血液學(xué)檢驗(yàn)緒論

1、血液學(xué)檢驗(yàn)檢驗(yàn)教研室馬雪蓮2016-1-10中西醫(yī)結(jié)合學(xué)院血液病離我們遠(yuǎn)嗎緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論概論血液學(xué)（hematology）臨床血液學(xué)（clinical hematology）臨床血液學(xué)檢驗(yàn)（hematologic laboratory science）概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論概論一 血液學(xué)（hematology）： 研究對象：血液、造血組織 研究內(nèi)容：概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論概論二 臨床血液學(xué)： 研究對象： 血液?。ㄔl(fā)、繼發(fā)）概論發(fā)展史與臨床關(guān)系病因、病機(jī)、臨床表現(xiàn)、診療緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系臨床科室-血液科緒 論概論 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)：概論

2、發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系臨床 血液學(xué)檢驗(yàn)檢驗(yàn)學(xué)血液理論血液病手段基礎(chǔ)對象緒 論概論 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)：臨床血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論發(fā)展史 # 血液探索史： 中國 西方 # 血液學(xué)研究史-顯微鏡發(fā)明： 一. 血細(xì)胞 二. 血栓與止血 三. 造血干細(xì)胞 四. 血液學(xué)檢驗(yàn)發(fā)展史概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論血液探索史概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系石器時(shí)代-砭石放血病公元前400年內(nèi)經(jīng)-藏神主血脈， 刺絡(luò)放血 “滴血認(rèn)親”吸血強(qiáng)身公元前400年希波克拉底公元500-1500)理發(fā)師用柳葉刀放血16世紀(jì)末期-荷蘭人制作簡易顯微鏡1628年哈維提出了血液循環(huán) 1674年列文虎克觀察血液 1799年開國總統(tǒng)華盛頓-死

3、于放血療法1840年-維多利亞女王家族血友病中國西方喬治華盛頓-美國首任總統(tǒng)（17321799）維多利亞女王（18191901）哈維-英國科學(xué)家（1578-1657）緒 論血液探索史我國古代：石器時(shí)代-砭石放血治病 公元前400年內(nèi)經(jīng)-“藏神”和“主血脈” ,刺絡(luò)放血 “滴血認(rèn)親”西方： 早期曾崇拜，神秘血液-吸血強(qiáng)身 古希臘醫(yī)圣希波克拉底（公元前460年-前370年）-血在四種體液中占主導(dǎo)地位 中世紀(jì)（公元500-1500)理發(fā)師用柳葉刀放血 16世紀(jì)末期-荷蘭人制作簡易顯微鏡， 1628年哈維提出了血液循環(huán) 1674年荷蘭亞麻商人安東尼凡列文虎克-血液由含有非常小的圓球狀物的水晶體般霧狀

4、的水組成，測量了它們的大小 1799年開國總統(tǒng)華盛頓-死于放血療法，20世紀(jì)逐漸淘汰 1840年-維多利亞女王的9子中，3/4男為血友病，5女為攜帶者-皇室遺傳病概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論血液研究發(fā)展史-顯微鏡發(fā)展概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系16世紀(jì)末-簡易顯微鏡-放大幾十倍 19世紀(jì)-普通光學(xué)顯微鏡-分辨率1微米（放大率極限2000倍） 顯微結(jié)構(gòu)2個(gè)世紀(jì)緒 論血液研究發(fā)展史-顯微鏡發(fā)展概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系電子顯微鏡-分辨率10nm （放大率上萬倍） 超微結(jié)構(gòu)（亞顯微結(jié)構(gòu)）緒 論血液研究發(fā)展史-顯微鏡發(fā)展概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系納米顯微鏡（掃描探針顯微鏡） 分辨率0.1nm （放大率百萬倍） 實(shí)現(xiàn)原子水平

5、的觀察及操控-納米生物學(xué)掃描探針示意圖納米顯微鏡照片緒 論血液研究發(fā)展史血細(xì)胞發(fā)展史16世紀(jì)到17世紀(jì)-顯微鏡-紅細(xì)胞、白細(xì)胞及血小板。19世紀(jì)-計(jì)數(shù)法的改善，紅細(xì)胞來源于骨髓及建立血細(xì)胞染色法-形態(tài)學(xué)階段。1900年-ABO血型確立-開創(chuàng)輸血領(lǐng)域。1945年-Coombs建立抗人球蛋白試驗(yàn)-對免疫血液學(xué)做出貢獻(xiàn)。1949年-鐮狀貧血是Hb異常而提出“分子病”-分子水平。概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論 1. 紅細(xì)胞認(rèn)識 概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系 血細(xì)胞發(fā)展史 1871-1876年-發(fā)現(xiàn)了紅細(xì)胞有攜氧能力，且參與組織的呼吸作用。 20世紀(jì)20年代-紅細(xì)胞體外保存需葡萄糖，30年代體外保存血液，40年代建

6、立血庫 1946年-紅細(xì)胞壽命120天左右，1959年以后對紅細(xì)胞糖代謝全面了解。 20世紀(jì)80年代-A、B型轉(zhuǎn)化為O型血成功，Rh陽性轉(zhuǎn)換為Rh陰性。緒 論一.血細(xì)胞發(fā)展史2 白細(xì)胞認(rèn)識1892-1930年-白細(xì)胞有趨化、吞噬和殺菌作用。1910年-單核細(xì)胞為“打掃戰(zhàn)場的清道夫”，1976年之后稱之為“單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)”。1959年-淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化為免疫母細(xì)胞并能分裂增殖，漿細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體，T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子。概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系白細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞分裂緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史-血細(xì)胞發(fā)展史 3 血小板認(rèn)識1842年發(fā)現(xiàn)血小板，40年后了解到止血和修復(fù)血

7、管作用，1923年發(fā)現(xiàn)其粘附和聚集功能。血小板超微結(jié)構(gòu)研究近年發(fā)現(xiàn)血小板顆粒 緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系二 血栓與止血的發(fā)展史 2000年以前，猶太人記載了血友病20世紀(jì)50年代后對凝血機(jī)制有了深入了解60年代凝血機(jī)制的“瀑布學(xué)說”得到公認(rèn)70年代發(fā)現(xiàn)新的凝血與纖溶相關(guān)因子80年代開展對纖維連接蛋白等粘附因子的研究90年代至今，完善并拓寬“瀑布學(xué)說”，拓寬血栓與止血的研究領(lǐng)域。分子水平研究：對內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、凝血和纖溶等在血栓中的作用從分子水平有了更深入的了解。發(fā)展史緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系1896年，Wilson在著作中用到“干細(xì)胞”1981年Evans和Martin從小鼠胚囊內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分

8、離出胚胎干細(xì)胞發(fā)展史 三 造血干細(xì)胞發(fā)展史緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史三 造血干細(xì)胞發(fā)展史 20世紀(jì)提出造血干細(xì)胞概念， 60年代初，Tills等用致死量射線照射 小鼠進(jìn)行骨髓移植，發(fā)現(xiàn)造血干細(xì)胞 1984年，Civin提出表達(dá)CD34抗原細(xì)胞即造血干細(xì)胞。1979年，體外成功培養(yǎng)人造血祖細(xì)胞。1990年，造血干細(xì)胞移植治療遺傳病、白血病和再障。緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史三 造血干細(xì)胞發(fā)展史 干細(xì)胞(stem cell)是一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細(xì)胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。 胚胎干細(xì)胞 （ES細(xì)胞） 1 根據(jù)發(fā)育階段 成體干細(xì)胞 存在于成熟個(gè)體各組織中的干細(xì)胞

9、2 根據(jù)發(fā)育潛能 全能干細(xì)胞（TSC細(xì)胞）：胚胎干細(xì)胞 多能干細(xì)胞：造血干細(xì)胞，神經(jīng)干細(xì)胞 專能干細(xì)胞 ：肝臟干細(xì)胞，腸上皮干細(xì)胞 緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史三 造血干細(xì)胞發(fā)展史胚胎干細(xì)胞是早期胚胎中分離出來的一類細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系1 胚胎干細(xì)胞研究在美國頗具爭議發(fā)展史三 造血干細(xì)胞發(fā)展史2 美國科學(xué)家從成體動物提取成體干細(xì)胞，并不能轉(zhuǎn)化成各種器官組織，不能取代胚胎干細(xì)胞。3 iPS細(xì)胞是將多能遺傳基因?qū)肫つw等細(xì)胞中而成。讓普通體細(xì)胞“初始 化”具備干

10、細(xì)胞功能即iPS細(xì)胞iPS細(xì)胞和ES細(xì)胞除了不能生成胚胎以外，可以產(chǎn)生所有細(xì)胞，如用于醫(yī)療，那么理論上可以治愈所有疾病凡是不好的組織去除，替換為重新生長的正常組織。緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系血細(xì)胞是造血干細(xì)胞增殖和分化的結(jié)果。不斷生成新細(xì)胞替代衰老退變細(xì)胞，維持體內(nèi)各類細(xì)胞恒定。造血干細(xì)胞是由胚胎干細(xì)胞發(fā)展而來，具有高度自我更新和多向分化兩個(gè)基本特征發(fā)展史三 造血干細(xì)胞發(fā)展史緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史發(fā)展史無染色的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期染色的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期骨髓組織學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)時(shí)期細(xì)胞免疫學(xué)（免疫化學(xué)）檢驗(yàn)時(shí)期細(xì)胞遺傳學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期分子生

11、物學(xué)及基因檢驗(yàn)時(shí)期緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史1 無染色的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期 （17世紀(jì)后期19世紀(jì)中期）1852-1867年，血細(xì)胞顯微鏡計(jì)數(shù)（包括血細(xì)胞吸管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板）緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史2 染色的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（19世紀(jì)中期起)1856年，Erb用某些合成染料染血液1879年，Ehrlich(德國細(xì)菌學(xué)家歐立希）用紡織染料染色固定血涂片1898年，Ehrlich等報(bào)告三酸染色法（橘黃G、甲基綠及酸性品紅組成的混合染色液）1891年，Romanowsky（羅曼若夫斯基）用改良的甲基藍(lán)混合染色液鑒定瘧原蟲，并可區(qū)分不同的

12、白細(xì)胞1902年, Wright,Giemsa改進(jìn)染色劑Romanowsky型混合物染色劑具有良好的染色效果，直到現(xiàn)在其基本配方仍被廣泛使用，這一混合染色劑由甲基藍(lán)、伊紅和天青組成，依據(jù)染色后細(xì)胞的大小、形狀及色彩深淺進(jìn)行鑒別緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史2 染色的血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（19世紀(jì)中期起)緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史3 骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)20年代起）1903年，Wolff首創(chuàng)骨髓穿刺術(shù)，用于動物實(shí)驗(yàn)。同年，Pianess應(yīng)用于人體1929年，Arinkin用改進(jìn)的簡便胸骨穿刺吸引法，在住院病人身上獲取胸骨骨髓涂片，為

13、骨髓檢查奠定了基礎(chǔ)緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史4 骨髓組織學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)20年代-70年代進(jìn)入快速發(fā)展時(shí)期） 骨髓病理組織學(xué)研究與骨髓抽吸物涂片檢查幾乎同時(shí)起步 20世紀(jì)70年代起，骨髓活組織工具改良以及新技術(shù)應(yīng)用，特別是不脫鈣組織塊塑料包埋半薄切片技術(shù)的應(yīng)用，使骨髓病理組織學(xué)檢查快速發(fā)展緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史5 細(xì)胞化學(xué)染色檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)初起,5070年代為鼎盛時(shí)期）1867年，鐵的普魯士藍(lán)染色法，后被應(yīng)用于骨髓鐵染色1909年，過氧化物酶染色 瑞士吉姆薩染色 鐵染色 POX染色緒 論概論發(fā)展史與臨床關(guān)系發(fā)展史5 細(xì)胞化學(xué)染

14、色檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)初起,5070年代為鼎盛時(shí)期）1939年，蘇丹黑B染色1939年，1955年，中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色1960年，過碘酸雪夫反應(yīng)1953年1977年，各種酯酶染色急性粒細(xì)胞白血?。∕2a）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色正常血細(xì)胞PAS染色1.原始粒細(xì)胞，呈弱陽性；2.幼稚粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性；3.中性桿狀核粒細(xì)胞，呈強(qiáng)陽性 緒 論概論發(fā)展史與臨床關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史6 細(xì)胞免疫學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)50年代起，80年代進(jìn)入快速發(fā)展時(shí)期）20世紀(jì)40-70年代，免疫熒光標(biāo)記技術(shù),免疫酶標(biāo)技術(shù),ELISA技術(shù)20世紀(jì)80年代，統(tǒng)一命名白細(xì)胞分化抗原（C

15、D）、白血病免疫表型分析7 細(xì)胞遺傳學(xué)檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)50年代起,80年代進(jìn)入快速發(fā)展時(shí)期）20世紀(jì)40年代，腫瘤細(xì)胞的染色體理論20世紀(jì)50年代，確認(rèn)人類染色體46條，標(biāo)志著人類細(xì)胞遺傳學(xué)開始20世紀(jì)60年代，慢?；颊叩陌籽〖?xì)胞中發(fā)現(xiàn)Ph染色體，第一次將染色體異常與特定腫瘤類型聯(lián)系在一起，是腫瘤細(xì)胞遺傳學(xué)史上里程碑20世紀(jì)7080年代，白血病細(xì)胞遺傳學(xué)表型與形態(tài)學(xué)類型與臨床治療和預(yù)后，腫瘤的生物學(xué)有關(guān)緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史四 血液學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展史8 分子生物學(xué)及基因檢驗(yàn)時(shí)期（20世紀(jì)80年代起，90年代進(jìn)入快速發(fā)展期）1983年，BCR-ABL融合基因20世紀(jì)90年代，分子血液學(xué)

16、時(shí)代，應(yīng)用分子生物學(xué)的思維，評估患者預(yù)后，個(gè)體化治療等緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系發(fā)展史1930年，卡爾蘭德斯坦納(KarlLandsteiner) （美籍奧地利人），發(fā)現(xiàn)ABO血型 為輸血、器官移植、胎母不相容和親子鑒定的理論基礎(chǔ)。 蘭德斯坦納生日6月14日定 為 “世界獻(xiàn)血者日”The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1930 緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系2. J.E.Murray默里（美國人）和E.D. Thomas托馬斯（美國人） -for their discoveries concerning organ and cell transplan

17、tation in the treatment of human diseaseJoseph E. MurrayE. Donnall ThomasThe Nobel Prize in Physiology or Medicine 1990緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系鄧家棟 (19062004) 我國血液學(xué)創(chuàng)始人之一、著名血液學(xué)家、醫(yī)學(xué)教育家；主持建立中國第一個(gè)輸血及血液學(xué)研究所-天津輸血及血液研究所；重視醫(yī)學(xué)教育，參與恢復(fù)八年制的醫(yī)學(xué)教育。主編鄧家棟臨床血液學(xué)、內(nèi)科學(xué)基礎(chǔ)、診斷學(xué)基礎(chǔ)、臨床血液學(xué)等。中國血液學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的著名專家王振義（1924.11.30- ）內(nèi)科血液學(xué)專家，中國工程院院士，法國科

18、學(xué)院外籍院士，瑞金醫(yī)院終身教授。國內(nèi)血栓與止血專業(yè)的開創(chuàng)者之一，其主編的血栓與止血基礎(chǔ)與臨床在醫(yī)學(xué)上的最主要貢獻(xiàn)還有首次利用全反式維甲酸誘導(dǎo)急性早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞分化。概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系陳竺（1953.8- ）1995年至2007年任上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院上海血液學(xué)研究所所長1998年5月起任國家人類基因組南方研究中心主任2000年至2007年任中國科學(xué)院副院長2007年6月起任衛(wèi)生部部長（至2013年3月）2013年3月14日，當(dāng)選全國人大常委會副委員長 概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系陳竺在血液學(xué)、分子生物學(xué)等領(lǐng)域有較高造詣，取得了突破性成果，曾獲得法國抗癌聯(lián)盟盧瓦

19、茲獎、國家科技進(jìn)步二等獎等多個(gè)獎項(xiàng)，是第三世界科學(xué)院院士、歐洲科學(xué)院外籍院士、美國科學(xué)院外籍院士、法國科學(xué)院院士 1.上世紀(jì)80年代，從分子水平上揭示了全反式維甲酸治療早幼粒白血病的原理，在國際上填補(bǔ)了白血病研究的空白點(diǎn) 2.在世界上首次闡明三氧化二砷（砒霜）治療白血病的分子機(jī)理緒 論概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系陳賽娟（1951.5.21- ） 遺傳學(xué)專家。工程院院士，現(xiàn)任上海交大醫(yī)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任、瑞金醫(yī)院血研所執(zhí)行所長等。主要從事白血病遺傳學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)一組新染色體易位的白血病，建成和發(fā)展了一整套白血病分子遺傳學(xué)和分子生物學(xué)診斷體系；建立了移植性和轉(zhuǎn)基因白血病動物模型，為從細(xì)胞和整體動物水平研究白

20、血病發(fā)生的分子機(jī)制及白血病誘導(dǎo)分化的機(jī)制提供了良好的模型 概論發(fā)展史與檢驗(yàn)關(guān)系緒 論 臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)的關(guān)系(一) 血液學(xué)與臨床一 血液系統(tǒng)疾病的分類及特點(diǎn)分類原發(fā)血液病繼發(fā)血液病原發(fā)于血液和造血組織的，并以血液學(xué)異常為主要表現(xiàn)的疾病，多有其獨(dú)特的血液學(xué)發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)他器官或組織的病變，通過某些機(jī)制累及血液和造血組織而出現(xiàn)血液異常，其轉(zhuǎn)歸常取決于原發(fā)疾患。特點(diǎn) 血液病的代表性癥狀和體征往往缺乏特異性 實(shí)驗(yàn)室檢查在血液病的診斷中占有突出地位 非血液病可同時(shí)合并血液病 繼發(fā)血液學(xué)異常相當(dāng)多見 血液病常具有非血液病表現(xiàn)的臨床特征研究血液病起點(diǎn)是細(xì)胞學(xué)水平，因此血液病診斷更依賴實(shí)驗(yàn)室檢查，從某種意義上說，實(shí)驗(yàn)室檢查是血液病確診的關(guān)鍵，所以形成了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床血液學(xué)的交叉學(xué)