致病性微生物的實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)基礎(chǔ)

1、致病性微生物的實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)基礎(chǔ)何 浙 生1一、常見(jiàn)細(xì)菌性傳染病的病原學(xué)及 血清學(xué)診斷基礎(chǔ)法定細(xì)菌性傳染病種類(lèi)：甲類(lèi)傳染?。菏笠?、霍亂；乙類(lèi)傳染?。杭?xì)菌性痢疾、傷寒和副傷寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性腦脊髓膜炎、猩紅熱、鉤端螺旋體病、布魯氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹傷寒；丙類(lèi)傳染?。悍谓Y(jié)核、麻風(fēng)病、感染性腹瀉。2采樣注意事項(xiàng)：時(shí)間性針對(duì)性防護(hù)與消毒無(wú)菌操作標(biāo)記昆蟲(chóng)、動(dòng)物標(biāo)本3臨 床 與 尸 解 取 材 參 考 表 病 人 取 樣 解 剖 取 樣 待診 血 尿 便 痰 唾 咽 腦 腺 局 肝 脾 肺 腸 淋 骨 腦病種 液 洗 脊 穿 部 巴 髓 液 液 液 穿 結(jié) 刺斑疹傷寒 + +鼠

2、疫 + + + + + + + + +霍 亂 + +炭 疽 + + + + + + + + + +布 病 + + + + + +傷寒、副傷寒 + + + +痢 疾 + 肉毒毒素中毒 +鉤 體 病 + + 注:+代表一定要取樣，+代表亦應(yīng)取樣4樣品保存：冷藏保存保存液保存5標(biāo)本運(yùn)送：嚴(yán)格包裝，外表消毒，編號(hào)，登記，貼標(biāo)簽，嚴(yán)防容器破碎、滴漏，避免活標(biāo)本逃逸等；附送檢單，填明名稱(chēng)、數(shù)量、地點(diǎn)、時(shí)間等 ；專(zhuān)人護(hù)送，不要委托攜帶，盡快到達(dá)目的地 ；妥善保存，運(yùn)送途中避免高溫、日光、過(guò)度震動(dòng)等 。6非污染材料檢驗(yàn)程序動(dòng) 物非污染樣品保存一部分(以備再查)血清學(xué)檢查鏡 檢細(xì)菌培養(yǎng)查Ag查Ab染色及非染色免

3、疫熒光鏡檢 鑒定鏡檢 分菌血清學(xué)檢驗(yàn)G染色及其他染色免疫熒光G染色及其他染色免疫熒光鏡檢鑒定查抗原查抗體7被污染材料檢驗(yàn)程序樣品處理污染樣品保存一部分(以備再查)上清或?yàn)V過(guò)液 (病毒)沉淀物或?yàn)V阻物(經(jīng)一定稀釋)接種小鼠查肉毒毒素接種幼貓查葡萄球菌腸毒素乳鼠.雞胚.組織培養(yǎng)病毒、立克次體等細(xì)菌培養(yǎng)查抗原CFT協(xié)同SAT反向HATHAIT等鏡檢動(dòng)物細(xì)菌培養(yǎng)G染色及其它染色I(xiàn)FT查抗原查抗體分菌鏡檢鑒定8細(xì)菌病原學(xué)診斷檢樣處理一般樣品處理：包括洗脫、提取、濃縮和抗雜菌等；節(jié)肢動(dòng)物標(biāo)本處理蚤類(lèi)：制作標(biāo)本時(shí)擠出前胃，涂片，分菌時(shí)可用單體也可用群體，研碎后接種培養(yǎng)。蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。蠅：用選

4、擇性增菌液洗，培養(yǎng)洗液。蚊：對(duì)細(xì)菌性傳染病意義不大，主要時(shí)對(duì)病毒性傳染病意義較大 9病 原 鑒 定菌屬的確定細(xì)菌種型的確定細(xì)菌染色 細(xì)菌生化反應(yīng)試驗(yàn) 糖代謝試驗(yàn) 有機(jī)酸、銨鹽反應(yīng) 蛋白、氨基酸、含氮化合物 呼吸酶類(lèi)試驗(yàn) 毒性酶類(lèi)試驗(yàn) 膽汁（膽鹽）溶菌試驗(yàn) 10血清學(xué)診斷基礎(chǔ)知識(shí)（1） 抗原、抗體和補(bǔ)體抗原:完全Ag、半Ag、構(gòu)成Ag條件，醫(yī)學(xué)上主要Ag類(lèi)別、共同Ag與異嗜性Ag ；抗體:基本結(jié)構(gòu)、特點(diǎn)、功能、類(lèi)別等 ；補(bǔ)體:概念、組成、功能 11血清學(xué)診斷基礎(chǔ)知識(shí)（2）抗原、抗體結(jié)合原理12血清學(xué)診斷基礎(chǔ)知識(shí)（3） 抗原、抗體反應(yīng)特點(diǎn)特異性 階段性 比例性 可逆性 13血清學(xué)診斷基礎(chǔ)知識(shí)（4）

5、 抗原、抗體反應(yīng)影響因素AgAb電解質(zhì)溫度pH14血清學(xué)診斷基本方法：玻片凝集試驗(yàn)試管凝集試驗(yàn)抗球蛋白凝集試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)ELISA試驗(yàn)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)免疫熒光試驗(yàn)15二、常見(jiàn)病毒性傳染病的實(shí)驗(yàn)診斷學(xué) 基礎(chǔ)法定病毒性傳染病種類(lèi)：（甲類(lèi)傳染?。┮翌?lèi)傳染?。翰《拘愿窝?、艾滋病、脊髓灰質(zhì)炎、麻疹、 流行性出血質(zhì)熱、狂犬病、流行性乙型腦炎。丙類(lèi)傳染?。毫餍行愿忻?、流行性腮腺炎、風(fēng)疹驪、急性出血性 結(jié)膜炎。16臨床診斷 血清學(xué)診斷實(shí)驗(yàn)室診斷 病毒學(xué)診斷 分子病毒學(xué)診斷病毒性疾病的確診 臨床診斷實(shí)驗(yàn)室診斷病 毒 病 的 診 斷17采 樣 標(biāo) 本血液 腦脊液糞便咽分泌物（咽拭子）尿皰疹液結(jié)膜拭子痰、鼻分泌物尸檢

6、：腦、肝、肺、腎、心、胃、淋巴結(jié)等器官活檢：病變器官 18 基本方法： 雞胚 病毒培養(yǎng)與分離 動(dòng)物 細(xì)胞 細(xì)胞陽(yáng)性的判斷 尿液中抗原陽(yáng)性 雞胚 絨毛尿囊膜的病變 死亡 動(dòng)物 發(fā)病與死亡 培養(yǎng)液PH變化 細(xì)胞 干擾試驗(yàn) CPE 鑒定病毒 加標(biāo)準(zhǔn)血清后的中和試驗(yàn) 含抗原材料的抗原性檢測(cè) 電子顯微鏡病毒檢測(cè)病 毒 學(xué) 檢 診191、查抗體IgG 早期及恢復(fù)期；IgM4周內(nèi)；IgA 28周。基本方法： 血凝抑制試驗(yàn) （例如流感、 麻疹等） 間接血凝抑制試驗(yàn) 對(duì)流電泳 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 酶標(biāo)抗體染色試驗(yàn) ELISA試驗(yàn) 免疫螢光試驗(yàn) 中和試驗(yàn)等血 清 學(xué) 檢 診20 基本方法： 血凝試驗(yàn) 間接血凝試驗(yàn) 血球吸