實(shí)驗(yàn)十六包合物的制備

1、 實(shí)驗(yàn)十六包合物的制備一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握飽和水溶液法制備包合物的工藝2掌握包合物形成的鑒別方法。二、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)包合物是一種分子囊，由一種形狀和大小適宜的小分子（通稱客分子），全部或部分嵌入一定形狀的分子（通稱主分子）的空穴內(nèi)形成。包合物是主分子與客分子之間相互作用而形成一種復(fù)合物（或稱包結(jié)構(gòu)），因此不改變二者的化學(xué)性質(zhì)。包合物有多種類型，以環(huán)糊精為包材制備的包合物為單分子包合物。環(huán)糊精分子由數(shù)個(gè)葡萄糖環(huán)組成。常用的a、B、Y環(huán)糊精，分別具有6、7、8個(gè)葡萄糖單元，其分子結(jié)構(gòu)上有一定大小的空穴，具有空穴內(nèi)部疏水、外部親水的特性。環(huán)糊精形成的包合物在水溶液中仍以包合物的形式存在，這樣大大減少原來藥物

2、分子與周圍環(huán)境的接觸，從而改善了藥物的穩(wěn)定性。藥物制成包合物后，可增加藥物的溶解度與溶出速度，增加藥物的穩(wěn)定性，提高藥物的生物利用度，減少刺激性等毒副作用，掩蓋異味、臭氣、揮發(fā)性以及改變藥物的物理狀態(tài)或具有緩釋作用。符合下列條件之一的有機(jī)藥物，通常都可以與環(huán)糊精包合成包合物：藥物結(jié)構(gòu)中的原子數(shù)大于5個(gè)且藥物的稠環(huán)小于5個(gè)；藥物分子量在100400之間；藥物在水中的溶解度小于10mg/ml；藥物的溶點(diǎn)低于250C。也有藥物符合條件而不能與環(huán)糊精包合的，如幾何形狀不合適，也有因環(huán)糊精用量不合適而不能包合的。無機(jī)藥物大多數(shù)不宜與環(huán)糊精包合。環(huán)糊精包合物制備方法很多，有飽和水溶液法、研磨法、噴霧干燥法

3、、冷凍干燥法以及中和法等，其中以飽和水溶液法（亦稱重結(jié)晶法或共沉淀法）為最常用。主分子為B環(huán)糊精，它空穴大小適中（即700800pm）,且在水中的溶解度（g/100ml）隨溫度升高而加大，當(dāng)20、40、60、80以及100C時(shí)，溶解度分別為1.85、3.7、8.0,18.3以及25.6。采用飽和水溶液法，即主分子為飽和水溶液與客分子包合作用完成后，可降低溫度，客分子進(jìn)入主分子空穴中，以分子間力相連接成的包合物可從水中析出，便于分離出包合物。本實(shí)驗(yàn)的客分子為陳皮揮發(fā)油（或薄荷油），制成包合物后，可使陳皮揮發(fā)油（或薄荷油）減少揮發(fā)，液態(tài)油改變成固體粉末，便于配方，并具有緩釋作用。三、實(shí)驗(yàn)用儀器與藥

4、品天平、揮發(fā)油提取器、控溫?cái)嚢杵鳌⒘客病?、過濾裝置、干燥器、硅膠G板、差示熱分析儀等。陳皮粉末、蒸餾水、無水硫酸鈉、無水乙醇、95%乙醇、B-環(huán)糊精、薄荷油、正已烷、氯仿、香莢蘭醛、30%硫酸乙醇溶液等。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與操作（一）陳皮揮發(fā)油-B環(huán)糊精包合物的制備1陳皮揮發(fā)油的制備取陳皮粉末120g，加入10倍量的蒸餾水，經(jīng)揮發(fā)油提取器提取2.5h，得淡黃色渾濁液體，用無水硫酸鈉脫水后，得淡黃色油狀澄明液體，即陳皮揮發(fā)油，備用。陳皮揮發(fā)油乙醇溶液的制備量取陳皮揮發(fā)油2ml（約1.75g）加無水乙醇10ml，溶解，即得，備用。B環(huán)糊精飽和水溶液的制備稱取B環(huán)糊精16g,加蒸餾水200ml,在60

5、C制成飽和水溶液，保溫，備用。陳皮揮發(fā)油-B環(huán)糊精包合物的制備用陳皮揮發(fā)油乙醇溶液與B環(huán)糊精飽和水溶液按10ml與200ml分別量取。將B環(huán)糊精飽和水溶液置500ml燒杯中，60C恒溫?cái)嚢?，將陳皮揮發(fā)油乙醇溶液緩緩滴入攪拌的飽和水溶液中,待出現(xiàn)渾濁逐漸有白色沉淀析出,繼續(xù)攪拌1h后，取出燒杯，再繼續(xù)攪拌至室溫，最后用冰浴冷卻，待沉淀析出完全后，抽濾至干，50C以下干燥，稱重，計(jì)算收得率。操作注意自制陳皮揮發(fā)油一定要脫水，才能得澄明油狀液體。B環(huán)糊精飽和水溶液要保溫于60C，否則不能得到澄清水溶液。包合物制備過程中，包合溫度應(yīng)控制在601C，攪拌時(shí)間應(yīng)充分，否則會(huì)影響收率。薄荷油-B環(huán)糊精包合物

6、的制備稱取B環(huán)糊精4g,置100ml的帶塞瓶中，加入50ml蒸餾水，加熱溶解，降溫至50C，加入薄荷油1ml,50C攪拌2.5h,過濾，用無水乙醇5ml洗滌共3次至表面近無油漬為止，將包合物置干燥器中干燥，稱重，計(jì)算收率。包合物形成的鑒別方法薄層色譜分析(TLC)硅膠G板的制作按硅膠G-0.3%羧甲基纖維素鈉水溶液1:3(g:ml)的比例，調(diào)勻，鋪板，110C活化1h,備用。樣品的制備陳皮揮發(fā)油乙醇溶液為樣品a；陳皮揮發(fā)油-B環(huán)糊精包合物用無水乙醇適量，振搖，取上清液為樣品b；包合物經(jīng)揮發(fā)油提取器提取包合物中陳皮揮發(fā)油，且經(jīng)無水硫酸鈉脫水后的淡黃色澄明油狀液體為樣品c(此油量可用于計(jì)算包合物中

7、含油率)，用無水乙醇配成樣品a的濃度。薄荷油B環(huán)糊精包合物0.5g，加95%乙醇2ml溶解，過濾，濾液為樣品a；薄荷油2滴，加入95%乙醇2ml溶解為樣品boTLC條件陳皮揮發(fā)油-B環(huán)糊精包合物：取樣品a、b及c分別約10ul,點(diǎn)于同一硅膠G板上，用正已烷-氯仿(40:1)為展開劑，展開前將板置展開槽中飽和10min,上行展開，展距15cm,5%香莢蘭醛濃硫酸液為顯色劑，噴霧烘干顯色。也可用30%硫酸乙醇溶液為顯色劑，噴霧后烘烤15min,即可顯色。薄荷油-B環(huán)糊精包合物：取樣品a與b點(diǎn)于同一硅膠板上，用含15%石油醚的乙酸乙酯為展開劑，展開前將板置展開槽中飽和5min,上行展開，1%香莢蘭醛

8、硫酸液為顯色劑，噴霧烘干顯色。差示熱分析(DTA)樣品的制備：陳皮揮發(fā)油為樣品a,B環(huán)糊精為樣品b,包合物為樣品c,按包合物中的比例量稱取陳皮揮發(fā)油與B環(huán)糊精，制成陳皮揮發(fā)油與B環(huán)糊精的混合物為樣品doDTA條件：用a-Al2O3為參比物，靜態(tài)空氣為氣氛，量程為土100叮，升溫速度為10C/min,走紙速度600mm/h,樣品與參比物的稱量大致相等。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論(一)計(jì)算包合物的含油率、利用率及收得率包合物中實(shí)際含油量(g)含油率二X100%包合物量(g)包合物中實(shí)際含油量(ml)2利用率=X100%投油量(ml)包合物實(shí)際量(g)3包合物收率=X100%B環(huán)糊精(g)+投油量(g)(二)包合物形成的鑒別繪制TLC圖，說明包合前后的特征斑點(diǎn)與Rf值的情況，說明包