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文檔簡介
1、 第五部分 非特異性免疫功能測定一、中性粒細胞趨化功能: 瓊脂糖凝膠板法原理:中性粒細胞在瓊脂糖凝膠內(nèi)向有趨化因子存在的方向移動,通過測定其移動距離,判定中性粒細胞趨化功能。試劑:趨化因子(酵母多糖活化人血清),白細胞懸液,培養(yǎng)基(RPMI1640培養(yǎng)基),15.0g/L瓊脂糖。方法:1.制備瓊脂糖凝膠板;2.打孔;3,中央孔加白細胞懸液,左側孔加趨化因子,右測孔加陰性對照;4.孵育;5.固定、染色;6.鏡檢。12結果: A(白細胞向趨化因子孔移動的距離) 趨化指數(shù) = B(白細胞向陰性對照孔移動的距離)參考值:新生兒趨化指數(shù)為2.02.5,成人為3.0 3.5。臨床意義:白細胞趨化功能缺陷見
2、于Chediak-Higashi綜合癥、遲鈍白細胞綜合癥、肌動蛋白功能不全癥、類風濕性關節(jié)炎、糖尿病等。3二、中性粒細胞吞噬功能測定 1: 硝基藍四氮唑試驗原理:中性粒細胞代謝中產(chǎn)生的氫與吞噬的硝基藍四 氮唑(nitroblue tetrazolium,NBT)反應,生 成藍黑色甲攢(formazan)顆粒,沉積胞漿,計 數(shù)一定數(shù)量的中性粒細胞和含甲攢顆粒細胞 (NBT細胞)所占的百分率。步驟: 待檢血加入等量的NBT孵育; 取一滴推片、染色,計數(shù)NBT陽性細胞百分 率。正常參考值:外周血NBT陽性百分率7154 臨床意義:(1) NBT陽性率 :慢性肉芽腫病(2) 慢性發(fā)熱原因鑒別: 細菌感染:NBT陽性率 病毒感染:不增高,或增高不明顯5 三、中性粒細胞吞噬功能測定 2 : 金葡菌吞噬試驗步驟:無菌采血加金葡菌懸液孵育涂片染色 油鏡計數(shù)吞噬率 = X 100正常參考值:吞噬率為915.7吞噬細菌的細胞數(shù)(X個)計數(shù)的細胞總數(shù)(200個)6四、巨噬細胞功能: 溶菌酶測定溶菌酶(lysozyme , LSZ),能與細菌牢固結合,并使其裂解,主要由單核巨噬細胞釋放。步驟:1 融化瓊脂,和靶細菌混勻,澆注于無菌平皿內(nèi)2 打孔,加待檢樣品和LSZ3 孵育4 測量溶菌環(huán)直徑,制作
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