華北理工藥物分析課件19中藥及其制劑分析概論

1、第十九章中藥及其制劑分析概論 樣品預(yù)處理的原理與常用預(yù)處理方法 樣品預(yù)處理的目的：1.將被測成分有效地從樣品中釋放出來，并制 成便于分析測定的穩(wěn)定試樣。2.除去雜質(zhì)，純化樣品。3.富集濃縮或衍生化，便于含量較低成分測定。4.使試樣的形式及所用溶劑符合分析測定要求。一、樣品預(yù)處理的原則1.消除干擾因素2.盡可能完整保留待測組分，避免待測組分在預(yù)處理過程中丟失。3.防止樣品在制備過程中被染，盡可能減少無關(guān)化合物引入。4.使被測組分濃縮5.便于成批處理試樣，特別是自動化在線技術(shù)選擇最佳預(yù)處理過程應(yīng)考慮：1.被測組分的理化性質(zhì)2.樣品的化學(xué)組成3.干擾物質(zhì)的類型4.樣品組分處理過程中的穩(wěn)定性5.樣品在

2、收集、儲存和預(yù)處理過程中容器的污染6.適合分析儀器的樣品最終使用的溶劑7.預(yù)處理過程盡量簡單，有高的準(zhǔn)確度和精密度8.預(yù)處理的最后一步應(yīng)使被測組分富集二、常用預(yù)處理技術(shù)1.分離純化技術(shù)：沉淀、結(jié)晶、回流提取、 萃取、柱層析2.濃縮技術(shù)：凍干、紅外干燥、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、 氣流吹蒸3.衍生化技術(shù)與標(biāo)記技術(shù)：酯化、?；⑼?基化、硅烷化、硼烷化、環(huán)化、離子化4.消解技術(shù)：金屬 適于分析的狀態(tài) 經(jīng)有機(jī)破壞和不經(jīng)有機(jī)破壞2種方法 如：氧瓶燃燒法、強(qiáng)酸破壞法取樣一、抽樣二、樣品的粉碎粉碎的目的： 保證所取樣品均勻有代表性 使樣品中被測組分能被完全提取出來粉碎設(shè)備：粉碎機(jī)、各種食品料理機(jī)、銅沖、缽體、高速勻漿機(jī)或

3、玻璃勻漿器等水蜜丸、水丸、糊丸、蠟丸、濃縮丸等可直接研細(xì)或粉碎大蜜丸:用小刀或剪刀將其切成小塊，加硅藻土研磨分散。片劑:用小刀刮去糖衣層，置乳缽中研細(xì)即可。栓劑:可使用小刀將其切成小塊。散劑、顆粒劑、硬膠囊劑:一般不需粉碎 可直接提取。樣品的提取 一、提取方法 1.冷浸法適用：熱不穩(wěn)定的樣品 易溶出樣品， 植物性粉末 不適宜：動物性粉末方法：稱取一定量樣品置于帶塞容器內(nèi)，加入適量溶劑（樣品量的1050倍），稱重，浸泡提取，浸泡時間1224小時。浸泡后再稱重，補(bǔ)足溶劑。 測定：部分測定法（等量法） 全部測定法（總量測定法）優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，提取雜質(zhì)少缺點(diǎn)：費(fèi)時、費(fèi)溶劑、不易提取完全 按提取溫度還可

4、溫浸、熱浸。浸泡時間1-24小時；親脂性 親水性石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水2.回流提取法適用：熱穩(wěn)定性的成分及較難溶出成分方法：以單一溶劑或混合溶劑于水浴/電 熱套加熱回流提取優(yōu)點(diǎn)：提取效率比冷浸法高，提取時間短，缺點(diǎn)：提取雜質(zhì)較多 不宜用于熱不穩(wěn)定或揮發(fā)性的成分每次提取時間為0.5-2小時，提取次數(shù)1-3次。通過更換溶劑，使提取更完全回流提取裝置3.連續(xù)回流提取法 （索氏提?。?適用：熱穩(wěn)定性的成分方法：樣品置索氏提取器中，用遇熱可 以揮發(fā)的溶劑進(jìn)行反復(fù)提取。樣 品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)的溶 劑經(jīng)冷凝流回樣品管。優(yōu)點(diǎn)：提取效率高，所需溶劑少 提取雜質(zhì)少，操作簡便

5、缺點(diǎn)：受熱易分解的成分不宜使用 4.超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器） 利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現(xiàn)“空化”現(xiàn)象（氣泡的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過1000個大氣壓的沖擊力，可把物體打成極細(xì)小微粒，起到助溶作用適用：熱穩(wěn)定性的成分方法：樣品置適當(dāng)容器中，加入提取溶 劑，放入超聲振蕩器中提取。 優(yōu)點(diǎn)：提取效率高，提取速度快，操作簡便注意：超聲頻率、提取時間、溫度需考察5.超臨界流體萃取法（SFE） 超臨界流體 當(dāng)壓力和溫度超過氣體的臨 界點(diǎn)時所形成的單一相態(tài) 是一種處于超臨界點(diǎn)之上的流體， 是介于氣體與液體之間的一種物相 兼有氣體與液

6、體的一些特性氣體超臨界流體固體T 壓力T 壓力SFE 工藝流程 超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相比 有以下突出的優(yōu)點(diǎn)：（1） 它具有與液體相似的密度，因而具有 與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力；（2）溶質(zhì)在流體中的擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似， 具有傳質(zhì)快，提取時間短的優(yōu)點(diǎn)； （3）超臨界流體的表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測定組分；（4）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出，易達(dá)到濃集的目的；（5）CO2是一種不活潑的氣體, 萃取過程不發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且屬于不燃性氣體,無味、無臭、無毒，故安全性好；（6） CO2價格便宜，純度高，容易取得，且在生產(chǎn)過程中循環(huán)使用，從而降低成本；（7）

7、該技術(shù)易與其他儀器聯(lián)用實現(xiàn)自動化影響因素：溫度、壓力、改性劑和提取時間。恒溫下，提高壓力，超臨界流體的溶解性參數(shù)將增加，有利于極性組分和高分子量組分的提??；在較低壓力下，溶解性參數(shù)較小，則有利于非極性組分的提取，在提取極性組分時，可加入適量有機(jī)溶劑作為改性劑，如甲醇、氯仿等。適用： 主要用于熱不穩(wěn)定成分或揮發(fā)性成分， 也可熱穩(wěn)定性成分 主要用于非極性、弱極性化合物， 也可極性化合物：加入極性改性劑（甲醇、氯仿、苯），增加其溶解能力。方法：超臨界流體萃取儀 優(yōu)點(diǎn)：萃取效率高、速度快、準(zhǔn)確度高、選擇性較高、節(jié)省溶劑、易于自動化，可避免使用易燃，有毒的有機(jī)溶劑，并能與色譜和光譜等儀器聯(lián)用。 6.水蒸

8、氣蒸餾法蒸餾法 ：利用某些被測成分具有揮發(fā)性，采用蒸餾 法，收集餾出液進(jìn)行含量測定；或某些成分經(jīng)蒸餾分解成揮發(fā)性成分，利用分解產(chǎn)物 （要求結(jié)構(gòu)明確）進(jìn)行測定。 最常用：水蒸氣蒸餾法 適用于：具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定 適用：揮發(fā)油，小分子生物堿（麻黃堿、檳榔堿） 丹皮酚 優(yōu)化：蒸餾液中加入一定量無機(jī)鹽（鹽析作用）， 使揮發(fā)性成分更完全地蒸餾出來 用GC測定揮發(fā)性組分時用揮發(fā)油提取器7.萃取法萃取法：利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，將測定組分提取出來的方法。（1）萃取溶劑的選擇 正丁醇 用于皂苷類； 醋酸乙酯 用于黃酮類； 氯仿 用于生物

9、堿類； 乙醚、石油醚 用于揮發(fā)油。（2）水相pH的選擇 酸性成分比其pKa低1-2個pH單位; 堿性成分比其pKa高1-2個pH單位.（3）儀器和提取次數(shù)（4）酒劑和酊劑先揮去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鑒別1次含量測定 3 4次（6）鹽析作用：水相用NaCl飽和，提高提取率。7. 加壓溶劑萃取法（PLE）全新的處理固體和半固體樣品的方法方法：將樣品放在密封容器中，加熱到高于 溶劑沸點(diǎn)的溫度，引起容器中壓力升高， 同時給予一定壓力，使溶劑不氣化，從而 大大提高萃取速度 PLE實現(xiàn)了高溫高壓條件下的萃取 美國環(huán)境保護(hù)署推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法8. 微波輔助萃取法（MAE）將樣品置于不吸收微薄的容器中，

10、用微波加熱，進(jìn)行萃取。優(yōu)點(diǎn)：1.萃取時間短 2.溶劑用量少 3.可根據(jù)吸收微波能力的大小選擇不同的萃取溶劑，控制樣品與溶劑間的熱交換。 4.多個樣品可同時萃取9.消化法目的： 重金屬及砷鹽檢查限量較低，有機(jī)成分往往會嚴(yán)重干擾測定，須采用合適的方法破壞這些有機(jī)物常用的破壞方法：濕法消化，干法消化濕法消化1.硝酸高氯酸法 適用于血，尿、組織等生物樣品和動植物藥制劑的破壞有機(jī)金屬藥物經(jīng)破壞后，得到的無機(jī)金屬離子一般呈高價態(tài)。本法不能用于含氮雜環(huán)藥物的破壞2.硝酸硫酸法 適用于大多數(shù)有機(jī)物質(zhì)的破壞 破壞得到的無機(jī)金屬離子均為高價態(tài)不能用于含堿土金屬有機(jī)藥物的破壞不適用于與硫酸形成不溶性硫酸鹽的金屬離子

11、3.硫酸硫酸鹽法 常用于含砷或銻有機(jī)藥物的破壞，破壞 得到的無機(jī)金屬離子多為低價態(tài)（三價砷或銻）。 樣品中加入濃硫酸作氧化劑，加入硫酸鹽提高硫酸的沸點(diǎn)，增強(qiáng)硫酸的氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。其它濕法 硝酸硫酸高氯酸法 硫酸氧化劑法（過氧化氫法、高錳酸鉀） 破壞后，金屬呈高價態(tài)注意點(diǎn)：所用儀器一般為硅玻璃或硼玻璃制成的凱氏瓶所用試劑應(yīng)為優(yōu)級純水應(yīng)為去離子水或高純水按相同條件進(jìn)行空白試驗校正操作在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行 干法消化 將有機(jī)物灼燒灰化達(dá)到分解目的方法：將適量樣品置于瓷坩鍋、鎳坩鍋或鉑坩堝中，常加無水Na2CO3或輕質(zhì)MgO以助灰化?；靹蚝螅刃』鸺訜?，使樣品完全炭化，然后放入高溫爐中灼燒

12、，使其灰化完全即可。適用：濕法不易破壞完全的有機(jī)物；某些不能用硫酸進(jìn)行破壞的有機(jī)藥物。不適用：含易揮發(fā)性金屬（如汞、砷等）有機(jī)藥物的破壞注意事項：（1）加熱或灼燒時，應(yīng)控制溫度在420以下，防止金屬化合物的揮發(fā)（2）一定要灰化完全（3）經(jīng)本法破壞后，所得灰分往往不易溶解，但不要輕易棄去二、分析目的與樣品提取1.供鑒別用樣品提取2.供雜質(zhì)檢查用樣品提取3.供含量測定用樣品提取樣品的凈化1.沉淀法 ：利用某些試劑與被測成分或雜質(zhì)生成 沉淀，分離沉淀或保留溶液的精制方法2.液-液萃取法： 1） 直接萃取法 2） 離子對萃取法離子對萃取法 常用于生物堿的分析基本原理：在適當(dāng)?shù)腜H介質(zhì)中適用：高度離解的

13、有機(jī)酸、有機(jī)堿 中藥制劑分析主要用于生物堿（B）離子對試劑：常為酸性染料（In-） 如：溴百里酚藍(lán)（BTB）和溴甲酚綠（BCG）注意：水相pH值的控制 離子對試劑的選擇。 3.經(jīng)典柱色譜法最常用：經(jīng)典柱色譜方法：將樣品溶液加到裝有合適固定相的色譜柱中（1）保留測定組分在柱上，洗去雜質(zhì)，再用 適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上，直接洗脫被測成分進(jìn) 行測定常用固定相氧化鋁大孔吸附樹脂聚酰胺LSE常用填料 硅膠、氧化鋁等：傳統(tǒng)吸附劑，極性吸附劑 氧化鋁：用于生物堿、苷類等堿性、中性成分 的測定，吸附酸性成分 硅膠：適合于分離中性或酸性化合物，強(qiáng)烈保 留堿性化合物。 鍵合相硅膠： 十八烷基鍵合相硅膠

14、（C18，ODS），C8 分離脂溶性雜質(zhì)或成分 氨基、氰基鍵合相硅膠 分離水溶性雜質(zhì)或成分 大孔樹脂：分為極性和非極性型 ，D101最常用 注意：預(yù)處理；定量時回收率聚酰胺： 氫鍵吸附常用于含phOH的黃酮類成分硅藻土、纖維素：親水型填料，分配作用 流動相：與水不混溶的有機(jī)溶劑 洗脫：親脂性的成分離子交換樹脂： 萃取樣品液中可離解化合物 除去樣品中的離子，防止組分分解四、固相萃取法五、固相微萃取技術(shù)樣品的濃縮與衍生化一、樣品提取液的濃縮1. 水浴蒸發(fā)：蒸發(fā)皿2. 自然揮散3.減壓蒸發(fā)：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀4. 氣流吹蒸: 氮吹儀5. 冷凍干燥：高真空二、樣品的衍生化1. GC中的衍生化： 目的：1）提高

15、成分揮發(fā)性 2）增加成分的穩(wěn)定性 3）生成非對應(yīng)異構(gòu)體主要衍生化反應(yīng)：1.硅烷化 2.?；?3. 烷基化 4. 不對稱衍生化2. HPLC中的衍生化 目的：1）提高檢測靈敏度 2）改善色譜分離效果 分類：1）柱前 1）在線 2）柱后 2）離線 方法：1）紫外衍生化反應(yīng) 2）熒光衍生化反應(yīng) 3）非對映衍生化反應(yīng)不同劑型中藥制劑供試品制備特點(diǎn)一、固體制劑的預(yù)處理特點(diǎn)1. 片劑片劑中常含有一定量的賦形劑，如淀粉、糊精、糖粉、硫酸鈣等，有的還含有藥材細(xì)粉，某些成分仍保留在植物組織、細(xì)胞中。樣品的提取：將片劑研碎（糖衣片需除去糖衣）后，過一定目篩，選擇適宜的溶劑。（超聲、冷浸、回流、連續(xù)回流）樣品的凈化

16、：液-液萃取法；柱色譜法 2. 丸劑樣品的提?。撼暋⒗浣?、回流、連續(xù)回流樣品的凈化：溶劑提取法；沉淀法； 柱色譜法3.顆粒劑經(jīng)過提取相對較純凈：若顆粒劑全部為藥材提取物，可用合適的溶劑進(jìn)行溶解或提取。含藥材細(xì)粉的顆粒劑，要注意提取溶劑的滲出透性：超聲提取法、回流提取法避免糖、糊精等輔料對測定的干擾。提取液的精制：液-液萃取法、柱色譜法。 4.膠囊劑 硬膠囊：將藥物全部傾出，參考顆粒劑或散劑的特點(diǎn)提取分離 軟膠囊：剪破囊材，擠出內(nèi)容物，若內(nèi)容物黏附在囊殼內(nèi)壁，可用提取溶劑洗滌囊殼，洗滌液與樣品一同處理。 腸溶膠囊5.散劑 重點(diǎn)應(yīng)注意對劇毒成分和貴重藥材進(jìn)行分析分析取樣時應(yīng)注意樣品的代表性。藥材

17、粉末中具有形態(tài)特征的組織碎片是顯微鑒別的 重要依據(jù)，可用于判斷制劑的真?zhèn)巍３Ｓ玫奶崛∪軇核?、乙醇、甲醇、乙醚、氯仿常見的提取方法：冷浸法、加熱回流法、連續(xù)回流 法、超聲提取法 6.栓劑應(yīng)注意減少基質(zhì)的干擾：將栓劑與硅藻土等惰性材料混合、研勻，轉(zhuǎn)入回流提取器中，用適宜的溶劑回流提取，具體如下：親水性基質(zhì)：用有機(jī)溶劑提取。油脂性基質(zhì)：水或稀醇提?。?將栓劑切成小塊，加適量水，于溫水浴上加熱使其融化，攪拌一定時間，取出于冰浴中再使基質(zhì)凝固，將水溶液濾出，如此反復(fù)2至3次，可將水溶性成分提取出來。 對一些酸、堿性指標(biāo)成分，可通過酸化或堿化處理，讓其游離或成鹽后，用水或有機(jī)溶劑萃取。 7. 滴丸應(yīng)注意

18、減少基質(zhì)的干擾分離方法與栓劑基本一樣；對一些酸、堿性指標(biāo)成分，可通過酸化或堿化處理，讓其游離或成鹽后，用水或有機(jī)溶劑萃取。二、半固體制劑的預(yù)處理特點(diǎn)1. 煎膏劑粘稠度大，可加入適量的惰性材料（硅藻土、纖維素），低溫烘干后，按固體樣品處理也可加水或稀醇稀釋后，按液體中藥分離凈化2.浸膏劑中藥流浸膏劑、浸膏劑都是復(fù)雜的混合物，可根據(jù)對所含成分的了解程度設(shè)計分析方案，達(dá)到控制質(zhì)量的目的。當(dāng)流浸膏劑或浸膏劑由單味中藥組成時，相對雜質(zhì)較少，個別制劑可經(jīng)稀釋后直接測定。若雜質(zhì)較多需凈化處理時，可采用稀釋后萃取法、回流提取法及柱色譜分離法等，有時還可利用指標(biāo)成分游離時難溶于水、成鹽時易溶于水或稀醇等性質(zhì)，用

19、重量法測定含量 。3.凝膠劑 水性凝膠劑 油性凝膠劑 根據(jù)基質(zhì)性質(zhì)不同，參照栓劑的預(yù)處理方法三、液體制劑預(yù)處理特點(diǎn)1. 湯劑、合劑、口服液2. 酒劑、酊劑、流浸膏劑3. 注射劑4. 糖漿劑四、外用膏劑預(yù)處理特點(diǎn)1.軟膏劑 1）濾除基質(zhì)法 2）提取分離法 3）灼燒法 4）離心法2.膏藥3.貼膏劑五、氣霧劑和噴霧劑的預(yù)處理特點(diǎn)根據(jù)內(nèi)容物的類型（溶液型、乳液型、混懸型）及待測成分的理化性質(zhì)分析方法分類化學(xué)鑒別法光譜鑒別法生物學(xué)法 HPLC、GC鑒別法 薄層色譜鑒別法 紙色譜鑒別法 呈色反應(yīng)鑒別法 紫外光譜鑒別法 紅外光譜鑒別法 沉淀生成反應(yīng)鑒別法 色譜鑒別法 氣體生成反應(yīng)鑒別法 測定生成物的熔點(diǎn)熒光

20、反應(yīng)鑒別法 鑒別試驗方法Identification Test Methods 1.有效性檢查：某些特殊制劑的特定項目2.安全性檢查：異常毒性、熱源、降壓物質(zhì)、無菌3.制劑通則檢查：是否達(dá)到制劑學(xué)有關(guān)要求 例：片劑：崩解時限檢查 顆粒劑：溶化性試驗 丸劑：溶散時限檢查4.純度（雜質(zhì)）檢查：重金屬、砷鹽、內(nèi)源性有害 物質(zhì)、外源性有害物質(zhì)中藥制劑檢查：中藥的檢查項目與內(nèi)容 中藥 的檢查項目水分總灰分酸不溶性灰分農(nóng)藥殘留量雜質(zhì)重金屬及 有害元素中藥的檢查項目與內(nèi)容一、雜質(zhì)檢查法雜 質(zhì)來源與規(guī)定相同，但其性狀或部位與規(guī)定不符來源與規(guī)定不同的有機(jī)雜質(zhì)和無機(jī)雜質(zhì)例：蒲黃中雜質(zhì)檢查方法 取本品10g，稱定重

21、量，置七號篩中，保持水平狀態(tài)過篩，左右往返，邊篩邊輕叩2分鐘。取不能通過七號篩的雜質(zhì)，稱定重量，計算，不得過10%。二、水分測定法 烘干法不含或含少量揮發(fā)性成分的供試品甲苯法-含揮發(fā)性成分的供試品減壓干燥-含揮發(fā)性成分的貴重藥品 干燥劑：P2O5 氣相色譜法-散劑、顆粒劑、丸劑、片劑等 各類型中藥制劑中微量水分的測定 卡爾費(fèi)休法-微量水分測定，尤其適合遇熱易 被破壞的樣品三、灰分測定法 灰分檢查主要是控制藥材和中藥制劑中泥沙等雜質(zhì)的含量，對于保證藥品品質(zhì)和潔凈度有著重要意義 包括總灰分檢查和酸不溶性灰分檢查1.總灰分 系指樣品經(jīng)高溫?zé)胱?，破壞分解后，剩下的非揮發(fā)性灰燼 。較純凈的藥材或制劑，其

22、總灰分主要為生理灰分即藥品本身所含的各種鹽類 （例如夏枯草中的鉀鹽，大黃、甘草、紅花中的草酸鈣等，故生理灰分不屬于雜質(zhì)。），以及少量允許存在的外來無機(jī)雜質(zhì)（泥沙等）。 在生理灰分相對穩(wěn)定的前提下，藥品具有一定的總灰分含量限度。如果總灰分含量超限，則說明藥品含有過多的泥沙（主含硅酸鹽）等外來雜質(zhì)。 2.酸不溶性灰分 系指總灰分加鹽酸處理后，得到的不溶于鹽酸的灰分。由于草酸鈣等生理灰分可溶于稀鹽酸，而泥沙（主要為硅酸鹽）等外來無機(jī)雜質(zhì)難溶于稀鹽酸，因此，對于那些生理灰分含量差異較大，特別是在組織中含草酸鈣較多的中藥（例如大黃），酸不溶性灰分能更準(zhǔn)確反映其中泥砂等雜質(zhì)的摻雜程度。3.總灰分測定法1）

23、 測定原理： 供試品在500600高溫?zé)胱疲蛊渲杏袡C(jī)物全部氧化分解成二氧化碳、水等逸出，而無機(jī)成分生成灰分殘渣，根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中的總灰分的含量。2）操作方法 供試品粉碎，過二號篩，混合均勻，取供試品25g（如需測定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g）緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500600，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。4）計算總灰分含量（ % ）= M1/M 100% M 為熾灼前供試品的重量，g M1 為熾灼后供試品的重量，g5）結(jié)果判斷 將計算結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比

24、較，低于或等于限度 的，總灰分符合規(guī)定；高于限度的，則不符合規(guī)定。4、酸不溶性灰分測定法1）測定原理 供試品在500600高溫?zé)胱疲蛊渲杏袡C(jī)物完全氧化分解逸出，往殘留灰分中加入稀鹽酸，溶解其中的草酸鈣等生理灰分，濾去酸水，得到難溶性殘渣（酸不溶性灰分），根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中酸不溶性灰分的含量。2）操作方法3）注意事項、 計算、結(jié)果判斷 (均同總灰分測定法)操作方法 按上述總灰分測定法制備供試品的總灰分。取所得的灰分，在坩堝中加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘渣重量計算供試品中酸不溶性灰分的含量（%）。5、應(yīng)用實例1.阿膠的總灰分測定2.九味羌活丸的酸不溶性灰分測定 九味羌活丸是由羌活等九味中藥制成的水丸，其中黃芪、甘草和地黃等多種根類藥材，易帶入泥沙等雜質(zhì)。因此