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文檔簡介
1、藥檢項目三藥物的鑒別紫外-可見吸收光譜法12布洛芬的紫外-可見分光光度法鑒別 在光譜分析中,依據(jù)物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法,主要有: 紅外吸收光譜:分子振動光譜,吸收光波長范圍2.51000m, 主要用于有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)鑒定。 紫外吸收光譜:電子躍遷光譜,吸收光波長范圍200400 nm(近紫外區(qū)),可用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。 (10-200nm;遠(yuǎn)紫外光區(qū)) 可見吸收光譜:電子躍遷光譜,吸收光波長范圍400750 nm,主要用于有色物質(zhì)的定量分析。光的選擇性吸收 紫外-可見分光光度計紫外-可見分光光度法的特點 2 靈敏度高;3 選擇性好;4 精密度和準(zhǔn)確度較高;5
2、用途廣泛。1 與其它光譜分析方法相比,其儀器設(shè)備和操作都比較簡單,費(fèi)用少,分析速度快; 基本構(gòu)造主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和顯示器五大部分組成。 紫外-可見分光光度計的基本構(gòu)造光源 單色器 樣品池 檢測器 顯示器基本組成1. 光源 在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜,具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。 可見光區(qū):鎢燈作為光源,其輻射波長范圍在3501000 nm。 紫外區(qū):氫、氘燈。發(fā)射200360 nm的連續(xù)光譜。 2.單色器 將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。 常用的元件:棱鏡、光柵3.樣品室 功能:用于盛放試樣,完成樣品中
3、待測試樣對光的吸收 常用的吸收池:石英(紫外區(qū)) 玻璃(可見區(qū)) 吸收池光程:1cm 、2cm、3cm等注意:為減少光的損失,吸收池的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向。吸收池要挑選配對,因為吸收池材料的本身吸光特征以及吸收池的光程長度的精度等對分析結(jié)果都有影響。單光束分光光度計雙光束分光光度計雙波長分光光度計(相互重疊多組分分析)5、儀器類型作用:接受、記錄信號組成:檢測器、放大器和讀數(shù)和記錄系統(tǒng)常用檢測器:光電管和光電倍增管 4、檢測系統(tǒng) ()單光束分光光度計 經(jīng)單色器分光后的一束平行光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進(jìn)行吸光度的測定。 簡單,價廉,適于在給定波長處測量吸光度或透光度,一般不能作
4、全波段光譜掃描,要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。 樣品池 參比池 ()雙光束分光光度計 經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡分解為強(qiáng)度相等的兩束光,一束通過參比池,一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強(qiáng)度,此比值即為試樣的透射比,經(jīng)對數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。 自動記錄,快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價格較高。M1M4參比池樣品池M2M3吸收曲線 將不同波長的光透過某一固定濃度和厚度的待測溶液,測量每一波長下待測溶液對光的吸收程度(即吸光度),然后以波長為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo)作圖,可得一曲線。這曲線描述了物質(zhì)對不
5、同波長的吸收能力,稱吸收曲線或吸收光譜。入射光 I0透射光 It同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長max不同濃度的同一種物質(zhì),其吸收曲線形狀相似max不變。而對于不同物質(zhì),它們的吸收曲線形狀和max則不同。 應(yīng)用舉例(一)定性鑒別 根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜特征,如吸收光譜的形狀、最大吸收波長、吸收峰數(shù)目、各吸收峰的位置,強(qiáng)度和相應(yīng)的吸收系數(shù)等進(jìn)行分析。300400500600350525 545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光譜350光譜定性分析基礎(chǔ):吸收曲線的形狀和最大吸收波長KMn
6、O4 的吸收曲線最大吸收波長,max定量分析的基礎(chǔ):某一波長下測得的吸光度與物質(zhì)濃度有關(guān)的關(guān)系(二)定量鑒別2.布洛芬的紫外-可見分光光度法鑒別布洛芬 光譜鑒別法紫外光譜鑒別法 原理: 含有芳環(huán)或共軛雙鍵的藥物在紫外光區(qū)有特征吸收,含有生色團(tuán)和助色團(tuán)的藥物在可見光區(qū)有吸收。 它們都可以用紫外-可見分光光度法進(jìn)行鑒別。 相關(guān)材料的準(zhǔn)備中國藥典 的查閱與使用標(biāo)準(zhǔn)操作 規(guī)程 檢驗SOP 中國藥典 2005年版 相關(guān)材料 的準(zhǔn)備 方法 取布洛芬0.2504g置100ml量瓶中,加0.4氫氧化鈉溶液使溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量該溶液10ml,置100ml量瓶中,加0.4氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含0.25mg的溶液)。 以0.4氫氧化鈉溶液為空白溶液,照紫外-可見分光光度法(附錄
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