葉綠素提取分離和理化性質(zhì)

1、學生姓名學號20062501302專業(yè)生物科學年級、班級06科三課程名稱植物生理學實驗實驗項目實驗類型驗證設計綜合實驗時間08年11月11日實驗指導老師冷佳奕、黃勝琴實驗評分葉綠素提取分離和理化性質(zhì)實驗材料：大葉紫薇葉片實驗操作：實驗結果：理化性質(zhì)現(xiàn)象熒光現(xiàn)象透射光一側呈綠色反射光一側呈血紅色光破壞作用黑暗處試管中溶液呈綠色強光處試管中溶液呈褐綠色銅代反應試管中溶液顏色變化：褐綠色f綠色葉綠素的化學性質(zhì)很不穩(wěn)定，容易受強光的破壞，特別是葉綠素與蛋白質(zhì)分離后，破壞更快。葉綠素中的鎂可被H+取代而生成褐綠色的去鎂葉綠素。加入銅鹽作用，去鎂葉綠素則成為綠色的銅代葉綠素。思考題：為什么用80%有機溶劑

2、提取葉綠素？由于植物葉子中含有水分，用純丙酮提取，其提取液中丙酮最終濃度近似80%。在提取葉綠素過程中加碳酸鈣的作用？對量有何要求？加入碳酸鈣只要是為了保護色素，防止在研磨的過程中被破壞。加入少許即可若加入過多，會影響滲透壓破壞葉綠素。紙層析法分離葉綠素的原理？其中流動相和固定相分別是什么？利用混合物各組分在流動相和固定相兩種不同溶劑中的分配系數(shù)差異，將它們分離。流動相是四氯化碳，固定相是濾紙上的水。為什么綠色葉子中的葉綠素在光下不被破壞？因為綠色葉子中的葉綠素與蛋白質(zhì)結合，所以不被破壞。銅在葉綠素中取代鎂的作用，有何使用意義？銅代葉綠素很穩(wěn)定,在光下不易被破壞,故常用此法制做植物的原色標本學

3、生姓名學號20062501302專業(yè)生物科學年級、班級06科三課程名稱植物生理學實驗實驗項目實驗類型驗證設計綜合實驗時間08年11月11日實驗指導老師冷佳奕、黃勝琴一實驗評分葉綠素含量的測定實驗材料：大葉紫薇葉片實驗操作：稱取O.lg大葉紫薇葉片加入碳酸鈣、石英砂、無水丙酮研磨靜置lOmin測定叫63、OD64580%丙酮定容至25ml過濾，取濾液實驗結果：OD0.078663OD0.418645代入公式得出葉綠素濃度TOC o 1-5 h zC=12.7OD-2.69OD=-O.l3382mg/La663645C=22.9OD-4.68OD=9.2O7l6mg/Lb645663C=8.02O

4、D+20.21OD=9.O7334mg/LT663645代入公式得出葉綠素含量葉綠素含量=CX25/100X1/w物質(zhì)含量(mg/g)葉綠素a-0.03346葉綠素b2.30179葉綠素2.268335分析：測定葉綠素含量的過程中造成的偶然誤差過大，測得數(shù)值代入公式后得出負值，因此實驗過程應盡量減少偶然誤差，可做平行實驗求平均值以減少誤差。思考題：確定溶液測定光密度值時的波長依據(jù)？葉綠素a的最大吸收峰在663nm,葉綠素b的最大吸收峰在645nm，葉綠素a和b的吸收光譜曲線彼此有重疊。如何計算葉綠素？表示單位？公式中k值與什么因素有關？根據(jù)Lambert-Beer定律，最大吸收光譜峰不同的兩個

5、組分的混合液，它們的濃度C與光密度OD之間有如下的關系：OD=Ck+Ckaa1bb1OD=Ck+Ckaa2bb2C、C表示單位g/L,公式中k值與組分、提取液、濃度有關。ab要獲得較準確葉綠素含量結果，在操作過程中注意哪些影響因素？要獲得較準確葉綠素含量結果，應該注意提取過程時充分研磨和洗滌研缽時盡量洗滌充分，確保提取液中的葉綠素含量與葉片的葉綠素含量接近。提出優(yōu)化實驗的想法。由于本次實驗是根據(jù)Lambert-Beer定律間接測定葉綠素的含量，因此實驗中的偶然誤差對實驗結果有很大的影響，因此應從設置平衡實驗著手。學生姓名學號20062501302專業(yè)生物科學年級、班級06科三課程名稱植物生理學

6、實驗實驗項目實驗類型驗證設計綜合實驗時間08年11月11日實驗指導老師冷佳奕、黃勝琴實驗評分紅墨水測定種子活力及玉米種子萌發(fā)實驗材料：玉米種子實驗操作：稱取0.1g大葉紫薇葉片加入碳酸鈣、石加入15mlNaAc緩沖液(pH=5.0)洗研缽英砂、無水丙酮研磨收集研磨液與洗液，4000rpm離心10min一取上清液70C水浴5min一分別取0.5ml上清液+0.5ml4mg/ml糊精40C水浴0min和10min分別加入5mli2-ki溶液測定OD560實驗結果：玉米種子活力玉米種子萌發(fā)率0.950.325思考題：TTC法和紅墨水法測定種子活力的優(yōu)點與不足？優(yōu)點：都能簡單、快速、直觀地測定種子活力。不足：只是測定種子相對的某個方面的活力，并不能完全