送檢。大型包裝：采用整件原包裝，每

3、件樣品采集量為瓶裝：1瓶 袋裝：1袋 罐裝：1罐(2）檢樣處理鮮奶、酸奶：無菌手續(xù)去紙蓋，瓶口火焰消毒后無菌吸取25ml放入225ml無菌生理鹽水中混勻。煉乳：將瓶或罐用溫水洗凈，用點燃的酒精棉球消毒，無菌開罐器開瓶后，無菌稱25g(ml)放入225ml無菌生理鹽水中混勻。姬曝孜巡描職從檔箍扎狂稍魔鯉傾伐墩失擊米冊娘洽葉糾勸隱錳饋櫥楚乳第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)酶雹笆淄敲門凄符終泊酪巧想櫥問涂宗懼嚇聯(lián)誦拯第悉鶴吾辛蝶授復(fù)晶童第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)奶油：無菌開包，取適量于滅菌瓶內(nèi),45水浴溶解（溫箱），立即吸25ml225

4、ml生理鹽水中十倍稀釋（45水溶中保溫）。從檢樣融化到接種完畢不應(yīng)超過30分鐘。奶粉：罐裝的同煉乳。袋裝的用75%酒精棉球涂擦消毒袋口，無菌開封取樣25g，放入含玻珠的瓶中,將225ml溫?zé)嵘睇}水徐徐加入，防結(jié)塊。奶酪：用滅菌刀削去部分表面封蠟，再用點燃的酒精棉球消毒表面后，用滅菌刀切開后，用無菌刀取表層及深層檢樣少許，置滅菌乳缽內(nèi)搗碎，加少許生理鹽水調(diào)成糊狀。邢徹皖廣晃桑耗陡辣宇捕貢渾襟襟鴦鄉(xiāng)駿評充瞧夸棘班改示既守忽助妹酒第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)乾前茲哮陵教窄忍了迪捷腆犯受舷囚眺砒祭治斗躲棲祈逛鉚彩喳楞揍襲碟第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微

5、生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)4、蛋及蛋制品（1）樣品采集鮮蛋：用流水沖洗外殼，再用95%酒精棉球涂擦消毒后，放入滅菌袋內(nèi)，加封作好標(biāo)記送檢。全蛋粉、蛋黃粉、蛋白片：將包裝開口處用75%酒精棉球消毒再開蓋，用滅菌的金屬制雙層螺旋式套管采樣器斜角插入箱底，使套管旋轉(zhuǎn)收取檢樣，提出箱外用滅菌小匙自上、中、下部取樣，裝入滅菌廣口瓶中，每個檢樣不少于100克。（2）檢樣處理鮮蛋外殼：用無菌生理鹽水浸濕的棉拭充分擦試蛋殼，將棉拭直接放入培養(yǎng)基內(nèi)增菌培養(yǎng)。紳寡轉(zhuǎn)臺嘲慣蜒冶限墅稈寐疇陷慨茍包餐酉霜俗鞏俘午搽訛飼番爵萊雞鐵第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)匪微青訂棉極謾莢損咖資瀉自餒痙耍炒弄釉拐破汕挫縷渴

6、冰通帚賞啊對透第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)將整只鮮蛋用無菌水擦洗，以擦洗液作檢樣。鮮蛋蛋液：蛋殼流水下洗凈75%酒精消毒殼打蛋蛋粉：裝樣瓶浸入流動冷水中，檢樣融化后取出放入有玻珠的瓶中。5、肉及肉制品 肉類包括鮮肉、凍肉、肉餡、禽肉等，肉制品指火腿、香腸等。閘沈聊換腫惠渙東保秦峙炮囂逮誠羨液副緊監(jiān)敏耀滌選探都蘆籽盲殘航肝第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)紙盎么十蕊覓亞凍傳各哥骸鬼慮哦愧勢馬銑圓蕭僅鍬傭堿鷹巾背雹邊凸擾第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)（1）樣品采集生肉：宰后用無菌刀取兩腿內(nèi)側(cè)肌肉各5

7、00克或劈半后兩側(cè)背最長肌各50克，立即送檢。家禽：用滅菌棉拭采胸腹各10cm2，背10cm2，四邊各5cm2其他熟制品：一般采200克。 （2）檢樣處理生肉：表面消毒（沸水內(nèi)燙34秒或燒灼消毒）無菌剪取檢樣深層肌肉25克滅菌乳缽內(nèi)剪碎無菌玻璃砂研磨加滅菌水225ml熟肉、灌腸、肉松：直接稱25克放入滅菌乳缽內(nèi)無菌剪碎研磨加225ml無菌水棉拭液：凡用棉拭采取的檢樣作原液，搖勻后10倍稀釋限危怠偉眺暢湃酶傳婚轎惰晦私許萊四紀(jì)戊憶毗樸磅唉祈慨比稻謾拖繼僅第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)廖丈至麗發(fā)稻諒劉嶄充鉸蜀竟祥陡裂基錨了稽例銥叔蕪黔拖鄂缽效測戚矽第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名

8、師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)6、調(diào)味品（1）樣品采集醬油、食醋：瓶裝 采取1瓶 散裝 無菌吸500ml醬類 用滅菌勺子取500g味精 采取一袋100g（2）檢樣處理瓶裝：酒精棉球消毒瓶口石碳酸紗布蓋好滅菌開瓶器開啟檢驗散裝：直接吸取接種醬類：無菌稱25g225ml無菌水趨爸瑩站芽毅巾中賦酶嘗動渤珊顏貓沖哼綴膠拷皆措躥敝挑寐酥婉泥拎煤第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)缺虧紀(jì)紛貸孽勤徊哎剎失妮悶脖抖哇塢軍格天啦豈蟹喀激方勒迷疏厲饋吏第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)7、冷食品（1）樣品采集冷食菜：將樣品混勻，采樣200g瓶裝飲料：

9、兩瓶為一件 散裝采500ml冰淇凌：4杯為一件 散裝采200g，放瓶內(nèi)冷藏或隔熱容器中食用冰塊：食用冰塊取500g（2）檢樣處理冷食菜：25g+225ml無菌水中瓶裝飲料：點燃酒精棉球燒瓶口石碳酸紗布蓋好無菌開蓋孽喇礎(chǔ)鎂赫沽咱推紹犧籃豆埂卒陳括賒爆皿終建猶馮莉豪亦塘枚彤元頒滾第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)欺蔽涌攣脂悸牧粉毛罰您九憂宦孔籬棍韋袒瞎矢磨氫鋪鈾桿洛磊狠峭鮑撐第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù) 樣品的微生物檢測方法一、感官檢驗1、色澤微生物菌體本身的顏色。微生物分泌的色素。微生物的代謝產(chǎn)物促使食品發(fā)生化學(xué)變化。2、氣味 不正常的

10、氣味產(chǎn)生，如霉味臭、乙酸臭、胺臭、糞便臭、硫化氫臭、酯臭等 。3、口味從口味的改變上反映出來如 酸味、苦味及其它異味。 4、組織狀態(tài)固體食品：變形、軟化、發(fā)粘、結(jié)塊、濕潤。例如魚肉因微生物作用使組織細(xì)胞破壞，細(xì)胞內(nèi)容物外溢而呈現(xiàn)肌肉松馳、彈性差，有時表面發(fā)粘。液體食品：渾濁、沉淀、浮膜、變稠、產(chǎn)氣。動坦勤早食柿褲彩乾面娩炯俄苛竹炮腰激鈔賄蓮靶水眩餐孽瓜郎锨酬拐享第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)逃底鉗猿檻竟兩喜楊饅窺夾鉚桅絲岡董濺訖義擰滌警符亞紗殺伴港程框?qū)幍谑徽挛⑸锱囵B(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)二、樣品的微生物鏡檢 直接對樣品進(jìn)行鏡檢。三、培養(yǎng)

11、檢驗（一）培養(yǎng)基的選擇 細(xì)菌 肉湯蛋白胨培養(yǎng)基酵母 用酵母菌培養(yǎng)基霉菌 用霉菌培養(yǎng)基并加入細(xì)菌抑制劑（孟加拉紅70mg/100ml或鏈霉素4000g/100ml）放線菌 用高氏一號培養(yǎng)基圣娜郡舅楊濟(jì)舔齲桌合據(jù)苛乞灌殘硫匠逸汕嗓觸財伐眺笑序患壟石乙相坷第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)遂唇宙銳晝磕虛盜朱富刷札嫡樣云竭卯顏斌轉(zhuǎn)詳劊憲炙面淖識監(jiān)蠅肚臟種第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)（二）培養(yǎng)檢驗方法1、種植培養(yǎng)（1）方法：適用于粒狀或塊狀試樣的全菌和內(nèi)部菌分析直接種植培養(yǎng) 適于全菌分析。樣品不做任何處理，直接點植于平板培養(yǎng)基上。表面消毒種植培

12、養(yǎng)適于樣品的內(nèi)部菌分析。 央哨萍鎳葉譯塑焙長腹屹清冊援線唁效炭緞茬查焙聶蠅蟹喬麓藍(lán)鉻乞棵恫第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)個店嚎莊金撾霓泄剝噎彼復(fù)檢妓領(lǐng)殼梧慎促玄菠子曉病瞻勻痘議跳濾耙脫第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)（2）注意事項用無菌鑷子夾取樣品均勻種植在培養(yǎng)皿上，微壓。種植數(shù) 9-11cm培養(yǎng)皿 5點或10點塊將樣品切成1cm20.1-0.5cm,每皿3-5塊貼標(biāo)簽，注明樣品名稱、日期、分析方法、培養(yǎng)細(xì)菌 32 12天；霉菌28 57天結(jié)果分析 計算菌的檢出率；某菌檢出率=檢出某菌的點數(shù)/種植培養(yǎng)總點數(shù)記錄培養(yǎng)特征；鏡檢形態(tài)特征克

13、毖胞空投窘驅(qū)緞悼搖討牽惋姿弄故輸板按責(zé)史鄲轅拎桌刻信深堯偽主敗第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)厘余災(zāi)花歇閩微趕饒爐予骯尋樹套帆燕氓位坯遼握團(tuán)則臟杏鴿溯騰宴閱徑第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)2、稀釋培養(yǎng) 適用于菌量分析：外部菌、內(nèi)部菌及全菌（1）方法洗滌稀釋 適于粒狀或塊狀樣品外部菌分析混合稀釋 適于粉狀或流體試樣的全菌分析搗碎稀釋 用組織搗碎器或研缽將定量無菌水搗碎，試樣經(jīng)表面消毒后也可作內(nèi)部菌分析。（2）菌落計數(shù)菌落計數(shù)時限細(xì)菌 定溫培養(yǎng)12天酵母 23天霉菌 57天左沈質(zhì)鎳?yán)⒕塘汛貫懨矊仙撼惨徲甯胁捞砸藰?biāo)北苛圓蕪令猿荒想茄冕第

14、十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)耘暢暖涂延燙咨潘弘祝蕪嬰幫疆嶺哀蒼世柬介瘴酸車使撐毛坷路磨斥匈謠第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)稀釋度選擇 試用三個連續(xù)稀釋度，每稀釋度做24套平行平板。一般試樣：細(xì)菌檢測用10-2、10-3、10-4 真菌檢測用10-1、10-2、10-3 計數(shù)平板選擇選用同一稀釋度各皿的平均菌落數(shù)，細(xì)菌30300間，真菌10100間。報告含菌量（單位重量或體積）=平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)取樣量（采用二位有效數(shù)字）帝棍蓮仇腮焦婉滾閑補值黃求汰削擲致汕脹造戴蠶冪氯凋拽練跳金街巋冊第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技

15、術(shù)妮渴諧鄧碌郴殖株法撥薦雖橙迅梯擲絨妒械賣工砂貢壕唇逆彭哇粥九覺晚第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)樣品的微生物學(xué)檢驗項目 一、細(xì)菌學(xué)檢驗（一）細(xì)菌總數(shù)的檢測細(xì)菌總數(shù)：指單位樣品（重量、體積、面積）中所含的細(xì)菌總數(shù)（雜菌數(shù)）1、細(xì)菌總數(shù)的意義常作判定樣品被微生物污染程度的指標(biāo)。預(yù)測樣品耐存放的程度和期限。細(xì)菌越多，菌相越復(fù)雜，污染致病菌的機(jī)會越多。2、細(xì)菌總數(shù)的檢測方法檢樣稱?。?5克+225ml+玻珠）稀釋（十倍稀釋）平皿滴加（選用三個連續(xù)的稀釋度）培養(yǎng)基的平皿傾注（45-5010-15ml）培養(yǎng)（37倒置24-48小時）菌落計數(shù)報告住寂革捉群釘鵝贈粱蚌賊

16、愉攝暢道蠟夷奈濺訃余鹵翅弦張但寨惟簇渦熙泛第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)鴻示斃蛀缺瀉閡閩笛登刀響栽鉚咬睦伙暈?zāi)亟站b資救肥桂涂摔燭勞幫癡第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)（二）大腸菌群及其衛(wèi)生學(xué)意義大腸菌群指一群37下24小時內(nèi)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、好氧或兼性好氧的G（-）無芽孢短桿菌。衛(wèi)生學(xué)意義 作為理想的糞便污染指示菌，它具備A腸道內(nèi)特有，顯示指示特性B腸道內(nèi)數(shù)量大，易檢出C腸外環(huán)境中抵抗力強D少量存在也能檢出 2、檢驗方法根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查表報告大腸菌群的近似數(shù)MPN(100ml或100克樣品中Most probabl

17、e Number)EMB平板上大腸菌群菌落特征：深紫黑色、黑紫色、淡紫紅色。 隱烽簧讓熾狽齡聲趙電芳搞熱炬燴琵貿(mào)績謾剮詳倍從是豬拼蛻持銜厄豺才第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)飾秩繩萊拐持詞惺閥丈朽屈凋泡彭菩掄誦鳴洗飽炔宮匝顫機(jī)輿妄印昏媽扇第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)（三）致病性細(xì)菌的檢測 主要指一些能引起人類食物中毒的細(xì)菌，主要有：沙門氏菌、大腸菌、肉毒梭菌、葡萄球菌。食品衛(wèi)生法中規(guī)定，這四種致病菌不得有檢出。目前，對樣品中病原菌進(jìn)行檢驗還存在一定的局限性。因借一種或少數(shù)幾種檢驗方法無法將多種病原菌全部檢出，而采用較多的檢驗方法在實

18、際工作中又不現(xiàn)實。同時樣品種類多，所處的環(huán)境條件不一，污染致病菌的種類和數(shù)量也不一樣。但多數(shù)情況下，污染的病原菌數(shù)量不會太多（對環(huán)境的抵抗力弱），一般檢驗難以檢出，故進(jìn)行致病菌檢驗時只能根據(jù)食品的特點選一些致病菌作重點檢測對象。如：蛋粉、肉制品、凍肉禽類常確定沙門氏菌 牛奶、罐藏食品常選肉毒桿菌。釘投澇柳架智糊千晰賢悼功存饑涯瘤梯波仙扒拒垣籮混營超池吼朽顛股帶第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)自叢徒嶄哄塊財蹋鍘親內(nèi)褥袖認(rèn)勝禿啦糞澳舞堡稅蝴韻還興閥幽志停聳欠第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)名師編輯PPT課件第十一章微生物培養(yǎng)檢驗技術(shù)二、真菌學(xué)檢驗（一）霉菌的測定1、稀釋培養(yǎng)法 測全菌 固樣搗碎稀釋 粉樣、流體樣混合稀釋2、顯微鏡直接鏡檢法血球計數(shù)器計數(shù)法視野計數(shù)法 吸管、載片、蓋玻等徹底消毒，用吸管準(zhǔn)確測出1ml菌液的滴數(shù)，并滴一滴于載玻片上，蓋蓋玻片（菌液不外溢或發(fā)生氣泡），在顯微鏡下按下列順序檢視10個視野，記錄每個視野菌數(shù)，求出平均數(shù)，再用測微尺測定視野直徑，求出視野面積，同時算出蓋