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1、火華縣中醫(yī)院文件編號:LCYYYJYK_SOP_01 頁碼:第- PAGE 5火華縣中醫(yī)院文件編號:LCYYYJYK_SOP_01 頁碼:第- PAGE 5 -頁,共 5 頁版本:第 1 版,第 1 次修訂生效日期:20XX0101項目檢驗科SOP編寫者:王醫(yī)生審核者:李醫(yī)生批準者:主任時間:20XX0101時間:20XX0101時編寫者:王醫(yī)生審核者:李醫(yī)生批準者:主任時間:20XX0101時間:20XX0101時間:20XX0101白細胞分類計數(shù)標準操作程序文件一、目的:確保儀器正常運轉(zhuǎn)與結(jié)果的準確性,嚴格檢驗質(zhì)量標準,為臨床提供及時、可靠的結(jié)果報告。二、適用范圍:檢驗科日常操作規(guī)范 測定
2、原理,以觀察數(shù)量診斷意義。試劑及儀器(一)染色液1. 瑞氏姬姆薩復合染色液Ilg0.3g,置潔凈研缽中,加 2 ML500ml3min,5液 pH6.46.8 磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀(無水)6.64g 磷酸氫二鈉(無水)2.56g加少量蒸餾水溶解,用磷酸鹽調(diào)整 pH,1000ml2快速染色液I 液:磷酸二氫鉀 6.64g磷酸氫二鈉 2.56g水溶性伊紅 Y 4g(或伊紅 B2.5g)蒸餾水 1000ml石炭酸 40ml煮沸,待冷備用。液亞甲藍 4g蒸餾水 1000m1蒸餾水 1000m1高錳酸鉀 2.4g煮沸,待冷備用。330s貯存液瑞氏染粉 2.0g 姬姆薩染粉 天青 E0.6g甘油 10.
3、0ml聚乙烯 D 比咯烷酮(PVP) 20.0g(或曲拉通 X-100 3ml)甲醇 1000ml磷酸鹽緩沖液(pH6.2-6.8) 磷酸二氫鉀 6.64g 磷酸氫二鈉 0.26g 石炭酸 4.0ml蒸餾水加至 1000ml應(yīng)用液l 液、2 液按 3:1 比例混合放置 14 天后備用。(二)顯微鏡。(三)計數(shù)器。標本的采集取手指血或靜脈血 1.0ml,置于抗凝管中(2%EDTAK2)搖勻待檢。或直接未梢取血涂成血片。操作步驟采血后推制厚薄適宜的血膜片,血膜應(yīng)呈舌狀,頭.體.尾清晰可分。37 C箱中保溫促干,以免細胞變形縮小。染色:(1). 瑞氏姬姆薩復合染色液染色351min510510min
4、后用水沖去染液,待干。(2快速染色液染色I30s,水洗待干。注:本染色法除了能快速用于急癥外,對玻片質(zhì)量要求也不高。隨著染液多次使用,可適當延長染色時間或更換新液。(330s將染液鋪滿血膜或?qū)⒀肴旧變?nèi),30s 后用自來水沖洗。PVPE可縮短染色時間。100其形態(tài)特征進行分類計數(shù),求出各類細胞所占比值(百分率。參考范圍中性桿狀核粒細胞(N:1-5% 中性分葉核粒細胞嗜酸性粒細胞(E:05-5%嗜堿性粒細胞淋巴細胞(L:20-40% 單核細胞(M:3-8%臨床意義中性粒細胞(N)中性粒細胞具有游走性和吞噬作用。增高見于: ab組織損傷:大手術(shù)后、心肌梗塞、肺梗塞等。 c惡性腫瘤:急、慢性白
5、血病、淋巴瘤等。 d各種中毒:尿毒癥、糖尿病酸中毒等。減少見于: a某些傳染病:流感、傷寒、付傷寒、麻疹。b某些血液病:再障、粒細胞缺乏癥、白細胞減少癥。c化療或放療后,抗癌藥物,X 線及鐳照射。d其它:脾功能亢進,自身免疫性疾病,高度惡病質(zhì)。嗜酸粒細胞E:嗜酸粒細胞與變態(tài)反應(yīng)有關(guān),并有吞噬抗原抗體復合物的作用。增多見于: a變態(tài)反應(yīng)性疾?。褐夤芟?、藥物過敏、蕁麻疹、血管神經(jīng)性水腫、過敏紫癜。寄生蟲?。夯紫x病、鉤蟲病、血吸蟲病。某些皮膚?。簼裾?、牛皮癬、剝脫性皮炎等。 d多發(fā)性骨髓瘤、何杰金氏病等。減少見于: a應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、促腎上腺皮質(zhì)激素。b傷寒、副傷寒等病患者。嗜堿性粒細胞(B)嗜
6、堿性粒細胞主要參與特殊的免疫反應(yīng)增多見于:a慢性粒細胞白血病、嗜堿性粒細胞白血病。b某些轉(zhuǎn)移癌及骨髓纖維化。嗜堿粒細胞減少無臨床意義。淋巴細胞(L:淋巴細胞能產(chǎn)生和運載抗體,在防御病毒感染方面有重要作用。增多見于:a某些病毒或細菌所致的傳染病:傳染性淋巴細胞增多癥、傳染性單核細胞增多癥、傳染病恢復期、結(jié)核病、百日咳。b淋巴細胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。減少見于:a應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、接觸放射線。b細胞免疫缺陷病、某些傳染病的急性期。單核細胞(M外,又能吞噬原蟲及具有類脂質(zhì)包膜的結(jié)核桿菌及麻風桿菌。增多見于:a某些感染:傷寒、結(jié)核、瘧疾、黑熱病、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎。b某些血液病:單核細胞性白血
7、病、淋巴瘤、骨髓異常增殖綜合癥、惡性組織細胞病。減少一般無臨床意義。常見的異常白細胞形態(tài)的變化在外周血象中,除了各類白血病幼稚細胞外,通常能見到一些細胞形態(tài)上的異常變化。(一) 中性粒細胞1:13。胞增多為核象極度左移,多見于類白血病反應(yīng)或白血病。 伴白細胞總數(shù)增高的核左移:稱再生性左移,常見于急性化膿性感染,如大葉性肺炎等。 白細胞總數(shù)不增加或減低的核左移:稱退行性左移,常見于嚴重感染、機體抵抗力低下時,如傷寒、伴感染中毒性休克的敗血癥等。453養(yǎng)性巨幼細胞性貧血和使用抗代謝藥物后。此外,在疾病進行期突然出現(xiàn)核象右移,表示預后不良。等癥時,中性粒細胞可出現(xiàn)形態(tài)變異。(l) 細胞大小不均:為骨髓內(nèi)幼稚粒細胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。不等??赡転橹行灶w粒成熟過程中發(fā)生變性所致。能著色所致。Dohle發(fā)育不平衡所致,為細胞嚴重毒性變的表現(xiàn)。癌轉(zhuǎn)移、嚴重放射損傷等有關(guān)。脹、破碎、溶解等變化,退行變可以是細胞衰老死亡的表現(xiàn)。(二
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