血流感染標(biāo)本和呼吸道標(biāo)本操作規(guī)范以及臨床意義

1、關(guān)于血流感染標(biāo)本和呼吸道標(biāo)本操作規(guī)范及臨床意義第一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本類型血培養(yǎng) 呼吸道標(biāo)本 (痰標(biāo)本、咽部標(biāo)本）尿培養(yǎng)腦脊液培養(yǎng)生殖道標(biāo)本培養(yǎng)抽吸物和組織標(biāo)本的培養(yǎng)（需氧、厭氧培養(yǎng)）傷口拭子糞便培養(yǎng)第二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)Blood Culture 第三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)是進(jìn)行血流感染診斷的最佳手段第四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)概念采集患者的血液或無菌體液標(biāo)本,送至微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)檢測(cè).檢測(cè)原本無菌的血液及體液中是否有細(xì)菌存在.如有細(xì)菌,則極有可能為致病的細(xì)菌.進(jìn)一步進(jìn)行鑒定/藥敏試驗(yàn).

2、第五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護(hù)理人員收集送檢樣本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、分離并鑒定導(dǎo)致血流感染的微生物三級(jí)報(bào)告：為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果第六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 目前血培養(yǎng)的問題采血時(shí)機(jī)不合適采血套數(shù)不夠采血量不足只做需氧培養(yǎng)，不同時(shí)做厭氧培養(yǎng)采血前或采血時(shí)正在使用抗生素治療第七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血流感染與血培養(yǎng)的規(guī)范實(shí)踐第八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于血培養(yǎng)指征“只有在發(fā)熱時(shí)，才需要進(jìn)行血培養(yǎng)?！毕氩删筒?？第九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 血培養(yǎng)的指征當(dāng)懷疑血流感染或膿

3、毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)。懷疑患者有血流感染的癥狀有：不明原因的發(fā)燒(38)或體溫過低(36)白細(xì)胞增多（ 10,000/ul），粒細(xì)胞減少（ 1,000/ul）休克，寒顫，僵直嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染，)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快第十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于采血時(shí)機(jī)“何時(shí)采血進(jìn)行血培養(yǎng)，無特殊時(shí)間要求?！?？第十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于采血套數(shù)及部位 “為減輕患者痛苦，只從一個(gè)穿刺部位采一份血液標(biāo)本即可。”？第十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)采血時(shí)機(jī)細(xì)菌濃度體溫03060時(shí)間 (分

4、鐘)第十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月基本概念成人“一套” 血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè)，也叫“一份”注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng)，但仍需從多個(gè)部位采集多次。特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)。 第十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月采血套數(shù)Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548第十五張，PPT

5、共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月表皮葡萄球菌的臨床意義污染菌？致病菌采集1套無法判斷是病原菌還是污染菌。23套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷。第十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于血培養(yǎng)套數(shù)與采血部位每位患者每次采血最少2套，3套更好初發(fā)患者，絕不能只采1套標(biāo)本多個(gè)穿刺部位采血。因多部位同時(shí)發(fā)生污染的幾率較小，便于對(duì)結(jié)果進(jìn)判斷 第十七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 關(guān)于采血間隔“兩套血培養(yǎng)采集間隔無特殊要求。”？第十八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于標(biāo)本采集間隔時(shí)間對(duì)于非持續(xù)性菌血癥，同時(shí)或短時(shí)間內(nèi)采集2-3套血培養(yǎng)，因?yàn)轶w內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會(huì)在1530min

6、內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌。可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。可疑的亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標(biāo)本。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。 第十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 關(guān)于采血量“每瓶采集多少血液無特殊要求?！保康诙畯?，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月采血量(ml)與檢出率的關(guān)系血培養(yǎng)物每增加一毫升，真性菌血癥成年人微生物的檢出率增加3 但并非越多越好，超過一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的肉湯，使肉湯無法有效中

7、和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素）。所以血液與肉湯的最佳比例為1：41：10第二十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于采集血液量采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素成人一份標(biāo)本2個(gè)培養(yǎng)瓶（需氧厭氧），每瓶810ml，共20ml；要求至少采兩份標(biāo)本，即40ml。兒童一般只需采集需氧瓶，在保證采集血量1總血量下，一般為1-3ml采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染 第二十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于各種血液標(biāo)本的采集順序先采生化、凝血標(biāo)本，再采血培養(yǎng)標(biāo)本。”？第二十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月采各種血液標(biāo)本的先后順序

8、血培養(yǎng)對(duì)無菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它標(biāo)本要高。所以要最先采集血培養(yǎng)標(biāo)本。污染率的指標(biāo)是 3%（100份標(biāo)本里只能有不到3個(gè)標(biāo)本出現(xiàn)污染）。 第二十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于皮膚及培養(yǎng)瓶消毒“消毒的重點(diǎn)是足夠量的消毒劑?！?？第二十五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月皮膚消毒程序：推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時(shí)間與碘町一樣（但不能用于少于2個(gè)月嬰兒皮膚消毒）第二十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)瓶的消毒程序：去掉培養(yǎng)瓶口的塑料瓶蓋。75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子60秒。自然待

9、干。將標(biāo)本注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。5.顛倒混勻標(biāo)本與肉湯，以避免血液凝集。第二十七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于培養(yǎng)瓶的儲(chǔ)存溫度“培養(yǎng)瓶未使用時(shí)，需要冷藏或冷凍?！保康诙藦?，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于未用培養(yǎng)瓶的儲(chǔ)存溫度 不需冷藏，更不能冷凍。保存在1525的室溫即可，溫度過低會(huì)導(dǎo)致對(duì)溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。第二十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢 “加入標(biāo)本后的培養(yǎng)瓶夜班未能及時(shí)送到檢驗(yàn)科，可以冷藏或放入35的溫箱?！?？第三十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于夜班血培養(yǎng)的送檢 培養(yǎng)瓶夜班未能及時(shí)送到檢驗(yàn)科，存在室溫即可，不

10、能冷藏也不能放入35 的溫箱 。過夜不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響，但仍需盡快送檢。冷藏可能導(dǎo)致對(duì)溫度敏感的耐瑟氏菌等死亡。溫箱會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌進(jìn)入生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期，從而錯(cuò)過檢測(cè)的最佳時(shí)期。第三十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月關(guān)于采血部位“患者靜脈中插有導(dǎo)管，可直接從導(dǎo)管采血?！保康谌?，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 關(guān)于從靜脈留置裝置直接采血 不可以，常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置中采集，檢出污染或定植菌的可能性較大。除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)性血流感染，請(qǐng)參照導(dǎo)管相關(guān)性血流感染的采血方法。第三十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)標(biāo)本的拒收瓶子上帖的標(biāo)簽錯(cuò)誤或未帖標(biāo)簽。血培

11、養(yǎng)瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。第三十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基的選擇推薦使用商品化的培養(yǎng)基使用添加抗菌藥物吸附劑的血培養(yǎng)瓶有助于提高已接受抗菌藥物治療患者血培養(yǎng)的檢出率，增加細(xì)菌的分離率和分離速度，但同時(shí)也會(huì)增加污染菌的檢出率。第三十五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)報(bào)陽時(shí)間當(dāng)前推薦的連續(xù)血培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)時(shí)間為5天大部分臨床意義的致病菌都在培養(yǎng)的前3天檢出在培養(yǎng)的前2天,檢出率為94%Bourbeau PP., Foltzer M. Routine incubation of BacT/ALERT FA and FN blood cultu

12、re bottles for more than 3 days may not be necessary. J Clin Microbiol. 2005;43:2506-2509 第三十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月血培養(yǎng)的危急報(bào)告制度1.初步報(bào)告 血培養(yǎng)陽性報(bào)警后，應(yīng)立即抽取培養(yǎng)液進(jìn)行涂片、革蘭染色、顯微鏡鏡檢，初步藥敏試驗(yàn)，并將結(jié)果向臨床主管醫(yī)生進(jìn)行緊急報(bào)告。2.二級(jí)報(bào)告 陽性報(bào)警的血培養(yǎng)轉(zhuǎn)種培養(yǎng)基培養(yǎng)1618小時(shí)后，觀察培養(yǎng)基上菌落形態(tài)、革蘭染色后菌體形態(tài)以及初步藥敏結(jié)果，盡可能通知臨床初步鑒定結(jié)果和某些耐藥特征。3. 最終（書面）報(bào)告 報(bào)告最終菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果第三十

13、七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月菌種鑒定對(duì)判斷血培養(yǎng)污染的價(jià)值當(dāng)分離出的微生物為金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌以及其他腸桿菌科細(xì)菌、銅綠假單胞菌、白色假絲酵母菌時(shí)，90%以上是血流感染病原菌。分離出化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、產(chǎn)單核李斯特菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、其它假絲酵母菌和新型隱球菌時(shí)污染的可能性更低。棒狀桿菌、微球菌、氣球菌、芽胞桿菌、丙酸桿菌、草綠色鏈球菌和凝固酶陰性葡萄球菌等很少是菌血癥的病原菌，如重復(fù)檢出才考慮為病原菌。第三十八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第三十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于20

14、22年6月臺(tái)大醫(yī)院BACTEC 9240 18臺(tái)les)/episode2-3 sets (4-6 bottles)/episode9,000-10,000 bottles/month100,000 bottles/year第四十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月臺(tái)灣長(zhǎng)庚醫(yī)院BACTEC 9240 23臺(tái)第四十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月呼吸道標(biāo)本Respiratory Cultures第四十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月上呼吸道標(biāo)本 Upper Respiratory Tract Specimens第四十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月上呼

15、吸道感染：絕大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位；導(dǎo)致咽痛、鼻涕、常常會(huì)發(fā)熱。感染喉部、中耳、鼻竇炎、結(jié)膜炎或角膜炎。可能與嚴(yán)重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和傳染性單核細(xì)胞增多癥并存。第四十五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月第四十七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月下呼吸道標(biāo)本 Lower Respiratory Tract Specimens 第四十八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 下呼吸道感染 急性支氣管炎 社區(qū)獲得性肺炎 院內(nèi)獲得性肺炎 免疫妥協(xié)患者肺炎第四十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月

16、 下呼吸道標(biāo)本自然咳痰誘導(dǎo)痰 氣管內(nèi)吸取物支氣管肺泡灌洗液保護(hù)性毛刷支氣管灌洗液 肺部組織第五十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月病原體種類繁多而復(fù)雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲第五十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污染唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。研究顯示，國(guó)內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。第五十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月我國(guó)痰細(xì)菌培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結(jié)果重復(fù)性差報(bào)告速度慢感染

17、菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距第五十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 咳痰標(biāo)本的采集標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護(hù)士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！第五十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本的正確采集 人工氣道：氣管內(nèi)吸引，可避免口腔正常菌群的污染。敏感性（38%-100%）特異性（14%-100%）。 PSB(聚苯乙烯-丁二烯共聚物):保護(hù)性毛刷采樣獲取下呼吸道分泌物進(jìn)行培養(yǎng)。敏感性（33%-100%）特異性（50%-100%）。 BALF(支氣管肺泡灌洗液 ):支氣管肺泡灌洗液獲取下呼吸

18、道分泌物進(jìn)行培養(yǎng)敏感性（42%-93%）特異性（45%-100%） 。 第五十五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本質(zhì)控判斷是否合格標(biāo)本：白細(xì)胞：鱗狀上皮細(xì)胞2.5：1痰涂片：平時(shí)處理痰標(biāo)本就必須涂片，這是基本工作之一，不會(huì)因?yàn)樵焊泻团R床醫(yī)生的要求而增加，也不會(huì)因?yàn)樗麄儾灰?，或者人手不足就不做。就如同建房子之前要挖地基一樣，不?huì)因?yàn)榭蛻舨灰缶褪〉暨@個(gè)步驟痰培養(yǎng)：取膿性痰、粘液膿性痰第五十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)本質(zhì)量帶血痰唾液or誘導(dǎo)痰 (?)膿痰粘液樣痰第五十七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞學(xué)篩選標(biāo)本 合格標(biāo)本 下呼吸道咳出的痰，含鱗狀上皮

19、細(xì)胞少，白細(xì)胞較多。白細(xì)胞：鱗狀上皮細(xì)胞2.5：1。不合格標(biāo)本指唾液或唾液嚴(yán)重污染的痰標(biāo)本，含鱗狀上皮細(xì)胞多，而白細(xì)胞少。白細(xì)胞：鱗狀上皮細(xì)胞2.5:1。第五十八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌胞內(nèi)細(xì)菌 提示感染第五十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月柱狀纖毛上皮細(xì)胞肺泡巨噬細(xì)胞第六十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月滑石顆粒第六十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月淀粉樣小體見于遷延長(zhǎng)時(shí)間的呼吸道疾病第六十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月彈性纖維第六十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月庫(kù)什曼螺旋體第六十四張，PPT共八十一頁(yè)

20、，創(chuàng)作于2022年6月呈鏈排列的革蘭陽性球菌和革蘭陰性球桿菌。缺乏鱗狀上皮細(xì)胞提示混合厭氧菌感染第六十五張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月你看見多少種形態(tài)？幾種細(xì)菌的混合形態(tài)，缺乏鱗狀上皮細(xì)胞=混合厭氧菌感染。如果是呼吸道標(biāo)本可能是吸入性肺炎。報(bào)告臨床醫(yī)生“提示吸入性肺炎”第六十六張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月呼吸道標(biāo)本中未被染色的，有折射的桿菌=抗酸桿菌第六十七張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月呈鏈排列的革蘭陽性球菌？或革蘭陽性分枝桿菌？肺中的結(jié)節(jié)吸出物，不規(guī)則“球菌”，分叉，無短鏈，鏈的末端的呈尖狀，都證明是分枝狀的革蘭陽性桿菌，可能是放線菌或諾卡菌（通常來自腦

21、或肺組織的標(biāo)本）第六十八張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月肺炎-可接受的不合格標(biāo)本評(píng)述很少的鱗狀上皮細(xì)胞10個(gè)/低倍視野可以在玻片上看到許多鱗狀上皮細(xì)胞，說明在采集時(shí)受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。很多的中性粒細(xì)胞很少有或沒有中性粒細(xì)胞免疫抑制的病人也會(huì)出現(xiàn)中性粒細(xì)胞減少中性粒細(xì)胞和上皮細(xì)胞都很少的標(biāo)本需要培養(yǎng)很多中性粒細(xì)胞混合有形態(tài)多樣的細(xì)菌（革蘭氏陰性桿菌，紡錘形，革蘭氏陽性球菌）吸入性肺炎標(biāo)本革蘭氏染色的典型形式，培養(yǎng)只會(huì)培養(yǎng)出正常菌群，所以革蘭氏染色是用于診斷的方法。許多或中等量的中性粒細(xì)胞，以一種形態(tài)的細(xì)菌為主酵母菌樣，酵母菌是一種很少引起肺炎的細(xì)菌，常由口腔污染成雙

22、革蘭氏陽性球菌，短鏈=肺炎鏈球菌革蘭氏陽性菌成群排列=金黃色葡萄球菌革蘭氏陰性球桿菌（?。?流感嗜血桿菌革蘭氏陰性桿菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他腸道菌革蘭氏陰性雙球菌=卡他莫拉菌許多不著色的有折射的桿狀細(xì)菌可能是肺結(jié)核，抗酸桿菌不能被革蘭氏染色所染色。呼吸道標(biāo)本的涂片評(píng)估模式第六十九張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月痰標(biāo)本的培養(yǎng)前處理：用無菌鹽水將痰洗滌3次，除去痰液表面的常居菌，加入等量的1%胰酶溶液（PH7.6），3530min，使痰液均值化后備用。分離培養(yǎng)：處理后的痰液分區(qū)劃線接種于血瓊脂平板、嗜血巧克力平板和麥康凱（或EMB、中國(guó)藍(lán)）瓊脂平板，置5%-10%CO2環(huán)境中，35

23、培養(yǎng)18-24h，根據(jù)菌落及形態(tài)（革蘭染色）特點(diǎn)，作出初步判斷。第七十張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月常用培養(yǎng)基作用及成分血平板：判讀細(xì)菌在體內(nèi)的基本生長(zhǎng)情況，分離培養(yǎng)苛氧和非苛氧菌?；A(chǔ)成分：特殊蛋白胨、淀粉、氯化鈉、瓊脂粉、蒸餾水。特殊成分：脫纖維綿羊血，鑒別溶血反應(yīng)和提供X因子（血紅素）。嗜血巧克力平板：分離培養(yǎng)苛氧菌，尤其適用與嗜血桿菌?；A(chǔ)成分：特殊蛋白胨、淀粉、氯化鈉、瓊脂粉、蒸餾水。特殊成分：血紅蛋白粉和NAD分別含X因子和V因子，嗜血桿菌生長(zhǎng)所必須；萬古霉素，抑制陽性菌生長(zhǎng)。麥康凱：用于檢測(cè)大腸菌群和腸道致病菌?；A(chǔ)成分：蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、蒸餾水。特殊成分：乳糖

24、和中性紅，大腸菌群為粉紅/紅色，腸道致病菌為透明；3號(hào)膽鹽和結(jié)晶紫，抑制陽性菌及真菌生長(zhǎng)。第七十一張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月平板的初步判讀條件致病菌：又為機(jī)會(huì)致病菌，在某種特定的條件下致病的細(xì)菌，為人體正常菌群，但其聚集部位發(fā)生改變、機(jī)體抵抗力降低或菌群失調(diào)時(shí)可致病。痰標(biāo)本的正常菌群主要以陽性菌為主。接板、讀板順序：血平板、嗜血巧克力平板、麥康凱平板血平板：反映細(xì)菌在體內(nèi)的生長(zhǎng)情況，用于半定量的判斷，觀察是否存在溶血、判斷優(yōu)勢(shì)菌。嗜血巧克力平板：抑制革蘭陽性菌，革蘭陰性菌及真菌生長(zhǎng)良好，不能用于半定量的判斷，主要用于流感嗜血桿菌鑒定。第七十二張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022

25、年6月平板的初步判讀流感嗜血桿菌：革蘭陰性短小桿菌，氧化酶、觸酶反應(yīng)不定，嗜血巧克力平板上形成微小、無色透明似露滴狀的菌落，有特殊氣味。血平板可形成“衛(wèi)星現(xiàn)象”。鑒別診斷：流感：V+X因子；副流感：V因子麥康凱平板：抑制革蘭陽性菌及真菌，革蘭陰性菌生長(zhǎng)良好，不能用于半定量的判斷，主要用于大腸菌群與腸道致病菌、非發(fā)酵菌的鑒定。大腸菌群包括埃希菌屬和腸桿菌科，發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸，菌落顏色粉紅或紅色。腸道致病菌、非發(fā)酵菌包括沙門、志賀、假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬等。不發(fā)酵乳糖，菌落顏色透明或半透明。第七十三張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)菌的初步鑒定一、判斷溶血溶血：不完全溶血，主要有草鏈、肺鏈（

26、濕潤(rùn)、臍窩狀、OP陽性）、糞腸、屎腸等。溶血：完全溶血，主要有金葡、溶葡、甲型/乙型鏈球菌、銅綠、大腸、李斯特菌、芽孢桿菌（污染）等。溶血：不溶血二、觀察菌落形態(tài)革蘭陰性桿菌：菌落較大、濕潤(rùn)、扁平、部分有特殊氣味（大腸、銅綠）；革蘭染色陰性。革蘭陽性球菌：菌落較小、干燥、凸起、部分有特殊氣味（葡萄球菌屬）；革蘭染色陽性。第七十四張，PPT共八十一頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)菌的初步鑒定三、生化鑒定革蘭陽性菌：觸酶陽性：葡萄球菌屬、李斯特菌屬等。觸酶陰性：鏈球菌菌、腸球菌屬等。凝固酶陽性：金葡、施氏葡、中間葡等凝固酶陰性：表葡、溶葡、頭葡等，致病力弱，需連續(xù)檢出才能確定為致病菌。革蘭陰性菌：氧化酶陽性：假單胞菌屬、弧菌屬、氣單胞菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、奈瑟菌屬等。氧化酶陰性：埃希菌屬、腸桿菌屬、克雷伯菌屬、沙門、志賀菌屬等。氧化酶不定：洋蔥、流感等。