食用植物油中乙基麥芽酚的測(cè)定BJS201708

1、附件食用植物油中乙基麥芽酚的測(cè)定（BJS 201708）1范圍本方法規(guī)定了食用植物油中乙基麥芽酚的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜定性確證和定量測(cè)定方法。本方法適用于芝麻油、芝麻調(diào)和油、菜籽油等食用植物油中乙基麥芽酚的確證及測(cè)定。2原理用甲醇提取試樣中的乙基麥芽酚后，采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，外標(biāo)峰面積法定量。3試劑和材料除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。試劑甲醇（CH3OH）:色譜純。甲酸（HCOOH ）:色譜純。乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品的分子式、相對(duì)分子量、CAS登錄號(hào)見(jiàn)表1，純度 99%。表1乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱(chēng)、英文名稱(chēng)、CAS登錄號(hào)、分子

2、式、相對(duì)分子量中文名稱(chēng)英文名稱(chēng)CAS登錄號(hào)分子式相對(duì)分子量乙基麥芽酚Ethyl maltol4940-11-8C7H 8。3140.14標(biāo)準(zhǔn)溶液配制乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品（3.2） 100.0mg （精確至0.000 1 g）,用甲醇溶解并定容至 100 mL,此溶液濃度為1 mg/mL。貯存于4 c冰箱中，有效期 3個(gè)月。乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液：將乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.3.1）用甲醇逐級(jí)稀釋成g/mL、2.5 g/mL、5閔/mL、25聞/mL、50聞/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，準(zhǔn)確稱(chēng)取與試樣基質(zhì)相應(yīng)的 陰性試樣10g （精確至0.01g）,分別加入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液

3、200人，與試樣同時(shí)進(jìn)行提取，制成最終 濃度為12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、250ng/mL、500ng/mL標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。臨用時(shí)配制。0.1%甲酸水溶液：取甲酸1mL用水稀釋至1000mL,用濾膜（0.22甲，水相）過(guò)濾后備用。0.1%甲酸甲醇溶液： 取甲酸1mL用甲醇稀釋至1000mL,用濾膜（0.22 m,有機(jī)相）過(guò)濾后備用。4儀器和設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。渦旋振蕩器。分析天平：感量為 0. 1 mg和0.01 g。離心機(jī)：可冷卻至 4C,轉(zhuǎn)速9000 r/min以上。具塞刻度試管：20 mLo聚丙烯離心管：50 mLo移液器：10 mL和2

4、50比。5分析步驟試樣制備準(zhǔn)確稱(chēng)取10g試樣（精確至0.01g）置于50 mL聚丙烯離心管中，用移液器準(zhǔn)確加入 10mL甲酉!（3.1.1）,渦旋振搖2min, 4c條件下9000 r/min離心10min ,將上清液移入 20mL具塞刻度試管 中，下層油液再用10mL甲醇重復(fù)提取一次，合并上清液，用甲醇定容至20mL,經(jīng)微孔濾膜（0.22 wm,有機(jī)相）過(guò)濾，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。儀器參考條件液相色譜條件a）色譜柱：C18色譜柱，100mmX2Jmm（id）, 1.7科叫或性能相當(dāng)者。b）流動(dòng)相：A為0.1%甲酸水溶液（3.4）, B為0.1%甲酸甲醇溶液（3.5）,梯度洗脫程序見(jiàn)表 2

5、。c）流速：0.3 mL/min 。d）柱溫：40 Coe）進(jìn)樣量：2b表2梯度洗脫程序時(shí)間/min流動(dòng)相比例/ （%）流動(dòng)相A流動(dòng)相B050500.550501.51585215854595559552.2質(zhì)譜條件a）電離方式：電噴霧正離子模式；b）監(jiān)測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（ MRM ）;c）氣簾氣：40 psi;d）碰撞氣：7 psi;e）離子噴霧電壓：5500V;f）離子源溫度：600 C；g）定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、去簇電壓和碰撞能見(jiàn)表3。表3乙基麥芽酚的定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、去簇電壓和碰撞能中文名稱(chēng)定性離子對(duì)/（m/z）（母離子/子離子）定量離子對(duì)/（m/z）

6、（母離子/子離子）去簇電壓/V碰撞能/V乙基麥芽酚141.1/126.1141.1/126.113027141.1/71.0130375.3定性確證按照儀器參考條件（5.2）測(cè)定試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，如果試樣中的乙基麥芽酚質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致（變化范圍在受.5%之內(nèi)）；且試樣中乙基麥芽酚的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度比（k）與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中乙基麥芽酚的兩個(gè)子離子的相對(duì)豐度比相比，其允許偏 差不超過(guò)表4規(guī)定的范圍，則可判定為試樣中存在乙基麥芽酚。表4定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度（%）k5050k2020k10k10允許的最大偏差（%）+ 20+25+30+

7、50乙基麥芽酚的參考保留時(shí)間約為1.35 min,質(zhì)量色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.1-圖A.2。5.4定量測(cè)定工作曲線的制作將乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（3.3.2）按儀器參考條件（5.2）進(jìn)行測(cè)定，得到相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的質(zhì)量色譜峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以質(zhì)量色譜峰的峰面積 為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線。試樣溶液的測(cè)定將試樣溶液（5.1）按儀器參考條件（5.2）進(jìn)行測(cè)定，得到相應(yīng)的試樣溶液的質(zhì)量色譜峰面積。 根據(jù)工作曲線得到試樣溶液中乙基麥芽酚的濃度。6結(jié)果計(jì)算試樣中乙基麥芽酚含量按式（1）計(jì)算： clOOOX= （ 1）m燈鴕6式中：X一試樣中乙基麥芽酚的含量，單位為微克每千克

8、（閔/kg）;c一由工作曲線得出的試樣溶液中乙基麥芽酚的濃度，單位為納克每毫升（ ng/mL）;V一試樣溶液定容體積，單位為毫升（ mL）;m一試樣質(zhì)量，單位為克（g）;計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)7回收率及精密度芝麻油、芝麻調(diào)和油、菜籽油中乙基麥芽酚加標(biāo)濃度為25g/kg 50g/kg和250 d g/kg時(shí)，乙基麥芽酚的回收率在80.5% 109.3%之間，精密度在 0.7%6.2%之間。8檢出限當(dāng)取樣量為10.00g,定容體積為20mL時(shí)，本方法中乙基麥芽酚的檢出限為25.0 g/kg附錄A乙基麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)溶液多反應(yīng)監(jiān)測(cè)質(zhì)量色譜圖圖A.1乙基麥芽酚定量離子對(duì)質(zhì)量色譜圖(m/z 141.1/126.1)SQ -SU 我 u_Sa口圖A.2乙基麥芽酚定性離子對(duì)質(zhì)量色譜圖(m/z 141.1/7